RNA干扰及其在肿瘤研究中的应用

RNA干扰(RNAi)是近年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,该技术通过双链RNA的介导,可以特异性地阻断或降低相应基因的表达。在肿瘤研究中,通过RNAi技术可以选择性地抑制人类肿瘤相关基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长。该技术的应用为癌症的基因治疗提供了新的方法。本文综述了小干扰RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)的生成和作用机制以及RNAi在肿瘤研究中的应用。     

RNA干扰与胶质瘤的基因治疗

RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术是一种新兴的由外源性或内源性的双链RNA介导的转录后基因沉默技术。RNAi可以使目标基因低表达或完全不表达。随着RNAi技术研究的不断进展，RNAi已成为研究基因功能和探索基因治疗的重要工具。本文就RNAi技术及其在胶质瘤治疗中的研究进展作一介绍。     

RNAi在肿瘤治疗中应用的研究进展

RNA干涉(RNAi)是近年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,该技术通过双链RNA的介导,可以特异性地阻断或降低相应基因的表达。在肿瘤研究中,通过RNAi技术可以选择性地抑制人类肿瘤相关基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长。该技术的应用为癌症的基因治疗提供了新的方法。本文综述了RNAi在肿瘤研究中的应用。     

RNA干扰技术及其在神经病学中的研究进展

RNA干扰(RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象,其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。微RNA(miRNA)在哺乳动物的大脑的不同区域具有不同的作用,并且RNAi在大脑的发育过程中具有重要的作用,miRNA具有调控多种目的基因表达的功能。由于神经元一旦受到损害就很难恢复正常的特性,目前RNAi被认为是治疗和改善神经变性疾病最有潜力的的技术。目前治疗性RNAi已运用于多种神经退行性疾病的体内和体外研究当中(如遗传肌张力障碍、阿尔茨海默病等),但其运用于临床治疗仍需进一步的研究。     

Ku70 基因RNA 干扰载体的构建及干扰效果鉴定

目的构建靶向Ku70基因的RNA干扰(RNAi)表达载体并进行RNAi效果鉴定。方法设计3个针对Ku70基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染Hela细胞系。在转染24、48、72 h后,通过免疫印迹分析检测Ku70蛋白的表达量。把RNAi效果最显著的siRNA设计成短发夹RNA(short-hairpin RNA,shRNA),克隆入pSi-lencerTM 4.1-CMV hygro载体,转染Hela细胞系并筛选稳转细胞株,在mRNA和蛋白水平,评估Ku70 siRNA的干扰效果。结果 siRNA转染Hela细胞24、48 h后,Ku70蛋白的表达没有显著变化,但在72 h后,蛋白的表达量显著下降。在具有稳定表达siRNA的稳转细胞株中,Ku70基因的表达在mRNA水平和蛋白水平都受到了非常明显的抑制。结论成功构建靶向Ku70基因RNAi载体,并筛选出效能最优序列,为进一步研究Ku70基因的表达与宫颈癌放射治疗敏感性的关系奠定了基础。     

RNA干扰——一种有力的基因沉默工具

RNA干扰(RNAi)自从1998年被阐明以来,一直是科学研究的一大热点。短短几年,基于此机制建立的技术,在功能基因组学、微生物学、基因表达调控机制研究等领域得到了广泛应用,已经成为一种有力的基因沉默方法。尤其对非编码RNA中的短干扰RNA与微小RNA的研究日益受到重视。本文从RNAi技术的发展、作用机制及应用等方面进行综述。     

RNA干涉（RNAi）机制及其在医学研究中的应用

RNAi（RNAinterference，即RNA干涉）是指通过反义RNA与正链RNA形成双链RNA特异性地抑制靶基因的转录后表达的现象，它通过人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA（正义RNA和反义RNA），从而诱导内源靶基因的mRNA降解，达到阻止基因表达的目的。自1998年，Fire小组发现线虫体内存在RNAi（RNA interference，RNAi）现象以来，随后又发现RNAi广泛地存在于植物、果蝇、拟南芥、斑马鱼、小鼠甚至锥虫等大多数真核生物中，具有广阔而重要的生物学意义，并且在医学研究与应用中得到了广泛的关注。     

基因沉默的工具-RNA干扰技术的研究进展

<正>RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指与靶基因序列同源的双链RNA(dsRNA)所诱导的转录后基因沉默现象,是真核生物抵御病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制,也可替代基因敲除、核酶、反义核酸等进行基因沉默相关研究。众所周知,基因的表达具有选择性,我们发现生物体内存在一套RNA监视系统,能通过多种途径产生异常dsRNA,诱发RNAi,激活抑制基因,控制活跃基因,从而参与基因选择性表     

RNA干扰在血液病研究中的应用

去除或降低某个或某些基因在细胞或机体中的表达,是研究正常基因的结构、功能以及疾病的发病机制的重要手段,基因敲除和反义技术是既往常用的实验技术,但存在操作复杂、不易控制、结果不稳定、无法预知实验效果等缺点.近年来RNA干扰(RNAi)技术的开发和利用,成为基因研究的新手段.RNA干扰是由双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)触发的转录后基因沉默机制,广泛存在于动物、植物等真核生物界.     

siRNAs介导的基因沉默技术和相关应用的研究进展

RNA干扰（RNAi）是由双链RNA（double-slranded RNA,dsRNA）介导的、序列特异的转录后基因沉默机制,是一古老的细胞反应通路,其在抵抗病毒感染、抑制转座子活动、调控内源性基因表达等方面发挥重要作用。近年来,短链RNA干扰（siRNAs）已成功地应用于哺乳动物中,该文就其介导的基因沉默技术和相关应用的研究进展进行综述。     

RNA干扰及其应用

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double—stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。     

RNA干扰技术在疾病治疗学上的应用研究

RNA干扰(RNAi)是一种广泛存在于各种真核细胞，由小干扰RNA(siRNA)介导对靶mRNA选择性识别和降解的转录后基因沉默现象。通过病毒或质粒栽体在培养细胞中转染外源性siRNA的RNAi技术被广泛用于基因功能的研究。临床研究表明，RNAi技术可选择性地消除疾病相关蛋白的表达，在疾病治疗学领域内具有可观的应用前景。     

应用RNA干扰抑制目的基因在小鼠体内表达

目的研究RNA干扰(RNAi)对体外和体内基因表达的沉默作用。方法以PCR方法从基因组DNA中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成;构建特异性针对目的基因(绿色荧光蛋白,GFP)的RNAi载体(Pi)。将RNAi干扰载体和GFP载体转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察、RT-PCR、流式细胞技术(FACS)分析上述细胞中RNAi对目的基因GFP表达的抑制效果,进一步在个体水平将RNAi载体注入小鼠体内,研究RNAi对GFP表达的抑制情况。结果RNAi能有效地使NIH3T3细胞中GFP表达量降低约60%以上,并能有效地抑制GFP在转基因小鼠体内的表达。结论RNAi技术能抑制目的基因在体内外的表达,是一种有效的基因治疗工具。     

siRNA阻抑Survivin基因表达对肝癌细胞周期的影响

应用RNA干扰技术(RNAi)对siRNA抑制肝癌细胞株内源Survivin基因的表达进行研究。笔者通过Western blot和半定量RT-PCR技术来检测Survivin蛋白的表达和mRNA转录水平的变化,观察小分子干扰RNA(siRNA)对肝癌细胞细胞周期的影响,并对RNAi技术的作用机制及在肿瘤基因治疗方面的实验研究做一综述。     

短发夹RNA及其在头颈肿瘤研究中的应用

RNA干扰(RNAi)是一种分子生物学上由双链RNA(dsRNA)诱发的特定基因沉默现象。随着该项技术的不断发展,以质粒、病毒为载体表达的短发夹RNA(shRNA)具有更强大的基因沉默作用,可使目的基因在细胞内稳定增殖并获得长效剔除效应。近年来,以shRNA为工具的RNAi技术开始在体内外各项实验中应用并取得突破,包括功能基因组学、药物靶点筛选、细胞信号转导通路分析及疾病治疗等,尤其在肿瘤领域显示出广阔的应用前景。     

RNA干扰技术基础与病毒学应用

RNA干扰(RNAi)是指由双链RNA始动的序列特异性转录后基因沉默机制，Fire等首先用这一术语描述双链RNA阻滞线虫基因表达这一现象。现已证实，RNAi不仅存在于线虫，也存在于昆虫、植物、真菌和脊椎动物。1999年Tuschl等将果蝇胚胎提取物中小RNA介导的靶mRNA降解，提出了RNAi的作用模式：大于30个碱基对的长双链RNA(dsRNA)被加工成21～23nt的小干涉RNA(siRNA)，后者可介导特异性mRNA的降解。如今RNAi在发育生物学、基因调控、基因功能的研究以及肿瘤和病毒的基因治疗等方面发挥了重要的作用。