牛磺酸对大鼠缺血心肌缺血再损伤的保护作用

目的：探讨大鼠心肌缺血损伤与凋亡蛋白Bcl—2和Bax的关系及牛磺酸的影响。方法：选择健康SD大鼠30只，随机分为假结扎组、结扎组和牛磺酸保护组，每组10只。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型。检测3组心肌线粒体中超氧化物歧化酶(supevoxide dismutase，SOD)、Ca^2+-ATP酶活性和丙二醛含量，用免疫组化法检测心肌中的Bct-2和Bax蛋白。结果：结扎冠状动脉左前降支可致心肌线粒体丙二醛含量升高[假结扎组：(4．89&;#177;0．54)μmol／g；结扎组：(9．85&;#177;0．68)μmol／g]，SOD和Ca^2+-ATP酶活性下降[假结扎组：(8．63&;#177;0．35)μmol／(g&;#183;s)，(13．97&;#177;1．97)mmol／(g&;#183;s)；结扎组：(6．73&;#177;0．39)μmol／(g&;#183;s)，(8．54&;#177;2．28)mmol／(g&;#183;s)]。缺血心肌Bax蛋白表达呈显著升高(t=3．931，P&;lt;0．01)，牛磺酸能明显减少缺血心肌线粒体丙二醛的生成[牛磺酸保护组：(5．46&;#177;0．72)μmol／g]，降低心肌BAT蛋白的表达，增加Bcl—2蛋白的表达(t=3．716，P&;lt;0．01)。结论：结扎大鼠冠状动脉左前降支所致心肌缺血损伤与Bcl—2和Bax蛋白的表达有关，牛磺酸对缺血心肌Bcl—2和Bax蛋白的表达有较好的调控作用。     

蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响及其可能机制

目的观察蛇床子素后处理对大鼠心肌急性缺血/再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响,并对其可能的作用机制进行探讨。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min后,松开结扎线再灌注120 min制备急性心肌缺血/再灌注损伤模型;将30只Wistar大鼠随机分为以下3组:对照(Sham)组、缺血/再灌注(I/R)组、I/R+蛇床子素后处理(Ost)组。采用TUNEL法原位标记缺血区凋亡心肌细胞并计算凋亡指数,采用Western blot法检测心肌组织中Caspase-3、Bcl-2及Bax三种蛋白的表达。结果与Sham组相比,I/R组心肌细胞凋亡指数、心肌组织Caspase-3蛋白、Bcl-2蛋白和Bax蛋白含量明显增高(均P<0.05);与I/R组相比,Ost组心肌细胞凋亡指数(P<0.05)、心肌组织Caspase-3蛋白(P<0.01)及Bax蛋白表达水平均降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。结论蛇床子素后处理能抑制急性心肌缺血/再灌注损伤所致的大鼠心肌细胞凋亡,同时上调心肌组织中Bcl-2蛋白的表达及下调心肌组织中Bax蛋白的表达,提示上调Bcl-2蛋白及下调Bax蛋白、进而上调Bcl-2/Bax比值可能是其发挥抗心肌细胞凋亡作用的机制。     

葛根素对心肌缺血再灌注大鼠心肌组织Bcl-2、Bax和Caspase-3表达水平的影响

目的探讨葛根素对心肌缺血再灌注大鼠心肌组织细胞凋亡的影响。方法以雄性Wistar大鼠为研究对象,将实验动物分为5组：即假手术组、心肌缺血再灌注模型组（I/P）、葛根素2mg/Kg给药组（A组）、葛根素5mg/Kg给药组（B组）和葛根素10mg/Kg给药组（C组）。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支（LAD）的方法,建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型;采用免疫组织化学方法检测,大鼠心肌组织中Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白含量采用RT-PCR法,检测大鼠心肌组织中Bcl-2、Bax和Caspase-3mRNA的表达水平。结果与假手术组相比较,心肌缺血再灌注模型组Bcl-2、Caspase-3的蛋白含量和Bcl-2、Caspase-3mRNA的表达水平均显著降低（P〈0.01）,而Bax的蛋白含量和BaxmRNA的表达水平均显著升高（P〈0.01）;B、C组Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白含量和Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA的表达水平均未见显著差异（P〉0.01）;A组Bcl-2、Caspase-3的蛋白含量和Bcl-2、Caspase-3mRNA的表达水平均显著降低（P〈0.01）,而Bax的蛋白含量和Bax mRNA的表达水平均显著升高（P〈0.01）。结论葛根素能够通过提高Bcl-2、Caspase-3的表达及降低Bax的表达调控心肌组织细胞的凋亡,从而起到保护心肌组织的功能。     

柿叶提取物通过MAPK/ERK1/2通路减轻心肌缺血再灌注损伤

目的探讨柿叶提取物(PEL)减轻心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、心肌缺血再灌注损伤组(MIRI组)、柿叶提取物组(PEL组)、MAPK抑制剂组、MAPK抑制剂+PEL组。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min后再灌注60 min建立心肌缺血再灌注模型。PEL组大鼠灌胃50 mg/(kg·d)柿叶提取物,MAPK抑制剂组大鼠尾静脉注射PD0325901; MAPK抑制剂+PEL组大鼠灌胃50 mg/(kg·d)柿叶提取物前30 min尾静脉注射PD0325901。假手术组和MIRI组灌胃等量生理盐水。每天相同时间给药1次,连续给药21 d。全自动生化分析仪检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)水平,试剂盒检测心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,采用1%氯化三苯基四氯唑测定心肌梗死面积,Western Blot检测心肌组织中Bcl-2、Bax和p-ERK1/2蛋白表达。结果与假手术组比,MIRI组大鼠血清AST和CK含量、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积,心肌组织MDA和LDH含量、Bax蛋白表达均显著升高(P 0. 05),心肌组织SOD和GSH-Px活力、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白表达显著降低(P0. 05)。与MIRI组比,PEL组和MAPK抑制剂+PEL组大鼠血清AST和CK含量、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积、心肌组织MDA和LDH含量、Bax蛋白表达均显著降低(P 0. 05),心肌组织SOD和GSH-Px活力、Bcl-2和pERK1/2蛋白表达均显著升高(P 0. 05); MAPK抑制剂组无显著差异(P 0. 05)。与MAPK抑制剂组比,MAPK抑制剂+PEL组血清AST和CK含量、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积、心肌组织MDA和LDH含量、Bax蛋白表达均显著降低(P 0. 05),心肌组织SOD和GSH-Px活力、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P 0. 05)。结论 PEL可能通过激活MAPK/ERK1/2信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤。     

创伤后应激障碍样情感行为异常大鼠脑组织ATP酶活性的动态变化

目的探讨创伤后应激障碍( posttraumatic stress disorder,PTSD)样精神与行为异常的病理生理基础,为其治疗途径提供新思路. 方法将 72只雄性 Wistar大鼠随机分组为海马阈下电刺激组( SE, n=32)、海马电极埋植对照组( CE, n=32)和正常对照组( NC, n=8),利用频率 25 Hz、波宽 1 ms、串长 10 s、串隔 7 min、强度 100 μ A的恒流、单脉冲电流,反复惊厥阈下电刺激海马,并定量检测了实验动物海马组织匀浆及线粒体 Na+-K+-ATP酶、 Ca2+-ATP酶活性改变. 结果电刺激停止后 12 h阈下刺激大鼠海马细胞线粒体 Na+-K+-ATP酶活性即明显下降为 (0.56± 0.15) mmol/( kg· s) ,(F=4.348, P< 0.01), 48 h为 (0.61± 0.17) mmol/(kg· s),(P< 0.05)仍显著低于 NC组 (0.84± 0.22) mmol/(kg· s); 24 h线粒体 Ca2+ ATP酶活性亦明显降低为 (0.53± 0.14 ) mmol/(kg· s),(F=4.999,< 0.05, 72 h为 (0.60± 0.16) mmol/(kg· s)仍显著低于 NC组 (0.83± 0.22) mmol/(kg· s). 结论海马组织,特别是海马细胞线粒体钠钾泵与钙泵功能受损 ,在实验动物长时程 PTSD样情感行为异常发生发展中可能有重要意义.     

参附注射液影响大鼠缺血再灌注心肌Bcl-2,Bax与c-Fos蛋白的表达

背景:研究证实,参附注射液对各种休克、心力衰竭、心肌缺血以及室上性/室性心律失常均有改善治疗作用,对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有良好的保护作用。目的:观察参附注射液对急性缺血再灌注损伤大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白表达的影响。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:重庆医科大学附属第二医院麻醉科。材料:实验于2004-04/12在重庆医科大学附属第二医院麻醉教研室完成。选用健康成年Wistar大鼠35只,由解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心提供。参附注射液是中医“回阳救逆”参附汤的中药配方,其主要成分是人参皂甙及乌头类生物碱(雅安三九药业有限公司出品,规格10mL/支,批号:030110)。方法:采用在体心脏缺血再灌注模型,35只大鼠按随机数字表法分为5组,每组7只。①假手术组:只穿线不结扎,静脉注射生理盐水8mL/kg,观察120min。②参附注射液30min组:结扎前15min静脉注射参附注射液8mL/kg,结扎左冠状动脉前降支40min,再灌注30min。③参附注射液120min组:再灌注120min,余同参附注射液30min组。④生理盐水30min对照组:结扎左冠状动脉前降支前15min静脉注射生理盐水8mL/kg,结扎左冠状动脉前降支40min,再灌注30min。⑤生理盐水120min对照组:再灌注120min,余同生理盐水30min组。应用免疫组化法检测各组大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白的表达量。主要观察指标:各组大鼠心肌凋亡相关基因Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白的表达量。结果:35只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①与假手术组比较,生理盐水30min组和120min组大鼠心肌Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比率显著降低(P<0.01)。②与相应生理盐水组比较,参附注射液30min组和120minBcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bax和c-Fos蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比率显著升高(P<0.01)。结论:参附注射液对缺血再灌注心肌保护效应可能与其促进Bcl-2蛋白高表达、抑制Bax与c-Fos蛋白表达、增加Bcl-2/Bax比率,从而抑制心肌细胞凋亡有关。     

二氮嗪对大鼠心肌缺血-再灌流损伤细胞凋亡的影响

目的观察二氮嗪对缺血-再灌流心肌细胞凋亡,以及对Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法21只SD大鼠随机分为假手术组(sham operation,SO),缺血-再灌流组(ischemia/reperfusion,IR)和二氮嗪处理组(Diazoxide,DI)。SO组和IR组静脉注射相应量溶媒,DI组12.5 mg/kg剂量静脉注射二氮嗪。10min后SO组不结扎前降支,4 h后取心脏,而IR组和DI组结扎前降支2 h,再灌流2 h。采用TUNEL法和免疫组化法检测缺血心肌细胞凋亡和Bax、Bcl-2、Caspase-3表达,及心肌梗死范围。结果与SO组相比,IR和DI组心肌细胞凋亡率显著增加(P<0.05),Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白阳性细胞指数明显升高(P<0.05);与IR组相比,DI组明显降低心肌细胞凋亡率(P<0.05)和Bax,Caspase-3蛋白阳性细胞指数(P<0.05),增加Bcl-2蛋白阳性细胞指数(P<0.05)。IR组心肌梗死范围为(36.9±2.3)%,DI组为(20.0±8)%,两组差异有显著性(P<0.05)。结论二氮嗪通过上调Bcl-2表达,下调Bax及Caspase-3表达而减少在体大鼠缺血-再灌流损伤心肌细胞凋亡。     

右美托咪定对心肌缺血-再灌注损伤大鼠的心肌保护作用及机制

目的探讨右美托咪定对大鼠心肌缺血再灌注损伤后的心肌保护作用及机制。方法 2018年3月选取SD大鼠63只,随机分为对照组、模型组、预处理组,各21只。模型组大鼠制备心肌缺血-再灌注模型,在制备缺血模型前2 h取0. 9%氯化钠溶液(5 ml/kg)静脉输注;对照组大鼠仅穿线不结扎;预处理组:在制备缺血模型前2 h静脉输注右美托咪定(5 ml/kg)。测定大鼠危险区面积、心肌梗死面积、心肌细胞凋亡、兔抗鼠B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、C3蛋白表达。结果预处理组大鼠危险区面积及心肌梗死面积均明显低于模型组,且心肌细胞凋亡率也低于模型组,差异均有统计学意义(P 0. 05);预处理组和模型组Bcl-2、Bax蛋白PEI表达含量均高于对照组,但Bax PEI低于模型组,Bcl-2 PEI高于对照组,Bcl-2/Bax预处理组高于模型组,低于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05);预处理组C3蛋白含量较模型组低,高于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。结论右美托咪定预处理可上调心肌缺血-再灌注损伤大鼠心肌Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白、C3蛋白表达,减轻大鼠心肌损伤。     

厄贝沙坦对大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的观察自发性高血压大鼠(spontaneouslyhypertensiverats,SHR)心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的表达;同时观察血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensinⅡ1typereceptor,AT1R)拮抗剂-厄贝沙坦对SHR大鼠心肌细胞凋亡和BcL-2/Bax蛋白表达的影响。方法24只16周龄SHR大鼠(上海市高血压研究所提供,医动字02-37-1号)分为SHR治疗组[沙坦30mg/(kg·d),20周]和SHR对照组,另选16周龄Wistar大鼠12只作为正常对照组。分别采用SP免疫组化法和末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法方法检测心肌细胞凋亡指数和BcL-2/Bax蛋白水平的表达,放射免疫法检测血浆和组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)。结果SHR治疗组与正常对照组比较收缩压明显增高[(243±13)和(151±11)mmHg,1mmHg=0.133kPa],左心室质量与体质量比(leftventricularmass/bodymass,LVW/BW)明显增加[(4.05±0.33)和(2.90±0.23)g/kg];血浆和心肌组织AngⅡ增高[血浆(31.8±5.4)和(22.2±18.5)ng;心肌(13.2±2.1)%和(8.3±1.2)%];心肌细胞凋亡指数明显增加[(4.75±0.70)%和(2.84±0.60)%];心肌细胞Bax蛋白的表达明显增强[(5.02±0.34)%和(2.85±0.29)%],Bcl-2/Bax比率明显降低(0.65±0.13和1.05±0.18),差异有显著性意义(P<0.05～0.01);而Bcl-2蛋白的表达[(3.2     

纳洛酮对急性缺血-再灌注心肌细胞Bcl-2蛋白和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的从分子水平探讨纳洛酮对急性心肌缺血-再灌注细胞凋亡和凋亡相关基因bcl-2产物Bcl-2蛋白表达的影响,及其对心肌的保护作用.方法 SD大鼠30只,随机分成3组,单纯缺血-再灌注组,纳洛酮干预组(缺血前10 min及再灌注2 h后腹腔注射纳洛酮0.517 mg/kg)和正常对照组,每组10只.实验动物采用戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉,开胸,打开心包,穿线结扎左冠状动脉前降支再恢复灌注制备大鼠心肌缺血-再灌注模型.用免疫组化法检测心肌组织Bcl-2蛋白表达;用放射免疫法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果正常对照组无Bcl-2蛋白表达,TNF-α含量为(0.39±0.06)μg/L;单纯缺血-再灌注组Bcl-2蛋白表达及TNF-α含量均增加.与单纯缺血-再灌注组比较,纳洛酮干预组Bcl-2蛋白表达明显增加(+ + + vs. +);TNF-α含量明显降低[(0.55±0.12)μg/L比(0.86±0.11)μg/L,P<0.01).结论纳洛酮预处理可抑制TNF-α的产生,并通过上调Bcl-2蛋白表达,抑制缺血-再灌注后心肌细胞的凋亡,从而保护缺血-再灌注对心肌细胞的损伤.     

缺血预处理对大鼠冷缺血再灌注损伤的保护作用的实验研究

目的：探讨缺血预处理对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的保护作用。方法：36只SD大鼠制备成肾脏冷缺血再灌注损伤模型，随机分为假手术组（A组）、冷缺血再灌注组（B组）、缺血预处理组（C组），免疫组化观察Bcl2、Bax蛋白表达，测定肾功能、肾组织超氧化物歧化酶、丙二醛，病理切片观察肾组织损伤形态学的变化。结果：B组、C组BUN、CR测定值均显著高于A组，而C组低于B组，差异具有显著性（P〈0.01）；C组大鼠肾组织超氧化物酯化酸水平较B组显著升高，而丙二醛水平显著性下降（P〈0．01）；B组、C组Bcl2、Bax蛋白较A组均明显增加，C组较B组Bcl—2表达显著增强，Bax表达明显下降（P均〈0．01），肾组织损伤的病理分级显著减轻。结论：缺血预处理对肾脏冷缺血再灌注性损伤具有保护作用，其机制可能与上调Bcl2和下调Bax蛋白表达相关。     

小鼠全脑缺血模型海马区Bcl-2和Bax的表达

背景由C57black/6小鼠制成的全脑缺血模型在实验性脑缺血的研究中使用在明显增加,目前需要对这种模型的神经元损伤死亡在分子生物学方面的改变进行全面深入的研究,此项研究正是观察两种与缺血神经元死亡密切相关基因的表达水平.目的在小鼠全脑缺血模型上观察缺血后海马区Bcl-2和Bax的表达,在蛋白分子表达水平对该模型进行研究,为这种模型在今后脑缺血研究中的应用提供实验依据.设计以实验动物为研究对象,随机对照前瞻性研究.单位一所大学生理学和病理解剖学教研室.对象实验于2002-11/2003-05在首都医科大学生理系完成.选择C57black/6小鼠12只,随机分为假手术组和对照组,每组6只.干预双侧颈总动脉夹闭15 min诱发全脑缺血模型,24 h后取脑组织.全脑缺血后应用免疫组织化学染色,观察海马Bcl-2和Bax的表达水平.主要观察指标海马Bcl-2和Bax的表达水平.结果缺血组海马CA1区Bax阳性反应神经元数目为(57.3±2.9个)个,假手术组Bax阳性细胞数目为(17.2±1.3)个,两组比较,差异有显著性意义(t=30.91,P＜0.05).缺血组CA3区和齿状回Bcl-2阳性反应神经元数目为(43.9±1.1)个,假手术组Bcl-2阳性细胞数目为(28.6±1.7)个,两组比较,差异有显著性意义(t=18.51,P＜0.05).阳性着色区灰度值测定结果显示缺血组海马CA1区Bax阳性细胞染色灰度值为90.45±5.23,假手术组Bax阳性细胞染色灰度值为168.39±4.55,两组比较,差异有显著性意义(t=27.54,P＜0.05);缺血组CA3区和齿状回Bcl-2阳性细胞染色灰度值为113.10±4.20,假手术组Bcl-2阳性细胞染色灰度值为157.25±7.68,两组比较,差异有显著性意义(t=12.35,P＜0.05).结论小鼠全脑缺血模型在缺血24 h后,Bcl-2和Bax表达发生改变,Bax表达增加在CA1区,Bcl-2表达增加在CA3区和齿状回.     

脂蛋白相关磷脂酶A2与颈动脉粥样硬化和颈内动脉短暂性脑缺血发作的关系

目的 研究脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)和颈动脉超声对短暂性脑缺血发作(TIA)的诊断价值.方法 以90例急性期颈内动脉系统TIA患者(TIA组)和55例健康体检者(正常对照组)为研究对象,应用颈动脉超声检测颈动脉内膜情况,应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清Lp-PLA2,并进行统计学比较.结果 TIA组颈动脉粥样硬化斑块检出率显著高于正常对照组[分别为78.9%(71/90)与29.1%(16/55),x2=35.27,P<0.01].正常对照组颈动脉粥样硬化斑块总数35块,其中不稳定斑块6块,稳定斑块29块;TIA组颈动脉粥样硬化斑块总数134块,其中不稳定斑块103块,稳定斑块3l块,TIA组不稳定斑块构成比显著高于正常对照组(x2=43.22,P<0.01).TIA组男性和女性血清Lp-PLA2,分别为(19.08±7.92)、(15.15±4.91)mol/(min·ml),正常对照组男性和女性血清Lp-PLA2分别为(13.86±3.15)、(11.18±2.96)mol/(m/n·ml),TIA组均显著高于相应正常对照组(t值分别为3.8598、2.9260,P均<0.01),且TIA组和正常对照组血清Lp-PLA2男性均显著高于女性(t值分别为2.3850、2.9143,P均<0.05).TIA组不稳定斑块组血清Lp-PLA2为(20.16±6.76)mot/(min·ml),稳定斑块组血清Lp-PLA2为(16.09±4.15)mot/(min·ml),2组比较差异有统计学意义(t=2.5578,P<0.05).结论 血清Lp-PLA2是颈动脉斑块的一种危险因素,联合Lp-PLA2检测和颈动脉超声检查可以预警TIA的发生.

Abstract：

Objective To evaluate the diagnostic value of lipoprotein-associated phospholipase A2 (Lp-PLA2) and carotid artery ultra sound for transient ischemic attack (TIA) . Methods Ninety patients with TIA of internal carotid artery system in the acute phase and 55 normal control subjects were recruited. Their carotid intima-media thicknesses were assessed by carotid ultrasonography. Serum Lp-PLA2 levels were determined by enzyme-linked immunosorbentassay(ELISA) ,and all the data were compared between the two group. Results The detection rate of carotid atherosclerotic plaque in the TIA group was significantly higher than that in the control group f 78. 9% (71/90) vs. 29. 1% (16/55), x2 = 35. 27, P < 0.01] . There were 35 carotid atherosclerotic plaque in the control group,of which 6 were unstable plaques and 29 were stable plaques. There were 134 carotid atherosclerotic plaque in the TIA group,of which 103 were unstable plaques and 31 were stable plaques, the constituent ratio of unstable plaque in the TIA group was significantly higher than that in the control group (x2 =43. 22 ,P < 0. 01). The levels of serum Lp-PLA2 in male and female patients in TIA group were ([19. 08 ±7. 92] mol/(min · ml) and [15. 15 ±4. 91] mol/(min · ml),which were significantly higher than those in male and female in the control group ([13. 86 ± 3. 15] mol/(min · ml) and [11. 18 ± 2. 96] mol/ (min · ml) (t = 3. 8598 and 2. 9260, respectively, Ps < 0. 01). Furthermore, the levels of serum Lp-PLA2 of males in the TIA group and control group were significantly higher than that of females in the TIA group and control group(t=2. 3850 and 2. 9143, respectively, Ps < 0.05). The level of serum Lp-PLA2 in unstable plaque patients in the TIA group was (20.16 ± 6. 76) mol/ (min · ml) , which was significantly higher than that in stable plaque patients in the TIA group was (16. 09 ±4. 15)mol/(min · ml) ,the difference was statistically significant (t = 2. 5578, P < 0. 05). Conclusion Serum Lp-PLA2 is a risk factor of carotid atherosclerotic plaque, the combination of Lp-PLA2 and carotid ultrosonography can be used and alert indicator of TIA.     

普罗布考对缺血再灌注心肌细胞凋亡的作用

背景已发现细胞凋亡在缺血再灌注损伤中起重要作用.普罗布考除可降低血清低和高密度脂蛋白胆固醇浓度,有效治疗高胆固醇血症外,还有抗氧化活性,抑制低密度脂蛋白胆固醇的氧化修饰,减少其在血管壁沉积的作用.还有研究证明普罗布考可改善左心室功能、防止左心室扩张和减少心肌纤维化.但普罗布考保护心肌作用的确切机制尚未清楚.目的探讨普罗布考对新西兰白兔缺血再灌注心肌细胞凋亡的作用及其可能机制;并探讨其对血清超氧化物歧化酶(serum superoxide dismuase,SOD)和丙二醛水平的影响.设计随机对照的实验研究.地点、材料和干预本实验在广西医科大学医学科学实验中心完成.实验选用30只雄性新西兰白兔,白兔被随机分成3组假手术组、对照组和预治疗组,每组各10只.对照组(标准兔饲料饲养)和预治疗组(标准兔饲料饲养+普罗布考每日每只1 000 mg灌胃)各4周后建立缺血再灌注模型;假手术组(标准兔饲料饲养)4周后开胸用4-0号线穿过冠状动脉左前降支近端,但不予结扎.测定3组白兔心肌细胞凋亡指数、血清丙二醛、SOD水平.主要观察指标①普罗布考对心肌细胞凋亡的影响.②普罗布考对血清SOD和丙二醛水平的影响.结果对照组凋亡指数[(34.75±3.20)%]、血清丙二醛水平[(2.70±0.64)μmol/L]显著高于假手术组[(0.48±0.20)%,(1.06±0.46)μmol/L,q=18.42,6.29,P＜0.01].对照组血清SOD水平显著低于假手术组(q=8.78,P＜0.01).预治疗组凋亡指数和血清丙二醛水平明显低于对照组(q=9.17,4.68,P＜0.01),血清SOD水平高于与对照组(q=3.02,P＜0.05).结论普罗布考降低缺血再灌注心肌细胞凋亡,这一保护作用可能部分是通过减少血清丙二醛水平和提高血清SOD水平来实现的.     

结扎大鼠冠状动脉诱发心肌及背根神经节内P物质变化的研究

目的 观察结扎冠状动脉（冠脉）左前降支大鼠不同时间整体心肌（包括缺血区和非缺血区）及背根神经节（DRG）内P物质蛋白及其基因水平的变化，探讨神经源性机制在局部急性心肌缺血诱发整体心肌损伤中的作用及其机制。方法 健康成年雄性SD大鼠24只，采用随机数字表法分为4组（n=6）：假手术组（S组）以及扎闭冠脉（CAO）1、3和6h组。采用结扎左冠脉前降支的方法制备急性心肌缺血动物模型。各组在规定的时间点开胸快速取缺血区和非缺血区（缺血区对侧半球）心肌及DRG T1～5制作标本。采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术观察各组动物缺血区和非缺血区心肌及DRG内P物质的蛋白和基因水平变化。结果 ①CAO后1、3和6h点大鼠缺血区和非缺血区心肌P物质蛋白及其mRNA水平均较S组显著升高（P均〈0．05），CAO 3h达峰值（P均〈0．05）；非缺血区CAO各组P物质蛋白及其mRNA水平低于相应组的缺血区心肌（P均〈0．05）。②CAO后1、3和6h点大鼠DRG内P物质mRNA的表达水平均较S组显著升高（P均〈0．05），在CAO 3h达高峰（P均〈0．05）。结论 结扎冠脉可诱发大鼠整体心肌组织（包括缺血区和非缺血区）P物质水平的增高，同时DRG内P物质mRNA的表达也显著增加，提示神经源性机制可能参与心肌缺血的病理学过程。     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血神经元细胞凋亡及调控基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的研究不同时程的亚低温治疗对大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型的神经元细胞凋亡及Bcl-2,Bax基因表达的影响。方法健康雄性SD大鼠共40只,月龄两三个月。按抽签法随机分为5组,每组8只(n=8),分别为:假手术组(A)、对照组(B)、亚低温0.5h组(C)、亚低温1.0h组(D)、亚低温3.0h组(E)。采用Longa线栓法制作MCAO模型,缺血3.0h后再灌注。缺血后即刻分别进行不同时程(0.5,1.0,3.0h)的亚低温治疗,再灌注后24h断头取脑,连续切片作TUNEL染色及Bcl-2,Bax免疫组化染色。结果凋亡神经元细胞(TUNEL阳性细胞)主要见于梗死灶周围的纹状体及额顶部皮层。Bcl-2及Bax阳性细胞也主要见于梗死灶周围的纹状体及额顶部皮层,与该区凋亡细胞的集中分布相一致。与对照组的Bcl-2细胞阳性率相比,亚低温3.0h组增加犤(23.0±3.8)%,P<0.05)犦;与对照组的Bax细胞阳性率相比,亚低温1.0,3.0h组均降低犤分别为(45.9±4.1)%,(32.4±3.7)%,P<0.05,P<0.01犦;凋亡细胞阳性率与Bcl-2/Bax的比值呈负相关关系(r=-0.9759,P<0.01)。结论亚低温1.0h以上有抑制细胞凋亡作用;Bcl-2/Bax的比值能影响细胞凋亡的发生。     

磷酸肌酸对大鼠心肺复苏后心肌细胞凋亡的影响

目的 通过观察大鼠心肺复苏(CPR)后心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达及外源性磷酸肌酸(CP)干预的影响,研究大鼠CPR后心肌损伤机制及外源性CP的保护作用.方法 将32只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)、常规复苏组(B组)、常规剂量CP组(C组,胸外按压时首次给药CP 0.5g/kg,2 h后再次给药1.0g/kg)、大剂量CP组(D组,胸外按压时首次给药CP 1.0g/kg,2 h后再次给药2.0g/kg).每组动物8只.建立窒息型大鼠心搏骤停(CA)-CPR模型,ROSC后24 h取心肌标本待测.以脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测ROSC后24h的心肌细胞凋亡指数(AI);以免疫组化法检测ROSC后24h的心肌细胞Bcl-2,Bax蛋白表达.数据比较采用方差分析.结果 与A组比较,CPR后24h B,C,D各组心肌凋亡指数及Bax,Bcl-2蛋白表达均显著升高(均P＜0.01),Bcl-2/Bax值均明显降低(P＜0.01);与B组比较,C组和D组心肌的凋亡指数及Bax,Bcl-2蛋白表达均明显降低,Bcl-2/Bax值均明显上升(P＜0.01);与C组比较,D组的凋亡指数及Bax,Bcl-2蛋白表达均明显降低,Bcl-2/Bax值明显上升(P＜0.05).结论 外源性磷酸肌酸可明显抑制窒息型大鼠CPR后心肌细胞凋亡,对心肺复苏后心肌损伤具有保护作用,该作用以大剂量时更明显.     

家族性肌萎缩侧索硬化症患者及家系成员血中铜/锌超氧化物歧化酶活性及丙二醛水平变化与临床分型的关系

背景不同的铜 /锌超氧化物歧化酶( Copper/Zinc superoxide dismutase, Cu/ZnSOD)基因突变会使家族性肌萎缩侧索硬化 (family amyotropbic lateral sclerosis, FALS)产生不同的临床特征;丙二醛是过氧化脂降解的中间产物,可间接反映 Cu/ZnSOD的活性,但 Cu/ZnSOD活性及丙二醛水平改变与 FALS临床分型之间的关系尚不明确.若能探明前两者与后者的关系,将有助于 FALS的临床分型及亚临床诊断. 目的探讨家族性肌萎缩侧索硬化症患者及家系成员 Cu/ZnSOD活性和丙二醛水平变化及 FALS的临床分型. 设计随机病例对照研究. 地点和对象 1998-09/1999-06共检测 7个家系的 32名成员,其中 3例先证者经中山医科大学第一附属院神经内科确诊( 1995年); 4例经广西医科大学附属第一医院神经内科确诊( 1997～ 1999年).将 32名成员分为 4组汉族血统中有临床表现或有肌电图异常者归为第 1组(共 10例);各项检查均正常者的为第 2组(共 17例).壮族血统家系中有临床表现或肌电图异常者归为第 3组(共 3例);无临床表现、各项检查均正常者归为第 4组(共 2例). 72例对照组(第 5组)均来自 1999-01/1999-12到我院健康体检自愿者,其中男 38例,女 34例,年龄 15～ 59岁,平均 38.2岁. 方法采用生物化学方法测定红细胞内 Cu/ZnSOD活性及丙二醛水平. 主要观察指标外周血 SOD活性及丙二醛水平. 结果第 1组 Cu/ZnSOD活性为( 316.68± 46.15) μ kat/g,丙二醛水平为( 8.08± 1.60) μ mol/L 1 100溶血液,其中,有 4例 Cu/ZnSOD活性低于正常值, 3例丙二醛水平高于正常值,后者与前中的 3例为相同患者,无临床症状.第 2组 Cu/ZnSOD活性为( 351.74± 28.42) μ kat/g,丙二醛水平为( 6.55± 0.87) μ mol/L 1 100溶血液,其中有 2例 Cu/ZnSOD活性低于正常对照组. 6例 Cu/ZnSOD活性低于正常值者及 3例丙二醛水平高于正常值者均集中见于 2个家系,并且与同组其他成员比较下降幅度约 20%.第 3组 Cu/ZnSOD活性为( 351.89± 27.92) μ kat/g,丙二醛水平为( 6.68± 0.59) μ mol/L 1100溶血液,第 4组 Cu/ZnSOD活性为( 351.89± 27.96) μ kat/g,丙二醛水平为( 6.61± 0.69) μ mol/L 1100溶血液,第 3, 4组两项测定值均在正常值范围内.第 5组为健康对照组(共 72例). Cu/ZnSOD活性为( 351.84± 26.76) μ kat/g,丙二醛水平为( 6.69± 0.58) μ mol/L 1100溶血液.第 5组与第 1组比较, F=8.1287,27.8872,P< 0.01.推测其发病类型为 ALS1型. 结论红细胞内 Cu/ZnSOD活性测定及丙二醛水平测定有可能作为 ALS 1型患者及基因携带者的诊断方法之一,并可用于 FALS初步分型及基因检测前的筛查.     

超声微泡介导尼卡地平对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的探讨超声破坏微泡介导尼卡地平对大鼠急性缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2,Bax表达的影响。方法60只SD大鼠随机分空白对照、假手术、缺血再灌注、尼卡地平、超声微泡、超声微泡介导尼卡地平六组。阻断左冠状动脉前降支40min,再灌注120min,建立在体急性心肌缺血再灌注模型。TUNEL法检测凋亡心肌细胞,SABC免疫组化法检测Bcl-2、Bax基因表达。结果缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡,尼卡地平可减少其发生,上调Bcl-2基因表达,下调Bax基因表达,超声微泡介导可进一步减少凋亡发生。结论尼卡地平可上调Bcl-2并下调Bax基因表达,升高Bcl-2/Bax比值,显著减少缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡,通过超声微泡介导,可增强尼卡地平抗凋亡作用。