炮制前后何首乌蒽醌类含量的比较研究

[目的]比较用相同方法炮制的不同产地何首乌中蒽醌类含量的差异。[方法]采用紫外分光光度法,以0.5%醋酸镁—甲醇溶液显色测定蒽醌含量,采用HPLC方法测定大黄素的含量。[结果]炮制后,何首乌中结合蒽醌类成分明显降低,总蒽醌类含量有所升高,但结合蒽醌占总蒽琨的比例明显降低;结合大黄素含量明显降低,总大黄素含量有所升高,但结合大黄素占总大黄素的比例明显降低。[结论]炮制对何首乌中蒽醌类成分的含量有影响。相比生首乌,制首乌中结合蒽醌含量明显降低,而总蒽醌含量有所上升;临床发现生首乌具有一定毒性而制首乌毒性较小,这可能和炮制后结合蒽醌含量降低有关系。     

NADH对辐射诱导正常肝细胞株L02损伤时细胞凋亡的影响

目的 研究抗氧化剂NADH对5．0GyX射线照射正常细胞的防护作用。方法 处理组于5．0GyX射线照射后立即加入NADH,一次给药,剂量为100－600μg/ml,分别观察培养6、12、24h后凋亡细胞率及p53和Bcl-2蛋白表达,并且与照射后加入RPMI1640组和假照射组比较。结果 NADH抑制细胞凋亡率呈剂量依赖性,在浓度为400－600μg/ml时达平台,并且能够上调Bcl-2蛋白表达,下调p53蛋白表达,差异非常显著（P＜0．01）。结论 NADH对受照L02肝细胞有明显的防护作用,但其作用机制还需进一步研究。     

年龄与何首乌对大鼠肝细胞胰岛素受体的影响

以＾１２５Ｉ－胰岛素作特异配基，用受体放射分析法研究大鼠年龄及何首乌对大鼠肝细胞胰岛素受体的影响。结果表明：大鼠肝细胞具有高亲和力低容量和低亲和力高容量两种受体，老年鼠结合容量显著下降，但亲和力无变化，何首乌对此受体的两个参数皆无显著影响。     

NADH抗紫外线诱导的肝细胞株L02凋亡

目的 研究还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）抗紫外线照射所致的细胞损伤的分子机制。方法 采用UVB紫外线照射正常肝细胞株L02（照射剂量为200J／m^2），实验组加／对照组不加NADH（400μg/ml）培养24h。AnnexinV/PI法检测细胞凋亡率，DNA凝胶电泳观察DNA断裂片断，流式细胞仪检测p53、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 NADH可明显抑制紫外线诱导的肝细胞凋亡，并且能够上调Bcl-2蛋白表达，下调p53、Bax蛋白表达。经紫外线照射后的肝细胞存在自身修复。结论 NADH能够抗紫外线诱导的细胞凋凋亡，其机制可能与上调Bcl-2，下调p53、Bax表达有关。     

百草枯对大鼠正常肝细胞系增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度百草枯对大鼠正常肝细胞系(BRL-3A)增殖和凋亡的影响。方法将传代培养的BRL-3A细胞分为药品空白组及低、中、高浓度组。向高、中、低浓度组和药品空白组中加入百草枯,使其终浓度依次为4.80、1.20、0.15、0.00μmol.L-1。24 h后噻唑蓝法检测细胞增殖活性;Western blot检测B细胞白血病家族蛋白Bcl-2、Bax和胱天蛋白酶caspase-9、caspase-3的表达变化。结果细胞增殖活性高浓度组低于药品空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中、低浓度组与药品空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞计数高浓度组低于药品空白组,差异有统计学意义(P<0.05);中、低浓度组与药品空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。随着染毒剂量的增加,促凋亡蛋白Bax、caspase-9、caspase-3表达增加,而凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达量则减少。结论百草枯能抑制BRL-3A细胞增殖,这种作用可能是通过调节凋亡相关蛋白表达实现的,但浓度较低时对细胞增殖反而有促进效应。     

索拉非尼对人RKO结肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的 研究索拉非尼对人RKO肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响.方法 将人肠癌RKO细胞给予不同浓度(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L)的索拉非尼处理,MTT法检测索拉非尼对RKO细胞增殖的抑制作用,确定半数抑制浓度(IC50),设为实验组.对照组为二甲基亚砜处理.针对两组细胞,通过细胞克隆...     

微粉化对制何首乌中脂溶性和水溶性成分的影响

制何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorm Thunb.干燥块根的炮制品,具补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的作用,临床上以6～12g饮片煎服,但制何首乌饮片常为不规则皱缩块片,厚约1cm,质坚硬,以常规饮片形式煎煮其有效成分不能充分溶出。制何首乌中主要含脂溶性蒽醌类和水溶性二苯乙烯苷类成分,其中蒽醌类大黄素、大黄素甲醚为制何首乌的主要脂溶性有效成分,以游离和结合型共存于制何首乌中。本研究将制何首乌通过气流粉碎成微粉,研究微粉化对制何首乌脂溶性和水溶性成分的影响,探讨微粉化技术在制何首乌中应用的可行性和必要性。1材料、仪器与试剂制何首乌饮片由广州市药材公司中药饮片厂提供,经何岚博士鉴定为蓼科植物何首乌P.multiflorum Thunb.的干燥块根炮制品。DF-15流水式粉碎机(温岭市大德中药机械有限公司)、QLM-90K微型流化床对撞式气流磨(浙江省上虞市和力粉体有限公司)、Mastersizer 2000激光粒度测定仪(Malvern)、SK250LH超声波清洗器(上海Kodos)、Waters1525高效液相色谱仪、UV2487检测器、717自动进样器。     

何首乌成分、药理及毒副作用相关的研究进展

[目的]总结何首乌在成分、药理和毒副作用方面的研究情况。[方法]查阅CNKI、维普数据库、PUBMED数据库中有关何首乌的研究文献,按成分、药理和毒副作用研究3个方面进行分类、汇总。[结果]①相关成分研究：何首乌主要含有二苯乙烯类、卵磷脂、蒽醌类、黄酮类、鞣质、微量元素等成分,二苯乙烯苷TSG及蒽醌类为其主要活性成分;产地、生长年限、采收时间及炮制工艺对成分含量有影响,其中炮制工艺尚能影响何首乌的成分组成及功效;大孔树脂分离法是目前何首乌中TSG及蒽醌类成分富集分离的主要[方法]。②相关药理及毒副作用研究：何首乌及其TSG等成分具有降脂保肝、抗氧化、抗骨质疏松、降血糖、抗抑郁、抗菌抗肿瘤等作用,降脂保肝是其主要作用。长期大量摄入何首乌可致可逆性肝损伤,主要表现为血清肝功能指标异常,胆汁代谢紊乱等;致肝损伤不良反应的可能物质为鞣质及蒽醌类成分,其中蒽醌类成分为何首乌中具有毒效双重性的成分,实际应用应慎重。[结论]降脂保肝是何首乌主要的药理作用,二苯乙烯苷为保肝降脂主要活性成分;蒽醌类成分为何首乌中具有毒效双重性的成分,应根据用药[目的],谨慎使用。作为临床常用保肝中药,对酒精性肝损伤的保护作用可作为何首乌的新研究点之一;生何首乌及其不同炮制品之间的降脂保肝作用的比较及其成分-药效间的相关性等,值得进一步的深入研究。     

硒对培养人肝细胞的毒性作用

原代培养人胚肝细胞，观察外加不同剂量亚硒酸钠对肝细胞生长代谢的影响，结果表明，当培养液中硒的作用浓度增至１．１５６×１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时，肝细胞聚缩，脱落，丙氨酸转氨酶外释增多，白蛋白合成减少，存活率下降，提示过量硒具有明显的肝细胞毒性作用。     

何首乌制剂致急性肝损伤1例

临床上药物性肝损伤日益增多,其中由中草药及其中成药所致者约占20%~30.2%。其特点是一般停药后并予以对症治疗,大多数患者可很快恢复。现将临床所观察到的1例何首乌制剂所致肝损伤报告如下。1临床资料患者,男,26岁,于2012年6月开始脱发,2012年8月于我院开始行脱发治疗。具体药物:(1)口服药:精乌胶囊[制何首乌、黄精(制)、女贞子(酒     

生、制首乌醇提物对小鼠肝脏的影响

目的:观察炮制对何首乌醇提物不同剂量长期给药对小鼠肝脏的影响。方法:生首乌醇提物、制首乌醇提物按大、中、小剂量灌胃,连续60 d,对受试动物进行血液生化指标及病理组织学的检测。结果:生首乌醇提物小剂量肝指数、病理学积分与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01),其他各给药组仅见趋势;生、制首乌醇提物各剂量组血液生化指标与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:生首乌醇提物临床等效量连续给药60d,对小鼠肝脏存在损伤。     

何首乌肝损伤的研究进展

近年国内外关于口服何首乌及其成方制剂导致的肝损伤问题报道日益增多,本文主要对何首乌炮制工艺、可能性毒性成分及其肝损伤的转化研究方面进行综述,并对何首乌相关性肝损伤的进一步研究提出建议。     

何首乌肝损伤的研究进展

近年国内外关于口服何首乌及其成方制剂导致的肝损伤问题报道日益增多,本文主要对何首乌炮制工艺、可能性毒性成分及其肝损伤的转化研究方面进行综述,并对何首乌相关性肝损伤的进一步研究提出建议。     

复方何首乌浸膏治疗阿尔茨海默病的疗效研究

目的：观察复方何首乌浸膏治疗阿尔茨海默病（AD）的临床疗效。方法：收集AD患者209例,其中复方何首乌治疗组120例,采用复方何首乌浸膏治疗;何首乌组(中药对照组)60例,采用单药何首乌浸膏治疗;西药对照组29例,采用脑复康片治疗,比较各组治疗12周前后简易精神状态量表(MMSE)、日常生活功能量表(ADL)的评分及临床疗效。结果：各组治疗后MMSE及ADL评分均较前改善,复方何首乌治疗组MMSE和ADL评分均明显优于中药与西药对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。复方何首乌治疗组总有效率为93.33％,优于何首乌组的73.33％和西药对照组的68.97％。结论：复方何首乌浸膏治疗阿尔茨海默病的疗效优于单味中药何首乌与西药脑复康。     

何首乌对记忆和抗疲劳作用的实验研究

目的研究何首乌对小鼠学习记忆的影响及其抗疲劳作用。方法采用跳台试验、水迷宫实验与爬杆试验、负重游泳试验和肝糖原测定（抗疲劳作用）,分别观察低、中、高剂量（2.6、7.8、23.4g/kg）何首乌提取物对小鼠改善记忆作用和抗疲劳作用的影响。结果①跳台实验结果显示高剂量组在第1天测试和24h后重测试时,动物平均错误次数显著减少（P〈0.05）;水迷宫实验结果显示高剂量组动物平均错误次数减少（P〈0.05）。②在抗疲劳实验中,爬杆试验的结果显示中高剂量的何首乌提取物能够显著延长小鼠在有机玻璃杆上的坚持时间（P〈0.05）。负重实验发现高剂量组动物负重游泳的生存时间与正常组相比明显延长,解剖后的肝糖原测定发现低剂量组肝糖原量明显降低。结论 23.4g/kg的何首乌对小鼠的记忆获得有改善作用,用药量大于7.8g/kg的何首乌对抗疲劳功能有明显改善作用。     

何首乌提取物对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的 研究何首乌提取物对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用.方法 体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP+致SH-SY5Y细胞损伤模型,实验分为对照组、MPP+损伤模型组、何首乌提取物干预组.干预组在MPP+损伤的基础上,给予不同浓度何首乌提取物(终质量浓度5、25、100 mg/L).MTT比色法检测细胞活力;Hoechst33258染色和白光下观察细胞形态变化,比色法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)及细胞中丙二醛(MDA)含量;通过荧光强度观察活性氧(ROS)的含量和线粒体膜电位的变化.结果 与对照组相比,模型组中细胞活性显著降低,Hoechst33258染色和白光下可见细胞胞体变小、核皱缩、碎裂有明显的颗粒状和固缩状荧光,并且细胞上清液中LDH泄漏明显增多、细胞中MDA含量和ROS显著升高而线粒体膜电位显著降低(P＜0.05).与模型组比较,预先4h给予不同浓度的何首乌提取物(5、25、100 mg/L)能明显改善SH-SY5Y细胞的活性,降低细胞产生的LDH、MDA含量,并恢复线粒体膜高能电位,且对ROS有明显的抑制效果(P＜0.01).结论 何首乌提取物对Mpp+诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有显著的保护作用,其保护作用与其抗氧化应激作用有关.     

不同产地何首乌药材水分、灰分和浸出物的测定

目的：测定何首乌药材的水分、灰分和浸出物的含量,为何首乌药材质量标准的修订提供实验数据。方法：按《中国药典》2005年版一部附录Ⅸ H中水分测定法中的第一法、附录Ⅸ K灰分测定法和附录Ⅹ A浸出物测定法测定。结果：何首乌药材含水量均不超过10.77%,总灰分不高于6.04%,酸不溶性灰分不高于0.71%,冷浸法醇溶性浸出物含量不低于20.03%。结论：本方法为何首乌药材质量标准的修订提供了实验数据。     

塞来昔布抑制人舌鳞癌Tca8113细胞周期进程及诱导凋亡的作用

目的观察选择性COX-2抑制剂塞莱昔布抑制人舌鳞癌Tca8113细胞周期进程及诱导凋亡的作用。方法采用不同浓度塞来昔布处理Tca8113细胞后,采用流式细胞仪检测细胞周期变化;应用Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞早期凋亡,透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果塞来昔布抑制Tca8113细胞生长增殖的作用,与阻滞细胞周期进程有关,其主要阻滞Tca8113细胞从G1期细胞向S期细胞进程,导致G0/G1期细胞的数量增加,S期和G2/M期细胞数量减少。Annexin V-FITC/PI双标记法结果显示,塞来昔布组与对照组相比,早期凋亡细胞增多有显著性意义。透射电镜观察显示,随着塞来昔布浓度的增加及作用时间的延长,Tca8113细胞出早期凋亡细胞至中后期凋亡细胞的变换。结论COX-2抑制剂塞来昔布以剂量依赖的方式,通过抑制细胞周期进程、诱导凋亡抑制Tca8113细胞生长、增殖,其作用机制有待进一步研究。     

DC-CIK细胞对人肝癌HEPG2细胞周期、凋亡的影响

目的 探讨细胞因子从肝癌患者外周血贴壁单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)诱导的树突状细胞( dendritic cells,DCs)与杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对人肝癌HEPG2细胞系周期、凋亡的影响.方法 用肝癌患者肝...     

黄芪和何首乌抗环磷酰胺诱导胸腺细胞凋亡

研究了黄芪和何首乌单用和联用对环磷酰胺诱导朱细胞凋亡改变的影响。环磷酰胺对照组的胸腺细胞呈现明显的凋亡改变,与ＡＭ、ＰＭ和ＡＭＰＭ组比较,结果表明流式细胞仪检测所出现的反映凋亡细胞数量的亚Ｇ１峰－Ａｐ峰,各组的高低不一,依次为ＡＭＰＭ组〈ＡＭ组〈ＰＭ组〈Ｃ组;