人肺癌细胞株化疗敏感性与基因表达的关系

目的探讨人肺癌细胞株对化疗药物的敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法采用MTT法检测5株肺癌细胞SPCA1、NCI-H446、SH-77、95C和95D对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡氮芥(BCNU)的敏感性。流式细胞术检测多药耐药基因P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)等耐药相关基因和Fas、bcl-2、p53和p16等凋亡调控基因的表达。结果不同肺癌细胞株对同一药物敏感性有较大差异。相关分析显示,肺癌细胞株对MMC的敏感性与GST-π和bcl-2的表达呈负相关,P值分别为0.040和0.030,GST-π和bcl-2的表达水平较高者,MMC的IC50较高,敏感性较低;对DDP的敏感性与p53蛋白表达水平呈负相关(P=0.036);对其余药物的敏感性与所检基因的表达水平无关(P>0.05)。结论人肺癌细胞株对不同化疗药物敏感与否有不同的机制,对MMC的敏感性与GST-π和bcl-2的表达有关,对DDP的敏感性与p53的表达有关。     

几种化疗药物对肝癌耐药细胞BEL7404/ADM端粒酶活性的影响

目的:研究顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、多柔比星(ADM)和长春新碱(VCR)4种化疗药物对人肝癌细胞株BEL-7404、耐阿霉素肝癌细胞株BEL-7404/ADM的细胞毒作用及其对端粒酶活性影响的关系。方法:采用MTT法测定常用4种(DDP、MMC、ADM和VCR)化疗药物对人肝癌细胞株BEL-7404、BEL-7404/ADM的体外抑制作用;以TRAP-PCR-ELISA法检测化疗药物作用后两种细胞端粒酶的活性。结果:DDP、MMC、ADM、VCR对BEL-7404均敏感,各种化疗药物IC50大小比较,DDP和ADM比VCR和MMC均小;而对BEL-7404/ADM这几种化疗药物敏感性均不同程度下降,其中以ADM及VCR尤其明显,耐药倍数分别为100·0倍、60·14倍。未加药前,肝癌亲本细胞BEL-7404和耐药细胞BEL-7404/ADM端粒酶活性均表达,加入化疗药物后,亲本细胞端粒酶活性下降明显,并呈现时间-剂量关系,而对于耐药细胞,只有高浓度的化疗药物才能抑制其端粒酶活性。结论:端粒酶活性的抑制与耐药细胞对药物敏感性存在一定关系,端粒酶可作为化疗敏感的潜在标志。     

肺腺癌多剂交替疗法近期疗效观察(附30例分析)

本文经病理学/细胞学,X光/CT扫描诊断为肺腺癌患者30例用MVFA(MMC、VCR、5Fu、ADM)与MVFP(MMC、VCR、5Fu、CDDP)交替化疗,每患者疗程前给CCNU100mg/Me-CCNU250mg顿服。与用COMF方案化疗30例患者进行了病期分期、功能状态、转移情况、疗效(CR、PR、NC、PD、)、副作用对照     

胃癌的联合化疗

胃癌的联合化疗方案有 FAM及其类似方案 ,有包括 DDP在内的方案 ,有毒性较缓和的 MUFT方案 ,各方案均可取得 30 %以上甚至达 50 %的高疗效 ,但远期生存期尚不理想。FAM( 5- Fu、ADM、MMC)方案广泛应用于 80年代 ,其剂量为 5- Fu 60 0 mg/m2 ( d1,d8,d2 9,d3 6) ,ADM30 mg/m2 (第 1、 2 9天 ) ,MMC1 0 mg/m2( d1) ,每 8周重复。Macdonold等 ( 1 980年 )报道 62例晚期胃癌患者 ,用 FAM方案治疗后 ,PR2 6例 ,有效率 42 % ,中位有效时间为 9个月 ,全组中位生存期 5.5月 ,其中有效者的中位生存期为 1 2 .5月。Preusser等 ( 1 988年…     

肿瘤坏死因子α和/或化疗药物联合应用对肝癌细胞系的协同细胞毒作用

本文采用体外细胞毒试验方法(MTT),检测了重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF-α)和/或6种常用化疗药物包括阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)、顺铂(DDP)、卡铂(CBP)、足叶乙甙(VP-16)、异环磷酰胺(IFO).对肝癌细胞株SMMC-7721及BEL-7402的细胞毒效应.结果表明,rhTNF-α对两种肝癌细胞株的细胞毒作用有明显差异;两种肝癌细胞株对六种化疗药的敏感性不同,其中对ADM、DDP、MMC的敏感性较高.rhTNF-α与六种化疗药物联合应用的结果表明,rhTNF-α与ADM、DDP、VP-16有协同增强抗瘤效应,而rhTNF-α与MMC、CBP、IFO仅呈简单的叠加效应.体外细胞毒试验证明,rhTNF-α与某些化疗药物有协同作用,在临床肿瘤治疗中联合应用有可能提高疗效.     

Nrf2及其靶基因在人肺腺癌A549顺铂耐药细胞株中的表达和意义

背景与目的 NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,已有研究表明Nrf2及其信号传导通路与卵巢癌顺铂耐药密切相关,但Nrf2与肺腺癌耐药相关性的研究罕见报道,本研究的目的是测定转录因子Nrf2及其靶基因在人肺腺癌A549顺铂耐药细胞株(A549/DDP)及其亲本细胞(A549)中的定量表达,探讨肺腺癌顺铂耐约机制.方法 采用MTT法测定A549/DDP及A549细胞对DDP的敏感性;实时荧光定量PCR检测两株细胞中转录因子Nrf2及其靶基因定量表达.结果 A549/DDP对DDP的耐药指数为12.12,属于中度耐药;与亲本细胞比较,A549/DDP细胞Keap1、Nrf2、NQO1、GSTP1、GCL、HO-1、MRP4的mRNA表达增加(P＜0.01),MRP1、MRP2及MRP3的表达降低(P＜0.01).结论 Nrf2信号传导通路可能参与了人肺腺癌A549顺铂耐药现象的产生,这一发现对从基因水平开发新的耐药拮抗剂用于肿瘤耐药的辅助治疗,避免和克服耐药具有重要意义.     

二甲双胍对肺腺癌细胞Nrf2基因表达的调控作用研究

目的探讨Nrf2基因在对顺铂耐药的肺腺癌细胞中的表达及二甲双胍对其调控作用的研究。方法应用细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞仪,检测二甲双胍对肺腺癌A549和A549/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率,RealtimePCR检测相关耐药基因表达,Western Blot法检测相关蛋白水平表达。结果 Nrf2、GSTA1、ABCC1等基因在A549、A549/DDP细胞间表达存在显著差异,在A549/DDP细胞中呈高表达;二甲双胍能够抑制A549、A549/DDP细胞Nrf2及下游GSTA1、ABCC1基因的表达,并进一步抑制细胞增殖和诱导A549/DDP细胞凋亡。结论 Nrf2基因及下游基因在肺腺癌细胞不同细胞株表达存在差异,二甲双胍可影响其表达。     

AGZY—83A人肺腺癌细胞系的HTCA及MINI—ASSay药敏试验的比较

本研究采用人癌细胞集落试验(HTCA)及核酸前体掺入试验(MINI-Assay)检测了AGZY83A人肺腺癌细胞系对8种化学抗癌剂的敏感性。结果显示,在HTCA法中,MMC,5-FU、ADM等对AGZY-83A人肺腺癌细胞系显示较明显的抑     

人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株的建立及其生物学特性研究

目的建立耐紫杉醇的人肺腺癌细胞株模型SPC-A1/Taxol,并初步研究其生物学特性。方法应用浓度递增和短时作用法,从人肺腺癌细胞株SPC-A1中诱导分离出对紫杉醇耐药的细胞亚株(SPC-A1/Taxol)。采用MTT法检测耐药细胞的耐药指数及对抗癌药物的敏感性;光镜和透射电镜观察细胞形态;以流式细胞术检测该耐药细胞的细胞周期分布;以免疫细胞化学染色检测多药耐药基因(mdr1)的表达产物P-糖蛋白(P-gp)。结果经MTT法检测,SPC-A1/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代SPC-A1细胞的759.46倍,对Taxotere、NVB、ADM呈高度耐药状态,对VP-16和HCPT有轻度的耐药,而对DDP、GEM以及中药榄香烯乳无交叉耐药现象。耐药细胞的群体倍增时间是亲代细胞的1.32倍;细胞形态未见明显改变;G0 G1细胞比例减少,S期细胞增多。SPC-A1细胞无P-gp表达,SPC-A1/Taxol则高表达P-gp。结论SPC-A1/Taxol肺腺癌细胞株是一个明确的多药耐药模型,具有耐药细胞的基本生物学特性,推测其多药耐药性与P-gp的高表达相关。     

热效应对SGC7901/ADM细胞株耐药基因表达影响及生物学意义的研究

目的:了解热效应对胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM各种多药耐药基因的影响。方法:RT-PCR法检测在不同温度下,对不同药物组的人胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM和对照的人胃癌敏感细胞株SGC7901中多药耐药基因1(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)的mRNA表达。结果:胃癌敏感细胞株SGC7901未检出MDR1、MRP和LRP基因的mRNA,而胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM中MDR1增加的倍数最多,MRP次之,LRP无表达。高温43℃下,药物多柔比星(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、紫杉醇(TAX)和顺铂(DDP)组MDR1mRNA表达水平分别下降0.19(P=0.000 1)、0.13(P=0.012 1)、0.15(P=0.000 4)和0.12(P=0.000 4),与未加温组相比差异有统计学意义,P<0.05。高温后5-FU、TAX组MRP的mRNA表达水平均降低0.04(P值分别为0.013 4和0.019 6),而ADM、DDP组差异无统计学意义,P值分别为0.633 5和0.664 1。结论:高温的短期处理对MDR mRNA的表达有明显的抑制作用,对MRP则为部分抑制作用,LRP无表达。     

肺癌细胞株中顺铂药物敏感性的相关基因

目的 筛选小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中与顺铂(DDP)药物敏感性相关的基因.方法 采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)比色分析法,测定4株SCLC细胞株和6株NSCLC细胞株对DDP的药物敏感性;应用cDNA微阵列技术检测肺癌细胞株中1291个药物敏感性相关基因的表达状态,并分析基因表达与DDP敏感性之间的相关性.结果 Metallothionein、Cathepsin B、TIMP1、TNF-R1、TGFβ-induced 68000、Cathepsin L、Galectin-1、Annexin 11、PAI-1、IGFBP4、UPAR、Jagged、CD13、α1 A-AR、EphA2(Eek)、APC、RhoC、Fibromodulin、GATA-6、HSC 70共20个基因,在SCLC和NSCLC细胞株中均与DDP的药物敏感性呈负相关,只有Procoagula和MDM2与DDP的敏感性呈正相关.VHL、MMP-7、Elongin A、GSK-3β、SLC、Galectin-3、Integrinβ5、Moesin、IKKβ和ETV 1等10个基因,只在SCLC细胞株中与DDP的药物敏感性呈负相关,而AT2与DDP敏感性呈正相关.Clusterin、FG FR-2、Thrombospondin 1、HSP 32、Lactate dehydrogenase A、P300、Thymosinβ10、CD81、C/EBPγ和Rak等10个基因,只在NSCLC细胞株中与DDP的药物敏感性呈负相关,而只有CaMKK和TPA与DDP的敏感性呈正相关.结论 与DDP药物敏感性相关的基因共有45个,其中共同表达于SCLC和NSCLC细胞株中的基因有22个,在SCLC细胞株中特异表达的基因有11个,在NSCLC细胞株中特异表达的基因有12个.     

肝癌体外药物敏感性试验

目的 通过测定肝癌对阿霉素（ADM）、顺铂（DDP）、氟尿嘧啶（FU）、长春新碱（VCR）、丝裂霉素C（MMC）及噻替哌（TSPA）的体外药物敏感性，为肝癌化疗用药提供参考依据。方法 采用滤纸支持组织块培养－MTT终点－计算机图像分析体外药物敏感性试验法。结果 在1倍血浆峰浓度（1 PPC）时作用最强的药物为MMC，其抑制率中位数（MIR）为26．5％，其次是ADM为13．0％，DDP、TSPA、5－FU和VCR为4．0－8．5％。在5倍血浆峰浓度（5PPC）时作用最强的药物亦为MMC，其MIR为92．0％，次为ADM、DDP和TSPA为41－50％，5－FU和VCR为16．0－17．0％，DDP和TSPA在5PPC的MIR比在1PPC时大5．0和5．8倍以上，MMC、ADM帮VCR则大2－3．5倍，5－FU只增大1倍左右。结论 结果提示MMC对肝癌抑制作用较强，DDP和TSPA剂量增加与疗效提高可能有较大的关系。天然来源的药物ADM、MMC和VCR之间，无论在1PPC或5PPC水平，其相关系数均较大（r=0.5539-0.7208)，表明部分肝癌具有多药耐药性。     

重组人血管内皮抑素逆转人肺腺癌A549/DDP细胞耐药性研究

目的探讨重组人血管内皮抑素(rh-ES)对A549/DDP细胞耐药性的逆转作用.方法采用人肺腺癌细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP作为研究对象,以顺铂(DDP)与重组人血管内皮抑素两者联合及单独给药的方式分别作用于人肺腺癌细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP,作用时间72 h,观察不同给药方式造成的同株细胞之间耐药性的不同及不同株细胞间耐药性的差别,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测重组人血管内皮抑素对A549/DDP细胞耐药性的逆转作用.结果DDP对A549细胞半数抑制浓度(IC50)为(0.72±0.05)μg/ml,对A549/DDP的IC50为(11.54±0.64)μg/ml.rh-ES联合DDP对A549/DDP的IC50为(2.0±0.1)μg/ml.逆转倍数(RF)为5.77,相对逆转率(RRR)为88.2%.结论重组人血管内皮抑素能逆转A549/DDP对DDP的耐药性.     

三苯氧胺在膀胱癌T-24细胞系中的化疗增敏作用

目的　本文旨在研究三苯氧胺在膀胱癌T -2 4细胞株中可能有的化疗增敏作用。材料与方法　应用MTT方法 ,以膀胱肿瘤T-2 4细胞株为研究对象 ,比较单独应用化疗药物 (ADM、MMC、Thiotepa、VCR)与化疗药物合并应用三苯氧胺 (Tamoxifen 5 μM ,10 μM )对细胞生长抑制率效应 ,通过化疗药物的量—效关系曲线 ,观察三苯氧胺是否有特定的化疗增敏作用。结果　三苯氧胺在浓度为 5μM、10 μM时 ,能分别使ADM和VCR的IC50 下降 1 95、7 0 6倍和 6 94、14 5 5倍 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;而三苯氧胺在 5 μM、10 μM的浓度下 ,对MMC、Thiotepa的IC50 的影响 ,无统计学意义。结论　在体外试验中 ,三苯氧胺在 5 μM和 10 μM的浓度下能显著性地促进膀胱肿瘤T -2 4细胞株对ADM和VCR的化疗敏感性     

贲门癌术前单次腹腔动脉灌注化疗的临床手术及组织学观察

为了改善贲门癌手术治疗条件,以减少术后复发和播散,提高生存率,我们设计了包括5—氟脲嘧啶(5—Fu),顺氯铵铂(DDP),丝裂霉素(MMC),阿霉素(ADM)在内的两种联合化疗方案,采用贲门癌术前单次联合用药,腹腔动脉灌注化疗,前瞻性观察临床近期疗效与病理组织学改变。现报告如下:     

胃复安在化疗应用中致锥体外系反应8例报告

甲氧氯普胺 (胃复安 )是肿瘤化疗中最常用的止吐药物之一 ,我院 1999年 1月— 2 0 0 0年 12月在 2 16例肿瘤患者化疗中应用该药止吐治疗 ,出现锥体外系反应 8例 ,现就出现反应的相关问题进行分析讨论。1　临床资料1.1　一般情况　本组 8例 ,男 5例 ,女 3例 ,年龄 19岁～ 76岁 ,平均 5 6岁。其中食管癌 3例、乳腺癌 1例、非霍奇金淋巴瘤 2例、直肠癌 2例。均经病理证实。食管癌采用 PF(DDP、5 - Fu)方案 ,非霍奇金淋巴瘤采用 CHOP(CTX、 ADM、VCR 、Pred)方案 ,乳腺癌采用 CAF(CTX、ADM、 5 - Fu)或 CAP(CTX、ADM、DDP)方案…     

人肺癌细胞株中hnRNP A2/B1表达的研究

目的 研究人肺癌细胞株中核内不均一核糖核蛋白(hnRNP)A2/B1及hnRNP B1的表达。方法 采用特异性hnRNP A2／B2及hnRNP B1引物,应用RT-PCR方法研究肺癌细胞株hnRNP A2／B1 mRNA的表达,以抗hnRNP B1单克隆抗体免疫细胞化学染色方法研究肺癌细胞hnRNP A2/B1蛋白的亚细胞定位。结果 RT—PCR显示人肺腺癌细胞株SPC-A1及Y-90,小细胞肺癌细胞株NCI-H446及鳞癌细胞株A431均表达hnRNP A2／B1及hnRNP B1,其PCR产物分子量分别在661及1039bp左右,与预期大小的hnRNP A2/B1 cDNA片断相符。免疫细胞化学研究发现,肺腺癌细胞株SPC—A1及Y-90．小细胞肺癌细胞株NCI—H446及鳞癌A431的细胞浆及细胞核内均可见特异的hnRNP B1染色,鳞癌A43l及小细胞肺癌NCI—H446 hnRNP B1染色较肺腺癌细胞株SPC—A1及Y-90明显。结论 肺癌细胞株hnRNP A2／B1及hnRNP B1表达明显增高。     

24例原发性肝癌患者的肿瘤药敏结果分析

目的通过测定原发性肝癌患者对5-氟脲嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)、氨甲喋呤(MTX)、长春新碱(VCR)6种化疗药物的体外敏感性试验,探讨肿瘤药敏试验对原发性肝癌个体化疗的应用价值。方法采用组织块培养-终点染色-计算机图像分析法(TECIA)。结果24例原发性肝癌细胞对6种化疗药物的敏感性由高到低依次为5-Fu、MMC、DDP、ADM、MTX、VCR。结论TECIA法的体外肿瘤药敏试验在原发性肝癌的临床用药及个体化化疗方面具有重要的指导意义。     

光敏剂photofrinⅡ预激活联合化疗药物对K562细胞杀伤作用的研究

目的:通过体外研究探讨光敏剂photofrinⅡ预激活后对人白血病K562细胞株的杀伤作用及其与化疗药物配伍能否产生协同或拮抗效应.方法:以K562细胞株为研究对象,采用MTT法检测photofrinⅡ预激活后对K562细胞株的抑制作用,同时检测photofrinⅡ预激活后分别与顺铂(DDP)、5-氟脲嘧啶(5-FU)、阿霉素(ADM)联合应用对K562细胞的杀伤作用,Burgi法分析联合用药效果.结果:photofrinⅡ预激活后能明显抑制K562细胞株的增殖,并且这种作用呈剂量依赖性,但其抑瘤作用较后激活组降低.photofrinⅡ预激活后分别与DDP、5-FU、ADM联合,增加了化疗药物的抑瘤作用.结论:photofrinⅡ预激活后能够抑制K562细胞株的增殖,与DDP、5-FU、ADM联合使用具有相加作用.     

5氟尿嘧啶持续静脉滴注与小剂量顺铂联用治疗晚期胃癌53例

[目的]观察持续静脉滴注5氟尿嘧啶 (5 Fu)与小剂量顺铂 (DDP)联合应用治疗晚期胃癌的近期疗效及毒性。[方法]治疗组53例患者接受5 Fu350mg/m2·d ,持续滴注28～30天 ,DDP5mg/m2·d ,每周应用5天 ,连续应用4周的联合化疗方案化疗2个周期 ,对照组53例采用FAM/FMP(5 Fu+MMC +ADM/DDP)方案 ,治疗两个周期 ,常规剂量给药。[结果]治疗组完全缓解 (CR)0例 ,部分缓解 (PR)32例 ,近期总有效率 (CR +PR)60.37 % ,对照组CR0例 ,PR21例 ,总有效率39.62% ,两组差异具有显著性 ,常见毒副反应如骨髓抑制及恶心、呕吐的发生率对照组明显高于治疗组。[结论]FP方案治疗晚期胃癌 ,近期疗效肯定 ,毒副反应低