表达IκBα突变体的树突状细胞对大鼠移植肾存活时间的影响

目的 观察IκBα突变体基因修饰的供体树突状细胞(IκBαM-Dc)对大鼠移植肾存活时间的影响.方法 利用重组腺病毒载体将IκBαM基因转染WF大鼠骨髓DC,流式细胞仪检测DC共刺激分子CD80、CD86表达.以wF大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,行同种肾移植.术前7 d,受体输注供体IκBαM-DC作为IκBαM组,未输注IκBαM-DC的受体作为对照组,观察移植肾存活时间和术后肾功能变化.术后第14天检测受体T细胞对供体成熟DC及第三方大鼠成熟DC的反应性.结果 IκBαM明显抑制DC共刺激分子CD80、CD86表达.IκBαM组受体鼠移植肾存活时间为(32.5±7.8)d,较对照组移植肾存活时间(8.5±1.7)d明显延长(P<0.01);而其术后7 d血清肌酐为(57.3±8.2)μmol/L,较对照组血清肌酐(498.0±46.3)μmol/L明显减低.肾移植术后,IκBαM组受体T细胞对供体成熟DC反应明显低于对照组,而对第三方大鼠成熟DC的反应性与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 表达IκBα突变体的供体树突状细胞能诱导受体大鼠T细胞对供体抗原的免疫低反应,显著延长大鼠移植肾存活时间.     

IκBα突变体对树突状细胞成熟及其信号通路的影响

不成熟树突状细胞（DC）低表达共刺激分子，通过T细胞凋亡、无能及调节性T细胞增多等多种机制诱导免疫耐受。如何有效抑制DC成熟从而诱导免疫耐受是移植免疫的重要课题。不成熟DC发育为成熟DC主要由NF—κB信号通路控制。我们利用IκBα突变体（MMM）阻断NF-κB活化，观察它对DC成熟的影响。     

人IκBα突变体在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用

目的探讨人IκBαM在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法将DA→Lewis大鼠原位肝移植模型分3组:组I为对照组,组Ⅱ为PcDNA 3．0组,组Ⅲ为PcDNA 3．0-IκBαM组。观察生存时间、肝脏组织病理、肝功能,流式细胞仪检测抗原递呈细胞(APC)表面CD80、CD86,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-2的表达。结果Ⅲ组与I、Ⅱ组相比较:(1)受体存活时问明显延长,差异有统计学意义[(23．0±6．5)d比(14．0±4．3)d;(23．0±6．5)d比(13．5±4．5)d, P<0．05];(2)移植后7 d汇管区轻、中度量淋巴细胞浸润;(3)肝功能指标术后3、7 d差异有统计学意义(P<0．05);(4)术后3 d APC表面CD86表达水平明显降低[(22．46±4．53)％比(37．29±4．15)%;(22．46±4．53)%比(35．82±3．92)％,P<0．05],术后7 d APC表面CD80的表达水平明显降低[(24．47±7．10)％比(45．70±5．22)％;(24．47±7．10)％比(43．27±6．38)％,P<0．05],差异有统计学意义;(5)术后3、7 d血清IL-2明显降低,以7 d为显著[(578．65±85．50)ng／L比(973．24±102．47)ng／L;(578．65±85．50)ng／L比(1 021．10±125．32)ng／L,P<0．05]。结论IκBαM可通过抑制APC表面共刺激分子的表达在急性排斥反应中发挥保护作用。     

负压封闭引流对创面细胞黏附分子-1表达及IκBα磷酸化的影响

目的 观察负压封闭引流技术(VSD)对创面细胞黏附分子-1(ICAM-1)表达及IκBα 磷酸化的影响.方法 每组建立24例Sus scrafa猪背急性感染创面模型,VSD治疗为实验组,120 mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa)负压持续吸引,常规换药治疗为对照组,对创面炎性反应、ICAM-1 表达及IκBα磷酸化的水平进行分析.结果 与对照组比较,VSD组减轻感染创面炎性反应,ICAM-1 表达相对值0.60±0.08,显著低于对照组1.01±0.06(P ＜0.05),VSD显著减少IκBα磷酸化(40±9)％,(P＜0.05).结论 负压封闭引流减少IκBα磷酸化,抑制感染创面ICAM-1的表达,明显减轻感染创面炎性反应.     

NF-κB/P65,p-IκBα,IκKα在皮肤SCC和BCC中的表达和意义

目的:探讨NF-κB信号转导通路中真核细胞转录因子κ(BNF-κB/P65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)以及真核细胞转录因子抑制蛋白激酶(IκKα)在皮肤SCC和BCC中的表达和三者之间关系,为临床治疗提供新思路。方法:采用免疫组化SP法检测53例皮肤癌组织(其中SCC27例,BCC26例)和20例正常皮肤组织中NF-κB/P65,p-IκBα和IκKα蛋白的表达。结果:与正常皮肤组织相比,NF-κB/P65,p-IκBα和IκKα三者在SCC,BCC中均高表达(P<0.05);三者在SCC和BCC中的表达具有统计学意义(P<0.05);IκK蛋白的表达与SCC的分化程度无明显相关性(P>0.05)。在BCC和SCC中,IκKα的表达与p-IκBα的表达呈正相关关系(r=0.536,P<0.05),NF-κB/P65和p-IκBα的表达呈正相关关系(r=0.435,P<0.05)。结论:NF-κB信号传导通路可能在BCC和SCC的发生中起重要作用。     

核转录因子κB与前列腺癌

核转录因子κB(nuclearfactorofkappaB ,NF κB)是一种多极性核转录因子 ,参与调控多种与免疫反应、凋亡、炎症、肿瘤形成和转移有关的基因表达。近年来 ,NF κB在肿瘤发生、耐药、转移中的作用及其机制逐渐成为医学研究的热点。本文主要综述了NF κB的结构、生物学功能及其抗凋亡诱发肿瘤的机制 ,NF κB调控的前列腺癌相关基因的表达和调控 ,NF κB参与前列腺癌浸润与转移的机制及其在前列腺癌基因治疗中的可能策略等。     

龙葵碱对前列腺癌细胞系PC-3的体外抑制作用

目的:探讨龙葵碱对雄激素非依赖型人前列腺癌PC-3细胞的体外抑制作用及其机制。方法:分别用0、30、40、50μg/ml浓度的龙葵碱作用PC-3细胞,12、24、48 h后应用CCK-8法检测细胞生长活性、24 h后流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡变化,荧光显微镜观察细胞凋亡,24 h后应用Western印迹方法检测细胞内IкBα和Bcl-2蛋白的表达。结果:龙葵碱能显著抑制PC-3细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度龙葵碱组之间与不同作用时间组之间的差异具有显著性意义(P均<0.05)。龙葵碱诱导PC-3细胞出现S期阻滞(P<0.05),各浓度组凋亡细胞比例均高于对照组,差异有显著意义(P均<0.05);不同浓度龙葵碱作用后,可以上调细胞内IкBα蛋白表达,下调Bcl-2蛋白的表达。结论:龙葵碱可以通过抑制PC-3细胞增殖、诱导凋亡、活化PC-3细胞中IкBα蛋白以及抑制Bcl-2蛋白表达等机制发挥抗前列腺癌作用。     

IκB-α基因转染HCC9204细胞对NF-κB和MMP-9表达的影响

目的观察高转移性人肝癌细胞系HCC9204转染抑制性κB基因(IκB-α)后核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的改变。方法采用脂质体法将IκB-α基因转染HCC9204细胞,应用Western-blot及RT-PCR法检测MMP-9和NF-κB的表达;通过基底膜侵袭实验检测肿瘤细胞的浸润和转移能力。结果HCC9204细胞转染pcDNA3-IκB-α后,细胞内NF-κB蛋白表达下降,同时伴随MMP-9mRNA表达水平和细胞侵袭、转移能力的明显下降。结论NF-κB活性被抑制后引起细胞侵袭、转移能力的下降可能是由于MMP-9表达下降所致。     

BMS-345541通过抑制IκB激酶/核因子-κB信号通路诱导人脑胶质瘤细胞凋亡

目的 观察IκB激酶(IKK)高度选择性抑制剂BMS-345541对胶质瘤细胞凋亡的影响及其机制.方法 不同浓度BMS-345541作用于人脑胶质瘤细胞株U87MG后,采用Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡,荧光素酶核因子-κB(NF-κB)报告基因法检测NF-κB活性,免疫印迹法检测bcl-2、Caspase-3和NF-κB胞核定位.结果 终质量浓度1、10、20 μmol/L BMS-345541作用U87MG细胞24 h后,细胞凋亡率分别为(18.2±2.2)%、(49.3±3.6)%、(73.3±8.9)%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).BMS-345541处理U87MG细胞后,bcl-2蛋白表达减少、Caspase-3被激活;NF-κB转录启动子的活性下降(66.2±5.1)%(P＜0.01),NF-κB p65亚单位核移位被抑制.结论 BMS-345541可通过抑制IKK/NF-κB信号通路诱导人胶质瘤细胞凋亡.     

变异型IκBα抑制胶质瘤中Epo、EpoR的表达及肿瘤生长的研究

目的 探讨变异型IκBα(IκBαM)基因对人类多形性胶质母细胞瘤(GBM)细胞中促红细胞生成素(Epe)和其受体(EpoR)表达的调控作用及其与肿瘤血管新生的关系.方法 建立稳定表达IκBαM的人类GBM细胞株并制作裸鼠皮下异位移植瘤生长模型,采用免疫组织化学法分析肿瘤组织中Epo、EPOR和FactorⅧ的表达.同时分析肿瘤组织中的微血管密度以及运用流式细胞术分析凋亡率.结果 各组肿瘤组织中,Epo的阳性细胞表达率分别为(54.8±12.4)%(G36△组)、(65.7±15.6)%(G36△-W组)、(6.1±10.1)%(G36△-M组)和(68.3±11.4)%(G36△-P组);EpoR的阳性表达率分别为(33.6±16.4)%(G36△组)、(37.3±13.9)%(G36△-W组)、(2.5±17.5)%(G36△-M组)和(37.2±14.4)%(G36△-P组).Epo和EPoR在G36△-M组中的表达显著低于其他三组,而在后三组间的表达差异无统计学意义.各肿瘤组织中肿瘤细胞凋亡率分别为(8.31±1.85)%(G36△组)、(8.06±2.08)%(G36△-W组)、(28.35±3.26)%(G36△-M组)及(7.40±2.35)%(G36△-P组),G36△-M组中的肿瘤细胞凋亡率明显高于其他三组;而G36△-M组中的微血管密度明显低于其他各组.结论 IκBαM基因可显著降低人类恶性胶质瘤中Epo和EpoR的表达,进而减弱肿瘤细胞的促血管新生的能力,促进肿瘤细胞凋亡,从而抑制肿瘤组织的生长.     

前列腺癌近距离放疗

永久性放射性种子植入的前列腺癌近距离放疗(brachytherapy)在近10余年来正越来越广泛地应用于早期前列腺癌的治疗，由于这一方法具有良好的长期生存率、减少了尿失禁和性功能障碍的发生率，在美国以及其他西方国家已经成为前列腺癌的主要治疗手段之一。本文综述前列腺近距离放疗的发展、技术、生存率和生活质量的问题。     

核转录因子抑制蛋白α突变体对大鼠急性胰腺炎的保护作用

目的 观察核转录因子抑制蛋白α突变体(IκBαM)对大鼠急性胰腺炎的保护作用.方法 蛙皮素诱导建立SD大鼠急性胰腺炎模型.分4组:空白对照组A组、急性胰腺炎组B组、转染PcDNA3.0组C组、转染PcDNA 3.0-IκBαM组D组.分别于24 h检测各组血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、淀粉酶的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织中Fas、FasL、Caspase-3、mRNA的表达;组织学检测胰腺腺泡细胞坏死情况.结果 D组与B、C组比较:血清TNF-α、淀粉酶表达水平明显降低,差异有统计学意义[TNF-α(587±93比915±102;587±93比897±116);淀粉酶(6773±663比8973±825;6773±663比9021+_763),P＜0.05];胰腺组织Fas、FasL、Caspase-3 mRNA表达明显升高,差异有统计学意义[Fas(0.572±0.103比0.473±0.084;0.572±0.103比0.468±0.071);FasL(0.627±0.124比0.397±0.084;0.627±0.124比0.391±0.072);Caspase-3 (0.893±0.142比0.513±0.122;0.893±0.142比0.508±0.130),P＜0.05];胰腺组织腺泡细胞坏死明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).B、C、D组与A组表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IκBαM通过诱导胰腺腺泡细胞凋亡对大鼠急性胰腺炎发挥保护作用.     

NF-κB抑制剂对前列腺癌PC-3细胞STAT3核转位的影响

目的:观察IL-6刺激后的前列腺癌PC-3细胞STAT3和NF-κB的表达情况;验证NF-κB抑制剂咖啡酸苯乙基酯(CAPE)对PC-3细胞IL-6和STAT3表达的影响。方法:20 ng/ml IL-6分别作用于PC-3细胞0、5、10、20、30、45 min后,Western印迹和实时荧光定量PCR检测STAT3和NF-κB蛋白和mRNA水平的表达差异;流式细胞技术检测细胞周期。采用TNF-α或TNF-α联合CAPE作用于PC-3细胞,收集培养液上清,ELISA检测IL-6的表达;同时用Western印迹检测p-STAT3的表达。结果:IL-6刺激PC-3细胞后,p-STAT3蛋白的表达明显上调,细胞增殖指数明显增高。TNF-α作用于PC-3细胞后,培养液中IL-6的表达上调,同时p-STAT3蛋白的表达亦上调(P<0.05)。CAPE联合TNF-α作用于PC-3细胞后,培养液中IL-6的表达及p-STAT3蛋白的表达均明显低于TNF-α作用后的表达水平(P<0.05)。结论:CAPE能抑制TNF-α引起的IL-6的分泌,从而抑制IL-6引起的STAT3核转位;通过CAPE抑制NF-κB表达,继而影响STAT3等相关细胞信号传导途径,可能成为前列腺癌治疗的一条新途径。     

人类多形性胶质母细胞瘤中变异型IκBα基因抑制血管新生的研究

目的研究变异型IκBα（IκBαM）基因在人类多形性胶质母细胞瘤（GBM）中对血管新生的抑制作用。方法选用IκBαM基因转染的胶质瘤细胞株，通过制备血管新生及异位肿瘤生成两组动物模型，检测新生血管的数量及肿瘤中血管生长因子VEGF及IL-8的表达，分析IκBαM对肿瘤中血管新生的作用。结果IκBαM基因转染的人类GBM细胞中。新生血管数量显著减少，诱导形成的异位胶质瘤中的VEGF及IL-8的表达量也显著降低。结论IκBαM基因可有效抑制胶质瘤中的血管新生从而抑制肿瘤的生长，这可作为人类多形性胶质母细胞瘤抗血管治疗的理论基础。     

NF-κB／P65，p-ⅠκBα，ⅠκKα在皮肤SCC和BCC中的表达和意义

目的：探讨NF-κB信号转导通路中真核细胞转录因子κB（SF—κB／P65）、磷酸化NF—κB抑制蛋白（p—ⅠκBα）以及真核细胞转录因子抑制蛋白激酶（ⅠκKα）在皮肤SCC和BCC中的表达和三者之间关系，为临床治疗提供新思路。方法：采用免疫组化SP法检测53例皮肤癌组织（其中SCC27例，BCC26例）和20例正常皮肤组织中NF-κB／P65，p-ⅠκBα和ⅠκKα蛋白的表达。结果：与正常皮肤组织相比，NF-κB／P65，p-ⅠκBα和ⅠκKα三者在SCC，BCC中均高表达（P〈0．05）；三者在SCC和BCC中的表达具有统计学意义（P〈0．05）：IκK蛋白的表达与SCC的分化程度无明显相关性（P〉0．05）。在BCC和SCC中，ⅠκKα的表达与p-ⅠκBα表达呈正相关关系（r=0．536，P〈0．05），NF—κB／P65和p—ⅠκBα表达呈正相关关系（r=0．435，P〈0．05）。结论：NF—κB信号传导通路可能在BCC和SCC的发生中起重要作用。     

亚洲种族对局限性前列腺癌根治性放疗结局的影响

从1994年起,作者随访了1872例接受治愈性强化放疗的前列腺癌病人。将所有病例分为亚裔(63例,3.6％)和非亚裔(1804例,96.4％)两组。依据治疗前前列腺特异抗原(PSA)、活检(Gleason评分和临床肿瘤分期将病例危险程度分为3组。统计分析采用Kaplan-Meier法分析总的相关性和每一危险组生存情况,并比较亚裔和非亚裔组之间的差异。亚裔和非亚裔组病     

激素难治性前列腺癌的化疗进展

雄激素非依赖性状态的出现是前列腺癌死亡的最后原因 ,本文复习文献中有关激素难治性前列腺癌(HRPC)化疗的报道 ,迄今为目 ,没有一个化疗方案被证实可以延长HRPC患者的寿命 ,仅米托 艹恩 醌加用肾上腺皮质激素对骨痛症状的缓解有较为确实的作用。     

烧伤血清对内皮细胞核因子-κB核移位的影响

目的　了解烧伤血清对内皮细胞核因子 κB (NF κB)异二聚体 p5 0 /p6 5核移位 ,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响 ,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用。方法　采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4 ,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐 (PDTC)刺激内皮细胞 ,并以正常培养的内皮细胞为对照。应用激光共聚焦显微镜观察刺激 30、6 0、12 0、4 80min后内皮细胞 p5 0 /p6 5核移位情况 ,采用Western印迹法检测刺激 30、6 0、90、12 0min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况。　结果　与对照组比较 ,烧伤血清刺激内皮细胞 30min后 ,p5 0、p6 5即发生核移位 ,30～ 6 0min达高峰 ,2h后恢复至刺激前状态 ;而烧伤血清刺激 30min后 ,IκBα发生降解 (P <0 .0 1) ,刺激 4 5～ 6 0min后最为明显 ,2h后表达逐渐恢复。PDTC能有效抑制烧伤血清作用 30、6 0min后 ,p5 0、p6 5的核移位和IκBα降解。 　结论　烧伤血清可导致内皮细胞NF κBp5 0、p6 5发生核移位 ,并使IκBα降解 ,进而活化NF κB ,诱导内皮细胞分泌细胞因子。PDTC对这一系列变化可能有抑制作用