苦参促粒系造血机制及对白血病HL—60细胞的诱导凋亡作用

目的：进一步探讨苦参促粒系造血机制及新的抗白血病作用机理。方法：建立实验性环磷酰胺（Cy:0.08g/kg)低白细胞血症小鼠模型,观察苦参对粒系造血的影响和对白血病HL－60细胞的诱导凋亡作用。结果：苦参对Cy所致外周血白细胞和中性粒细胞数下降具有对抗和促恢复作用（P＜0．01）,能增加骨髓有核细胞、粒－巨噬系祖细胞（CFU－GM）数（P＜0．01）促进CFU－GM增殖并诱导其向粒系、巨噬系分化,且其促粒系造血作用与鲨肝醇一致。此外,苦参与明显诱导白血病HL－60细胞凋亡,呈药物浓度－粒应关系。结论：苦参有望用于防治化疗所致的白细胞减少及通过诱导细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用。     

苦参联合胎肝低分子抑瘤物抗白血病及其机制

目的 :探讨苦参 (SF)、胎肝低分子抑瘤物 (LMW NTS)联合用药对正常人骨髓粒 巨噬系造血祖细胞(CFU GM )和急性髓性白血病细胞的影响及其作用机制。方法 :采用CFU GM集落培养、细胞液体培养、Wrigh giemsa染色、3H TdR掺入实验、DNA片段凝胶电泳和RT PCR等方法 ,观察SF和LMW NTS联用对白血病的作用。结果 :SF和LMW NTS联用 ,明显提高抑制白血病细胞增殖的能力 ,促进白血病细胞的凋亡 ,诱导白血病细胞中原癌基因c Myc的下调 ,抑制正常造血祖细胞CFU GM的作用明显低于抑制白血病细胞的作用。结论 :联合用药抗白血病的效果 ,较单用苦参或胎肝低分子抑瘤物明显提高     

苦参联合胎肝低分子抑瘤物抗白血病有其机制

目的：探讨苦参（SF）、胎肝低分子抑瘤物（LMW－NTS）联合用药对正常人骨髓粒－巨噬系造血祖细胞（CFU－GM）和急性髓性白血病细胞的影响及其作用机制。方法：采用CFU－GM集落培养、细胞液体培养、Wrigh-giemsa染色、^3H-TdR掺入实验、DNA片段凝胶电泳和RT－PCR等方法，观察SF和LMW－NTS联用对白血病的作用。结果：SF和LMW－NTS联用，明显提高抑制白血病细胞增殖的能力，促进白血病细胞的凋亡，诱导白血病细胞中原癌基因c-Myc的下调，抑制正常造血祖细胞CFU－GM的作用明显低于抑制白血病细胞的作用。结论：联合用药抗白血病的效果，较单用苦参或胎肝低分子抑瘤物明显提高。     

烷化溶血磷脂作为骨髓净化药物的实验研究

目的：探讨烷化溶血凝脂（ALP）作为骨髓净化药物的潜在应用价值。方法：克隆形成实验测定HL60细胞生长;正常粒－单核系造血祖细胞（CFU－GM）集落产率的变化检测ALP对正常造血祖细胞的影响;RT－PCR检测bcl-2mRNA表达;流式细胞术检测Bcl-2蛋白表达。结果：ALP作用后,HL60细胞的克隆形成率明显下降（P＜0．01）;ALP对CFU－GM的影响不显著,20μg/ml预处理24h,CFU－GM集落产率才被抑制（P＜0．01）;ALP不影响bcl-2基因在mRNA及蛋白水平的表达。结论：ALP具有抑制白血病细胞增殖的作用,但对正常造血细胞无显著毒性,在白血病病人自体骨髓体外净化中有良好的应用前景。     

姜黄素对小鼠CFU-GM及WEHI-3B细胞增殖的影响(英文)

用体外半固体集落培养方法 ,观察不同浓度姜黄素 ( 10 - 8～ 10 - 4 mol·L- 1 )对BALB/c小鼠骨髓粒 巨噬系祖细胞 (CFU GM)及骨髓单核系白血病干细胞 (WEHI 3B细胞系 )增殖的影响。结果显示 ,姜黄素呈剂量依赖性抑制CFU GM和WEHI 3B细胞增殖 ,其半抑制剂量 (IC5 0 )分别为 1.0 36× 10 - 5 mol·L- 1 和 1.2 2 0× 10 - 6 mol·L- 1 。表明姜黄素对WEHI 3B白血病细胞的抑制作用强于对CFU GM的作用     

普乐林诱导HL-60细胞分化和凋亡研究

目的 :研究中药葛根的提取物普乐林对HL 6 0细胞的诱导分化和促凋亡作用。方法 :采用硝基苯唑氮兰(NBT)还原、NBT/MTT值及细胞表面抗原CD11b表达 ,观察细胞分化程度 ;通过细胞形态、DNA片段电泳、流式细胞(FCM)DNA含量分析检测细胞凋亡。结果 :80 μg .ml 1,16 0 μg .ml 1和 32 0 μg·ml-1普乐林对HL 6 0细胞具有诱导分化效应 ;且 32 0 μg .ml 1普乐林与 1μmol.L 1全反式维甲酸效果相当。 32 0 μg .ml 1和 6 40 μg.ml 1普乐林分别作用HL 6 0细胞 36h ,可出现典型的细胞凋亡形态。DNA凝胶电泳出现片段化的梯状带谱 ;普乐林同时可影响HL 6 0细胞的细胞周期进展 ,且随其浓度的增高 ,亚G1期细胞所占比例增加。结论 :普乐林具有诱导HL 6 0细胞分化及凋亡的双重作用。     

重组人粒细胞集落刺激因子对辐射后小鼠中性粒细胞减少的治疗作用

目的 :观察重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)对辐射致小鼠中性粒细胞减少的治疗作用。方法 :分别用rhG CSF 10 μg·kg- 1 ·d- 1 和 30 μg·kg- 1 ·d- 1 二个剂量对辐射致中性粒细胞减少症小鼠皮下注射 ,观察rhG CSF对辐射小鼠脾脏重量、脾表面造血灶 (CFU S)数、骨髓有核细胞数和骨髓DNA含量及骨髓粒 单核系祖细胞 (CFU GM)的影响。结果 :rhG CSF二个剂量对钴6 0 照射小鼠有明显增加脾脏重量和CFU S数 ,加速小鼠骨髓DNA合成速率的作用 ;CFU GM细胞集落形成增多。结论 :rhG CSF对辐射所致小鼠中性粒细胞减少有明显促进其造血功能的恢复、增加外周血白细胞数和中性粒细胞数     

碘化砷-硫脲诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的研究

目的　研究新型砷剂配合物碘化砷 硫脲 (AsI3 Tu)诱导白血病HL 6 0细胞凋亡的生物学效应。方法　采用细胞形态学观察、细胞凋亡原位检测法 (TUNEL法 )检测凋亡细胞并测定其细胞蛋白质的含量。结果　① 1～16 μmol/LAsI3 Tu对HL 6 0细胞增殖有抑制作用 ,并与时间和剂量相关。②TUNEL法检测凋亡细胞明显增加。③AsI3 Tu能够抑制HL 6 0细胞蛋白质合成。结论　AsI3 Tu能有效诱导白血病细胞系HL 6 0细胞凋亡。     

化疗+G-CSF与化疗+G-CSF+GM-CSF动员外周血干细胞效果和造血功能重建的对比观察

目的 :比较化疗 G CSF与化疗 G CSF GM CSF二种动员方案动员外周血干细胞 (PBSC)和造血重建的效果。方法 :将 33例患者 (急性白血病 2 3例 ,恶性淋巴瘤 9例 ,乳腺癌 1例 )分为化疗 G CSF与化疗 G CSF GM CSF二组 ,化疗后WBC最低时开始分别应用G CSF 15 0 μg皮下注射 ,2 /d及G CSF15 0 μg、GM CSF 15 0μg ,皮下注射 ,上、下午各 1次。动员 3d后行PBSC采集。 结果 :二种动员方案比较 ,MNC、NC、CD34 细胞、GM CFU培养及造血功能重建均无明显差别。动员过程中 ,GM CSF组骨痛及发热明显患者难以耐受。结论 :化疗 G CSF GM CSF的动员方案 ,动员效果及造血功能重建并未优于化疗 G CSF组 ,而耐受性差     

毫米波对人骨髓细胞和白血病细胞克隆能力的作用

【目的】探索毫米波对人骨髓细胞和白血病细胞克隆能力的影响。【方法】以波长 8mm ,功率密度为 4mW /cm2的毫米波辐射人骨髓细胞和HL6 0细胞、K5 6 2细胞 ,测定粒巨噬细胞集落形成单位 (GM CFU)和肿瘤细胞集落形成单位 (tC FU)。【结果】连续 2次 6 0min的辐射使实验组的GM CFU比对照组明显上升 (P <0 0 5 ) ,连续 10次 30min或 6 0min的辐射均使tCFU较之于对照组显著降低 (P <0 0 5或P <0 0 1)。其余辐射方式则对GM CFU和tCFU的变化无明显作用 (P>0 0 5 )。【结论】毫米波的短期辐射 (2次 )能增强正常人骨髓细胞的克隆能力而不影响HL6 0细胞和K5 6 2细胞的克隆能力 ,较长时间的辐射 (10次 )则使HL6 0细胞及K5 6 2细胞的克隆能力明显降低。提示微波的非热效应可能会影响白血病细胞的净化。     

灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究

应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、ＤＮＡ片段凝胶电泳及ＤＮＡ片百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长及ＨＬ－６０细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长有促进作用，而对白血病系ＨＬ－６０细胞集落生长则表现了剂量依赖性抑制；细胞形态学经为芝复方对ＨＬ－６０细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。８和１６ｍｇ／ｍｌ灵芝复方作用４８ｈ，可使ＨＬ－６０细     

苦参抗白血病作用及其机制

By using CFU-GM/CFU-L colony assay, NBT/MTT reductant test and DNA fragmentation analysis, we studied the effects of Sophora flavescens (SF) on CFU-GM proliferative ratio in human normal bone marrow/umbilical cord blood and on proliferation, differentiation and apoptosis in human acute myelogenous leukemia HL-60 cells. The results showed that 5, 10, 15, 20 micrograms.microliter-1 of SF significantly inhibited proliferation and induced apoptosis in the HL-60 cells in a dose-dependent fashion. Fifteen micrograms.microliter-1 of SF also induced differentiation in HL-60 cells. Furthermore, cytotoxic activity of SF(5-15 micrograms.microliter-1) was not apparent on human normal hematopoietic progenitors(CFU-GM). The results indicate that an appropriate concentration of SF has a selective antileukemic effect. Thus, these are important impetuses for further research of SF as an anticancer agent.     

三氧化二砷或ATRA对原代APL细胞或HL-60细胞作用研究

目的：探讨三氧化二砷（吡霜）或ATRA对原代APL细胞或HL－60细胞影响,同时分析三氧化二砷与ATRA之间的交叉耐药性。方法:MTT测定HL－60细胞或APL细胞的增殖性。流式细胞仪检测两类细胞的凋亡性,NBT法用于测定HL－60细胞或原代APL细胞的分化性。结果：三氧化二砷与ATRA均能明显抑制APL细胞或HL－60细胞的体外增殖,它们作用机制分别为诱导明显的凋亡或分化。体外三氧化二砷对ATRA耐药HL－60细胞具有明显的抑制增殖作用,并诱导其凋亡发生。结论：三氧化二砷与ATRA无交叉耐药性。研究结果表明,ATRA诱导的高白细胞征并非归因于分化大于凋亡。     

苦参碱对急性白血病早幼粒细胞 HL-60的抑制细胞增殖与诱导凋亡作用

目的：探讨苦参碱对急性白血病早幼粒细胞 HL-60的抑制细胞增殖与诱导凋亡作用。方法：以早幼粒急性白血病细胞系（HL-60细胞）为实验对象,采用体外培养技术,试验检测不同浓度苦参碱对HL-60细胞活力、细胞周期以及细胞凋亡的作用。结果：随着苦参碱浓度（12.5~50μg/ ml）的增加,苦参碱对 HL-60细胞增殖的作用不断增强;苦参碱处理72 h 后的 HL-60细胞与空白对照组比较,G0/ G1期细胞明显增多,S 期细胞明显减少,但比较差异无统计学意义（P〉0.05）;细胞凋亡率均明显高于空白对照组（P〈0.01）。结论：苦参碱对于急性白血病早幼粒细胞 HL-60的增殖具有明显的抑制作用,并能促进其凋亡。     

水蛭提取物对人白血病HL60细胞体外抑制作用研究

目的：研究水蛭提取物对人白血病HL-60细胞的体外抑制作用.方法：用液氮快速冻融法制备水蛭提取物,将不同浓度提取物作用HL-60细胞,观察提取物对HL60生长与增殖的影响、诱导调亡效应、并计算出水蛭提取物作用HL-60的半数抑制浓度（IC50）.结果：浓度高于0.1mg/mL的水蛭提取物对HL60有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性;水蛭提取物作用HL60细胞48h的IC50为1.4mg/mL;另外水蛭提取物也具有诱导HL60细胞凋亡作用.结论：水蛭提取物可抑制HL60细胞增殖并诱导调亡.     

环孢菌素A对HL-60和K562细胞增殖的影响

目的 探讨环孢菌素A对HL-60、K562细胞增殖的影响。方法 应用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）观察环孢菌素A对HL-60、K562细胞增殖的抑制率，应用电镜进行凋亡的检测。结果 癌细胞在环孢菌素A作用下，细胞增殖被阻遏，并呈现时间剂量效应关系。同时发现环孢菌素A能诱导HL-60、K562细胞凋亡。结论 环孢菌素A可以通过诱导细胞凋亡而抑制HL-60和K562细胞增殖。     

急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞增殖、分化的影响

目的 为探讨急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的影响。方法 骨髓基质与白血病细胞共培养，采用MTT检测基质对白血病细胞的粘附，流式细胞仪检测粘附的HL-60细胞周期，非特异性酯酶及过氧化物酶染色观察白血病细胞分化及绘制白血病细胞生长曲线。结果 白血病骨髓基质对HL-60细胞的粘附率及粘附的白血病细胞处于G0／G1期比例均明显高于正常骨髓基质；正常骨髓基质对HL-60细胞的生长抑制作用及诱导分化作用均明显强于白血病基质。结论 急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的增殖、分化作用均存在异常。     

铁超载与铁剥夺对Ara-C诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的 :探讨铁超载对铁剥夺对Ara C诱导HL 60细胞凋亡的影响。方法 :细胞培养法、台盼蓝活细胞拒染实验、细胞活力测定、光镜形态学观察、DNA琼脂糖电脉及流式细胞仪 (FCM )等方法检测HL 60细胞凋亡。观察不同浓度的三氯化铁 (FeCl3 )、铁剥夺剂 去铁胺 (DFO)等对HL 60细胞的作用 ,选择 10 0 μmol/LFeCl3 和 10 μmol/LDFO与Ara C共同作用于HL 60细胞 ,并以单用Ara C及生理盐水作对照。结果 :①FeCl3 (10 0 μmol/L) +Ara C(10 0 μg/ml) 6h ,12h ,2 4h ,APO %和Sub -G1%低于单用Ara C(10 0 μg/ml)组 ,两组相比有显著差异性 (P <0 0 5 )。②DFO(10 μmol/L) +Ara C(10 0 μg/ml)组APO %、DNA电泳ladder数目 ,FCM检测Sub -G1%均比单用Ara C高 (P <0 0 1)。③等摩尔的DFO与等摩尔FeCl3 共同作用于HL 60细胞 ,结果与生理盐水组相同 ;等摩尔DFO加等摩尔FeCl3 和Ara C(10 0 μg/ml)与单用Ara C(10 0 μg/ml)结果相同。 结论 :铁超载抑制化疗药物Ara C诱导HL 60细胞凋亡作用 ,铁剥夺 (DFO)可促进化疗药物Ara C诱导HL 60细胞凋亡作用。临床上可采用铁剥夺的方法协同治疗白血病 ,白血病患者补铁应慎重     

苦荞胰蛋白酶抑制剂对HL-60细胞增殖的抑制作用

应用MTT法分析了苦荞胰蛋白酶抑制剂对急性髓细胞性白血病细胞株HL－60细胞生长的影响。结果显示：苦荞胰蛋白酶抑制剂能够显著抑制HL－60白血病细胞的增殖，而对正常细胞毒性较小，其IC50值分别为0．29g/L和1．01g/L，并且对HL－60细胞增殖的抑制作用呈明显的剂量-效应和时间－效应关系。这一结果表明，苦荞胰蛋白酶抑制剂可显著地抑制HL－60细胞的增殖，有望开发成为一种新型的抗白血病药物。