通脱木组织培养与种苗快速繁殖技术体系研究

目的:建立通脱木组织培养与种苗快速繁殖技术体系。方法:试验以通脱木幼根、幼茎、幼叶和幼芽为外植体,以MS为基本培养基,利用不同的植物激素配比分别进行愈伤组织与丛芽的诱导、丛芽增殖与壮苗、生根诱导等,从中筛选出适宜的培养方案。结果:以培养基MS+NAA 3.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L诱导幼叶的出愈率较高,效果最好;以培养基MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 1.5 mg/L从愈伤组织诱导产生丛芽,诱导率最高,增殖系数为3.17倍;以培养基MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+GA30.1 mg/L可促进丛芽增殖和壮苗;以培养基1/2MS+NAA 0.3 mg/L诱导生根,生根率达到90%以上。结论:建立了通脱木种苗快速繁殖技术体系,为通脱木种质资源保存和规模化生产奠定基础。     

金线莲试管苗高效快繁技术研究

目的建立高效的金线莲组培快繁体系。方法以金线莲茎尖、茎节和叶片为外植体,研究不同植物生长调节剂处理对丛生芽诱导、继代培养及生根的影响。结果以茎节为外植体诱导效果最好;丛生芽诱导最适培养基为MS+1 mg/L6-BA+1 mg/L NAA;继代培养较佳培养基为MS+1 mg/L IBA+3 mg/L 6-BA;适宜的生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA。结论过上述技术应用,可实现金线莲的快速繁殖,增殖系数可达5.2。     

菊叶薯蓣茎段离体快速繁殖技术研究

目的:建立菊叶薯蓣茎段快速繁殖体系,为其推广种植提供可行性。方法:利用植物组织培养技术,将菊叶薯蓣带腋芽的茎段斜插入不同培养基中培养,诱导其成为完整植株并进行炼苗和移栽。结果:在诱导培养基MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA中,芽苗诱导率达93.33%,效果最佳;生根诱导用1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.5mg/L KT培养基,生根率可达89.73%;试管苗移栽成活率达98%以上。结论:所建立的菊叶薯蓣快速繁殖体系是高效可行的。     

滇杠柳茎段和顶芽组织培养及植株再生研究

目的:建立滇杠柳(Periploca forrestii Schlt)茎段和顶芽快速繁殖体系,为其推广种植提供可行性。方法:利用植物组织培养技术,将滇杠柳茎段和顶芽插入含有不同浓度6-BA(6-苄基腺嘌呤)、NAA(萘乙酸)和2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的MS培养基中培养,诱导其成为完整植株。结果与结论:顶芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,其中芽的诱导率可达到86.29%;茎段诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,芽的诱导率可达到56.67%;增殖的最佳培养基配方都为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系数达到2.10;生根培养基最好为1/2 MS+IBA(吲哚丁酸)0.5 mg/L,生根率达到53.33%。     

植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响

目的:研究植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响,建立地榆无性系快繁技术体系。方法:采以地榆叶茎和花茎为外植体,接种到添加不同激素的培养基上,分别进行丛生芽途径和愈伤组织植株再生的组培快繁。结果:花茎在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA培养基中诱导丛生芽的生长情况最好,在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中次之;叶茎在4种诱导丛生芽培养基中均不能诱导出丛生芽。继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,丛生芽均生长情况良好。结论:建立了地榆无性系快速繁殖技术体系。     

泰山四叶参的组织培养与快速繁殖

目的:通过对泰山四叶参组织培养的研究,以达到快速繁殖和种质保护的目的,并为四叶参的商业化生产提供科学依据。方法:利用植物组织培养技术,对四叶参愈伤组织和不定芽的诱导、继代增殖,幼苗的生根、移栽,原生质体的分离及初步培养等方面进行研究。结果与结论:四叶参愈伤组织诱导的理想材料是绿色幼嫩茎段,诱导培养基:MS+NAA 1 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,诱导率为100%。增殖培养基:MS+NAA 0.1mg/L+2,4D 0.01 mg/L+6-BA 0.01 mg/L,20 d增殖率为2.07倍。茎尖在培养基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1中诱导出了球形菜花状愈伤组织,为愈伤组织和畸形幼苗的混合体,生长迅速而稳定,20 d的增殖倍率达2.8倍,明显高于茎段愈伤组织的增殖。诱导出苗培养基:MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.02 mg/L,30 d的诱导率达95%,平均每块愈伤出苗9.3个。生根培养基为:MS+NAA 0.01 mg/L或MS+IBA 0.01 mg/L,生根率分别达95%和91%。     

铁皮石斛原球茎高效再生体系的研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale实生种子为外植体,研究铁皮石斛原球茎的增殖、分化、诱导生根等条件,筛选出适宜铁皮石斛原球茎高效再生的诱导条件,建立高效的再生体系。方法以铁皮石斛种子为外植体,在培养基上诱导产生原球茎,经过增殖培养后,转移到分化培养基中诱导芽苗分化,待分化的芽苗长到1~2 cm时,转移到生根培养基诱导生根,最终长成完整的再生植株。结果适宜铁皮石斛生长的基本培养基为1/2 MS;原球茎诱导的培养基为1/2 MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+50 g/L土豆泥;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高增殖系数达23;最佳分化培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,平均分化率最高达95%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L NAA+50 g/L土豆泥,生根率达100%。结论铁皮石斛实生种子是铁皮石斛离体繁殖的优良外植体来源。以铁皮石斛种子诱导获得的高效再生技术体系可以为铁皮石斛快速繁殖和工厂化生产提供理论基础。     

无花丹参的脱毒培养及植株再生

目的:建立应用于无花丹参快速繁殖的组织培养体系。方法:以茎尖为材料,优化其脱毒培养和植株再生的激素浓度组合,筛选出最佳组合。结果:在添加适宜浓度6-BA(1.5 mg/L)和NAA(0.1 mg/L)的MS培养基上能有效诱导茎尖的芽发生,诱导率可达90.8%。丹参叶片愈伤组织诱导与继代增殖的适宜培养基为2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA;最佳分化培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,芽发生率达到90%;1/2MS+0.5mg/L IBA适宜于试管苗生根。结论:所建立的无花丹参植株再生体系可为解决丹参栽培中的资源和质量问题以及在分子水平进行品种改良打下了良好基础。     

植物生长调节素对黑果菝葜组织培养的影响

目的:建立黑果菝葜Smilax glauco-china Warb.的组织培养繁殖体系。方法:以黑果菝葜的幼嫩茎段为外植体,MS、1/2MS为基本培养基,利用正交设计研究不同植物生长调节素多因素组合(6-BA、NAA、IAA和IBA)对黑果菝葜初代诱导、继代增殖及诱导生根的影响。结果:黑果菝葜最佳的初代诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L;利于继代增殖的培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L,增殖倍数为6.3;最佳的诱导生根培养基为1/2MS+NAA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+AC 1.0 g/L,生根率达到70%。结论:建立了黑果菝葜的组织培养繁殖体系,可为人工种植提供健壮种苗。     

臭参组培快繁体系研究

目的:建立臭参腋芽增殖和不定丛芽快速繁殖体系,筛选适宜高效的离体再生途径。方法:选取无菌实生苗高位带芽茎段为腋芽增殖材料、基茎不定休眠芽为丛芽增殖材料,采用不同种类和质量浓度的植物激素对外植体增殖及植株再生进行研究。结果:2种外植体中,基茎不定休眠芽是最理想的增殖材料,其继代增殖适宜的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L,增殖系数21.0以上;高位带芽茎段是腋芽增殖的适宜材料,在MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L培养30 d后,腋芽增殖系数为4.55;生根的适宜培养基为30%蔗糖的1/2 MS培养基,30 d后即可获得完整的再生植株,不定根发生率为90.33%;将生根苗炼苗移栽至腐殖质土壤中,成活率达到100%。结论:成功建立了臭参2种离体再生途径。     

珐菲亚组织培养条件的优化研究

目的 优化珐菲亚组织培养快速繁殖技术.方法 分别以MS和1/2MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、IBA和IAA)对珐菲亚继代增殖和诱导生根的影响.结果 MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L利于丛生芽继代增殖,30 d繁殖系数6.0以上;1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L适于诱导生根获得再生植株,生根率100％;生根苗移栽于排水良好的沙床上,成活率98％.结论 本实验为保护珐菲亚的野生资源,发展人工栽培和探讨育种新途径奠定基础.     

五指毛桃组织培养获得再生植株的研究

目的采用组织培养快繁技术培养五指毛桃种苗,为人工种植提供种源。方法采用五指毛桃叶片作外植体,以MS和1/2 MS为基本培养基,采用正交设计研究植物生长调节剂多因素组合(6-BA、NAA、2,4-D、IAA、KT和IBA)对五指毛桃初代诱导、不定芽分化和诱导生根的影响。结果不定芽最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,外植体经20 d诱导培养,可分化形成不定芽72个;MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L KT最利于不定芽继代增殖,增殖倍数6.67;1/2 MS+1.0 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA最适于诱导生根获得再生植株,生根率100%;宜移栽于泥炭-珍珠岩(1︰1)的基质上,成活率为93%。结论此途径繁殖速度快、再生率高,能为栽培五指毛桃提供大量种苗。     

珊瑚樱丛芽高效诱导体系及植株再生研究

目的以珊瑚樱Solanum pseudo-capsicum种子为实验材料,建立珊瑚樱高效、稳定的丛芽诱导体系,优化组织培养条件,筛选出适宜的植株再生途径。方法将消毒后的种子接种于空白MS、OM和WPM培养基中,培养45 d后获得无菌苗;在此基础上,选取茎尖、带芽茎段和叶片为外植体材料,通过正交试验研究不同基本培养基和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果适宜珊瑚樱生长的基本培养基为WPM;3种外植体中叶片是最适宜诱导愈伤组织的材料,在WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L中可在7d内诱导出分化能力极强的愈伤组织,得愈率为100%,10d内即分化为大量绿色丛芽,愈伤组织丛芽分化率亦达100%;带芽茎段在上述培养基中亦能诱导出愈伤组织,得愈率为81.7%,20 d后开始分化出丛芽;而茎尖可以诱导出愈伤组织,但无再分化能力。适宜丛芽增殖培养基为WPM+6-BA 0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,30d增殖系数6.0以上。无菌苗生根则在1/2WPM+NAA0.01 mg/L中进行,30 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。生根苗移栽至排水良好的沙土中,保温保湿培养25 d后,成活率90%以上。结论为保持珊瑚樱优良品种特性、种苗繁殖提供了有效途径,也为其优良品种的培育和遗传转化研发奠定了良好基础。     

滇龙胆丛芽高效诱导与植株再生体系的建立

目的以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径。方法以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73%;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100%;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5mg/L中培养30 d后,增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础。     

青叶胆组织培养条件优化及不同交配方式子代植株再生能力比较研究

目的优化青叶胆Swertia mileensis组织培养快速繁殖技术,同时比较不同交配方式后代植株的再生能力,从而探讨青叶胆片断化居群繁殖保障机制。方法以自交、近交、远交和自然结实种子为材料,相同方法消毒后接种于空白MS培养基上,60 d后统计各组萌发率;在此基础上,以各组无菌苗带节茎段为外植体,采用正交试验考察不同来源外植体在添加不同植物激素及质量浓度组合的MS培养基中诱导愈伤组织及丛芽分化能力。结果自交、近交、远交和自然结实种子萌发率之间无显著性差异(P0.05);适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+ZT 0.5 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L,在此培养条件下,自交、近交、远交和自然结实种子苗带节茎段愈伤组织诱导率分别达100%、96.67%、96.55%和96.29%,各组间无显著性差异;适宜的丛芽发生培养基为MS+BA 2.0 mg/L+KT 0.1 mg/L+NAA 1.0 mg/L,4种来源不同的愈伤组织丛芽分化率均为100%;生根则在1/2 MS+NAA 1.0 mg/L中进行,4种来源不同的试管苗生根率均为100%,生根苗在生长势上亦无明显差别。结论优化的青叶胆组织培养快速繁殖技术,为保护其野生资源、种苗繁殖提供了有效途径,同时从植物生理学角度初步推测青叶胆近交的获益可以补偿与近交相伴的适合度损失,其后代植株在再生能力方面与异交无显著差异。     

黑果枸杞基茎丛生芽诱导及植株高效再生体系的建立

目的优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系。方法以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L_9(3~4)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35 d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100%,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9%;试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。     

华重楼植株的快速繁殖研究

目的以华重楼Paris polyphylla var.chinensis根茎为外植体,建立华重楼植物的快速繁殖技术。方法以MS为基本培养基,通过研究激素6-BA、2,4-D、NAA、IBA、KT、IAA和头孢曲松钠、活性炭等对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根产生的影响,找出组培苗诱导培养的最佳培养基配方。结果华重楼最佳愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+KT 1.0 mg/L+头孢曲松钠300 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭0.5%。当组培苗长出第1片叶且不定根长出4条以上时将组培苗取出,先放在无菌水中栽培5 d,再移栽至松软土壤中,组培苗生长健壮,成活率为100%。结论在获得愈伤组织的基础上,进一步完成对不定芽的诱导与无根苗生根培养,筛选出了培育华重楼组培苗的最佳条件。     

箭根薯愈伤组织诱导及无性系的建立

目的 诱导箭根薯愈伤组织及建立无性系.方法 以箭根薯野生种为材料,采用不同激素组合对不同部位(根茎、叶片、叶柄)进行诱导,对比诱导效果,筛选出最佳部位及各个生长阶段的最佳激素组合.结果 外植体的消毒以0.1％ HgC12溶液处理8 min的效果最佳;诱导愈伤组织最佳外植体为叶柄;愈伤组织诱导的最佳培养基是MS +6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,在此培养基上使用叶柄诱导愈伤组织的诱导率达到100％;不定芽诱导分化的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,分化率高达90％;生根诱导的最佳培养基为含1/2 MS+NAA 0.5 mg/L,生根率高达100％.结论 筛选出诱导箭根薯愈伤组织最佳诱导外植体及激素组合.     

老鸦瓣芽茎组织培养初步研究

目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体,MS为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,愈伤诱导率78.54%,诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化;愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,芽诱导率为66.21%;丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基,初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。