灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸雄激素结合蛋白和抑制素表达的影响

目的 观察灵芝孢子粉对镉致雄性大鼠睾丸雄激素结合蛋白和抑制素的影响.方法 45只SD雄鼠,随机均分为3组:对照组、Cd组、灵芝孢子粉拮抗组(GLS+ Cd).灵芝孢子粉拮抗组用5mg/kg灵芝孢子粉灌胃,对照组与Cd组灌胃等量生理盐水,每天1次.Cd组和GLS+ Cd组腹腔注射CdCl22mg/kg,隔天1次.对照组腹腔注射等量生理盐水.3个月后分3批处死,间隔为1个月.用RT-PCR法对抑制素和雄激素结合蛋白的表达量进行定量分析,睾酮定量分析酶联免疫检测试剂盒测定血清睾酮浓度.结果 在镉染毒1个月时,Cd组ABP(雄激素结合蛋白)表达量应激性升高,在第3个月Cd组ABP表达量低于灵芝孢子粉拮抗组,有统计学意义(P＜0.05);随着镉染毒时间延长,第2、3个月Cd组INH-B(抑制素B)表达量低于灵芝孢子粉+ Cd组,有统计学意义(P＜0.05);镉染毒3个月时,与对照组比较,Cd组和灵芝孢子粉拮抗组血清睾酮水平明显降低(P＜0.05);与Cd组比较,灵芝孢子粉+Cd组血清睾酮水平浓度高(P＜0.05).结论 灵芝孢子粉可以通过提高ABP、INH-B的表达对镉致雄性大鼠支持细胞损伤有一定的保护作用.     

铝对大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白mRNA表达的影响

目的:研究氯化铝对体外培养大鼠睾丸支持细胞的雄激素结合蛋白(ABP)mRNA表达的影响。方法:体外培养大鼠睾丸支持细胞为模型,分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组(0,300,400,500μmol/L)氯化铝染毒睾丸支持细胞,培养24h后采取MTT法检测细胞活性,RT-PCR法检测ABP mRNA的表达水平。结果:随着氯化铝染毒剂量的增大,ABP mRNA的表达下降。高剂量染毒组与对照组相比较,ABP mRNA的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:氯化铝对体外培养的睾丸支持细胞具有毒性作用,抑制ABP mRNA的表达,从而损伤支持细胞功能,导致生殖功能障碍。     

巴戟天萃取物对环磷酰胺诱导生精障碍大鼠支持细胞的影响

目的 探讨巴戟天萃取物对环磷酰胺(CTX)诱导生精障碍大鼠睾丸支持细胞的影响.方法 48只成年雄性SD大鼠,随机分为6组,空白对照组、CTX+NS组、CTX+ MO 10 g/kg组、CTX+ MO 20 g/kg组、CTX+MO 30 g/kg组、CTX+ MO 40 g/kg组.以CTX构建大鼠生精障碍动物模型;巴戟天水提物用乙酸乙酯萃取后取水层成分,分别以10、20、30、40 g/(kg·d)的浓度给予4个剂量实验组灌胃,空白对照组及CTX+ NS组予生理盐水灌胃,持续2周.取各组大鼠睾丸组织,荧光定量PCR检测卵泡刺激素受体(FSHR) mRNA和雄激素结合蛋白(ABP) mRNA表达的差异.结果 4个剂量实验组FSHR mRNA和ABP mRNA表达明显高于CTX+ NS组及空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 巴戟天萃取物对CTX诱导生精障碍大鼠的睾丸支持细胞具有保护作用,进而修复睾丸的生精功能.     

妊娠期染毒 PFOS 对子代成年雄性大鼠生殖系统的影响

目的：研究妊娠期染毒全氟辛烷磺酸盐（perfluorooctane sulfonate,PFOS）对子代成年雄性大鼠生殖系统的影响。方法：对妊娠第12天的SD大鼠采用灌胃方式染毒不同剂量PFOS（5、10mg／kg）。每天1次,连续8d。出生后第65（PDN56）天,检测子代成年雄性大鼠体质量及睾丸重量。采用实时荧光聚合酶链式反应检测睾丸间质细胞（adult Leydig cell,ALC）类固醇激素合成急性调节蛋白（steroidogenic acute regulatory protein,StAR）mRNA的相对表达量。结果：与对照组相比,5mg／kg剂量染毒组子体质量显著性降低（P〈0．001）,睾丸系数下降（P〈0．05）;睾丸组织中StAR mRNA的相对表达量下调（P〈0．05）。结论：妊娠期染毒PFOS可通过抑制ALC合成睾酮途径中StAR mRNA的表达水平,对子代成年雄性大鼠的生殖系统产生毒性作用。     

重铬酸钾对大鼠睾丸支持细胞中雄激素结合蛋白、转铁蛋白和抑制素蛋白表达的影响

目的:研究重铬酸钾对大鼠睾丸支持细胞中雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(Tf)和抑制素(INH)蛋白的表达的影响。方法:建立大鼠睾丸支持细胞体外原代培养模型,分为0mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L重铬酸钾染毒组,Westernblot法检测重铬酸钾作用24h后各组睾丸支持细胞中ABP、Tf和INH蛋白表达水平的变化。结果:ABP蛋白的表达量随重铬酸钾浓度的升高而升高(0.39±0.19、0.51±0.18及0.81±0.19),差异有统计学意义(F=10.738,P<0.001);Tf蛋白的表达量也随重铬酸钾浓度的升高而增加(0.56±0.19、1.21±0.19及1.19±0.17),差异有统计学意义(F=32.435,P<0.001);而INH蛋白表达却呈下降趋势(1.06±0.19、1.20±0.19及0.71±0.19),差异有统计学意义(F=14.116,P<0.001)。结论:重铬酸钾能够引起大鼠睾丸支持细胞分泌功能的变化,产生生殖毒性作用。     

异丙酚对睾丸扭转/复位后生精细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的探讨异丙酚对睾丸扭转/复位后睾丸细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法30只青春期Wistar大鼠随机等分为3组.组1为对照组(左侧睾丸扭转720°即刻复位);组2、3为睾丸扭转/复位模型组(左侧睾丸扭转720°、2h后复住).组3睾丸复位前5min静脉注射异丙酚20mg/kg,继之输入5%异丙酚50mg/(kg·h)1 h;组1、2以生理盐水代之.术后24 h取左侧睾丸标本分别以原位缺口末端标记法(TUNEL)及免疫组织化学法检测凋亡细胞和Bcl-2、Bax基因蛋白表达.结果与组1比较,组2睾丸生精细胞凋亡指数升高和Bax表达增强(P＜0.01),而睾丸细胞Bcl-2表达下降(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值降低,睾丸病理损害明显.与组2比较,组3睾丸上述改变明显减轻(P＜0.01).结论异丙酚通过调节Bcl-2及Bax蛋白表达抑制睾丸扭转/复住所诱导的生精细胞凋亡增加.     

砷染毒大鼠生精细胞Bcl-2表达的变化

目的观察不同剂量的三氧化二砷（As2O3）对成年大鼠生精细胞Bcl-2表达的影响。方法40只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别为0．375mg/kg、0．75mg/kg、1．5mg/kg 3个染毒组和对照组，灌胃法连续给药16w后对各组大鼠计算睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2表达的情况。结果①中剂量组（0．75mg/kg）和高剂量组（1．5mg/kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）；②与对照组相比，中、高剂量组大鼠生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低（P〈0．01）；③生精细胞Bcl-2阳性率与每日精子生成量呈正相关（r=0．589,P〈0．01）。结论一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2的表达而导致精子生成量的减少，产生雄性生殖毒性。     

醋酸铅对大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白、抑制素和转铁蛋白mRNA表达的影响

目的：观察醋酸铅对体外培养大鼠睾丸支持细胞雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(Tf)和抑制素(INH)mRNA表达水平的影响。方法：体外培养大鼠睾丸支持细胞,分离纯化经鉴定后,分别给予不同浓度(0、10-8、10-7、10-6和10-5moL/L)的醋酸铅处理,培养24 h后采用MTT法测定细胞活性,采用RT-PCR检...     

戊四氮致痫大鼠海马c-FOS蛋白表达及钙拮抗剂的影响

目的：探讨戊四氮（PTZ）致痫后大鼠的海马锥体细胞、齿状回颗粒细胞c-FOS蛋白表达情况，和钙拮抗剂尼莫地平对c-FOS蛋白表达的影响。方法：大鼠腹腔注射PTZ 60mg/kg建立急性癫痫动物模型，测定痫性发作潜伏期、发作强度，用免疫组化LSAB法检测2h和4h后c-FOS的表达。结果：对照组大鼠无癫痫发作，干预组痫性发作潜伏期较致痫组明显延长（P＜0．01），且发作强度明显减弱（P＜0．01）；对照组海马各区c-FOS仅低水平表达，致痫后表达明显增高（P＜0．01），干预组2h比致痫组2h的c-FOS阳性率明显降低（P＜0．01），4h干预组与致痫组无显著性差异（P＞0．05）。结论：大剂量PTZ可诱发大鼠全面阵挛发作，诱导海马锥体细胞、齿状回颗粒细胞c-FOS表达增高，海马结构涉及PTZ致痫引起阵挛发作的发展或传播的病理生理机制，尼莫地平可延缓癫痫的发生，减轻发作强度，降低c-FOS的表达。     

丙烯酰胺对大鼠睾丸的毒性作用及其对增殖细胞核抗原蛋白表达的影响

目的 观察丙烯酰胺(AA)对大鼠睾丸的毒性作用及其对增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组(双蒸水)、4 mg/kg AA染毒组、12 mg/kg AA染毒组和36 mg/kg AA染毒组.连续灌胃30 d后,取睾丸行苏木精-伊红染色,观察睾丸组织形态学变化;TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况;化学发光法检测血清中睾酮和雌二醇含量;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测睾丸组织PCNA mRNA表达;免疫组织化学法和Western blotting技术检测睾丸组织PCNA蛋白表达.结果 12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠体质量明显低于对照组(P＜0.05).12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠睾丸组织生精细胞减少,生精上皮萎缩,管腔出现空泡,凋亡细胞显著增多.各染毒组大鼠血清睾酮水平均显著低于对照组(P＜0.05);12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠血清雌二醇水平显著低于对照组(P＜0.05).与对照组比较,12 mg/kg和36 mg/kg AA染毒组大鼠睾丸组织PCNA mRNA和蛋白表达均明显降低(P＜0.05).结论 AA染毒可引起雄性大鼠性激素分泌减少,睾丸组织发生病理学改变,凋亡细胞增多,PCNA蛋白表达减少,打乱生精细胞增殖与凋亡的动态平衡,导致生殖系统发生不同程度的功能障碍.     

大豆异黄酮对壬基酚所致大鼠血清性激素紊乱及前列腺增生的改善作用

目的探讨壬基酚(Nonylphenol,NP)对大鼠前列腺脏器系数、组织病理学改变及对血清性激素水平的影响及大豆异黄酮(soybean isoflavones,SI)的保护效应。方法 50只健康雄性清洁级Wistar大鼠,随机分为5组,分别为橄榄油溶剂对照组,25.0mg/kg NP组,25.0mg/kg NP+50.0mg/kg SI组,25.0mg/kg NP+100.0mg/kg SI组,100.0mg/kg SI组。NP采用皮下注射染毒,SI采用灌胃染毒,染毒容积皆为1mL/kg,1次/d,连续30d。观察大鼠前列腺的湿质量、前列腺指数、组织病理学及血清性激素水平。结果 NP染毒组前列腺前叶质量、脏器指数高于溶剂对照组,差别有统计学意义(P<0.05);25.0mg/kg NP组、各NP+SI染毒组及100.0mg/kgSI组血清E2水平显著低于溶剂对照组(P<0.05);血清T水平除100.0mg/kg SI组外,余各组均高于溶剂对照组(P<0.05),E2/T比值低于溶剂对照组(P<0.05);与25.0mg/kg NP组比较,NP+SI染毒组前列腺前叶质量、脏器指数均低于单独染NP组,血清E2和E2/T比值高于该组(P<0.05)。组织病理学观察:NP染毒组大鼠前列腺上皮增生广泛,腺体密集,腺上皮细胞肥大,核增大,腔内嗜酸性分泌物较多;联合染毒组前列腺腺腔较规则平整,腔内嗜酸性分泌物量较少。结论 SI具有拮抗NP致雄性大鼠前列腺增生作用,这可能与其调节NP所致大鼠体内性激素水平紊乱有关。     

青春期糖尿病鼠睾丸支持细胞功能研究

４０日龄雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，分为对照（Ｃ）组：腹腔注射赋形剂；糖尿病（Ｄ）组：腹腔注射ＳＴＺ，５５ｍｇ／ｋｇ体重；糖尿病胰岛素及时治疗组（Ｃｏｎｔ．Ｄ）：给ＳＴＺ３天后胰岛素治疗；糖尿病胰岛素延迟治疗（Ｄｅｌ．Ｄ）组：注射ＳＴＺ３０天后胰岛素治疗，睾丸ＡＢＰ和培养支持细胞功能被研究，结果是：Ｃ，Ｃｏｎｔ．Ｄ，Ｄｅｌ．Ｄ和Ｄ组的睾丸ＡＢＰ平衡解离常数（Ｋｄ）分别是５．９１±１．７４，２．２１±０．４５，２．１３±０．７９和５．５４±１．１０ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｃｏｎｔ．Ｄ和Ｄｅｌ．Ｄ组显著低于Ｃ和Ｄ组（Ｐ＜０．０５，ｎ＝３）；ＡＢＰ的最大结合容量（Ｂｍａｘ）分别是３１．７８±５．４７，２９．８８±３．７４，２６．７４±３．６９和２８．６９±４．５４ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白，组间比较差异不显著（Ｐ＞０．０５，ｎ＝３）；培养支持细胞的ＡＢＰ２４ｈ分泌量各组分别是２３．５４±５．５７，２３．６１±８．６０，１８．０６±７．５３和１４．９２±７．８９ｆｍｏｌ／１０￣６细胞，Ｄ组显著低于Ｃ和Ｃｏｎｔ．Ｄ组（Ｐ＜０．０５）。     

百色市不同人群输血传播病毒及其基因型检测分析

目的　探讨百色市不同人群TTV及其基因型感染特点。方法　采用PCR法检测TTVDNA ,微板核酸杂交 -ELISA法检测TTV基因型。结果　本地慢性乙肝、慢性非甲～庚肝、静脉吸毒者、血液透析者、献血员的TTV阳性率与健康体检者相比较差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ,慢性肝炎、肝炎肝硬化、肝细胞癌的TTV阳性率比较差异无显著性(P >0 .0 5 )。 67例TTV感染患者中Ⅰ型 5 0例 ,占 74.63 % ,Ⅱ型 7例 ,占 10 .45 % ,Ⅰ、Ⅱ混合型 10例 ,占 14 .93 %。结论　本地慢性乙肝、慢性非甲～庚肝、静脉吸毒者、血液透析者、献血员和健康体检者存在TTV感染 ,且是慢性非甲～庚肝病的重要病因之一 ,前五者是高危人群 ,血液传播是TTV感染的主要途径 ,本地TTV基因型可分为Ⅰ型 ,Ⅱ型 ,Ⅰ、Ⅱ混合型 ,以Ⅰ型为主。     

建立四氧嘧啶糖尿病动物模型的研究

目的　建立合适大鼠糖尿病动物模型。方法　选取健康大鼠 2 2只 ,体重为 180～ 2 40 g ,随机分为实验组 1、实验组 2、实验组 3、正常组。实验 1～ 3组腹腔注射四氧嘧啶 ,注射剂量分别为 15 0mg/kg、175mg/kg、2 0 0mg/kg(按体重计算 ) ,经 48h后取血清测定其血糖的变化。结果　实验 1～ 3组大鼠血糖均显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ;实验 3组的血糖显著高于实验 2组和实验 1组 (P <0 .0 1) ;实验 2组显著高于实验 1组 (P <0 .0 1)。结论　大鼠腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病模型是一种可靠、易控制的方法。血糖的升高与体重、鼠龄有关。     

壬基酚对性成熟期F1子代雄性SD大鼠生殖发育的影响

目的　研究壬基酚(NP)对性成熟期F1 子代雄性SD大鼠生殖发育的影响。方法　设NP5 0 mg/ kg,10 0 m g/ kg,2 0 0 m g/ kg三个剂量组和一个空白对照组,对母鼠从妊娠第7d至断乳期灌胃染毒,产后5 5 d处死雄性子代,检测血清睾酮,取附睾作精子计数和活度测定,取睾丸作病理组织学观察和细胞增殖核抗原(PCNA)、雌激素受体(ER)及芳香化酶(Arom)的免疫组化分析。结果　与对照组相比,2 0 0 m g/ kg NP组血清睾酮浓度、精子计数、精子活度显著降低(P<0 .0 5 ) ;睾丸组织病理学检查显示,发育异常的生精小管数增多,支持细胞数量减少,生精功能受损;2 0 0 mg/ kg NP组PCNA的表达显著低于对照组(P<0 .0 5 ) ;10 0 mg/ kg和2 0 0 mg/ kg NP组Arom的表达显著降低(P<0 .0 5 ) ;各染毒组ER的表达与对照组相比无显著性差异。结论　2 0 0 mg/ kg NP能明显损伤性成熟期F1 子代雄性SD大鼠的生殖发育功能。     

壬基酚对围产期子代雄性SD大鼠性腺组织PCNA和Aromatase表达的影响

目的研究壬基酚对围产期雄性子代生殖系统PCNA和Aromatase表达的影响,探讨壬基酚生殖发育毒性作用机制。方法对母鼠孕期第7～20d染毒壬基酚（NP）（50、100、200mg／kg）,妊娠第20d和产后第2d分两批处死母鼠,测定血清雌二醇和血清NP浓度,并取雄性子代睾丸和附睾进行组织病理学观察和PCNA,Aromatase免疫组织化学分析。结果实验组孕鼠血清雌二醇和血清NP浓度显著高于对照组,且呈剂量反应关系（P〈0．05）;妊娠第20d和产后第2d雄性子代睾丸的PCNA表达,100、200mg／kgNP染毒组低于对照组（P〈0．05）,且产后第2d雄性子代附睾PCNA表达和睾丸Aromatase表达也低于对照组（P〈0．05）。结论NP能干扰围产期雄性子代睾丸和附睾的正常生长发育。     

壬基酚对大鼠5-羟色胺及其2A受体的影响

目的 观察壬基酚(NP)对大鼠血浆和尿液中5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)及血小板中5-HT和5-HT2A受体含量的影响,探讨壬基酚对大鼠5-HT和5-HT2A受体影响的毒效应机制。方法 将24只SD雄性大鼠分为阴性对照组和NP低、中、高剂量组[30、90、270mg/(kg·d)],隔日灌胃染毒28d后检测大鼠血浆中5-HT、血小板中5-HT和5-HT2A受体含量,并检测灌胃后收集到的24h尿液中5-HT的含量。结果 染毒28d后,随NP暴露的剂量增加,各组大鼠血浆、血小板及尿液中5-HT含量升高,血小板中5-HT2A受体表达则下降。NP暴露中、高剂量组大鼠血浆及血小板中5-HT含量均高于对照组(P<0.01;P<0.01),NP暴露高剂量组大鼠血小板5-HT2A受体表达低于对照组(P<0.01)。第4~28天,NP暴露低、中、高剂量组大鼠的尿液5-HT含量均高于对照组(P<0.01)。结论 NP暴露剂量与大鼠血小板5-HT、5-HT2A受体及血浆和尿液中5-HT含量均呈剂量-效应关系,提示NP通过影响大鼠5-HT水平和5-HT2A受体表达而产生毒效应。     

丙泊酚对SD乳鼠少突胶质细胞髓鞘碱性蛋白表达和髓鞘形成的影响

目的探讨不同剂量丙泊酚对新生SD乳鼠少突胶质细胞合成髓鞘碱性蛋白（MBP）和大脑髓鞘形成的影响。方法出生后 7 d（P7）SD乳鼠57只,随机分为对照组（n=13）、溶剂脂肪乳组（n=5）、25、50和100 mg/kg丙泊酚组（各组n=13）,单次腹腔注射给 药。采用qPCR和Western blot检测注药后8 h mbp mRNA、caspase-3 mRNA和MBP、Cleaved Caspase-3蛋白的表达;免疫荧光 法检测注药后8 h少突胶质细胞凋亡以及24 h大脑胼胝体和内囊处髓鞘形成情况。结果与对照组相比,各丙泊酚组8 h mbp mRNA和MBP蛋白呈剂量依赖性下调（P<0.05）,caspase-3 mRNA和Cleaved Caspase-3 蛋白转录表达水平均呈剂量依赖性 增加（P<0.05）;同时少突胶质细胞凋亡明显增加,且50 和100 mg/kg 组较25 mg/kg 组凋亡显著增多（P<0.05）;24 h 胼胝体处 100 mg/kg丙泊酚组、内囊处50和100 mg/kg丙泊酚组髓鞘形成均明显减少（P<0.05）。结论丙泊酚可致SD乳鼠少突胶质细胞 呈剂量依赖性凋亡增加,MBP表达减少,并且不同程度的影响胼胝体和内囊处髓鞘的形成。     

佛手宁神方改善睡眠作用的机制

目的 评价佛手宁神方镇静催眠作用并研究其对失眠大鼠海马5-羟色胺(5-HT)、5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)表达的影响.方法 雄性昆明小鼠随机分为空白组,艾司唑仑组[0.4 mg/(kg·d)],佛手宁神方低、中、高剂量组[12,24,48 g/(kg·d)];连续给药1周,末次给药后进行阈下剂量和阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠实验.雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,艾司唑仑组[0.2 mg/(kg·d)],佛手宁神方低、中、高剂量组[6,12,24 g/(kg·d)],每组8只;采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)350 mg/(kg·d)制作失眠大鼠模型;造模完成后第1天开始灌胃给药,连续1周.旷场实验测试各组大鼠运动总路程和站立次数;酶联免疫吸附法测定海马5-HT的含量;免疫组化法和实时荧光定量PCR分别检测海马5-HT1AR蛋白和mRNA的表达.结果与空白组相比,佛手宁神方高剂量组阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡只数增加(P<0.05),阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期缩短(P<0.01),睡眠持续时间延长(P<0.01).与空白组比较,模型组大鼠在旷场实验中运动总路程增加(P<0.05),海马5-HT含量减少(P<0.01),海马5-HT1AR蛋白和mRNA表达水平下降(P<0.01).与模型组相比,艾司唑仑组和佛手宁神方高剂量组运功总路程减少(P<0.05),海马5-HT含量增加(P<0.05),海马5-HT1AR蛋白和mRNA表达水平上升(P<0.01).结论 佛手宁神方可能通过提高海马5-HT的含量,上调海马5-HT1AR蛋白和mRNA的表达,从而起到治疗失眠的作用.