山东省家猫检出汉赛巴尔通体

汉赛巴尔通体是一种可引起人类猫抓病的革兰染色阴性、营养条件要求苛刻兼性细胞内寄生的需氧杆菌,猫是汉赛巴尔通体的自然宿主,人通过猫抓伤或咬伤而感染患病.为了解家猫巴尔通体感染状况,我们于2005年4月在山东省采集家猫血液,进行巴尔通体分离培养及检测鉴定.     

巴尔通体的宿主动物及传播媒介研究进展

巴尔通体(Bartortella)是一属寄生于脊椎动物红细胞内的革兰染色阴性杆菌，可引起人类卡里翁病(Carrion's disease)、猫抓病(cat-sratchdisease，CSD)、战壕热(trench fever)、心内膜炎、杆菌性血管瘤(bacillary angiomatosis，BA)等多种疾病。目前发现的巴尔通体有20余种，8种致病菌，除B．bacilliformis,B.quintana的宿主是人类，其余均寄生于自然界动物体内，并经吸血节肢动物传播。近年来，由于人类巴尔通体感染日益增多，国外对这种病原菌的宿主动物及传播媒介进行了较多的调查研究，以下就这方面的研究工作予以综述。     

汉赛巴尔通体媒介和宿主的实验室研究进展

汉赛巴尔通体（Bartonella henselae）是一类革兰阴性的兼性厌氧菌，属于α-变形杆菌纲（Alphaproteobacteria）、根瘤菌目（Rhizobium）、巴尔通体科（Bartonellaceae）、巴尔通体属（Bartonella），该种又可分为2个亚型即：Houston型和Marseille型。汉赛巴尔通体为致病巴尔通体，可以引起猫抓病（CatScratch Disease，CSD）、慢性淋巴结病、心内膜炎、杆菌样血管肉瘤杆菌样紫瘢（BAP）、视神经病变等，其中以CSD最为普遍。     

云南疑似钩端螺旋体病患者中巴尔通体感染的血清学调查

巴尔通体是一新发现的古老病原体,早在1905年,秘鲁医生Alberto Barton在血液中就发现人类巴尔通体病Oroya热的致病因子;1919年,Battistini、Naguchi等分离出该病原体。直到20世纪90年代才     

云南省不同环境鼠形动物巴尔通体感染情况的研究

目的 了解云南省不同地区、环境和气候条件下鼠形动物巴尔通体感染状况。方法 对2003年6～7月在云南省3种不同气候类型共5个县、市不同生境中捕获的鼠形动物采集股动脉血,用含5％去纤维兔血脑心浸液琼脂培养基置于35℃含5％CO_2培养箱中分离培养巴尔通体,疑似菌落用巴尔通体属特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增特异基因片段,电泳图中出现目标带即判断为阳性菌株。结果 捕获鼠形动物278只,接种鼠血标本176份,共检获巴尔通体疑似菌株79份,经PCR证实69份为巴尔通体。6种被检动物中有4种动物检出巴尔通体,感染鼠分属于家鼠属、绒鼠属、小鼠属。总检动物巴尔通体分离率为39.2％;其中以黄胸鼠分离率最高为42.0％。除大理市外,剑川、祥云、云龙和云县等县捕获的鼠类标本均分离到巴尔通体,鼠类生境涉及室内、庭院、溪场灌木丛、山地灌木丛,跨越暖温带季风气候、北亚热带季风气候、南亚热带河谷少雨气候三种气候类型。结论 研究再次证实云南鼠类宿主,特别是与人类关系密切的家栖鼠类巴尔通体感染率较高;巴尔通体在多种鼠类、不同地区、不同气候环境中均有分布,呈现出对不同地理和气候环境具有广泛适应性及宿主多样性特征。     

从山东省家犬血液中分离出致病性巴尔通体——文森巴尔通体伯格霍夫亚种

目的调查家犬巴尔通体的带菌状况,分离培养并鉴定菌种.方法将采获的家犬血标本抗凝血接种于含5%去纤维兔血的脑心浸液培养基上,置于37℃含5%CO2培养箱中分离巴尔通体.然后挑选巴尔通体疑似菌落染色镜检,应用聚合酶链反应技术（PCR）在属分类水平鉴定巴尔通体,通过PCR产物限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）方法在分离菌株及与阳性对照菌株之间鉴别.选择16S rRNA、gltA和16S～23S rRNAITS的PCR产物测序,将所测核酸序列进行同源性比较及系统发育分析确定巴尔通体种或基因型.结果从山东省采获的71份犬血液中分离培养出2株巴尔通体疑似菌株,光镜下观察为革兰染色阴性、微弯曲的细小杆菌,3对巴尔通体属特异性引物扩增结果阳性,PCR-RFLP分析2株分离菌株相同,与阳性对照不同,16S rRNA、gltA和16S～23SrRNA ITS序列分析结果表明2株巴尔通体分离株与文森巴尔通体伯格霍夫亚种的同源性分别为100.0%、99.7%和97.2%.结论山东省家犬中存在巴尔通体感染,分离培养出的菌株经鉴定为文森巴尔通体伯格霍夫亚种,该亚种属于致病性巴尔通体.     

探讨基于不同基因设计的巴尔通体特异引物

巴尔通体是一群革兰染色阴性、营养要求苛刻兼性细胞内寄生的需氧多形杆菌,呈全球性分布的新发现的病原体,重要性不断增加。巴尔通体培养较难,表型特征少,其鉴定主要根据基因扩增。合适的引物尤为重要。在巴尔通体检测、鉴定和种系发生研究中,设计和应用引物较多,主要基于16SrDNA、16S～23SrRNAITS、gltA、rpoB、ribC、groEL和fisZ基因等。该文就几种常被选择基因及所设计的引物在巴尔通体研究中的运用做一综述。     

海南省小型兽类巴尔通体的分离培养和序列分析

目的调查海南省小型兽类巴尔通体感染状况以及携带巴尔通体的种类,为巴尔通体感染的预防控制提供科学依据。方法用鼠笼法捕获小型兽类,取心脏血,抗凝,取100μl抗凝血用胰酶大豆肉汤按1∶4稀释后接种于含5%去纤维羊血的胰酶大豆琼脂培养基上,置含5%CO2的培养箱中37℃培养45d。挑选疑似菌落涂片,革兰染色、Gimanez染色后做镜检进行初筛,将革兰阴性杆菌用巴尔通体属特异性引物进行聚合酶链反应（PCR）。然后对其PCR产物测序,将所测核酸序列提交到GenBank,做相似性比较及序列分析。结果从65份样本中分离培养出疑似菌落6株,革兰染色镜检均见阴性小杆菌,Gimanez染色为红色杆菌,经PCR证实6株均为巴尔通体,其中分离自黄毛鼠和屋顶鼠各2株,针毛鼠和臭鼩鼱各1株。经过序列分析证实,所分离到的巴尔通体与Bartonella rattimassiliensis、B.tribocorum和B.queenslandensis3种巴尔通体相似度最高。结论海南省小型兽类中有巴尔通体感染,存在人群感染的风险。     

汉赛巴尔通体的研究进展

随着经济全球化和新发传染病在世界范围内的不断涌现，一种新发的虫媒传染病——巴尔通体感染，越来越引起人们的广泛关注。汉赛巴尔通体（Bartonella henselae）是巴尔通体属中重要的致病菌之一，直到20世纪90年代才被发现，由于其对动物和人的广泛致病性和复杂的临床特征，已引起国内外学者的兴趣。本研究针对汉赛巴尔通体的流行病学、临床诊断及治疗、实验室诊断、动物易感性及传播媒介等方面做一综述。     

福州海港口岸鼠形动物巴尔通体感染调查

目的了解福州海港口岸鼠形动物巴尔通体感染状况,并掌握其菌种基因类型、遗传特征和变异关系,为该菌种的溯源及鼠传疾病防治工作提供科学依据。方法 2013年2月—2014年1月,随机抽取福州海港口岸4个监测点,采用鼠笼法捕获鼠形动物,解剖取其肝、肾,研磨后提取核酸,进行PCR扩增,并对所得产物进行测序及系统进化分析。结果共捕获212只鼠形动物,经分类鉴定,隶属于2目2科3属4种,以黄胸鼠为优势种群,占39.62%,臭鼩鼱和褐家鼠分别占33.96%和23.59%。鼠密度2.31%。2只雄性黄胸鼠检出巴尔通体,感染率为0.94%。遗传进化分析显示本次检测到的巴尔通体与B.taylorii以及对人类有致病性的B.tribocorum的遗传关系最近。结论福州海港口岸鼠形动物中存在巴尔通体感染,而且携带人类致病性巴尔通体,存在人群感染的风险。     

用PCR方法检出蚤类携带巴尔通体

目的调查我国巴尔通体宿主动物体表寄生蚤类是否携带巴尔通体。方法2003年6～7月在云南省大理州云龙县居民区采集家猫、狗、鼠类等体表寄生蚤，用3对巴尔通体属特异性引物BhCS．781p—BhCS．1137n、Bh．311p—Bh．452n和TI1e．455p—TA1a．885n进行聚合酶链反应(PCR)，扩增巴尔通体gltA和16S～23S rRNA ITS中部分核酸片段，检测采集的蚤类是否感染巴尔通体。结果共采集251只寄生蚤，包括猫栉首蚤、人蚤、缓慢细蚤等7个常见蚤种，从1组猫栉首蚤和1组缓慢细蚤中扩增出目标带，证实有巴尔通体感染。结论猫栉首蚤和缓慢细蚤能够感染巴尔通体，是该种病原体的潜在传播媒介，间接表明当地家猫和鼠类动物存在巴尔通体感染。     

浙江省蜱中巴尔通体感染的分子流行病学调查

目的了解浙江省的优势蜱种,检测其巴尔通体感染情况,为巴尔通体的预防控制提供科学依据。方法从天台、金东和江山地区的动物体表采集饱血成蜱,用PCR方法检测其阳性率,并克隆测序后分析所检测到的巴尔通体种类。结果所捕获的蜱均为中华硬蜱,天台、金东和江山地区的阳性率分别为42.3%（11/26）、6.7%（2/30）和3.3%（1/30）,平均阳性率为16.3%,所检测到的巴尔通体与Bartonella rattimassilensis的遗传关系最近,与人类致病性巴尔通体B.grahamii的遗传关系也很近。结论浙江省蜱中存在巴尔通体感染,具有传播给人的风险,应该采取措施加以控制。     

间接酶联免疫吸附试验检测北京市昌平地区体检人群中汉赛巴尔通体抗体

目的调查北京市昌平地区健康体检人群血清汉赛巴尔通体抗体阳性情况。方法用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光抗体（IFA）试剂盒检测体检人群血清汉赛巴尔通体抗体情况。结果以IFA为参考标准，间接ELISA方法的灵敏度为70．6％，特异度为91．6％；阳性预测值为82．2％（60／73），阴性预测值为84．9％。ELISA共检测了357份健康体检人群血清，汉赛巴尔通体抗体阳性率为34．5％，IFA共检测了239份体检血清，其汉赛巴尔通体抗体阳性率为35．6％。结论间接ELISA方法对于检测汉赛巴尔通体感染是一种快速、敏感、特异的方法，昌平地区健康体检人群中存在汉赛巴尔通体抗体阳性的情况。     

浙江省丽水市鼠类巴尔通体的检测研究

目的:对丽水市鼠肝脾组织进行巴尔通体检测,为控制人巴尔通体流行提供参考依据。方法:收集丽水市鼠的肝脾标本,采用PCR法检测巴尔通体gltA基因片段(379 bp),确定阳性标本。结果:在丽水市捕获鼠467只,巴尔通体总感染率为15.20%,宿主动物有黑线姬鼠、社鼠、小家鼠。黑线姬鼠为优势鼠种(429/467),巴尔通体感染率为16.08%(69/429)。结论:丽水市鼠中存在巴尔通体自然感染,且宿主动物呈多样性,为进一步深入进行巴尔通体病疫源地的调查奠定了基础。     

不明原因发热病人钩端螺旋体和巴尔通体感染调查

目的了解不明原因发热病人钩端螺旋体和巴尔通体的感染状况。方法用显微镜凝集实验方法检测不明原因发热病人血清的钩端螺旋体抗体,用间接免疫荧光法检测血清的汉塞巴尔通体和五日热巴尔通体IgG抗体水平。结果共检测232份不明原因发热病人血清。感染率:汉塞巴尔通体(30.17%)五日热巴尔通体(18.10%)钩端螺旋体(4.74%),混合感染率:汉塞巴尔通体和五日热巴尔通体(14.22%)钩端螺旋体和汉塞巴尔通体(2.16%)钩端螺旋体和五日热巴尔通体(0.86%),1例病例三项抗体阳性。结论不明原因发热病人中有一定比率的病例是因为感染钩端螺旋体,和/或汉塞巴尔通体、五日热巴尔通体而引起的发热,感染率各不相同,混合感染较为普遍。在不明原因发热的诊断中,有必要进行钩端螺旋体病和巴尔通体病的诊断筛查。     

陕西省定边县鼠疫疫区啮齿动物巴尔通体感染情况调查

目的了解陕西省定边县鼠疫疫区啮齿动物巴尔通体感染情况及携带种类,为巴尔通体感染的预防控制提供科学依据。方法 2015年在定边县鼠疫疫区的2个乡镇捕获啮齿动物,无菌取鼠脾,分离培养巴尔通体,疑似菌株提取DNA,PCR扩增glt A基因,测序并根据序列应用Mega 6.06软件进行系统发育分析,确定巴尔通体属种。结果共捕获3种223只啮齿动物,分离巴尔通体78株,感染率为34.98%,其中主要啮齿动物长爪沙鼠的感染率为34.72%;序列分析表明定边县鼠疫疫区共检出4个巴尔通体种群:伊丽莎白巴尔通体(B.elizabethae)、格拉汉姆巴尔通体(B.grahamii),另外2个种群与泰勒巴尔通体(B.taylorii)、文森巴尔通体阿鲁潘亚种(B.vinsonii subsp.arupensis)亲缘关系较近,有待进一步确认。结论陕西省定边县鼠疫疫区啮齿动物中有巴尔通体感染,存在人群感染的风险。     

浙江省鼠中巴尔通体rpoB基因系统进化分析

目的初步了解巴尔通体在浙江省鼠群中携带状况及流行特征,为制定预防措施提供依据。方法 2009年8月于浙江省磐安县捕鼠101只,提取其肝、脾DNA后,选择巴尔通体属rpoB基因进行PCR扩增,并对所得产物进行测序及进一步的系统进化分析。结果 2009年在磐安县捕获的101只鼠中肝脾标本检出巴尔通体rpoB基因阳性1例,其中黄胸鼠中巴尔通体分离率为4.3%;此分离株与格雷汉巴尔通体（GenBank序列号：AB426694.1）处于同一进化分支上（自展值为96%）。结论在浙江省鼠群中存在巴尔通体感染,分离株种属为格雷汉巴尔通体。     

北京市宠物猫和流浪猫巴尔通体感染状况调查

目的调查北京市宠物猫和流浪猫巴尔通体感染状况。方法采集猫的抗凝血和血清并收集相关流行病学信息。将抗凝血用灭菌胰酶大豆肉汤按1∶4稀释后,取100μl接种于含5%去纤维羊血的脑心浸液培养基上,置于37℃、含5%CO2培养箱中分离培养至45 d。选择glt A、fts Z、rib C引物对分离到的疑似菌落进行PCR并测序,所测核酸序列进行同源性比较及系统发育分析,确定巴尔通体种。利用间接免疫荧光法检测血清样本汉赛巴尔通体抗体水平。利用SPSS 13.0软件分析实验室数据与现场采集的流行病学数据。结果北京市猫的巴尔通体血培养分离率为13.8%,获得的22株分离株全部为汉赛巴尔通体。血清抗体阳性率为39.4%。流浪猫(30.4%)、染蚤猫(36.6%)、幼猫(27.9%)的血培养阳性率较高,差异有统计学意义。染蚤猫的血清抗体阳性率(61.0%)也显著高于未染蚤猫(31.9%)。结论北京市宠物猫和流浪猫中巴尔通体感染率较高,且均为对人致病的汉赛巴尔通体,需做好宠物猫的防蚤除蚤、流浪猫的管理来预防人类巴尔通体感染。     

用分子生物学技术诊断巴尔通体感染

目的 应用聚合酶链反应(PCR)技术建立巴尔通体的检测鉴定方法并用于诊断临床疑似猫抓病合并双侧支气管肺炎患者。方法 根据16S～23S rRNA ITS基因序列较其他属细菌长,而且位于这段基因序列中的tRNA~(Ile)-tRNA~(Ala)基因间隔区具有高度变异性,tRNA~(Ile)和tRNA~(Ala)基因序列在巴尔通体属中完全保守,设计引物;同时应用文献发表的2对引物直接扩增1例临床可疑猫抓病患者全血基因组DNA。将研究设计引物的PCR产物直接测序,并进行序列分析。结果 3对引物扩增全血基因组DNA均获得巴尔通体特异基因片段,根据其中2对引物扩增产物大小与阳性对照不同,可初步确定样本与阳性对照菌株是不同巴尔通体;序列分析结果显示,研究设计引物TIle.455p-TAla.885n扩增产物核苷酸序列与中国云南省巴尔通体-分离株对应位置的序列相一致,同源性100％。结论 应用PCR技术从血液中直接扩增特异基因片段,可以快速检测巴尔通体感染;测序及序列分析结果进一步提供了此种致病巴尔通体在中国南北方均存在的线索。     

安徽省不同地区人群和家畜巴尔通体病血清流行病学调查

为探索安徽省农村地区人群和家畜巴尔通体病感染状况和分布特点,2009年4-5月在安徽省广德、明光和怀远县进行了人群和家畜汉赛巴尔通体及五日热巴尔通体血清流行病学调查,现将结果汇报如下.