人脑胶质瘤细胞中IL—6mRNA的表达及意义

目的 观察白细胞介素－６（ＩＬ－６）ｍＲＮＡ在脑胶质瘤细胞中的表达。方法 采用逆转聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对２０例新鲜人脑胶持瘤标本进行了检测。结果 ２０例标本中有１７例表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ，恶性程度高的肿瘤中ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达量明显高于恶性程度低的肿瘤。结论脑胶质瘤细胞中ＩＬ－６基因的表达与脑胶质瘤的发生发展有关。     

白细胞介素10mRNA在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的　探讨白细胞介素 - 10 (IL - 10 )在人脑胶质瘤发生发展中的作用。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)方法检测 IL - 10 m RNA在人脑胶质瘤细胞中的表达。结果表明 ,17例新鲜人脑胶质瘤标本中有 15例表达 IL - 10 m RNA,提示免疫抑制因子 IL - 10在脑胶质瘤中的表达可能是导致脑胶质瘤患者免疫功能低下的原因之一。     

建立人脑胶质瘤恶性进展相关基因表达谱

目的：建立人脑胶质瘤恶性进展相关基因表达谱。方法：用微阵列技术对同一胶质瘤患者初发(WHOⅡ级)、复发(WHOⅢ级)和再发(WHOⅣ级)的3次手术标本中基因差异表达情况进行检测,并以第3次手术时切取的正常脑组织作为对照。结果：全组共获取16363个数据。3份肿瘤标本中,表达差异≥3倍的基因共197条。将含正常脑组织在内的4份标本进行两两比较,表达差异≥3倍的基因共489条(上调193,下调296)。再将已知功能的109条基因按出现频率排列,由高到低依次为发育、代谢、分化、信号传导、DNA结合转录、细胞受体、免疫、DNA合成修复重组、离子通道运输、蛋白翻译合成、细胞骨架运动、应激、原癌和抑癌、细胞凋亡、细胞周期相关基因。结论：从处于恶性进展不同阶段的人脑胶质瘤手术标本中发现了197条表达差异≥3倍的基因,同时经生物信息学分析,发现17条候选新基因,它们在胶质瘤发生与发展的分子机制中起重要作用。     

人脑胶质瘤研究20年

目的 总结人脑胶质瘤研究20年的经验，探讨进一步研究策略。方法 回顾1980至2000年在人脑胶质胶瘤的模型制作、化疗实验、抗体制备与应用、诱导分化、生物治疗等方面的创新点和不足之处的改进。结果 创新，建立了中国第一个人脑胶质瘤体外细胞系SHG－44及其可移植性裸小鼠NHG－1、杂交瘤单抗细胞株SZ38和SZ39及其在生物导向诊治中的应用、详细观察诱导分化剂HMBA和DMF的促分化效应等。改进，从SHG－44中克隆出具有高.中.低三个不同分化程度的细胞株，建立人鼠肿瘤免疫嵌合模型以弥补NHG－1不能用于生物免疫治疗的不足，SU2000替代效价不断下降的SZ39、基因工程改造SZ39为ScFv、Fab/Hu、ScFv/TNF、ScFv/PE40和化学偶联SZ39Fab/CD3Fab等小分子.低免疫原.双功能抗体。结论 胶质瘤研究举步为艰，随着分子生物学研究的深入和人类DNA密码的破译，传统治疗加生物.免疫和基因治疗有可能永久性治愈胶质瘤。     

人脑胶质瘤细胞中IL-6mRNA的表达及意义

目的观察白细胞介素－６（ＩＬ－６）ｍＲＮＡ在人脑胶质瘤细胞中的表达。方法采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对２０例新鲜人脑胶质瘤标本进行了检测。结果２０例标本中有１７例表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ，恶性程度高的肿瘤中ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达量明显高于恶性程度低的肿瘤。结论脑胶质瘤细胞中ＩＬ－６基因的表达与脑胶质瘤的发生发展有关。     

人脑胶质瘤的基因治疗进展

介绍了近年脑胶质瘤基因治疗基本原理与方法及基因治疗中有关细胞因子的研究进展。     

Th2类细胞因子优势表达在人脑胶质瘤发生及发展中的作用

目的 探讨Th1／Th2类细胞因子基因在人脑胶质瘤中的分泌及表达情况,以及它们在脑胶质瘤发生及发展中的作用。方法 以IL—2、IFNγ代表Th1类细胞因子,IL—4、IL—6及IL—10代表Th2类细胞因子,采用ELISA法检测脑胶质瘤细胞株培养上清中细胞因子的活性,采用逆转录聚合酶链反应方法(RT—PCR)检测Th1／Th2类细胞因子基因在脑胶质瘤细胞、肿瘤浸润淋巴细胞及细胞株中的表达情况。结果 人脑胶质瘤细胞、肿瘤浸润淋巴细胞及脑胶质瘤细胞株均呈现明显的Th2类细胞因子基因优势表达,而正常人脑组织中则无这种表达趋势。结论 Th2类细胞因子在人脑胶质瘤中的优势表达可能是导致脑胶质瘤患者细胞免疫功能低下的原因之一,有可能在脑胶质瘤的发生及发展中起一定作用。     

非小细胞肺癌患者淋巴结转移与E-CD mRNA 表达异常关系的探讨

目的:观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中E-CD基因的转录表达水平,分析肺癌转移与该基因表达异常的关系。方法:采用半定量RT-PCR方法,以正常肺组织为对照,观察了24例原发性NSCLC中E-CD基因的mRNA表达情况。结果:24例NSCLC患者中,E-CDmRNA表达异常10例(10/24,41.7%),其中15例淋巴结转移的患者中E-CDmRNA表达降低9例(9/15,60.0%),明显高于无淋巴结转移的非小细胞肺癌(1/9,11.1%),P<0.05。结论:E-CD基因为一种可在肺癌转移过程中发挥负调节作用的转移抑制基因,检测E-CDexon8-9mRNA的表达有助于肺癌的病理学诊断。     

脑胶质瘤的细胞因子及细胞因子基因治疗

脑胶质瘤是中枢神经系统常见的严重疾患，常规的手术，放疗及化疗难以根治，免疫和基因治疗已成为脑胶质瘤综合治疗的重要一环。     

细胞因子在胶质瘤免疫治疗中的作用

胶质瘤是中枢神经系统一种常见肿瘤。目前在胶质瘤的综合治疗方案中，包含细胞因子在内的免疫治疗倍受关注。通过皮下或颅内细胞因子输入，尤其进行联合细胞因子基因转染对胶质瘤生长的抑制以及改善胶质瘤患者的预后具有重要作用。     

miR-181家族的表达与人脑胶质瘤恶性程度的关系

目的：探讨miR-181家族，miR-181a、miR-181b和miR-181c，在不同恶性程度的人脑胶质瘤中的表达。方法：收集病理确诊的15例不同恶性程度胶质瘤以及5例正常脑组织手术标本，提取总微小RNA，应用实时荧光定量PCR技术检测miR-181a、miR-181b和miR-181c基因在人脑胶质瘤组织和正常脑组织中的表达，并进一步比较miR-181家族表达情况与不同级别胶质瘤的相关性。结果：miR-181a和miR-181b，在人脑不同级别胶质瘤中表达均明显下降。miR—18Ia表达水平呈随胶质瘤级别增高而下降趋势。miR-181b在胶质瘤级别HI级以上表达水平趋于稳定，Ⅲ级和Ⅳ级组织中的表达无明显差异。miR-181c表达量在正常脑组织与胶质瘤Ⅱ级和Ⅲ级组织间差异不显著．在胶质瘤Ⅳ级组织miR—181c表达水平降低。结论：miR-181a、miR-181b和miR-181c在胶质瘤组织中呈不同程度低表达，miR-181a表达与胶质瘤级别呈负相关，     

大肠癌患者多药耐药基因表达与临床疗效的关系

目的 研究大肠癌患者多药耐药基因表达与临床疗效的关系。方法 利用RT—PCR法半定量分析84例大肠癌患者MDR_1基因表达水平。结果 未经化疗组与化疗组MDR_1表达水平具有显著性差异(P<0.05);病理类型高分化者与低分化者MDR_1基因表达水平具有极显著性差异(P<0.01)。结论 RT—PCR法检测大肠癌患者外周血中MDR_1表达水平灵敏度高,相对定量,结果可靠,为临床提供了一项监测和判断疗效的又一种新方法。     

人脑恶性胶质瘤耐药相关蛋白的表达及临床意义

目的 探讨耐药相关蛋白在人脑恶性胶质瘤的表达规律，评价其对临床化疗用药的指导意义。方法 免疫组化S-P法检测97例未经治疗的脑胶质瘤6种耐药相关蛋白表达，包括6-氧甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）、P-糖蛋白（P-gP）、多药耐药相关蛋白（MRP）、拓扑异构酶Ⅱ（TOPoⅡ）、胎盘型．谷胱甘肽S转移酶（GST-π）、和胸苷酸合成酶（TS）。结果 TS在所有病例中均不表达；P-gP仅表达于正常脑组织及肿瘤周边区域的毛细血管；MGMT、GST-π、ToPoⅡ以及MRP均表达于肿瘤细胞，阳性例数（率）分别为53例（54．6％）、97例（100％）、42例（43．2％）和31例（31．9％）；Ⅲ、Ⅳ级肿瘤MRP阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤，而MGMT及ToPoⅡ表达阳性率则较低（P〈0．05），GST-π和P-gP阳性表达与肿瘤分级无关。结论 ①脑胶质瘤细胞表达多种耐药相关蛋白，其原发性耐药可能是多因素综合作用的结果；②P-gP介导的多药耐药（MDR）机制在胶质瘤细胞原发性耐药中作用不大，但可能与血脑屏障、血肿瘤屏障的形成有关；③耐药相关蛋白在脑胶质瘤的表达存在明显异质性，常规联合检测这些蛋白的表达状况有助于临床合理选择化疗方案。     

人脑连接组学指导下的脑胶质瘤手术

随着世界范围内脑计划研究的大范围开展,人脑连接组学研究得到了快速的发展。宏观尺度上的人脑连接组学主要采用脑成像和电生理技术,建立人脑网络的结构和功能连接模式及拓扑特征,进而揭示健康和疾病状态下人脑网络的组织规律和运行机制。目前人脑连接组学,作为大脑结构-功能精准分析的重要手段,在神经系统正常发育、神经系统疾病等领域中不断应用。本文对人脑连接组学的历史发展、研究进展进行综述,探讨人脑连接组学在脑胶质瘤领域的临床应用与潜在挑战。      

细胞因子在胶质瘤免疫治疗中的作用

胶质瘤是中枢神经系统一种常见肿瘤.目前在胶质瘤的综合治疗方案中,包含细胞因子在内的免疫治疗倍受关注.通过皮下或颅内细胞因子输入,尤其进行联合细胞因子基因转染对胶质瘤生长的抑制以及改善胶质瘤患者的预后具有重要作用.     

bFGF基因表达与人脑胶质瘤间质血管增生

探讨ｂＦＧＦ基因表达与人脑胶质瘤间质血管增生的关系。方法采用原位杂交法检测５７例胶质瘤组织的ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达水平并定量分析所含毛细血管。结果：各级胶质瘤ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达的阳性性,随着胶质瘤及别的升达水平也升高。     

反义microRNA-221与反义microRNA-222抑制人脑胶质瘤细胞的体外与体内生长

目的 探讨敲低microRNA(miR)-221和miR-222表达以抑制人脑胶质瘤U251细胞生长的作用及其机制.方法 脂质体介导转染反义寡聚核苷酸(AS-miR-221和AS-miR-222)于人脑胶质瘤细胞U251.采用Northern blot鉴定转染后U251细胞的miR-221和miR-222表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价AS-miR-221和AS-miR-222抑制U251细胞生长的作用;Transwell实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期的分布和凋亡;Western blot检测转染后U251细胞相关蛋白表达的变化,并用AS-miR-221和AS-miR-222治疗裸鼠皮下移植瘤,观察其在活体内对肿瘤生长的抑制作用.结果 Northern blot检测结果 显示,AS-miR-221和AS-miR-222共转染后,肿瘤细胞miR-221和miR-222表达明显下降,细胞生长速度降低,细胞穿过率为14.5%,细胞周期出现G0/G1期阻滞,凋亡率(13.7%)增高,并可见connexin43、p27、PUMA、caspase-3、PTEN、TIMP3和Bax等相关蛋白表达增高,而bcl-2表达降低,p53无明显变化.经AS-miR-221和AS-miR-222治疗后,裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑.结论 AS-miR-221和AS-miR-222共转染可抑制U251细胞的增殖与侵袭,miR-221和miR-222可以作为人脑胶质瘤基因治疗的侯选靶点.     

人脑胶质瘤的分子遗传学研究进展

胶质瘤是中枢神经系统最常见的一类肿瘤。同其它颅内肿瘤一样,其确切病因尚不清楚。随着分子遗传学理论和实验技术的发展,逐渐发现肿瘤细胞染色体组的基因变化与肿瘤的发生发展及演变有很大关系。     

胶质瘤组织明胶酶B基因表达研究

目的 了解明胶酶B在胶质细胞瘤中的作用。方法 36例胶质细胞瘤,其中Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤13例,Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤23例。患者术中取肿瘤组织及正常脑组织,提取组织总RNA;用逆转录共扩增定量PCR方法测定明胶酶B(MMP_9)基因表达水平。结果 Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤明胶酶B基因表达水平(1.77±0.55)明显高于Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤(0.63±0.11)及正常脑组织(0.46±0.08)。胶质瘤MMP_9基因表达水平与肿瘤大小无关,而与肿瘤组织分化程度有关。结论 明胶酶B在脑胶质瘤的进展中可能起重要作用。     

ODC反义RNA表达质粒的构建及其对人肺鳞癌细胞生长特性的影响

应用RT—PCR方法,体外扩增获得人IL—6、IL—10、IL—13和SCF膜外区蛋白质编码序列.又运用基因重组手段,将这些基因序列分别插入到表达性载体PBV220中,转化大肠肝菌DH5α,经过筛选和鉴定,获得了上述细胞因子膜外区cDNA克隆.SDS—PAGE和生物学活性测定证实:IL—6、IL—10和IL—13已在大肠肝菌中得到表达,尤其是IL—6获得了高效表达,其表达量约占菌体总蛋白质含量的30%左右.