英夫利西单抗治疗依那西普疗效不佳的类风湿关节炎1例报告

患者男,22岁。因对称性关节肿痛15年,加重伴发热20d入院。患者于15年前无明显诱因出双踝关节肿痛,给予对症治疗(具体不详),效果欠佳,并逐渐出现双手各关节、双膝关节疼痛不适,曾间断口服"激素、中药"(具体剂量不详)治疗可好转。5     

英夫利西单抗对类风湿关节炎患者血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b的影响

目的 观察英夫利西单抗治疗活动性类风湿关节炎(RA)患者前后血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)水平,并分析其与RA患者各项活动性指标及疗效的相关性,比较不同抗RA药物对骨侵蚀的影响并阐明可能的机制.方法 36例RA患者随机分为2组,英夫利西单抗治疗组16例,甲氨蝶呤(MTX)治疗组20例,记录所有患者24周的临床及实验室指标.对比2组间及组内血清TRACP-5b水平的差异,并分析其与RA各项活动性指标及疗效的相关性.计量资料组间比较采用秩和检验、成组设计和配对设计的t检验,计数资料采用x2检验,相关分析采用Spearman、Pearson相关分析.结果 基线X线表现为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的RA患者血清TRACP-5b水平分别为(1.69±0.48)、(2.64±1.13)、(3.34±1.07)、(4.05±0.25)U/L,Ⅲ、Ⅳ期TRACP-5b水平与Ⅰ期比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗24周后,英夫利西单抗治疗组血清TRACP-5b水平为(2.16±1.09)U/L,较MTX治疗组[(3.05±0.93)U/L ]低,差异有统计学意义(P＜0.05);较英夫利西单抗组治疗前血清TRACP-5b水平[(3.07±1.32)U/L]低,差异有统计学意义(P＜0.05).活动性RA血清中TRACP-5b基线水平与病程、健康评价呈正相关(r=0.313,P=0.043;r=0.443,P=0.007).结论 TRACP-5b血清水平随RA关节X分期增加而升高;血清TRACP-5b的治疗变化可能反映了英夫利西单抗对RA骨破坏的抑制作用.治疗24周后,英夫利西单抗治疗组血清TRACP-5b水平较甲氨蝶呤治疗组明显低,提示英夫利西单抗对破骨细胞的抑制作用可能优于MTX.

Abstract：

Objective To detect the serum level of tartrate-resistant acid phosphatase 5b (TRACP5b) in patients with rheumatoid arthritis (RA) before and after infliximab treatment and analyze the relevance between TRACP-5b and activity indexes of RA.The effect of different medicines on bony erosion in RA and its possible mechanism were explored.Methods Patients were divided into two groups:16 patients were treated with inffiximab for 24 weeks (group 1 ),25 patients were treated with MTX for 24 weeks (group 2).The core indicators of RA activity were evaluated.Ranked test,grouped design and matched t test was used to examine the quantity data between groups,while numerate data was analyzed with qui-square test.Correlation between data was tested by Spearmen's and Pearson's tests.RestltsThe levels of TRACP-5b in patients with X-ray stagesⅠ ,Ⅱ ,Ⅲ ,Ⅳ were elevated at the baseline.The levels of TRACP-5b in phase Ⅲ and Ⅳ were [(3.34±1.07) U/L] and[(4.05±0.25) U/L] respectively,higher (P＜0.05) than those in phase Ⅰ[(1.69±0.48) U/L].At week 0,week 12,and week 24,the serum levels of TRACP-5b in group 1 were(3.07±1.32),(2.72±1.18),(2.16±1.09) U/L respectively,while the levels in week 12,and 24 were significantly lower than those of week 0(P＜0.05).A significant decrease of serum TRACP-5b level in group 1[(2.16±1.09 ) U/L]when compared to group two[ (3.05±0.93) U/L] after 24 weeks.TRACP=5b level was positively correlated with the course of disease (r=0.313,P=0.043 ),HAQ(r=0.443,P=0.007).Conclusion Infliximab can reduce TRACP-5b level in RA and inhibit inflammatory bone loss.TRACP-5b can be used to evaluate the efficacy of biological agents in treating RA.     

类风湿关节炎患者外周血TL1A表达水平及其临床意义

目的：通过检测类风湿关节炎（RA）患者外周血肿瘤坏死因子样配体1A（TL1A）的表达水平,探讨TL1A在RA中的临床意义。方法：利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测99例RA患者和40例健康人血清TL1A和IL17水平,统计分析血清TL1A与RA患者临床特点及血清IL17之间的关系。结果：RA患者血清TL1A浓度为1091.96±1160.77pg/ml,明显高于正常人248.13±161.71pg/ml（P〈0.01）。RA高度活动组TL1A浓度明显高于中度活动组和低度活动组（P值均〈0.01）,而后2组之间未见明显差异（P〉0.05）。血清TL1A与RA活动度评分DAS28呈正相关（P〈0.01）,与RA肿胀关节数、压痛关节数、类风湿因子浓度也具有相关性（P值均〈0.05）,与关节骨侵蚀程度X线分期无明显相关（P〉0.05）。RA患者血清IL17与TL1A之间未见明显相关性（P〉0.05）。结论：TL1A在RA患者血清中表达水平明显升高,并与RA病情活动相关,可以辅助其他临床指标评价RA病情。推测TL1A在RA的发病机制中起一定作用,但与IL17无直接相关。     

类风湿关节炎患者血管内皮功能研究

目的研究类风湿关节炎（RA）患者血管内皮功能状况以及影响其功能的相关因素。方法控制影响血管内皮功能的因素后纳入观察组66例RA初治患者，以及年龄、性别匹配的对照组54名。采用超声检测血管内皮功能；比较两组临床及实验室炎性指标，分析与血管内皮功能之间的相关性。结果观察组存在血管内皮功能障碍；两组在年龄、性别、体重、血压、血脂、血白细胞介素（IL）-8、可溶性细胞间黏附分子（sICAM）-1、血管性假性血友病因子（vWF）水平差异无统计学意义，观察组的IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α和CD141高于对照组（P〈0．05）；仅舒张压、TNF-α和CD141水平与该组的血管内皮功能障碍相关。结论RA患者存在血管内皮功能障碍，TNF-α可能在其发生机制中起重要作用。     

英夫利西单抗联合甲氨蝶呤治疗老年类风湿关节炎的临床效果

目的观察英夫利西单抗(IFN)联合甲氨蝶呤(MTX)治疗老年类风湿关节炎(RA)的临床效果,探讨提高老年RA临床疗效的药物治疗方案。方法选择80例老年RA患者,按照患者知情同意的原则,分为对照组(n=35)和观察组(n=45),对照组采用MTX治疗,观察组采用英夫利西单抗联合MTX治疗,治疗24 w后比较两组患者临床症状及相关检查指标、临床疗效和不良反应情况。结果治疗24 w后两组患者临床症状及相关检查指标比较,差异显著(P<0.01,P<0.05);两组患者治疗后出现的不良反应例数比较,差异不显著(P>0.05)。结论在老年RA患者药物治疗过程中,可考虑首选IFN联合MTX治疗的方式,可显著提高临床疗效,且不会增加治疗中的不良反应。     

类风湿关节炎外周血与滑液细胞CD147分子表达的研究

目的　为了探讨关节内CD14 7表达细胞的来源与类风湿关节炎 (RA)的关系 ,研究CD14 7分子在RA患者及正常健康人外周血与滑液细胞中的表达水平。方法　取 10例活动期RA患者用药治疗前后外周血、治疗前滑液及 10名正常健康对照外周血 ,外周血和滑液分离后细胞悬液采用双色免疫荧光标记 ,流式细胞术测量淋巴细胞 (CD3+ T)、CD14 + 单核细胞和中性粒细胞表达CD14 7阳性率及表达荧光强度水平。结果　①与正常对照相比 ,RA患者外周血CD3+ T淋巴细胞与CD14 + 单核细胞的表面CD14 7表达强度较高 (P <0 0 1) ,而其表达率比较差异无显著性。中性粒细胞表面CD14 7的表达率与表达强度与正常人相比差异均无显著性 ;②正常对照外周血细胞膜表面CD14 7的分子的表达在IFN γ刺激后有显著增多 ,而RA患者在刺激前后差异无显著性 ;③关节滑液中淋巴细胞、单核细胞与中性粒细胞上的CD14 7表达强度均比外周血细胞表达高 ,且淋巴细胞的表达率较高。结论　CD14 7在RA中各种炎细胞上均有较高表达 ,提示其在RA的病理损伤中起到重要作用。     

类风湿关节炎患者外周血及滑液NKp44+自然杀伤细胞的表达和临床意义探讨

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血及滑液NKp44+自然杀伤细胞的临床意义.方法 采用流式细胞术检测20例活动期RA患者[疾病活动指数(DAS)28≥2.6]、15例缓解期RA患者(DAS28＜2.6)及20名健康对照者外周血NKp44+自然杀伤细胞比例及10例活动期RA患者滑液NKp44+自然杀伤细胞比例.多重非参数检验比较3组间NKp44+自然杀伤细胞比例差异.采用Spearmar相关分析NKp44+自然杀伤细胞与临床指标[DAS28评分、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)]的相关性.结果 ①活动期、缓解期RA患者及健康对照者外周血NKp44+自然杀伤细胞比例分别为(1.480±4.750)%、(0.540±0.590)%、(0.000±0.000)%,活动期RA患者外周血NKp44+细胞比例明显高于缓解期和健康对照(x2=46.708,P=0.000).②10例活动期RA患者滑液NKp44+自然杀伤细胞比例为(15.6±11.7)%,明显高于其外周血NKp44+自然杀伤细胞比例(3.6±2.5)%(z=-3.780,P=0.000).③活动期RA患者外周血NKp44+自然杀伤细胞比例与DAS28评分、抗CCP抗体呈正相关(r=0.777,P=0.000;r=0.967,P=0.000),与RF无相关性(r=-0.343,P=0.138).滑液NKp44+自然杀伤细胞比例与DAS28评分、抗CCP抗体呈正相关(r=0.930,P=0.000;r=0.867,P=0.001),与RF无相关性(r=0.564,P=0.09).结论 NKp44+自然杀伤细胞在RA患者外周血及滑液中明显增高,且与DAS28评分、抗CCP抗体呈正相关,提示NKp44+自然杀伤细胞与疾病活动度和病情严重程度相关.

Abstract：

Objective To investigate the clinical significance of NKp44+NK cells in the peripheral blood and synovial fluid of rheumatoid arthritis (RA) patients.Methods The proportions of NKp44+NK cells in the PB of 20 active and 15 remission patients with RA and 20 healthy individuals were detected using flow cytometry.The proportions of NKp44+NK cells in the SF of 10 active patients were detected.Multiple nonparametric test was used to compared the difference of NKp44+NK cells proportions.Clinical data including DAS28,anti-CCP antibody and RF were collected.The relationship between NKp44+NK cells and clinical data was analyzed by Spearman correlation analysis.Results The proportions of NKp44+NK cells in PB of active and remission patients and healthy individuals were (1.480±4.750)%,(0.540±0.590)%,(0.000±0.000)%respectively.The proportion of NKp44+NK cells in PB of active patients was significantly higher than that of remission patients and healthy individuals (x2=46.708,P=0.000).The proportion of NKp44+NK cells in the SF of ten active RA patients was significantly higher than matched PB.There was positive correlation between NKp44+NK cells proportion in PB and SF of active patients and DAS 28 and anti-CCP antibody level.There was no correlation between NKp44+NK cells proportion in PB,SF and RF.Conclusion There is a marked increase in the proportion of NKp44+NK cells in PB and SF of RA patients.Moreover,NKp44+NK cells are positively correlated with DAS28 and anti-CCP antibody,suggesting that NKp44+NK cells may be correlated with disease activity and severity.     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞TIM-3 mRNA的表达

目的观察类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4 T细胞TIM-3mRNA的表达,探讨TIM-3在RA发病中的作用。方法应用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测25例RA患者和18名健康对照组外周血CD4 T细胞TIM-3mRNA的表达,并分析TIM-3mRNA的表达与类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)的相关性。结果RA患者外周血CD4 T细胞TIM-3mRNA的相对表达较健康对照组明显增多(0.84±0.09vs0.55±0.07,t=11.73,P<0.01),且与RF水平呈正相关(r=0.84,P<0.01);高度活动组RA患者TIM-3mRNA的表达高于低中度活动组(0.89±0.06vs0.81±0.09,t=2.49,P<0.05)。结论RA患者CD4 T细胞TIM-3mRNA的表达异常增多并与RF水平呈正相关,高度活动组TIM-3mRNA的表达高于轻中度活动组,提示TIM-3mRNA的表达与RA的病情活动有关,TIM-3可能在RA的发病中起重要作用。     

rhTNFR:Fc对类风湿关节炎患者血清中致炎及抗炎性细胞因子的影响

目的探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白[rhTNFR：Fc，益赛普（etanercept）]治疗类风湿关节炎（RA）的免疫学机制，了解rhTNFR：Fc对RA患者血清中致炎及抗炎性细胞因子的作用，比较rhTNFR：Fc和甲氨蝶呤（MTX）对这些细胞因子作用的不同，为rhTNFR：Fc治疗RA提供进一步的实验依据。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测RA患者rhTNFR：Fc治疗前后血清中白细胞介素（IL）-1、IL-6、IL-1、肿瘤坏死因子（TNF）-α和干扰素ONF）-γ度。观察rhTNFR：Fc对细胞因子的影响。结果①RA患者血清中的炎性细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-6的水平均高于健康对照组，其中IL-6、INF-γ、TNF-α的水平与健康对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01），抗炎性细胞因子IL-10的水平低于健康对照组，但两者相比差异无统计学意义（P〉0．05）。②rhTNFR：Fc治疗RA后血清中Th1型细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-6水平均明显降低（P〈0．01），而Th2型细胞因子IL-10的水平明显提高（P〈0．01）。③RA患者血清中TNF-α水平与肿胀关节数及肿胀关节指数呈正相关（P〈0．05）。④对临床指标的分析表明，rhTNFR：Fc治疗RA疗效确切。结论rhTNFR：Fc可以降低RA患者血清中TNF-α、INF-γ、IL-1β、IL-6的水平，同时升高IL-10水平；在抑制了Th1型细胞因子的同时．增强了Th2型细胞因子的效应．从而改善RA的病情。     

肿瘤坏死因子拮抗剂治疗类风湿关节炎的研究进展

类风湿关节炎（RA）是一种以慢性骨侵蚀性为主要表现的系统性自身免疫性疾病.滑膜的慢性炎症导致关节破坏和畸形、功能渐进性障碍,随之而来的是患者生活质量降低和死亡率上升.RA患者致残率可达30%,死亡率增加至52%,另外还会导致感染和心血管等疾病的发生[1].治疗RA目的就是为了缓解病情的活动性,预防和控制关节破坏,减少其他严重的合并症,如心脏病和脑卒中等.早期干预对RA患者改善关节功能显得尤为重要.     

细胞亲环素A通过CD147分子促进类风湿关节炎单核/巨噬细胞MMP-9的表达

目的观察类风湿关节炎（RA）滑液中存在的大量细胞亲环素A（CypA）是否可以上调RA滑液中细胞膜表面高表达CD147分子的单核／巨噬细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9的表达及活性，并确定这一调节是否需要CDl47分子信号通路的参与。方法重组人CyPA（200ng／mL）刺激人单核细胞系THP-l细胞24h。进行实时定量RT-PCR及明胶酶谱分析MMP-2和MMP-9mRNA表达及酶活性的改变：加入抗CDl47拮抗肽AP-9阻断细胞膜分子CDl47的作用。临床收集10例确诊的活动期RA患者外周血及关节腔滑液，分离获得单核／巨噬细胞，观察CypA对其MMP-2和MMP-9表达的影响。结果CyPA增加分化前及分化后THP-1细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达和活性，而对MMP-2则无作用；环孢素A（CsA）及抗CDl47拮抗肽AP-9显著抑制THP-1细胞MMP-2和MMP-9 mRNA表达及其分泌和活性及阻断CypA的上调作用。CyPA对RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达和活性具有促进作用。结论CypA通过CD147受体的参与，上调RA关节腔滑液内单核／巨噬细胞MMP-9的表达及其活性，这一作用机制为RA发病机制及其治疗提供了新的理论基础。     

趋化因子受体CCR4在活动期类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞表达的研究

目的 探讨活动期类风湿关节炎(aRA)患者趋化因子受体CCR4在外周血CD4+T细胞的表达及其意义,并对该表达与血清重要细胞因子水平的相关性进行研究.方法流式细胞计数方法对12例aRA患者和10名健康对照者外周血CD4+T细胞表面CCR4的表达情况进行检测;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测患者血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10及干扰素(IFN)-γ的水平并记录患者相关临床及实验室资料.分析及评价aRA患者外周血淋巴细胞中CD4+CCR4+T细胞百分数(CD4+CCR4+T%)与TNF-α、IL-10、IFN-γ的血清水平及临床指标的相关性.结果 aRA组外周血CD4+CCR4+T%明显高于健康对照组(P＜0.01).aRA组血清TNF-α(P＜0.01)、IL-10(P＜0.01)及IFN-γ(P＜0.01)水平明显高于健康对照组.在检测的细胞因子中,aRA患者血清IL-10水平与CD4+CCR4+T%呈明显正相关关系(r＝0.66,P＜0.05).在临床指标中,CD4+CCR4+T%与aRA患者Lunsbury关节指数、血沉、C反应蛋白及血小板计数呈明显正相关关系(P＜0.05).结论 CCR4在CD4+T细胞趋化至病变关节过程中可能发挥重要作用;外周血CD4+CCR4+T%与血清IL-10水平密切相关;该百分数可以作为临床评价RA活动性的一个敏感指标.     

CD48在类风湿关节炎患者外周血CD8+T细胞上的表达及意义

目的探讨类风湿关节炎（RA）患者CD8^＋T细胞上CIM8的表达及意义。方法选择30例RA患者（RA组）和30名健康人（对照组），采用流式细胞仪测定两组外周血CD8^＋T细胞表面上CD48的平均荧光强度，分析RA患者CD48在CD8^＋T细胞上表达的临床意义。结果RA组CD48^＋CD8^＋T细胞表面平均荧光强度明显低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。而两组CD48^＋CD4^＋T细胞的表面平均荧光强度差异无统计学意义。结论RA患者CD8^＋T细胞上CD48的表达低于对照组，CD48的表达减低使抑制性T细胞减少可能在RA的发病过程中起作用。     

可溶性CD147与类风湿关节炎动脉粥样硬化危险因素的相关性

目的 通过研究类风湿关节炎(RA)患者外周血中可溶性CD147(sCD147)的表达水平及其与血脂水平相关性的分析,探讨sCD147在RA动脉粥样硬化中的作用.方法 采用双抗体夹心ELISA方法分别检测RA、动脉粥样硬化性心脏病(CAHD)患者各36例及30名健康人血清中sCD147含量;测定RA患者病情活动度(DAS28),分析sCD147水平与其病情活动度的相关性;使用全自动生化分析仪测定RA患者血脂水平,分析患者血清中sCD147与血脂水平的相关性.结果 RA患者血清中sCD147分子水平显著高于冠心病患者及健康对照,且病情高度活动RA组的sCD147含量显著高于病情低度及中度活动组(P均＜0.05).总胆固醇(TC)升高组及甘油三酯(TG)升高组RA患者的TC、TG水平与其血清中aCD147含量呈正相关(r=84,P＜0.05;r=0.87,P＜0.05),而TC轻度升高及正常组或TG正常组患者的TC、TG水平则与其血清中sCD147含量无相关性(r=0.41,P=0.21;r=0.14,P=0.57;r=0.49,P=0.87).低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高及轻度升高组患者的LDL-C水平与其血清中sCD147含量呈正相关(r=0.86,P＜0.05;r=0.81.P＜0.05),LDL-C正常组两者则无相关性(r=0.78,P=0.22.RA患者高密度脂蛋白胆同醇(HDL-C)降低与否和其血清中sCD147水平无相关性(r=0.04,P=0.96;r=0.13,P=0.87.结论 RA患者体内sCD147分子可能参与了RA的发病,且与病情活动度有关.同时,其sCD147水平的升高还可能与其血清中血脂的异常有关.     

CD147分子和基质金属蛋白酶在类风湿关节炎滑膜中的表达

目的 探讨类风湿关节炎(RA)滑膜组织CD147的表达及其与基质金属蛋白酶(MMP)-01和MMP-2表达的相关性。方法 采用免疫组织化学SP(streptavidin／peroxidase)染色方法检测11例RA患者受损关节软骨-血管翳接合部（CPJ)滑膜组织中CD147和MMP-1及MMP-2的表达，并与3例骨关节炎（OA)患者滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的检测相对照。结果 3例OA滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的表达均为阴性，而11例RA滑膜组织中均有CD147和MMP-1及MMP-2的表达。其中，表达CD147的细胞为单核-巨噬细胞、淋巴细胞和滑膜成纤维样细胞，表达MMP-1及MMP-2的细胞为滑膜成纤维样细胞。统计学分析表明RA滑膜细胞CD147的表达和MMP-1及MMP-2的表达间存在显著相关性。结论 CD147在RA滑膜组织中表达增高，可能是导敏RA受损关节软骨、骨基质降解的重要因素之一。     

急性胰腺炎患者外周血CD14^+CD16^+单核细胞表达B7-H2的临床意义

背景急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是常见的急腹症,不同类型预后不同.AP的免疫应答和失衡免疫与其严重程度有关,炎症因子和相关免疫细胞在AP发病机制中至关重要,因而寻找炎症细胞和新炎症免疫因子对精准治疗AP具有重要意义.目的探讨AP患者外周血CD14^+CD16^+单核细胞表达B7-H2的临床意义.方法A P患者63例[轻度A P(m i l dA P,M A P)25例、中度AP(moderately severe AP,MSAP)20例、重度AP(severe AP,SAP)18例],对照组为健康体检者20例,采用流式细胞仪检测CD14^+CD16^+细胞亚群上B7-H2表达情况,评价其与胰腺炎严重程度关联性及临床意义.结果AP患者发病24hCD14^+CD16^+细胞B7-H2出现异常高表达,显著高于健康对照组(t=11.10,P<0.001);A P各组B 7-H 2在C D 14^+C D 16^+细胞膜上表达明显高于CD14^+C D16^-细胞膜上表达(P<0.01);SAP组CD14^+C D 16^+和CD14^+C D 16^-细胞B7-H2表达(373.30±89.72和78.62±13.05)最高,M S A P组(279.55±76.95/44.92±12.44)其次,均高于M A P组(181.15±35.75/23.32±4.28),各组两两比较差异有显著性(P<0.01);MAP组、MSAP组发病24 h、48 h、72hCD14^+CD16^+和CD14^+CD16^-单核细胞膜B7-H2动态表达差异无显著性(P>0.05),然而,SAP组无论C D14^+C D16^+还是CD14^+C D16^-细胞膜B7-H2表达24h、48h、72h均呈明显上升趋势,差异有显著性(P<0.05).结论CD14^+CD16^+和CD14^+CD16^-单核细胞膜B7-H2在AP患者体内高表达,与AP严重程度密切相关,且SAP呈动态升高变化;同时B7-H2在AP患者CD14^+CD16^+单核细胞膜表达较CD14^+CD16^-单核细胞明显升高,为进一步认识AP免疫应答和失衡提供了新的线索,为AP精准靶向治疗提供参考.     

同型半胱氨酸对巨噬细胞CD147表达的影响及瑞舒伐他汀的干预作用

目的探讨同型半胱氨酸对U-937巨噬细胞CD147表达的影响及瑞舒伐他汀的干预作用。方法在佛波酯诱导分化的人U-937巨噬细胞中加入0、50、100及500μmol/L的同型半胱氨酸孵育48 h;半定量RT-PCR检测CD147 mRNA的表达,Western blot检测巨噬细胞CD147蛋白的表达。不同浓度的瑞舒伐他汀和500μmol/L同型半胱氨酸共同干预U-937巨噬细胞,48 h后半定量RT-PCR及Western blot检测CD147受抑制情况,细胞免疫荧光试验检测CD147表达。结果半定量RT-PCR和Western blot结果显示,随同型半胱氨酸浓度增加,U-937巨噬细胞CD147 mRNA及蛋白的表达逐渐升高,具有剂量依赖性。不同浓度瑞舒伐他汀和500μmol/L同型半胱氨酸共同处理U-937巨噬细胞,随瑞舒伐他汀浓度增加,U-937巨噬细胞CD147 mRNA及蛋白的表达逐渐受抑制,呈一定剂量依赖性。细胞免疫荧光证实同型半胱氨酸促进CD147表达增加,而瑞舒伐他汀能抑制其表达。结论同型半胱氨酸能上调U-937巨噬细胞CD147的表达,瑞舒伐他汀呈浓度依赖性抑制同型半胱氨酸诱导CD147表达。     

CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞在类风湿关节炎患者外周血中的表达及意义

目的 检测调节性T淋巴细胞新旧标志在活动性类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达,探讨用CD127代替FOXP3对调节性T淋巴细胞进行研究的可能性.方法 选取活动性RA患者32例,其中未经缓解病情抗风湿药(DMARDs)治疗者20例,经DMARDs治疗效果不佳者12例,以25例原发性干燥综合征(pSS)患者和24名健康人作为对照,采用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low/-及CD4*CD25+FOXP3+T淋巴细胞的比例,同时检测外周血C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、免疫球蛋白、补体等水平并进行相关性分析.结果 RA患者CD4+CD25highT淋巴细胞百分率与健康对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).其CD4+CD25+FOXP3+T淋巴细胞与CD+CD25+CD127low/-T淋巴细胞的百分率均低于健康对照组(P<0.05),但CD4+D25+FOXP3+、CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞在RA患者与pSS患者中的表达差异无统计学意义(P>0.05);这三群细胞的表达水平在RA未经治疗组和治疗效果不佳组之间差异均无统计学意义(P>0.05). RA患者CD4+CD25+FOXP3+T淋巴细胞与CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞之间呈明显正相关(r=0.698,P=0.001),但这两群细胞与患者的CRP、ESR等水平及抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)均无相关性(P>0.05).结论 活动性RA患者外周血中,CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞的百分率降低,并且与CD4+CD25+FOXP3+T淋巴细胞呈显著正相关性,提示CD127可能被作为Treg细胞中FOXP3的替代标记.     

CD14+,CD16+ blood monocytes and joint inflammation in rheumatoid arthritis

OBJECTIVE: CD14+,CD16+ monocytes, identified as a minor population of monocytes in human peripheral blood (PB), have been implicated in several inflammatory diseases. We undertook this study to investigate the relevance of this phenotype to joint inflammation in rheumatoid arthritis (RA). METHODS: The expression of CD14, CD16, CC chemokine receptor 1 (CCR1), CCR5, and intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) on monocytes was measured by flow cytometric analysis. Concentrations of the cytokines known to induce CD16 (including transforming growth factor beta1 [TGFbeta1], macrophage colony-stimulating factor [M-CSF], and interleukin-10 [IL-10]) and concentrations of the soluble form of CD14 (sCD14) in plasma and synovial fluid (SF) samples were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The induction of CD16 on RA blood monocytes cultured for 18 hours with 1 or with all 3 cytokines was determined. RESULTS: The mean +/- SD frequency of CD14+,CD16+ blood monocytes was significantly increased in RA patients (11.7 +/- 5.6%; n = 105) compared with healthy controls (9.5 +/- 2.2%; n = 15) (P < 0.01), and the patient group with an increased frequency of CD16+ monocytes (> or =13.9%) had active disease, as defined by increased counts of tender and swollen joints, levels of acute-phase reactants, and titers of rheumatoid factor. The response to drug therapy correlated with changes in the frequency of this phenotype. The expression of CD16 on SF monocytes from RA patients was markedly elevated compared with the expression on PB monocytes. CD16 expression on RA blood monocytes was augmented in vitro by IL-10, M-CSF, and TGFbeta1. Plasma concentrations of these cytokines and of sCD14 were significantly higher in RA patients with high CD16+ monocyte frequencies than in those with low CD16+ monocyte frequencies or in healthy controls. CD14+,CD16+ monocytes expressed higher levels of CCR1, CCR5, and ICAM-1 than did regular CD14++,CD16- monocytes, particularly in active RA. CONCLUSION: These results indicate that the maturation of blood monocytes into tissue-infiltrative CD16+ cells before entry into the joint, induced by cytokine spillover from the inflamed joint, may contribute to the persistent joint inflammation of RA.