基于活性筛选和靶标网络预测的蒲黄和赤芍选择性抑制血小板聚集作用

目的:探讨常用活血化瘀中药抗血小板活性的激动剂选择性及可能的作用通路。方法:通过体外高通量血小板聚集实验系统评价24种常用活血化瘀中药醇提取物抗二磷酸腺苷(ADP)和凝血酶诱导的血小板聚集活性;通过Ingenuity Pathway Analysis(IPA)预测代表性药物蒲黄与赤芍已知单体成分的作用靶点,并加以验证。结果:蒲黄抗ADP,凝血酶诱导血小板聚集的半数抑制浓度(IC50)分别为55.27,300.60 mg·L~(-1);赤芍抗ADP,凝血酶诱导血小板聚集的IC50分别为336.20,101.60 mg·L~(-1)。IPA预测提示,蒲黄与赤芍有可能通过调节Ca2+,环磷酸腺苷(c AMP)和一氧化氮(NO)水平抑制血小板聚集。实验发现,蒲黄可明显抑制ADP对血小板内Ca2+的升高(P0.05,P0.01);赤芍可显著提高凝血酶导致的血小板内NO浓度降低(P0.01);蒲黄、赤芍均不能逆转ADP,凝血酶引起的血小板内c AMP浓度降低。结论:蒲黄和赤芍醇提物分别具有选择性抗ADP和凝血酶诱导的大鼠血小板聚集活性。与IPA预测相符,蒲黄可降低血小板内钙离子水平,赤芍可提高血小板内NO浓度,可能分别激活嘌呤能P2Y1受体下游的Gq亚基/磷脂酶C(PLC)/三磷酸肌醇(IP3)和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/内皮型一氧化氮合酶(e NOS)通路抑制血小板聚集。     

乳香、没药提取物及其配伍对血小板 聚集与抗凝血酶活性的影响

目的:通过乳香、没药水提物、挥发油及其配伍组合体外对ADP诱导的家兔血小板聚集及对凝血酶时间影响研究,评价其配伍前后的效应变化与量效关系。方法:采用体外二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集实验观察乳香、没药提取物及不同配伍组合的抗血小板聚集活性及量效关系;采用凝血酶时间(TT)法观察乳香、没药提取物及不同配伍组合对凝血酶的影响及量效关系;采用等效线法评价两药配伍的药效相互作用。结果:血小板聚集实验表明:乳香、没药提取物及其不同配伍组合均能显著或非常显著抑制ADP诱导的家兔血小板聚集,且两药配伍后具有协同增效作用,其活性强于各单用提取物的活性。TT实验研究结果表明:乳香、没药不同提取物均能显著延长家兔血浆凝血时间,配伍后除乳香水提物与没药水提物配伍具有拮抗作用外,其余配伍组合均具有协同增效作用。结论:乳香、没药的水提物、挥发油及其配伍组合对家兔血小板聚集及凝血酶时间的影响均能产生显著效应,除乳香水提物和没药水提物配伍组合对凝血酶时间的影响具有拮抗作用外,其余配伍组合均呈现出协同增效作用。研究结果为揭示中药药对配伍的科学性和合理性提供借鉴与参考。     

复方丹参注射液抗心肌缺血及活血化瘀作用的实验研究

目的:观察复方丹参注射液的抗心肌缺血及活血化瘀作用。方法:实验分为模型对照组、复方丹参注射液低、中、高剂量组和阳性药物香丹注射液对照组。采用舌静脉注射垂体后叶素制备大鼠急性心肌缺血模型,观察复方丹参注射液对大鼠心电图的影响;通过兔体外血小板聚集实验,观察复方丹参注射液对ADP诱导血小板聚集率的影响;对小鼠连续尾静脉注射给药3天,观察凝血时间变化;对大鼠连续尾静脉注射给药3天,观察血液流变学指标的变化及抗血栓形成作用。结果:复方丹参注射液有较好的对抗垂体后叶素所致心肌缺血心电图改变作用,其作用随剂量的增加而加强;对ADP诱导的兔体外血小板聚集有明显的抑制作用;可明显延长小鼠凝血时间;改善大鼠血液流变学指标的变化,明显抑制大鼠动-静脉旁路血栓形成。结论:复方丹参注射液可通过活血化瘀对抗心肌缺血,是防治心肌缺血性疾病的有效药物。     

桃红四物汤各分离部位对体外ADP诱导血小板聚集、凝血酶活性的影响及效应物质基础研究

评价桃红四物汤各分离部位对体外二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集及凝血酶活性的影响,探讨其效应物质基础。采用比浊法测定体外ADP诱导家兔血小板聚集率;采用改进凝血酶时间法测定抑制凝血酶活性;采用UPLC-Q-TOF-MS对各分离部位进行定性分析鉴定。桃红四物汤醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~30%醇洗脱部位对ADP诱导的血小板聚集具有显著的抑制作用;水不溶部位、醇沉上清液部位及40%~70%醇洗脱部位具有显著的抑制凝血酶活性的作用;芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分是醇沉沉淀部位、醇沉上清液部位及20%~40%醇洗脱部位的主要成分。桃红四物汤抑制ADP诱导家兔血小板聚集及抑制凝血酶活性的主要效应物质基础是芳香酸类成分、苷类成分和苯酞类成分。该实验为进一步探讨活血化瘀方桃红四物汤治疗血瘀证的物质基础及作用机制提供了科学依据。     

活血化瘀方对ADP诱导的家兔血小板聚集和凝血酶时间的影响及量效关系研究

目的:探讨5个活血化瘀方(血府逐瘀汤、少腹逐瘀汤、膈下逐瘀汤、身痛逐瘀汤、通窍活血汤)对家兔血小板聚集及凝血酶时间的作用及其量效关系.方法:采用比浊法测定ADP诱导家兔血小板聚集率和凝血酶时间(TT)法测定家兔血浆凝血时间.结果:活血化瘀方能显著抑制ADP诱导的家兔血小板聚集、延长凝血时间,5个方剂醇沉上清液部位抗血小板聚集效果比其全方和醇沉沉淀部位效果好(P＜0.01),其中少腹逐瘀汤和膈下逐瘀汤醇沉上清液部位抗血小板聚集效果比其他方剂好,而在延长家兔血浆凝血时间方面全方效果最好(P＜0.01),醇沉上清液部位效果最差.结论:5个活血化瘀方对ADP诱导血小板聚集和凝血酶时间均有显著影响,且不同部位样品侧重的药效强弱不同.通过本实验研究为进一步的方剂活血化瘀整体评价奠定了基础,为中医临床治疗心脑血管疾病提供了科学依据.     

温里药配伍对少腹逐瘀汤活血化瘀效应的影响

目的:评价温里药配伍对少腹逐瘀汤活血化瘀效应的影响。方法:采用体外实验观察不同提取物对二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集作用及凝血酶时间(TT)法抗凝血作用的影响;采用大鼠急性血瘀模型评价少腹逐瘀汤、少腹逐瘀汤减小茴香-肉桂-干姜温里药组水提取物对血液流变性的影响。结果:少腹逐瘀汤能够明显抑制ADP诱导的血小板聚集,改善急性血瘀大鼠全血黏度(P<0.05)、血沉(P<0.05);明显延长凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)和部分活化凝血活酶时间(APTT);而少腹逐瘀汤减小茴香等温里药物后仅在血浆黏度,TT,PT指标显示显著性降低作用,而对血小板聚集作用、APTT;对纤维蛋白原未呈现明显影响。结论:温里药配伍后对少腹逐瘀汤活血化瘀效应具有一定的增强或协同作用。     

基于改善微循环药效的天麻素与葛根素配伍合理性研究

目的:研究天麻素与葛根素配伍后在抗凝血及抗血小板聚集方面的作用,探讨其配伍应用的合理性.方法:以体内外活化部分凝血活酶时间(APTT)和二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集率为指标,分别评价药物及其配伍后的抗凝血和抗血小板聚集作用.结果:天麻素和葛根素在一定剂量范围内均具有抗凝血、抗血小板聚集作用,且二药作用强于单一用药.结论:一定剂量天麻素和葛根素配伍后,其抗凝血及抗血小板聚集作用均有所增加.     

六味地黄方及其配伍对血小板聚集的影响

目的 研究六味地黄方及其配伍对血小板聚集率的影响.方法 以比浊法测定六味地黄方及其配伍对二磷酸腺苷(ADP)、血小板活化因子(PAF)、花生四烯酸(AA)诱导的家兔体外血小板聚集率的影响,运用荧光法观察血小板经ADP激活前后的[Ca2+]的变化.结果 味地黄方及其配伍对ADP、PAF、AA诱导的家兔体外血小板聚集率均具有不同程度的抑制作用,且呈明显的量效关系;在终质量浓度为生药9.26 mg/mL时,除山药/茯苓药对外,均不同程度降低ADP激活的血小板释放Ca2+的作用.结论 六味地黄方及其配伍均具有不同程度抗血小板聚集作用,其中以山茱萸/丹皮药对作用尤为显著,其抗ADP诱导血小板聚集的作用可能与抑制血小板内钙释放有关.     

益母草抗血小板聚集作用的实验研究

近年来,我们在研究益母草及其提取物活血化瘀作用的实验中,证明该药能改善大鼠异丙肾上腺素引起的心肌缺血,增加心肌营养血流量,改善肠系膜微循环障碍,以及体外抗ADP诱导的血小板聚集作用。为了进一步探索该药的活血化瘀机理,本文通过烫伤、冰水应激、和静脉注入ADP等不同方法,造成大鼠体内血小板聚集活性增高,对益母草在体抗血小板聚集作用作了观察。     

脑心通胶囊肠吸收液抗ADP诱导血小板凝集的有效成分辨识研究

应用外翻肠囊法制备肠吸收液,同时拆方或构建重组方,生化试剂盒结合酶标仪检测ADP诱导血小板的聚集率,寻找脑心通胶囊组方中拮抗血小板聚集的单味或多味中药。研究表明脑心通胶囊能抑制ADP诱导血小板聚集。通过拆方以及重组方研究,表明丹参、赤芍、桂枝以及水蛭是脑心通全方抗血小板聚集的主要活性中药。此4味中药又以桂枝在全方中发挥主要的抗血小板聚集作用。桂枝肠吸收液来源的香豆素在50～200μmol·L~(-1)时拮抗血小板聚集。综上所述,丹参、赤芍、桂枝以及水蛭是脑心通胶囊抗ADP诱导血小板聚集的主要活性成分,以桂枝抗血小板聚集作用最强。     

葛根素对大鼠血脂和血粘度的影响

目的：研究葛根素对大鼠血脂、血粘度的影响。方法：将30只大鼠随机分为正常对照组、高脂饲料组、高脂饲料葛根素组三组进行喂养与给药,30天后测定大鼠的总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、全血粘度（低切）和血浆粘度。结果：与空白对照组相比,高脂饲料组大鼠的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、全血粘度（低切）和血浆粘度含量明显增加（P〈0．01）,高密度脂蛋白胆固醇含量降低;与高脂饲料组相比,高脂饲料葛根素组大鼠的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、全血粘度（低切）和血浆粘度明显降低（P〈0．01）。结论：葛根素具有明显的降低血脂、降低血粘度的作用。     

疮疡血瘀证与活血化瘀

目的探索疮疡疾患的病理基础;中医、中西医治法治则;筛选活血化瘀中药,以促进治疗疮疡血瘀证的药物开发.方法追溯自晋代至清代疡科治疗专著30余部,分析疮疡疾患的病因病机;统计疮疡内治处方出现率较高的中药排序,分析药物的功效分类.查阅现代文献,归纳血瘀证时出现的病理生理改变;分析治疗疮疡各类中药的现代药理作用.结果疮疡疾患病理基础,肿疡以气滞血瘀伴湿热毒为主证;溃疡以血瘀伴气血两虚为主证.治法为活血化瘀,清热解毒,补益气血.药物以甘草、当归、金银花、赤芍、人参、黄芪、桂枝为主药.结论疮疡疾患以活血化瘀治法为主,辨证佐以清热解毒、补益气血类药物.     

200例正常高值血压之血压血脂血糖的多元回归分析

目的：观察滋阴平肝潜阳汤调治阴虚阳亢型正常高值血压的临床疗效,并初步探讨血压、血脂、血糖之间的关系。方法：前瞻性、随机对照临床研究。共收集阴虚阳亢型正常高值血压者200例,所有病例随机分为治疗组（100人）与对照组（100人）,分别用滋阴平肝潜阳汤和杞菊地黄丸治疗,并观察两组患者治疗前后血压水平、证候疗效、血脂、血糖等。结果：治疗组与对照组合并在一起,用药前,收缩压与总胆固醇、高密度脂蛋白有关系,在其它因素不变的情况下,总胆固醇增加一个单位,收缩压增加0.313个单位;高密度脂蛋白增加一个单位,收缩压降低0.134各单位;用药前,舒张压与总胆固醇有关系,在其它因素不变的情况下,总胆固醇增加一个单位,舒张压增加0.181个单位。治疗组用药前,收缩压与总胆固醇、高密度脂蛋白有关系,在其它因素不变的情况下,总胆固醇每增加一个单位,收缩压增加0.301个单位;高密度脂蛋白每增加一个单位,收缩压降低0.212个单位。治疗组用药前,舒张压与总胆固醇有关系,在其它因素不变的情况下,总胆固醇每增加一个单位,舒张压增加0.228个单位。治疗组用药后,收缩压与血糖有关系,在其它因素不变的情况下,血糖每增加一个单位,收缩压增加0.241个单位。治疗组用药后,舒张压与总胆固醇、血糖有关系,在其它因素不变的情况下,总胆固醇每增加一个单位,舒张压降低0.237个单位,血糖每增加一个单位,舒张压上升0.225个单位。对照组用药前,收缩压与总胆固醇有关系,在其它因素不变的情况下,总胆固醇增加一个单位,收缩压增加0.303个单位。对照组用药前,舒张压与血脂、血压没有明显的关系。对照组用药后,收缩压与血脂、血压没有明显的关系。对照组用药后,舒张压与血糖有关系,在其它因素不变的情况下,血糖每增加一个单位,舒张压增加0.262个单位。结论：滋阴平肝潜阳汤是治疗阴虚阳亢型正常高值血压的有效方药,不但能降低血压、改善症状,还有降血脂作用。血压与血脂、血糖、关系密切。     

试论“肺为血脏”与活血化瘀法

历代对肺为血脏和肺瘀血的论证较少,但肺脏对全身血液的生成和运行有重要意义.肺为血脏主要表现在:全身之血生于肺,气血关系密切,肺与脉关系密切及肺部解剖结构特点等方面.在疾病状态下,气、血、津液密切联系,可相互影响,使得肺脏容易出现肺瘀血.但是,由于肺脏特殊的生理特点和功能,肺瘀血的表现缺乏特异性,临床上较易被忽视.治疗上,活血化瘀法治疗急慢性肺系疾病可收到较好的疗效,应予以足够重视.     

吴茱萸碱对高脂血症小鼠血脂水平及血液黏稠度的影响

目的:观察吴茱萸碱对高脂血症小鼠血脂水平及血液黏稠度的影响。方法:将60只小鼠随机分出12只为正常组,其余48只进行造模,将造模成功的40只小鼠随机分为对照洛伐他汀组、模型组、吴茱萸碱高剂量组和吴茱萸碱低剂量组,每组各10只。给药组每天早上灌高脂饲料20 m L·(kg·d)~(-1),下午灌药:吴茱萸碱高剂量组给予吴茱萸碱溶液30 m L·(kg·d)~(-1),吴茱萸碱低剂量组给予吴茱萸碱溶液10 m L·(kg·d)~(-1);洛伐他汀组给予洛代他汀水溶液3 mg·(kg·d)~(-1),模型组给予高脂饲料20 m L·(kg·d)~(-1),正常组给予基础饲料。检测血清三酰甘油(three acyl glycerin,TG)、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量和血液黏稠度。结果:与正常组比较,模型组TC、TG、LDL-C含量明显增高,HDL-C降低,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,洛伐他汀组和吴茱萸碱高剂量组TG、TC、LDL-C含量显著降低,HDL-C含量升高明显,差异具有统计学意义(P0.05);吴茱萸碱低剂量组TG、TC、LDL-C含量变化不明显,差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,洛伐他汀组、吴茱萸碱低剂量组及吴茱萸碱高剂量组血液黏稠度明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:吴茱萸碱具有降低高脂血症小鼠TC、TG、LDL-C及血液黏稠度,升高HDL-C的作用。     

瘀病证治浅谈

瘀病可因部位差别、量的多少、时间新久而产生诸如疼痛、肿、积聚、出血、发热、口渴、咳喘、心悸怔忡等不同的症状和体征。瘀血致病具有阻滞气机、瘀阻心脉、影响新血形成、生风、生热等特点。单纯瘀血所致病证,治以活血化瘀即可;除血瘀外,兼有其他致病因素或病理变化,以及虚实夹杂,兼见气血阴阳亏虚者,则需适当配伍其他药物,如活血养血、补气益气之品。     

血瘀窍闭说

结合文献和临床研究,并分析了脑血管意外性昏迷和颅脑损伤性昏迷的病理变化,提出了血瘀窍闭是脑血管意外性昏迷和颅脑损伤性昏迷的关键病理变化.     

益肾法对自发性高血压大鼠血压和肾血流影响的研究

目的:观察益肾法对自发性高血压大鼠(SHR)血压和肾脏血流的影响。方法:将16只SHR随机分为模型对照组,杞菊地黄丸组,二仙汤组和苯那普利组,连续灌胃给药6周。分别观测血压动态变化和肾血流情况。结果:滋阴补肾的杞菊地黄丸组和苯那普利组的收缩压低于模型对照组(P<0.05),其降血压作用强于温补肾阳的二仙汤;二仙汤组肾血流高于模型对照组(P<0.05),其对肾血流的改善作用强于杞菊地黄丸。结论:益肾中药可以降低SHR的收缩压,以滋阴补肾的杞菊地黄丸的降压作用更为显著。益肾中药可以改善SHR的肾血流量,以温补肾阳的二仙汤的作用更为显著。     

正常高值血压之血压 血脂 血糖的主成分与因子分析

目的：观察滋阴平肝潜阳汤调治阴虚阳亢型正常高值血压的临床疗效。方法：前瞻性、随机对照临床研究。共收集阴虚阳亢型正常高值血压者200例,所有病例随机分为治疗组（100人）与对照组（100人）,分别用滋阴平肝潜阳汤和杞菊地黄丸治疗,并观察两组治疗前后血压水平、证候疗效、血脂、血糖等。结果：X1（收缩压）、X2（舒张压）、X4（甘油三酯）、X5（低密度脂蛋白）主要由F1（第一公因子）＂动脉粥样硬化综合危险因素＂解释,X3（总胆固醇）主要由F2（第二公因子）＂胆固醇危险因素＂解释,X6（高密度脂蛋白）主要由F3（第三公因子）＂动脉粥样硬化风险抵抗因素＂解释,X7（血糖）主要由F4（第四公因子）＂代谢综合征因素＂解释。结论：滋阴平肝潜阳汤是治疗阴虚阳亢型正常高值血压的有效方药,不但能降低血压、改善症状,还有降血脂作用。甘油三酯和低密度蛋白是高血压发生的主要危险因子。     

芳香酸类成分在活血化瘀方中的作用分析

揭示了部分活血化瘀方中出现频次较高的药味常含有丰富的具有抗血小板凝集和抗血栓等作用的芳香酸类成分，它们对整方效应的贡献不仅在于其本身的生物效应，还通过与碱成盐、与醇形成酯化物以及助溶其它活血化瘀成分等方式改善或增强整方活血化瘀效应。因此，系统地研究活血化瘀方中芳香酸类成分与整方生物效应的关系将为阐明方剂效应物质基础和配伍规律具有重要意义。