神经再生条件液中 6.16～10.23KDa 蛋白粗制品对雪旺细胞的动力学影响

目的：了解神经再生条件液中６．１６～１０．２３ＫＤａ蛋白粗制品对雪旺细胞（Ｓｃｈｗａｎｎｃｅｌ，Ｓｃ）增殖的作用。方法：雪旺细胞的培养采用差速贴壁法，分成５组，每组３个标本。第１组：外周神经再生条件液中６．１６～１０．２３ＫＤａ蛋白粗制品（ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｎｅｒｖｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｆｌｕｉｄｓ，ＮＲＣＦｐ）；第２组：成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）的粗提物；第３组：纤连蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ，ＦＮ）；第４组：神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）；第５组：对照组。各组进行细胞计数和动力学分析。结果：ＮＲ－ＣＦｐ组、ＦＧＦ粗提物及ＦＮ组的细胞增长加快并且Ｓ期、Ｇ２＋Ｍ期（ＤＮＡ合成前期、ＤＮＡ合成后期及分裂期）所占比例增加。结论：本实验显示ＮＲＣＦｐ、ＦＧＦ粗提物及ＦＮ能够促进Ｓｃ的增殖，而ＮＧＦ对雪旺细胞的分裂增殖不起作用     

神经营养因子和脊髓损伤综述

神经营养因子和脊髓损伤综述刘文戈＊罗永湘＊神经营养因子（ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＮＴＦ）是对脊椎动物神经系统形成和功能影响的重要调节因子之一。而神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）是最早发现的细胞生长调节因子，迄今...     

睫状神经营养因子神经生长因子对周围神经再生的作用

目的：研究睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）和神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）对周围神经再生的作用。方法：硅管套接大鼠坐骨神经，将ＣＮＴＦ、ＮＧＦ、生理盐水（ｎｏｒｍａｌｓａｌｉｎｅｓｏｌｕｔｉｏｎ，ＮＳ）分别加入硅管中，并于术后每日皮下注射一定剂量。术后４周，应用ＨＲＰ逆行追踪技术显示再生轴突通过修复部位的胞体。结果：与ＮＳ组、ＮＧＦ组相比，ＣＮＴＦ组脊髓标记胞体显著增加，其它组间比较，差异不显著。结论：外源性ＣＮＴＦ能明显促进周围神经运动轴突再生，但促进感觉轴突再生的作用不明显。外源性ＮＧＦ促进周围神经运动和感觉轴突的再生均不明显     

白芨胶载HMW－NGF促进伤口愈合的实验研究

用中药白芨胶（ｂｌｅｔｉｌａｓｔｒｉａｔａｇｅｌａｔｉｎ，ＢＳＧ）作为外源性高分子神经生长因子（ｈｉｇｈｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＨＭＷ－ＮＧＦ）的载体，观察促进大鼠伤口愈合的作用。实验分两部分进行：①将生理盐水、ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ分别加入无血清培养基中，观察其对鸡胚背根神经节的影响；②选用ＳＤ大鼠４０只，分Ａ、Ｂ、Ｃ及Ｄ四组，在各大鼠背部切取２ｃｍ的伤口，一组大鼠伤口不用药，其余三组伤口分别给予外用ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ，每天用药１次。在用药后第３及第１０天测量伤口面积，并用图象分析仪计算伤口面积，用光学显微镜观察细胞渗出类型和数量，并观察伤口愈合时间。结果表明：ＢＳＧ对ＨＭＷ－ＮＧＦ的活性无影响；ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ都能促进伤口愈合和增加创面渗出多形核白细胞、单核细胞和成纤维细胞，尤以ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ的作用最为显著。可以得出以下结论：ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ能显著加速伤口愈合     

雪旺氏细胞分泌蛋白质及其神经营养活性物质的生化分析

成年大鼠瓦勒氏变性神经来源的雪旺氏细胞（ＳＣ），经体外无血清分离培养，收集ＳＣ无血清条件培养液，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析其超滤浓缩液（分子量大于１０ＫＤａ）中ＳＣ分泌蛋白，发现其含有１４条蛋白带，分子量从大于９４ＫＤａ至小于３４ＫＤａ。用免疫印迹技术、抗２．５Ｓ神经生长因子（ＮＧＦ）抗体鉴定证实ＳＣ分泌蛋白中含有ＮＧＦ。用Ｄｉｓｃ－ＰＡＧＥ（４℃）分离ＳＣ分泌蛋白带，分别经电洗脱、浓缩收集１０份蛋白区带，结合有髓腹侧运动神经元细胞培养、ＮＴＦｓ生物学活性鉴定，初步发现其中一组蛋白区带（Ｂ＋）含运动性神经营养因子（ＮＴＦ）活性，其分子量在６５ＫＤａ至３４ＫＤａ。     

白芨胶载神经生长因子促周围神经再生的实验研究

为验证白芨胶（ｂｌｅｔｉｌｌａｓｔｒｉａｔａｇｅｌａｔｉｎ，ＢＳＧ）作神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）载体的可行性，将ＢＳＧ，ＮＧＦ和ＢＳＧ＋ＮＧＦ分别加到无血清培养基中，观察对鸡胚背根神经节突起生长的影响，另用硅胶管桥接大鼠１０ｍｍ长坐骨神经缺损，管内分别注入生理盐水，ＢＳＧ，ＮＧＦ，ＢＳＧ＋ＮＧＦ，术后４周，８周行光镜，电镜，图像分析等检测，结果表明：ＢＳＧ＋ＮＧＦ和     

生长因子对软骨细胞的作用

近年来,随着现代创伤修复概念的建立,在影响创伤修复的局部因素中,细胞因子的作用越来越受到人们的关注。目前已发现的细胞因子有几十种,大致可分为五大类：生长因子（ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＧＦ）、白细胞介素（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ,ＩＬ）、肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ,ＩＦ）、集落刺激因子（ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＳＦ）。其中生长因子与软骨细胞生长、分化的关系最为密切,随着分子生物学的建立,生长因子对软骨细胞影响…     

白芨胶载HMW—NGF促进伤口愈合的实验研究

用中药白芨胶（ＢＳＧ）作为外源性高分子神经生长因子（ＨＭＷ－ＮＧＦ）的载体，观察促进大鼠伤口愈合的作用。实验分两部分进行：①将生理盐水、ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ分别加入无血清培养基中，观察其对鸡胚背根神经节的影响；②选用ＳＤ大鼠４０只，分Ａ、Ｂ、Ｃ及Ｄ四组，在各大鼠背部切取２ｃｍ的伤口，一组大鼠伤口不用药，其余三组伤口分别给予外用ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ     

神经再生液中相对分子质量为6.16000～10.23000的蛋白粗制品、NGF和CNTF对背根神经节细胞生长的影响

目的研究神经再生条件液中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品（ｐｒｏ－ｔｅｉｎｉｎｎｅｒｖｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｆｌｕｉｄｓ,ＮＲＣＦｐ）、睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）和神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＮＧＦ）对背根神经节感觉神经元细胞有无促进其存活和生长的作用。方法采用背根神经节体外植块培养,分散培养及ＭＴＴ微量比色法,比较在培养器,培养板孔中加入神经再生条件中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品、ＣＮＴＦ及ＮＧＦ三个实验组,对体外培养的背根神经节神经元细胞生长的影响。结果三实验组中背根神经节神经元细胞的轴突生长均旺盛,它们的四唑盐终产物与对照组（加ＤＮＥＮ培养液）相比,其差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）,但各实验组之间无明显差异。结论神经再生条件液中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品、ＣＮＴＦ及ＮＧＦ对背根神经节神经元细胞体有促进其存活和生长的作用。     

应用^99mTc—DTPA清除率测定肾小球滤过率及与传统方法的比较研究

目的为临床准确评估ＧＦＲ提供一定依据。方法我们对３２例慢性肾脏病患者及５例正常志愿者，用９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ的清除率测定肾小球滤过率（Ｔｃ－ＧＦＲ），同时测定血尿素氮（ＢＵＮ），肌酐（Ｓｃｒ），２４小时肌酐清除率（２４ｈＣｃｒ）和采用Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ－Ｇａｕｌｔ公式计算肌酐清除率（Ｃｃｏｃｋｃｒｏｆｔ），并进行比较和分析。结果以上指标与Ｔｃ－ＧＦＲ均存在相关关系；它们检出Ｔｃ－ＧＦＲ下降的敏感性分别是５０％、５８％、６９％和８０％；２４ｈＣｃｒ和Ｃｃｏｃｋｃｒｏｆｔ与Ｔｃ－ＧＦＲ的相关性显著优于ＢＵＮ，Ｃｃｏｃｋｃｒｏｆｔ检出Ｔｃ－ＧＦＲ下降的敏感性显著优于ＢＵＮ。结论传统的指标除ＢＵＮ外均能一定程度地准确反映ＧＦＲ。９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ清除率可以准确，安全，有效地测定ＧＦＲ，适用于某些对ＧＦＲ精确性要求较高的情况。     

血小板衍生生长因子对肝星状细胞基质分解素-1及其抑制因子基因表达的调节

目的 了解血小板衍生生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）对肝呈状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ ｃｅｌｌ，ＨＳＣ）基质分解素－１（ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ－１，ＭＭＰ３）及金属蛋白酶组织抑制因子－１（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ－１，ＴＩＭＰ）基因表达的影响。方法 在培养的肝星状细胞系中加入２００μｇ／     

L-精氨酸加快呼吸道纤毛运动频率的机制

目的 了解ＮＯ信号传递系统对呼吸道纤毛运动的作用机制。方法 用ＮＯ前体Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）作用于培养大鼠呼吸道纤毛上皮,并分别将纤毛组织预孵于一氧化氮合酶（ＮＯＳ）抑制剂Ｌ－ＮＭＭＡ,可溶性岛苷酸环化酶（ｓＧＣ）拮抗剂ＯＤＱ及选择性ｃＧＭＰ依赖的蛋白酶（ＰＫＧ）拮抗剂Ｒｐ－８－Ｂｒ－ｃＧＭＰＳ后,再施以Ｌ－Ａｒｇ。以相差显微镜及成像分析技术测定纤毛运动频率（ＣＢＦ）。结果 Ｌ－Ａｒｇ可使ＣＢＦ     

CT and MRI diagnosis of acute traumatic hepatic rupture： analysis of ten cases

ＴＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＲａｄｉｏｌｏｇｙ,ＦｉｒｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ,ＢｅｉｊｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,８ＸｉｓｈｉｋｕＳｔｒｅｅｔＢｅｉｊｉｎｇ１０００３４,Ｃｈｉｎａ（ＷａｎｇＲＧ,ＧａｏＹＪａｎｄＬｉＳＮ）Ｄ...     

碱性成纤维细胞生长因子与脊髓损伤

脊髓损伤（ｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ,ＳＣＩ）后,有关其神经再生修复作用的研究较多。近年来,众多研究主要集中在神经营养因子的作用方面,如脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）,而发展较快的碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ...     

GDNF及其对脊髓损伤修复的前景

胶质细胞源性神经营养因子 (Ｇｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ ｄｅｒｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ)是近年来发现并已克隆其基因的一种蛋白质 ,最初是由小鼠胶质细胞株Ｂ4 9细胞分离出来 ,在体外能激活鼠胚中脑腹侧多巴胺 (ＤＡ)能神经元摄取ＤＡ ,并能促进神经元存活。该因子是由两个单体通过糖基化二硫键结合成的二体 ,单体由 134个氨基酸组成。它的 7个半胱氨酸残基在分子中的构象与转化生长因子 (ＴＧＦ β)超家族成员相同 ,而且其序列中有近 2 0 %的同源性 ,从结构上看属于ＴＧＦ β超家族远亲[1] 。近来发现其对损…     

类风湿关节炎与骨性关节炎成纤维样滑膜细胞蛋白酪氨酸磷酸化状态的比较

目的 比较类风湿关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ,ＲＡ）与骨性关节炎（ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ,ＯＡ）成纤维样滑膜细胞（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ－ｌｉｋｅ ｓｙｎｏｖｉｏｃｙｔｅｓ,ＦＬＳ）蛋白酪氨酸磷酸化状态的差异。方法滑膜细胞原代培养,流式细胞仪鉴定滑膜细胞型别,提取蛋白进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ单向电泳和ＩＣＥ－ＰＡＧＥ双向电泳分离后,应用抗蛋白酪氨酸磷酸化抗体进行ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测。结果 滑膜细胞原代培养至第三代时,ＣＤ３、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ｖｏｎ Ｗｉｌｌｉｂｒａｎｄ ｆａｃｔｏｒ阳性细胞比例小于１％,ＲＡ ＦＬＳ蛋白酪氨酸磷酸化程度是ＯＡ ＦＬＳ的４～６倍。结论 滑膜细胞原代培养至第三代时即可以获得型别均一的ＦＬＳ,ＲＡ ＦＬＳ酪氨酸磷酸化程度较ＯＡ ＦＬＳ明显增     

肿瘤坏死因子单克隆抗体对急性胆管炎大鼠的器官保护作用

目的探讨肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）单克隆抗体（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ,ＭｃＡｂ）对急性胆管炎大鼠多器官损害是否具有保护作用。方法ＳＤ大鼠２４只,随机分成假手术组、急性胆管炎组和ＴＮＦＭｃＡｂ防治组。分别测定血浆ＴＮＦ、血清ＡＬＴ和ＢＵＮ,并行肝、肺、肾病理变化观察。结果ＴＮＦＭｃＡｂ防治组血浆ＴＮＦ明显低于急性胆管炎组（Ｐ＜００１）,血清ＡＬＴ、ＢＵＮ亦明显低于急性胆管炎组（Ｐ＜００５）,肝、肺、肾病理变化明显减轻。结论ＴＮＦ是导致急性胆管炎多器官损害的重要介质,ＴＮＦＭｃＡｂ对多器官损害具有保护作用     

血小板衍生生长因子—BB对破骨细胞功能影响的实验研究

目的 探讨血小板衍生生长因子－ＢＢ（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｏｔｒ－ＢＢ,ＰＤＧＦ－ＢＢ）对破骨细胞生物学功能的影响。方法 （１）利用酶消化法分离培养成人破骨细胞;（２）应用放射电子显微镜方法观察破骨细胞对ＰＤＧＦ－β受体的表达;（３）在经过纯化的破骨细胞上清液中旋加重组人基因ＰＤＧＦ－ＢＢ,利用酶动力学方法测定培养上清液中的酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和抗酒石酸酸性磷酸酶（     

pcDNA3.0/hTH和 pcDNA3.1/hGDNF共转染SH-SY5Y细胞的克隆筛选和鉴定

我们采用多基因表达技术把携带人胶质细胞源性神经营养因子 (ＧＤＮＦ)和酪氨酸羟化酶 (ＴＨ)基因的重组质粒转入ＳＨ ＳＹ5Ｙ细胞中 ,构建同时分泌人ＴＨ和ＧＤＮＦ的工程细胞 ,为探讨双基因治疗帕金森病 (ＰＤ)提供依据 ,现将结果报道如下。一、材料与方法1.实验材料 :ｐｃＤＮＡ3.0 /ｈＴＨ和ｐｃＤＮＡ3.1/ｈＧＤＮＦ重组质粒 (普林斯顿大学崔振中博士构建 )。真核表达载体ｐｃＤＮＡ3.1:5 .6ｋｂ ,非功能区含ＨｉｎｄⅢ和ＢａｍＨⅠ酶切位点 ,带有抗潮霉素和氨苄青霉素标记基因 ,含有ＣＭＶ启动子和ＳＶ40增强子。细胞培养液 :采用最低…     

神经生长因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的：证实神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）对脊髓前角运动神经元有保护作用。方法：切断ＳＤ大鼠一侧坐骨神经，借助单盲端硅胶管系统在神经损伤局部给予ＮＧＦ。术后行酶组织化学检测。结果：坐骨神经切断可致腰段脊髓前角运动神经元明显损害，其表现为神经元乙酰胆碱脂酶（ａｃｅｔｙｌ－ｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ，ＡｃｈＥ）活性降低和酸性磷酸酶（ａｃｉｄｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＡＣＰ）活性升高，应用ＮＧＦ可显著改善上述酶学变化。结论：ＮＧＦ对受伤的脊髓前角运动神经元有保护作用