Urocortin致大鼠心肌细胞肥大由PKA信号通路介导

目的 通过观察PKA拮抗剂H-89和CRF受体拮抗剂Astressin抑制UCN诱导乳大鼠心肌细胞肥厚的作用,研究UCN诱导的大鼠心肌细胞肥厚的信号转导机制.方法 以体外培养的乳大鼠心肌细胞为模型,应用UCN 0.1μmol·L-1诱导心肌肥大,观察H-89 0.1 μmol·L-1和Astressin 1 μmol·L-1的作用,探讨UCN 0.1μmol·L-1对心肌肥厚的作用机制.用消化分离法及计算机图像分析系统检测心肌细胞体积;[3H]亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白的合成;用Western蛋白印迹法测定ANP表达.结果 UCN 0.1 μmol·L-1使心肌细胞体积、蛋白合成和ANP表达明显增加,H-89 0.1μmol·L-1和Astressin 1μmol·L-1抑制UCN诱导的心肌肥大.结论 Urocortin可能通过CRF-R2并通过PKA信号通路诱导乳大鼠心肌细胞肥大.     

心肌肥厚相关信号通路的研究进展

心肌肥厚是心脏对各种刺激产生的适应性增生,表现为心肌细胞体积增大,心脏质量增加,是独立的心血管危险因素,最终导致心力衰竭,甚至猝死.其主要病理变化包括心肌细胞肥大、心肌间质增殖以及心肌细胞外基质重建等,即心肌重构.心肌肥厚时,心肌细胞蛋白合成增加、体积增大、直径增宽或长度增加;心肌肌节数量增多、纤维组织增生、胚胎基因再表达.     

人参皂甙Rg1对缺氧豚鼠心肌细胞游离钙浓度降低作用的研究

目的探讨人参皂甙(ginsentosides,Gin)单体Rgl及维拉帕米(verapamil,Ver)对豚鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)变化的影响.方法采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注,胶原酶Ⅰ型分离心肌细胞,用荧光指示剂方法(Fura-2/AM)标记心肌([Ca2+]i)变化.将心肌细胞悬液分为3组对照组、Rgl组和Ver组.观察缺氧后心肌[Ca2+]i的变化.结果(1)正常氧状态心肌[Ca2+]i均值为(125.4±10.3)nmol/L(n=20).(2)缺氧状态下,心肌[Ca2+]i增加与缺氧时间(程度)直线相关,相关系数r为0.98左右.(3)Rgl对缺氧后心肌[Ca2+]i增加明显延缓.结论Rgl在缺氧条件下,使心肌[Ca2+]i明显下降,从而阻止心肌细胞内钙超载,其作用与Ver相似,我们认为Rgl具有心肌细胞的保护作用.     

心肌细胞凋亡在心脏外科中的意义

通过细胞凋亡的大量研究,使人们对许多疾病的认识增加了新的视角。心肌细胞凋亡参与了多种心血管疾病的病理生理过程,缺血再灌注损伤造成心肌细胞凋亡。心肌细胞凋亡是心脏术后心肌顿抑的重要机制,减少心肌细胞凋亡是心肌保护的一重要方向。     

冠心病患者冬眠心肌中TNF-α表达及细胞凋亡的临床研究

目的 探讨冬眠心肌细胞内TNF-α mRNA与心肌细胞凋亡的变化和意义,初步探索冬眠心肌形成的分子生物学机制.方法 行冠状动脉搭桥手术(CABG)的冠心病患者10例,术前1周内用多巴酚丁胺超声负荷试验(DSE)结合多普勒组织成像(DTI)确定冬眠心肌及正常心肌的存在部位,CABG术中根据检测结果进行取材(分别取正常心肌和冬眠心肌),并经电镜证实.取材心肌用 Tunel法检测心肌细胞凋亡情况,原位杂交法(ISH)测定TNF-α mRNA的活性.分析TNF-α mRNA与心肌细胞凋亡的关系.结果 冬眠心肌细胞凋亡数及TNF-α mRNA的表达较正常细胞高;TNF-α mRNA与冬眠心肌细胞凋亡数相关(r＝0.816,P＜0.05).结论 心肌缺血缺氧时,心肌细胞内TNF-α分泌增加,TNF-α促进冬眠心肌的形成并诱导心肌细胞凋亡.     

用大鼠原代心肌细胞构建工程化心肌组织的研究

目的探索用大鼠原代心肌细胞构建工程化心肌组织的方法。方法用胶原、M atrigel、2倍DMEM分别与含0.04?TA的0.25%胰酶制备的乳鼠原代心肌细胞(实验组)和0.1%胰酶制备的原代心肌细胞(对照组)混合,注入环形槽内形成心肌条带,一周后行力学拉伸继续培养一周。常规HE染色等对组织工程化心肌组织,即心肌条带进行评价。结果心肌条带出现自发性跳动,HE染色显示与正常成年大鼠心肌组织类似,电镜结果显示条带中的心肌细胞含有丰富的肌原纤维,肌小节结构和Z带清晰可见。用含0.04?TA的0.25%胰酶制备的原代乳鼠心肌细胞构建的心肌条带,拉伸后第4天形成一致性跳动。免疫组化检测提示肌钙蛋白阳性细胞数多于对照组。电镜观察显示,条带的心肌细胞中肌原纤维较对照组明显增多。结论这一方法可构建工程化心肌组织,心肌细胞制备方法的改进以及液态Ⅰ型胶原浓度的精确测定,可显著提高构建心肌条带的成功率及条带的生理功能,使其更接近正常心肌组织。     

羊心脏束细胞-心肌细胞演化系观察

目的:观察羊心室内膜下层束细胞演化形成心肌细胞的动态过程.方法:12只山羊取心脏后,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成体羊心室内膜下Ⅰ型束细胞分裂增生为Ⅱ型束细胞团或心肌生成单位.生成单位经横向与纵向2种方式,演化形成蒲肯野纤维和工作心肌细胞;部分Ⅰ型束细胞经Ⅱ型束细胞直接演化为工作心肌.结论:正常成体羊心室传导心肌和工作心肌属同-细胞演化系,羊心室心肌主要来源于束细胞-心肌细胞演化系.     

存活心肌的识别

在心肌严重缺血或梗死后,根据缺血发生速度、程度、范围、以及是否有侧支循环的建立,心肌细胞损伤可能出现3种不同结局.①坏死心肌,②冬眠心肌,③顿抑心肌.冬眠心肌和顿抑心肌属于存活心肌,表现为收缩功能障碍,但细胞代谢存在,细胞膜完整,对正性肌力药具有收缩增强的反应.     

κ阿片受体激动对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的抑制作用

目的 通过观察κ阿片受体激动对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的作用,研究κ阿片受体激动剂对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的抑制作用.方法 以体外培养的乳大鼠心肌细胞为模型,应用血管紧张素Ⅱ1 μM诱导心肌肥大,观察U50488H1 μM对它的作用,并和洛沙坦(los)1 μM组做对比观察κ阿片受体的激活对心肌肥大的作用.用Lowry法检测心肌细胞蛋白含量;用消化分离法及计算机图像分析系统检测心肌细胞体积;用[3H]-leueine掺入法测定心肌细胞蛋白的合成.结果 AngⅡ1 μM使心肌细胞总蛋白含量,蛋白表迭及细胞体积明显增加;U50488H1 μM能够降低由AngⅡ引起的心肌细胞蛋白含量,蛋白表达,以及体积的增加,从而抑制心肌肥大,并且抑制程度与los1 μM相似.结论 κ阿片受体激动剂U50488H能够抑制由AngⅡ诱导的心肌细胞肥大.     

心肌肽素在体外循环中对心肌保护的临床研究

目的 探讨心肌肽素（CMP）在体外循环中对心肌的保护作用。方法 50例风湿性心脏病患者，随机分成对照组和实验组。对照组经升主动脉根部灌注冷晶体停跳液，实验组在晶体停跳液的基础上加入心肌肽素60mg／L。其它处理两组相同。从心肌酶谱（AST、CK-MB、LDH1）、心肌组织细胞形态学、心肌细胞超微结构等观察对心肌的影响。结果 （1）两组病例心肌酶在升主动脉开放后显著升高，但实验组明显低于对照组，两组间差异有显著性。（2）心肌组织细胞形态学、细胞超微结构观察发现对照组因缺血、缺氧引起的心肌纤维变性、心肌横纹模糊和空泡样变显著，电镜结果显示对照组术后部分心肌纤维溶解断裂，线粒体肿胀明显；而实验组心肌细胞的形态学超微结构损伤轻。结论 心肌肽素加入晶体停跳液中可加强心肌保护，减少心肌酶的释放，心肌细胞超微结构损伤轻，对心肌的保护效果优于单纯晶体停跳液。     

骨骼肌卫星细胞移植对残存心肌细胞游离Ca~(2 )的影响

目的研究骨骼肌卫星细胞移植对梗塞心肌残存心肌细胞游离Ca2 分布及Ca2 波的恢复作用。方法自犬臀部取骨骼肌 ,提取、培养、扩增骨骼肌卫星细胞 ,4’ ,6-diamidino -2 -phenylindone(DAPI)荧光标记 ,经结扎的左冠状动脉前降支远端灌注移植入自体急性心肌梗塞区域 ,2、4、8周后处死动物 ,取心肌标本行组织形态学、心肌细胞游离Ca2 分布及Ca2 波检测。　结果梗塞区观察到带荧光的细胞核及肌纤维 ,部分已分化成横纹肌并以闰盘相连。梗塞区残存心肌细胞游离Ca2 增加 ,Ca2 波峰出现明显晚于正常区域心肌细胞 ,且峰值低于正常心肌细胞。骨骼肌卫星细胞移植 8周后 ,梗塞区残存心肌细胞游离Ca2 分布及Ca2 波峰恢复正常。　结论经冠状动脉灌注移植骨骼肌卫星细胞使梗塞心肌残存心肌细胞游离Ca2 分布及Ca2 波恢复 ,利于心肌收缩力的恢复。     

未成熟心肌保护研究进展

未成熟心肌在结构、代谢和功能上有别于成熟心肌。随着婴幼儿心脏外科的发展 ,未成熟心肌保护问题亟待解决。未成熟心肌的发育成熟是一个循序渐进的过程。不同的动物、种族或同一种族在不同的生长环境下 ,其心肌细胞发育成熟的时限均不一致 ,目前尚无明显分界线 ,但人们一般把未成熟哺乳动物 (豚鼠 <8d、羊 <6d、猪 <15d、新西兰兔 <4w、犬 <8w) ,新生儿、婴幼儿的心肌称为未成熟心肌[1] 。发育学上这个独特阶段 ,越来越引起人们的重视。1　未成熟心肌结构、功能和代谢差异未成熟心肌比成熟心肌结构更致密 ,心肌细胞数占心脏细胞总数的 60 %…     

心肌组织工程研究现状

组织工程包括种子细胞、生物材料和组织构建三部分.种子细胞的来源和种类是心肌组织工程的关键环节,目前研究较多的主要有胎幼心肌细胞、心脏自体细胞和全、多能干细胞等.生物材料是细胞附着的基本框架和代谢场所,直接影响所构成的组织形态和功能.生物反应器系统使体外构建理想的工程化心肌组织成为可能.本文介绍近年来心肌组织工程在上述三方面的研究进展.     

轻症室间隔缺损病人心肌成熟时限的研究

目的 研究人未成熟心肌的成熟时限。方法 以不同年龄层次无明显症状的轻症室间隔缺损（室缺）４８例病人心肌为研究对象,按年龄分为６组,每组８例,从形态、物质代谢（钙、能量）、氧自由基代谢、含水量、酶活性等方面进行观察。结果 随着年龄的增长。轻症室缺患儿未成熟心肌细胞直径、心肌细胞肌原纤维体密度、心肌细胞肌原纤维体密度、心肌细胞线粒体密度与年龄呈显著的正相关;心肌超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、心肌ＡＴＰ     

S-亚硝基谷胱甘肽对PGF2α诱导心肌肥大的抑制作用

目的 从细胞水平研究一氧化氮(Nitric oxide,NO)供体S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)对前列腺素F2α(PGF2α)所致心肌肥大的影响,并初步探讨其作用原理.方法 利用培养的新生大鼠心肌细胞,以细胞直径大小、蛋白质含量为心肌肥大反应指标,观察药物的抗心肌肥大效应;分别用比色法和荧光法检测细胞NO浓度和游离钙浓度([Ca2+]i),分析其可能的作用原理.结果 PGF2α10-7mol/L使心肌细胞明显增大,蛋白质含量明显增加,并使[Ca2+]i显著升高,但对NO含量无明显影响.与PGF2α组比较,GSNO10-4mol/L明显使心肌细胞直径、蛋白质含量和[Ca2+]i减少;同时使NO浓度明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 GSNO可抑制PGF2α诱导的心肌细胞肥大,该作用可能与其释放NO,使心肌细胞局部NO含量增加,从而降低细胞内钙有关.     

动员的骨髓干细胞保护大鼠缺血心肌机制的研究

[目的]探讨干细胞动员剂动员的骨髓干细胞的心肌细胞分化潜能及对缺血心肌的影响.[方法]用异丙肾上腺素制作大鼠心肌坏死模型,联用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和辛伐他汀动员大鼠自体骨髓干细胞释放和迁移至心肌坏死灶,于用异丙肾上腺素后24h、4周杀死大鼠,取出心脏,通过免疫组化、HE染色和VG染色方法观察大鼠心肌坏死灶的CD34 细胞的浸润及心肌血管再生、心肌纤维化的情况.[结果]使用异丙肾上腺素后24h,动员组大鼠心肌坏死区可见CD34 细胞浸润,并有CD34阳性的新生心肌细胞生长,4周后瘢痕组织少,心肌纤维化程度轻,缺血心肌基本结构得到保护.[结论]急性心肌缺血坏死发生后,联用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和辛伐他汀能迅速动员自体骨髓干细胞向心肌坏死灶内迁移、存活和向心肌细胞、血管内皮细胞等分化;并能抑制缺血心肌纤维化和保护缺血心肌基本结构.     

福辛普利对压力超负荷性心肌肥厚大鼠左心室心肌细胞凋亡的影响

目的：研究福辛普利（fosinopril）对压力超负荷性心肌肥厚大鼠左心室心肌细胞凋亡的影响。方法：将36只Wistar大鼠随机分为假手术组、腹主动脉缩窄组、腹主动脉缩窄＋福辛普利给药组。以左心室重量指数作为心肌肥厚的指标;以DNA荧光染色方法测凋亡率研究心肌细胞凋亡的情况。后者采用流式细胞术测试。结果：与假手术组相比,腹主动脉缩窄组大鼠心肌细胞凋亡率明显升高（P〈0.01）;腹主动脉缩窄＋福辛普利给药组同腹主动脉缩窄组相比,心肌细胞凋亡率下降（P〈0.05）。结论：（1）心肌细胞凋亡是压力超负荷性心肌肥厚发生的一个重要因素;（2）福辛普利能有效地抑制心肌细胞凋亡,从而使心肌肥厚发生逆转。     

心肌纤维化发病机制及治疗进展

心肌纤维化是多种病理因素导致的心肌细胞及心肌细胞间质的改变,是各种心血管疾病发展到一定阶段的共同病理表现,最终导致心脏功能衰竭而死亡。其发生发展的确切分子机制尚未明确,目前认为主要与心肌成纤维细胞功能异常、心肌细胞外基质成分失调、神经内分泌因子改变等有关。本文就心肌纤维化的发病机制、治疗进展作如下综述。     

未成熟心肌的特点及未成熟心肌保护的研究进展

未成熟心肌细胞在形态结构、功能和代谢方面均存在其特殊性,对其保护也存在特殊性。本文对未成熟心肌的形态结构、功能和代谢等特点,及近年来未成熟心肌保护的研究进展做一简要综述,重点为缺血预处理以及药物预处理对于未成熟心肌的保护作用。     

磷酸肌酸对未成熟心肌保护作用的实验研究

目的通过幼兔离体心模型,研究磷酸肌酸(creatine phosphte,CP)强化的ThomasⅡ心肌保护液对未成熟心肌的保护作用.方法20只幼兔随机分为对照组和CP组,主动脉阻断时分别给予ThomasⅡ心肌保护液和用10mmol/LCP强化的ThomasⅡ心肌保护液.观察左心室功能恢复情况,心肌ATP含量及含水量,冠状动脉流量(CF),冠状静脉引流液中心肌酶(CK,CK-MB,LDH)和超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量以及心肌细胞的超微结构等.结果左室心功能在复灌后30min时,两组间无显著差异;但复灌后60min,CP组的左室收缩压(LVSP)、左室发展压(LVDeP)、左室收缩压对时间的变化率(+dp/dt)均显著高于对照组.CP组心肌组织中ATP含量明显高于对照组,而含水量显著少于对照组.CP组CF、SOD、MDA也显著优于对照组,而CK、CK-MB、LDH的漏出明显少于对照组.心肌细胞超微结构显示,CP组的超微结构保存较好,损伤比对照组小.结论CP能够显著增强ThomasⅡ心肌保护液对未成熟心肌的保护作用.