卡托普利对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性及MMP-9表达的影响

目的观察血管紧张素转化酶抑制药卡托普利对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,并探讨其机制。方法采用血管内栓线阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,于脑缺血2h、再灌注24h后测定脑组织含水量、伊文斯蓝(EB)含量,放射免疫方法测定血浆中血管紧张素Ⅱ的含量,免疫组织化学方法测定MMP-9表达。结果研究发现,脑缺血2h、再灌注24h,缺血再灌组大鼠脑组织含水量及EB含量明显增加,MMP-9呈现高表达。而卡托普利组脑组织含水量、EB含量及MMP-9表达明显低于脑缺血再灌注组(P<0.05)。结论卡托普利通过减少血管紧张素Ⅱ的生成从而降低脑缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9的活性及血脑屏障通透性,发挥对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

促红细胞生成素对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠脑组织的保护作用研究

目的:研究促红细胞生成素(EPO)对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠脑组织的保护作用。方法:取大鼠随机分为假手术组、模型组和EPO低、中、高剂量(1 000、3 000、5 000 u.kg-1)组,采用线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,于缺血2 h时腹腔注射相应药物,分别于缺血再灌注后3、6、12、24、48、72 h断头取海马组织,取材前行神经功能学评分,取材后标本以免疫组化法、蛋白质印迹法分析脑组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达(n=12)。结果:与假手术组比较,模型组大鼠各时间点神经功能学评分明显升高,再灌注12 h后MMP-9、VEGF表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,EPO各剂量组再灌注12 h后神经功能学评分、MMP-9表达明显降低,VEGF表达明显升高(P<0.01);与EPO低剂量组比较,EPO中、高剂量组神经功能评分、MMP-9表达明显降低,VEGF表达明显升高(P<0.05)。结论:EPO能通过抑制MMP-9发挥保护细胞外基质的作用,通过增强VEGF表达以增强组织周围微血管的修复能力,从而减轻局灶性脑缺血再灌注损伤程度而发挥脑保护作用。     

美满霉素对大鼠脑缺血再灌注脑组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的观察美满霉素对大鼠脑缺血再灌注后脑组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,探讨其神经保护机制。方法采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血90分钟后行再灌注;在模型组的基础上,美满霉素预处理组于缺血前30分钟、治疗组于缺血后120分钟和14小时分别予以美满霉素50mg/kg灌胃;缺血12小时和24小时后处死大鼠,采用HE染色观察大鼠脑组织病理改变;免疫组织化学法检测大鼠脑组织MMP-2和MMP-9的表达。结果美满霉素预处理组MMP-2和MMP-9的平均光密度值12小时组为160.3±5.4、162.3±3.3,24小时组为162.3±7.4、164.3±4.1;美满霉素治疗组12小时组为151.6±5.6、150.3±7.1,24小时组为154.3±5.8、158.1±3.6。均较对照组明显降低(P<0.01),较IR组明显增高(P<0.05)。结论美满霉素能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织MMP-2和MMP-9的表达     

依那普利对肾陛高血压大鼠脑缺血再灌注后脑组织基质金属蛋白酶-2、-9表达的影响

目的 通过观察血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）依那普利对肾性高血压大鼠脑缺血再灌注后脑组织基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9表达的影响,探讨依那普利的脑保护机制.方法 Wistar雄性大鼠28只,随机分为高血压组和正常血压组.前组采用狭窄肾动脉方法建立肾性高血压大鼠模型,再随机分为依那普利组（Y）和缺血再灌注组（HIR）,分别采用依那普利2 mg/kg和0.9%氯化钠注射液进行灌胃治疗;正常血压组再分为假手术组（N）和缺血再灌注组（IR）,分别行假手术和缺血再灌注处理.采用大脑中动脉线栓法造成大脑缺血再灌注模型,缺血时间为2 h,再灌注22 h.采用免疫组织化学技术检测脑组织MMP-2和MMP-9的表达,用图象分析仪测定灰度值.结果 与N组比较,IR组MMP-2、MMP-9灰度值明显增高（P＜0.01）;与IR组比较,HIR组MMP-2、MMP-9灰度值增高（P＜0.05）;与HIR组比较,Y组MMP-2、MMP-9灰度值减少（均P＜0.01）.结论 高血压加重缺血再灌注后脑组织MMP-2和MMP-9的表达;依那普利能明显抑制脑组织MMP-2和MMP-9的表达.     

藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌注后MMP-2和MMP-9表达的影响

目的探讨藻蓝蛋白对大鼠局灶性脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-2和9（MMP-2和MMP-9）表达的影响。方法应用线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注（MCAO／R）模型，应用藻蓝蛋白进行干预，干湿重法测定脑组织含水量（BWC），比色法测定脑组织伊文斯蓝（EB）含量，免疫组化技术检测脑组织MMP-2和MMP-9的表达。结果脑缺血再灌注6h BWC和EB含量增加，至2d达高峰，应用藻蓝蛋白后均明显减少。对照组脑缺血再灌注24h脑组织MMP-2阳性细胞即开始出现，3～7d阳性细胞数达高峰，14d仍高于假手术组。藻蓝蛋白组MMP-2阳性细胞的变化趋势与对照组相似，但同一时间点明显低于对照组。对照组缺血侧脑组织MMP-9阳性细胞于再灌注后6h开始出现，12h明显增高，至2d达高峰，3d开始减少，至14d时恢复至假手术组水平。藻蓝蛋白组MMP-9阳性细胞变化趋势与对照组相似，同一时间点相比明显低于对照组。结论藻蓝蛋白可能通过下调MMP-2和MMP-9的表达而减轻脑水肿，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

缺血后处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠Bcl-xl、Bax的影响

目的:观察缺血后处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠Bcl-xl、Bax的影响.方法:线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,将成年雄性Wistar大鼠144只,随机分成三组:假手术组、对照组(脑缺血再灌注组)、缺血后处理组.假手术组只进行假手术;对熙组(脑缺血再灌注组)给予90min大脑中动脉缺血(MCAO);缺血后处理组在大脑中动脉缺血90min后,给予灌注30s缺血30s,反复3次.各组分别再灌注12h、24h、48h、72h后测定脑组织Bcl-xl、Bax的表达.结果:局灶性脑缺血后再灌注前给予后处理,缺血后处理组与缺血再灌注组相比,Bcl-xl蛋白的表达明显增加,而Bax蛋白的表达明显减少.结论:脑缺血后处理增加脑缺血再灌注后Bcl-xl蛋白的表达、减少Bax蛋白的表达,从而抑制缺血周围区的细胞凋亡.     

黄芪对脑缺血再灌注损伤c-fos/c-jun表达和细胞凋亡的影响

目的:探讨黄芪注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的保护作用。方法:采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉(MCA)血流2h,再灌注24h制成局灶性脑缺血再灌注损伤模型。将30只Wistar雄性大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注组、黄芪组3组。造模前1h时黄芪组给与黄芪200mg/kg腹腔注射。假手术组、缺血再灌注组给予等剂量生理盐水。再灌注24h后断头取脑、切片,进行HE染色、c-fos和c-jun免疫组化染色和细胞凋亡检测。结果:缺血2h再灌注24h后,黄芪组和缺血再灌注组大鼠缺血侧皮层可检测到凋亡细胞,黄芪组凋亡细胞数明显少于缺血再灌注组,假手术组未见凋亡细胞;黄芪组和缺血再灌注组大鼠缺血侧皮层c-fos/c-jun阳性细胞数均高于假手术组,与缺血再灌注组相比,黄芪组大鼠缺血侧皮层c-fos/c-jun表达降低。结论:黄芪可抑制缺血再灌注损伤后缺血侧皮质的细胞凋亡。     

丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡相关因子表达的影响

目的观察丁苯酞(NBP)对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织Bcl-2和Bax表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为4组:假手术组、缺血再灌注组、溶剂对照组和丁苯酞治疗组,用线栓法,制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,于缺血2 h再灌注24 h后,断头取脑,用免疫组织化学法和RT-PCR法,观察脑组织Bcl-2和Bax表达水平的变化。结果大鼠脑缺血再灌注损伤后,Bcl-2和Bax显著增多;与模型组和对照组相比,治疗组Bcl-2的表达显著上调,Bax的表达显著下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与上调Bcl-2的表达、下调Bax的表达有关。     

小牛血清去蛋白注射液对大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响及机制分析

目的:探讨小牛血清去蛋白注射液(DCSI)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响及其可能机制。方法:76只SD大鼠随机分为假手术组(SH)、模型组和DCSI高、低剂量组(DCSI-H、DCSI-L组:60、30mg·kg-1)4组,每组19只,给予相应药物10d后,后3组采用血管内栓线阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。于脑缺血2h再灌注24h后测定各组大鼠脑组织水含量、伊文思蓝(EB)含量,电镜观察血脑屏障超微结构的改变,并用Westernblot法观察大鼠脑组织细胞间黏附分子(ICAM)-1、基质金属蛋白(MMP)-9的蛋白表达情况。结果:与模型组比较,DCSI组脑组织水含量、EB含量、ICAM-1和MMP-9的蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01);血脑屏障的破坏程度明显减轻。结论:DCSI可能通过降低ICAM-1、MMP-9的蛋白表达发挥其血脑屏障的保护作用。     

原花青素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马线粒体CytC的释放和Caspase-9的影响研究

目的:研究原花青素对大鼠局灶性脑缺血再灌注所致线粒体损伤的保护作用机制。方法:48只Wistar大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注模型组,原花青素高、低剂量(400、40mg.kg-1)组,各组灌胃给予相应试药后30d,采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCA)制作脑缺血再灌注损伤模型,24h后处死取脑。利用免疫荧光方法测定各组小鼠细胞色素C(CytC)的表达,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测半胱氨酸蛋白酶(caspase)-9mRNA的表达。结果:与模型组比较,原花青素组CytC阳性细胞明显增多,而caspase-9mRNA表达减弱(P<0.05)。结论:原花青素可以抑制海马CA1区神经元CytC的释放,并减弱cas-pase-9mRNA的表达,对脑缺血再灌注损伤产生保护作用。     

二维三七桂利嗪胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察二维三七桂利嗪胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法:SD大鼠分别用292,146和73 mg·kg-1的二维三七桂利嗪胶囊灌胃10 d,线拴法制备大鼠大脑中动脉缺血模型(middle cerebral arteryocclusion,MCAO),缺血3 h后再灌注3 h,分别取脑组织测定脑梗死范围、脑指数、脑含水量并观察脑组织形态结构,取血测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(S0D)活性.结果:3个剂量的二维三七桂利嗪胶囊能够不同程度地缩小缺血再灌注损伤后脑梗死范围、降低脑指数、脑含水量和血清LDH活性,提高SOD活性并减轻光镜下脑组织缺血性损伤.结论:二维三七桂利嗪胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用.     

Caffeic acid ameliorates early and delayed brain injuries after focal cerebral ischemia in rats

AIM:To investigate the effects of caffeic acid on early and delayed injuries after focal cerebral ischemia in rats, and the possible relation to 5-lipoxygenase inhibition. METHODS: Transient focal cerebral ischemia was induced by middle cerebral artery occlusion in Sprague-Dawley rats. Caffeic acid (10 and 50 mg/kg) was ip injected for 5 d after ischemia. The brain injuries were observed, and the levels of cysteinyl leukotrienes and leukotriene B4 in the brain tissue were measured. RESULTS: Caffeic acid (50 mg/kg) ameliorated neurological dysfunction and neuron loss, and decreased infarct volume 24 h after ischemia; it attenuated brain atrophy, infarct volume, and particularly astrocyte proliferation 14 d after ischemia. In addition, it reduced the production of leukotrienes (5-lipoxygenase metabolites) in the ischemic hemispheres 3 h and 7 d after ischemia. CONCLUSION: Caffeic acid has protective effect on both early and delayed injuries after focal cerebral ischemia in rats; and this effect may partly relate to 5-lipoxygenase inhibition.     

牛磺酸对急性局部脑缺血大鼠脑血流和脑梗死体积的影响

目的 :研究牛磺酸对脑缺血再灌注模型大鼠的局部脑血流和脑梗死体积的影响。方法 :用大脑中动脉栓塞 (MCAO)法制作大鼠急性局部脑缺血再灌注模型 ,分别用 10 ,4 0和 80mg·kg- 1牛磺酸经腹腔注射给药 ,检测缺血 1h和灌注 30min内脑血流 ,再灌注 2 4h后进行神经功能缺损评分并计算脑梗死体积的大小。结果 :MCAO引起大脑中动脉供血区脑血流显著下降 ,牛磺酸可减少脑血流量下降的幅度 ;缺血 1h再灌注 2 4h后 ,模型组脑梗死体积为 (33±s 9) % ,而牛磺酸治疗组脑梗死体积明显缩小 ,各组分别为 (17± 5 ) % ,(12± 5 ) %和 (11± 3) % ;牛磺酸治疗组神经缺损评分比模型组小。结论 :牛磺酸可以增加缺血局部的脑血流量 ,缩小脑梗死体积 ,对急性脑缺血具有脑保护作用。     

吡拉格雷钠对局灶性脑缺血再灌注大鼠微循环和内皮功能的影响

目的：研究抗脑缺血药物吡拉格雷钠对局灶性脑缺血大鼠脑微血管血流量以及血管内皮功能的影响。方法采用改良的线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞（ NCAO）脑缺血再灌注模型,以激光多普勒血流仪监测各给药组对大鼠脑微循环血流的影响,并采用酶联免疫ELISA法检测大鼠血浆中血管假vWF、TN、EPCR水平。结果吡拉格雷钠各给药组均使NCAO大鼠脑微循环血流量明显升高,并显著性降低vWF、TN、EPCR在大鼠血浆中含量。结论吡拉格雷钠能够明显改善NCAO大鼠脑微循环血流量并且对vWF、TN、EPCR均有抑制作用,对血管内皮细胞有明显的保护作用。     

Neuroprotective effect of treatment with human albumin in permanent focal cerebral ischemia: histopathology and cortical perfusion studies.

In recent experimental studies, we demonstrated a highly beneficial neuroprotective effect of moderate- to high-dose human albumin treatment of transient focal cerebral ischemia, but we did not define the effect of albumin therapy in permanent focal cerebral ischemia. In this study, anesthetized Sprague-Dawley rats were subjected to permanent middle cerebral artery occlusion by retrograde insertion of an intraluminal nylon suture coated with poly-L-lysine. Albumin was administered i.v. at 2 h after onset of middle cerebral artery occlusion, in doses of either 1.25 (n=8) or 2.5 g/kg (n=6). In a separate group of animals, albumin (2.5 g/kg) was given 1 h after middle cerebral artery occlusion (n=6). Vehicle-treated rats (n=6) received 0.9% saline in equivalent volumes. Neurological status was evaluated during and 24 h after middle cerebral artery occlusion. One day after middle cerebral artery occlusion, infarct volumes and brain edema were determined. In a separate group of animals, cortical perfusion was assessed by Laser-Doppler perfusion imaging. Albumin (1.25 g/kg; n=3) or vehicle (sodium chloride 0.9%; n=3) was administered at 2 h after onset of middle cerebral artery occlusion. Higher-dose albumin therapy (2.5 g/kg) significantly improved the neurological score compared to vehicle rats at 24 h, when administered at either 1 or 2 h after middle cerebral artery occlusion. Total infarct volume was reduced by albumin (2.5 g/kg given at 2 h) by 32% compared with vehicle-treated rats. Both albumin doses (1.25 and 2.5 g/kg) significantly reduced cortical and striatal infarct areas at several coronal levels when administered at 2 h after middle cerebral artery occlusion. Brain swelling was not affected by albumin treatment. Cortical perfusion declined during middle cerebral artery occlusion in both groups. Treatment with albumin led to 48% increases in cortical perfusion (P<0.002), but saline caused no change. These results support a beneficial effect of albumin therapy in permanent focal cerebral ischemia.     

雏菊叶龙胆酮对局灶性脑缺血损伤的保护作用及机制探讨

目的　研究雏菊叶龙胆酮 (Bellidifolin)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法　利用电凝法制作SD大鼠右侧大脑中动脉阻塞 (MCAO)模型,于MCAO缺血后 4h和 24h进行神经行为学评分, 24评分后断头取脑测量脑梗塞面积,应用HE染色和免疫组化法观察Bellidifolin干预后缺血区病理学改变和ICAM 1、Bcl2蛋白的变化。结果　Bellidifolin能改善MCAO缺血后神经功能障碍并缩小脑梗塞面积;减轻相关脑区神经元损伤程度;显著抑制大鼠局灶性脑缺血损伤ICAM 1表达,上调缺血周边区神经元Bcl 2抗凋亡蛋白的表达。结论　Bellidifoli口服给药对缺血性脑损伤有保护作用,其作用机制可能与抑制ICAM 1表达和促进Bcl 2表达有关。     

三羟异黄酮抑制脑缺血大鼠大脑皮层中铜蓝蛋白的表达

目的探讨植物性雌激素三羟异黄酮（genistein,GST）对局灶性永久性脑缺血成年雄性大鼠的大脑皮层铜蓝蛋白（ceruloplasmin,CP）表达的影响。方法实验分为假手术组、缺血组、GST组和溶剂对照组,利用流式细胞学方法,观察颈内动脉注射GST对雄性大鼠局灶性永久性脑缺血模型中大脑皮层CP阳性细胞荧光强度和CP阳性细胞百分率的影响。结果脑缺血过程中CP的表达呈时相性变化,缺血组、溶剂组、GST组、缺血6、12、24h低于假手术组（P＆lt;0.05或＆lt;0.01）,缺血48、72h高于假手术组（P＆lt;0.05）;GST组CP的表达变化在不同时段均明显低于溶剂组（P＆lt;0.01）。结论GST可抑制脑缺血时CP的时相性变化,提示GST可通过抑制脑内铁相关的氧化应激损伤提供神经保护作用。     

D-R聚甘酯对局灶性脑缺血大鼠的保护作用

目的研究D-聚甘酯(多糖类化合物)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(RI)的保护作用及其可能机制。方法用改良Longa法,建立大鼠局灶性脑缺血2 h再灌注损伤模型,观察D-聚甘酯对脑缺血再灌注大鼠的脑组织中丙二醛(MDA)含量及对超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的影响。结果模型组大鼠在RI 24 h、RI 72 h及RI 144h时,MDA含量明显高于假手术组;而SOD和GSH-PX活性降低。D-聚甘酯可降低MDA含量,升高SOD和GSH-PX活性,尤其是在RI 144 h。结论 D-聚甘酯对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抗缺血性脑组织中的自由基有关。     

氨基胍对局灶性脑缺血大鼠线粒体损伤的影响

目的观察选择性诱生型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍(aminoguanidine,AG)对局灶性脑缺血大鼠脑线粒体损伤的作用,探讨其改善缺血性脑损伤的作用机制。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血对照组、AG治疗组,采用线栓法复制大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,分别于缺血后2、6、12h给药治疗3d,迅速断头取脑,差速离心法提取缺血侧脑组织线粒体,测定线粒体总ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性,以及线粒体一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量;电镜观察了缺血后皮层神经元超微结构的改变及AG对此改变的影响。结果在大鼠MCAO后线粒体NO生成明显增加,线粒体总ATP酶、SOD、GSHPx活性均有明显下降,线粒体MDA含量明显升高;缺血2、6、12h给予AG治疗3d与缺血对照组相比NO生成有所下降,总ATP酶、SOD、GSHPx活性均升高,MDA含量下降。电镜结果显示脑缺血后皮层神经元水肿,线粒体肿胀、嵴断裂、溶解、消失,且随缺血时间延长损伤加重;AG能明显改善脑缺血引起的神经元水肿、线粒体肿胀和空泡化。结论AG能明显抑制脑缺血后线粒体NO生成,改善线粒体能量供应,增加线粒体抗氧化作用,从而减轻脑缺血损伤。     

羟基红花黄色素A对实验性脑缺血的保护作用

红花为菊科植物红花(Carthamus tinctoriusL.)的干燥花,是传统的活血化瘀类代表药物[1]。红花的化学成分比较复杂,研究表明,红花的花中含有黄酮类、脂肪酸、色素、挥发油以及多炔等化合物[2]。目前认为,红花活血化瘀的主要成分集中在水溶性的黄色素部分;红花黄色素主要成分有羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)、红花明苷A、红花明苷B及其他含量较低的成分。在红花黄色素中含量最高且具有活性的成分为羟基红花黄色素A[2]。作者采用经典的大鼠大脑中动脉阻塞性脑缺血模型,观察HSYA对局灶性脑缺血大鼠的行为评分、缺血区面…