嗅鞘细胞移植治疗脊髓截瘫110例

目的用嗅鞘细胞移植法试治脊髓截瘫,探讨该方法是否有助于脊髓损伤神经功能的恢复.方法取胚胎嗅球,消化成单个嗅鞘细胞后,培养2～3周,然后将其移植到脊髓损伤部位的上下处.结果嗅鞘细胞移植后6个月、1年和2年随访,75例患者的脊髓功能均有不同程度的改善,且呈现继续改善趋势.结论嗅鞘细胞移植有助于脊髓损伤患者脊髓神经功能的恢复.     

用嗅鞘细胞移植法治疗白血病全脊髓放疗后导致的截瘫

患者男,13岁,因白血病全脊髓放疗后双下肢运动、感觉障碍2年入院。入院查体：一般情况好,心、肺、腹无异常。神经系统查体：双下肢肌张力高,有轻度肌萎缩,双下肢肌力呈0级,腱反射活跃,病理征阳性,双下肢感觉右侧明显减退,而左侧痛温觉与深感觉均消失。脊髓MRI提示：全脊髓均明显缩     

嗅球成鞘细胞植入大鼠挫伤脊髓内的迁移分布特征

目的 观察嗅球成鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)在损伤脊髓内的迁移分布与脊髓功能恢复的关系.方法 用NYU-impactorⅡ装置以10 g·25 mm损伤大鼠T10脊髓,1周后将急性分离、纯化、鉴定的绿色荧光蛋白(GFP)-大鼠OECs植入脊髓损伤部位及其首尾两侧,OECs的移植量为90 000/μl.在移植后13周时间内,镜下定性观察OECs在冰冻切片上的迁移分布特征,然后对其分布面积和长度进行半定量观察.脊髓运动功能用BBB评分法测定.结果 移植后早期OECs主要聚集在移植部位,并逐渐向周围迁移扩散,但主要沿脊髓纵轴向首尾方向扩展,脊髓空腔内也可见移植的OECs.OECs的分布面积和长度分别由术后1周时的1.33 mm2和4.23 mm逐步扩大到13周时的3.30 mm2和7.68 mm.与此同时,大鼠损伤脊髓的运动功能也得到逐步恢复.结论 OECs植入挫伤脊髓后可以迁移游走,且与大鼠脊髓运动功能恢复有一定关系.

Abstract：

Objective To observe the migration and distribution of OECs in injured spinal cord and discuss their relation with the recovery of spinal cord function. Methods The rats were contused by a force of 10 g · 25 mm with NYU-impactor at T10 level. The OECs acutely isolated from green fluorescence protein (GFP) rats were purified, identified and then transplanted into the injured site and the rostral and caudal parts of the spinal cord one week after injury, with total volume of the transplanted OECs for 90 000/μl. Within 13 weeks after transplantation, the migration and distribution of OECs were qualitatively observed on the cryo-sections under fluorescence light microscope. The area and the length of OECs distribution were semi-quantitatively determined. The locomotor function of the spinal cord was appraised by BBB score. Results OECs were located collectively in the transplanted site at early stage after transplantation and then spread gradually mainly along the long axis of the cord. OECs could be found in the cavity of the contused spinal cord. The area and the length of OECs distribution were increased from 1.33 mm2 and 4.23 mm respectively at one week to 3.30 mm2 and 7.68 mm respectively at 13 weeks after transplantation. In the meantime, the locomotor function was gradually improved. Conclusion OECs can migrate within the contused spinal cord, as may contribute to the recovery of locomotor function.     

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤临床试验的初步报告

目的：开展嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床试验,探讨其对脊髓损伤晚期患者是否有帮助脊髓神经功能恢复的作用。方法：取胚胎溴球,消化成单个溴鞘细胞后,培养2－3周,然后将其移植到脊髓损伤部位的上下处。共治疗23例伤后时间为0．5－8．5年的脊髓损伤患者,其中19例为完全性脊髓损害,4例为不完全性脊髓损害。结果：嗅鞘细胞移植后2周－2个月时随访,23例患者的脊髓功能均有改善,且呈继续改善趋势。结论：嗅鞘细胞移植能帮助脊髓损伤晚期患者的脊髓神经功能恢复。     

嗅鞘细胞对脊髓源性神经干细胞分化的影响

目的 探讨嗅鞘细胞对脊髓源性神经干细胞分化的作用。方法 应用Millicell插入式细胞培养皿，大鼠脊髓源性神经干细胞与嗅鞘细胞在无血清培养液中共培养，通过免疫化学染色方法，检测脊髓源性神经干细胞分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的比例。结果 共培养7d后，脊髓源性神经干细胞分化为神经元的比例高达43．5％，明显高于对照组的21．4％。结论 嗅鞘细胞提供的微环境可促进脊髓源性神经干细胞分化为神经元。     

脑源性神经营养因子基因转染嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤的观察

目的观察BDNF基因转染的嗅鞘细胞（OECs）对脊髓损伤的修复作用。方法制作大鼠脊髓损伤模型,随机分为无OFCs移植组（6只）、非转染OECs移植组（6只）和转染OECs移植组（8只）,利用免疫组化、逆行示踪及顺行示踪技术对脊髓横断损伤区及其上位、下位脊髓不同平面进行观察。结果移植后12周在局部注射区仍可以见到预标记的OECs,免疫组化观察到脊髓损伤区有BDNF的表达。逆行示踪法在损伤平面头侧的脊髓、脑干和皮质中观察到示踪剂。顺行示踪法在脊髓损伤区可以见到再生的神经纤维通过。无嗅鞘细胞移植组及非转染嗅鞘细胞移植组损伤平面头侧的脊髓、脑干和皮质中未观察到示踪剂,脊髓损伤区内亦未见有再生神经纤维长入。结论移植BDNF转染的OECs可促进损伤的中枢神经轴突存活和再生,较单纯应用OECs能更好地促进脊髓损伤修复。     

嗅鞘细胞可塑性研究进展

19世纪后叶有学者发现在嗅球中存在两大类胶质细胞,一种是分布于整个嗅球的星形细胞,另一种是存在于嗅球Ⅰ、Ⅱ层的梭形细胞（后来证实为嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OECs）.上世纪末期有学者对其功能及形态学作了相应的描述.随后Tumer Cp[1]检测出该细胞的神经生长因子受体（P75）阳性.有学者将OECs分为类星形细胞型和类施万细胞型,并且可以肯定它们来源于相同谱系.Richard Axel[2]证实：原来认为不具备分化能力的小鼠嗅感觉神经元能够再次进入细胞分裂周期,其更新的半衰期大约是90天.     

嗅鞘细胞移植与脊髓损伤再生修复

嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells，OECs)是存在于嗅觉系统的一种特殊类型的大胶质细胞，分布于嗅神经、嗅球的第一、二层和嗅上皮。OECs能伴随嗅束进入中枢神经系统。OECs兼有星形胶质细胞和雪旺细胞的特点，并迁徙于周围神经系统和中枢神经系统。在受损的脊髓组织移植OECs后，OECs不仅能引导、支持损伤神经轴突再生、延伸和髓鞘化作用，     

嗅鞘细胞促使脊髓挫裂伤后神经再生和功能恢复的研究

目的：研究嗅鞘细胞在脊髓挫裂损伤后不同时期植入能是否帮助轴突再生、穿过瘢痕和神经功能恢复。方法：用NYU打击器制造Log Evans Hooded大鼠的脊髓挫裂损伤模型,在伤后即刻和二周后植入嗅鞘细胞,采用BBB方法做行为学观察三个月,经运动皮层注入神经示踪剂（BDA）后行组织化学研究。结果：部分大鼠鞘细胞植入后比对照组的神经功能恢复好,组织学发现这些神经功能恢复好（BBB分数＞10）的大鼠,再生神经轴突能穿过损伤瘢痕区到达损伤下段。结论：嗅鞘细胞在脊髓挫裂损伤后即刻和二周后植入均能帮助轴突再生、穿过瘢痕和神经功能恢复。     

嗅鞘细胞在神经系统损伤修复中的作用

嗅鞘细胞是一种特殊的神经胶质细胞,也是目前唯一应用到临床治疗脊髓损伤的细胞。在神经系统损伤修复中,嗅鞘细胞具有改善损伤微环境、促进轴突再生、穿越胶质瘢痕、亲和神经元和导向神经再生方面的作用,为神经系统损伤修复及病变治疗提供了广阔的临床应用前景。     

神经营养因子、周围神经及嗅鞘细胞与脊髓再生

神经营养因子是一类由神经元、神经胶质细胞及神经支配靶组织产生的神经营养多肽,是维持神经元生存、促进轴突生长的重要因素。周围神经移植可促进损伤神经元轴突再生,使其成为治疗脊髓损伤及促进脊髓再生研究的候选之一。嗅鞘细胞表现出类似于星形胶质细胞和雪旺细胞的双重特性,可分泌多种神经营养因子,具有促进脊髓损伤后的髓鞘重塑、轴突再生和功能恢复的潜在作用。     

大鼠坐骨神经损伤后嗅球成鞘细胞对脊髓神经元的保护作用

目的：探讨嗅球成鞘细胞（OECs)对大鼠坐骨神经损伤引起的脊髓前角运动神经元死亡的保护作用，方法：30只SD大鼠随机分成对照（SAL）组和实验（OFCs)组，采用硅胶管套接大鼠切断的坐骨神经，硅胶管内给予等渗盐水或培养成活的新生大鼠OECs，分别于伤后7，14，30d应用尼氏染色，酶组织化学染色方法，检测神经损伤侧的脊髓前角运动神经元死亡数目和胆碱酯酶（ChE)及酸性磷酸酶（ACP）的变化。结果：与SAL组比较，伤后7，14和30d,OECs组脊髓前角运动神经元死亡率分别降低了7．04％，6．44％，和9．72％（P＜0．01），脊髓前角运动神经元中ChE活性变化幅度分别降低了4．03％，4．25％和5．72％（P＜0．01），ACP的变化幅度分别下降了51％、64％和92％（P＜0．01），结论：OECs对周围神经损伤后引起的神经元死亡有较好的保护作用。     

嗅鞘细胞移植治疗多发性硬化的初步分析附1例报告

目的 开展嗅鞘细胞移植治疗脊髓多发性硬化的临床试验研究,探讨其对多发性硬化脊髓神经功能的改善效果。方法 取胚胎嗅球,消化成单个嗅鞘细胞后,培养2周,然后将其移植到脊髓病变部位的上下处。报告1例移植患者：女,33岁,四肢及躯干进行性无力,感觉减退2年。采用上述细胞行脊髓移植。术前和术后4周使用美国脊髓损伤协会国际评价系统进行疗效评价。结果 嗅鞘细胞移植后4周,患者的脊髓功能有改善,美国脊髓损伤协会评分运动总分由术前2增加到4分;轻触觉总分由4增到6分;痛觉由21增至24分。经0．5年电话随访呈继续改善趋势。结论 嗅鞘细胞移植能改善多发性硬化患者的脊髓神经功能。长期效果有待进一步评价。     

嗅鞘细胞联合甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤区神经中丝表达的影响

目的 观察嗅鞘细胞(olfactory ensheating cells,OECs)移植联合甲基强的松龙(methyprednisolone,MP)对大鼠脊髓损伤区神经中丝(neurofilament,NF)mRNA及蛋白表达的影响,探讨OECs移植联合应用MP促进损伤脊髓修复的机制.方法 以NYU脊髓打击法建立大鼠急...     

α晶体蛋白促进大鼠嗅鞘细胞存活的体外研究

目的研究α晶体蛋白对离体培养的嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)存活和增殖的影响,探索增强移植OECs存活和增殖的有效方法。方法取大鼠嗅球进行OECs离体培养,细胞计数检测α晶体蛋白组及对照组OECs的存活数目;Brdu掺入法及流式细胞仪检测OECs的增殖。结果 (1)培养5 dα晶体蛋白组OECs数目与对照组相比无明显差异,培养6～13 d,α晶体蛋白组OECs数目明显多于对照组(P<0.05);(2)将Brdu加入培养液中8 h后,α晶体蛋白组同视野Brdu阳性细胞数与总细胞数的百分比显著大于对照组(P<0.01);(3)α晶体蛋白组G2/M期、S期细胞数明显多于对照组(P<0.01)。结论α晶体蛋白能明显促进离体培养的OECs的存活。     

嗅球成鞘细胞对新生大鼠皮层神经元的影响

目的　观察嗅球成鞘细胞 (OECs)培养液对培养中的新生大鼠大脑皮层神经元的影响。方法　原代培养新生大鼠OECs和大脑皮层神经元 ;收集含有OECs分泌物的培养液并以不同剂量添加到正在培养的神经元中 ,观察神经元正常及损伤时的生长情况。结果　培养的OECs形态学观察及神经生长因子受体 (p75NGFR)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、胶质细胞源性营养因子 (GDNF)免疫组化阳性反应均与报道一致。OECs培养液 (0 .4～ 1.0ml)能明显促进神经元生长速度 ,并能有效地减少受损神经元的崩解。结论　OECs有促进正常神经元生长、保护损伤神经元的作用 ,这可能与OECs分泌多种生物活性物质有关     

嗅鞘细胞移植与α晶体蛋白联合对大鼠视神经损伤后视功能恢复的促进作用

目的 研究嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)移植与α晶体蛋白联合对大鼠视神经损伤后视功能恢复的促进作用.方法 玻璃体腔α晶体蛋白注射,联合视神经损伤近端移植OECs,分为4个实验组,包括α晶体蛋白注射组、OECs移植组、α晶体蛋白注射+OECs移植组、PBS对照组.于视神经损伤并移植OECs+玻璃体腔注射药物后即刻、1周、2周、1个月、2个月、3个月,用全自动眼电生理仪进行闪烁视觉诱发电位(flash-elicited visual-evoked potential,FVEP)检测,分析比较各时间点各组P1波的振幅及潜时.结果 OECs移植组及α晶体蛋白注射+OECs移植组FVEP的P1波振幅于视神经损伤后1周[(8.49±1.19) μv,(9.33 ±2.54) μv]、2周[(8.85±1.92) μv,(9.43±2.41)μv]、1个月[(8.46±1.09) μv,(8.72±1.91)μv]、2个月[(8.12±1.41)μv,(8.48±1.67) μv]、3个月[(7.68±2.56)μv,(8.08±1.47)μv],均显著高于对照组(P＜0.01),二者联合组P1波振幅恢复更为明显.3个实验组FVEP的P1波潜时与对照组比较,均无统计学差异.结论 OECs移植与α晶体蛋白均明显促进视神经损伤后FVEP电生理的恢复,其中,二者联合的作用最为明显.     

急性脊髓炎的MR诊断

目的：探讨MRI对急性脊髓炎的诊断价值及预后评价分析。方法：总结30例经临床治疗及随访证实急性脊髓炎患者的MRI及临床表现，8例有复查MRI，分析常规序列MR平扫及增强扫描的影像学特点。结果：病变分布，于颈延髓2例，颈髓9例，颈胸髓15例，胸腰髓3例，全脊髓1例。病变范围，两个椎体高度以下为7例，2—4椎体高度5例，4个椎体高度以上18例，12例病变段脊髓增粗；病变信号为T1WI稍低或等信号，T2WI高信号，部分增强后有条状或斑片状强化。8例治疗后复查MR，病变范围明显改变，28例临床随访均有明显症状改善。讨论：MRI对急性脊髓炎诊断有重要价值，MRI表现有一定的特征性，结合病史可作出早期诊断，MRI随访是评价疗效的重要手段。     

嗅神经鞘细胞及其在脊髓损伤中的应用前景

成年中枢神经系统(central nerve system，CNS)损伤后，由于内部微环境不适合，神经元轴突往往不能再生，而成年嗅觉系统中嗅感觉神经细胞却终生具有增殖、更新能力，新生成的轴突能长入嗅球并建立功能联系。研究发现，嗅觉系统这种独特的特点可能与一种特殊的大胶质细胞——嗅神经鞘细胞有关。     

肺癌脊髓转移误诊为急性脊髓炎1例

1病例报告 患者男,54岁。主因咳嗽、咳痰带血2个月,胸腹以下感觉减退18h,加重伴双下肢无力7h入院。患者2个月前无明显诱因出现咳嗽、咳痰及咯血,每次约10ml,劳累后明显,无胸闷、气短,声音嘶哑．当地医院诊断为支气管炎,给予抗感染治疗,