高效液相-质谱法联用测定大鼠体内去甲基斑蝥素血药浓度

目的:建立大鼠体内去甲基斑蝥素的 HPLC-MS 分析方法。方法:选用烟尿酸为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理。色谱条件为 Hypersil SAX 阴离子交换色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-水(25∶75,含2.5%甲酸)为流动相,流速0.5mL·min~(-1),采用 HPLC-MS检测系统,AP-ESI 负离子模式,质谱检测参数如下:AP-ESI 负离子模式;雾化压力276kPa;温度350℃;保护气流量8 L·min~(-1);毛细管电压3500V;裂解电压为90V(NCTD)和120V(内标);SIM 检测,NCTD m/z185(M+H_2O-H)、烟尿酸m/z 179(M-H)。结果:血浆中去甲基斑蝥素检测方法的线性范围为0.2-20μg·mL~(-1),最低检测限可达2ng·mL~(-1)。血浆中去甲基斑蝥素的平均回收率为96.7%-100.3%,日内、日间 RSD 均小于8%。结论:本法灵敏、准确、选择性高,可用于去甲基斑蝥素的药代动力学研究。     

RP-HPLC法同时测定复方石韦胶囊中5种成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定复方石韦胶囊中香草酸、绿原酸、芦丁、苦参碱和氧化苦参碱的含量。方法:采用Gemini-C_(18)(250mm×4.6mm,5.0μm)色谱柱;以甲醇(A)-0.04%三乙胺(pH=6.65)(B)为流动相,采用梯度洗脱程序:0min,A-B(15:85);10min,A-B(60:40);13 min,A-B(80:20)。流速为0.8 mL·min~(-1);柱温为27℃;二极管阵列检测波长为220,270,326nm。结果:香草酸、绿原酸、芦丁、苦参碱和氧化苦参碱的线性范围分别为1.14～17.14μg·mL~(-1)(r=0.999 3),4.28～51.42μg·mL~(-1)(r=0.998 0),3.97～43.67μg·mL~(-1)(r=0.999 8),0.06～0.72mg·mL~(-1)(r=0.999 6),9.8～68.6μg·mL~(-1)(r=0.999 6);加样回收率分别为100.1%(RSD<2.4%),99.4%(RSD<1.3%),99.5%(RSD<2.4%),99.9%(RSD<72.8%),100.3%(RSD<2.2%)。结论:该检测方法为复方石韦胶囊的质量控制提供了科学依据。     

HPLC—MS（TOF）法测定大鼠血浆中环维黄杨星D的浓度

目的:本文建立了HPLC-MS(TOF)法测定大鼠ig给药后体内环维黄杨星D的浓度,为进一步研究环维黄杨星D的药代动力学提供了可靠的方法。方法:大鼠血浆中加入内标多奈哌齐后碱化,以液-液萑取法提取血浆后采用LC-ESI-MS(TOF)联用技术,以电喷雾(ESI)作为接口技术,选择环维黄杨星D的准分子离子([M H]~ ,m/z 403)和内标多奈哌齐的准分子离子([M H]~ ,m/z 380)作为测定离子,测定大鼠血浆中环维黄杨星D的浓度。HPLC条件:Lichrospher CN柱(4.6 mm×150mm,10μm),甲醇-醋酸盐缓冲液(80:20)为流动相,流速:0.8mL·min~(-1);质谱检测参数:喷嘴电压力5500V;喷管电压为180 V;检测电压为2 225 V;喷管温度为140℃。结果:环维黄杨星D的线性范围为0.5～200 ng·mL~(-1),最低检测限为0.2 ng·mL~(-1),日内精密度RSD为6.1％,日间精密度的RSD为7.6％。结论:该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点,应用本法测定了大鼠ig给药环维黄杨星D的血浆浓度。     

液质联用法测定犬血浆中阿普唑仑及其代谢物α-羟基阿普唑仑的浓度

目的建立测定Beagle犬血浆中阿普唑仑及其代谢物α-羟基阿普唑仑浓度的液相色谱-质谱联用(LC-MS)法。方法血浆样品采用1 mol·L~(-1)硼酸盐缓冲液(pH 9.0)碱化、乙酸乙酯-正庚烷(85:15,V:V)萃取后LC-MS测定。色谱柱:Zorbax SB-C_(18)柱(150 mm×3 mm,3.5μm);流动相:乙腈-0.01 mol·L~(-1)乙酸胺缓冲液(含1%甲酸)(45:55,V:V);流速:0.3 mL·min~(-1);柱温:40℃。采用电喷雾正离子模式离子化,用于定量分析的离子分别为m/z 309.2(阿普唑仑)、m/z 325.2(α-羟基阿普唑仑)和m/z 343.2(三唑仑,内标)。结果阿普唑仑和α-羟基阿普唑仑的线性范围分别为0.5～50μg·L~(-1)和0.5～32μg·L~(-1),两者定量下限均为0.5μg·L~(-1),提取回收率均>80%,方法回收率为97.3%～102.5%,批内RSD≤10.4%,批间RSD≤12.2%。结论本方法灵敏、准确、重现性好,适用于阿普唑仑犬体内药动学研究。     

液质联用测定人血浆中伪麻黄碱的浓度

目的:建立液质联用法测定人血浆中伪麻黄碱的浓度。方法:采集到的血浆样品以苦参碱为内标,经0.2 mL 0.02 mol·mL~(-1)碳酸钠溶液碱化后氯仿萃取进行 LC-MS 分析。色谱条件为 Kromasil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(13:87),流速为1.0 mL·min~(-1);质谱条件为大气压电喷雾离子源(ESI 源),正离子方式检测;扫描方式为选择离子监测(SIM),用于定量分析的离子分别为 m/z 166(伪麻黄碱)和 m/z 249(苦参碱)。结果:方法的线性范围为5～300 ng·mL~(-1),定量下限为5 ng·mL~(-1),提取回收率均大于77.9%,日内、日间精密度(RSD)均小于12.7%。结论:本方法灵敏、专属,适于伪麻黄碱人体血浆药物浓度的测定。     

HPLC-MS/MS法测定琥乙红霉素颗粒体内活性代谢物

目的:建立琥乙红霉素人体内活性代谢物红霉素的HPLC-MS/MS分析方法。方法:选用克拉霉素为内标,血浆样品经正己烷-二氯甲烷-异丙醇(300∶150∶15)提取处理,通过检测活性代谢物红霉素的浓度来监测琥乙红霉素体内行为。色谱条件Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(80∶20,含0.5%甲酸)为流动相,流速0.6 mL·min-1,采用HPLC-MS/MS检测系统(SRM模式),质谱采用电喷雾电离源(ESI),红霉素选择检测离子对为m/z 734→m/z 158,内标克拉霉素选择检测离子对为m/z 748→m/z 158。结果:血浆中红霉素检测方法的线性范围为9.724～2431.0 ng·mL-1,最低检测限可达9.724 ng.mL-1。血浆中红霉素的平均回收率为77.6%～80.0%;日内、日间RSD均小于11%。结论:本法灵敏、准确、选择性高,可用于监测琥乙红霉素的体内行为。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中纳美芬的浓度

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用的方法测定人血浆中的纳美芬。方法血浆样品经乙酸乙酯-二氯甲烷(4:1,V:V)液液提取后,以Agilent Eclipse XDB-C_(18)(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.02 mol·L~(-1)醋酸铵(70:30,V:V),流速为0.8 mL·min~(-1),柱温为25℃,进样量为40μL,在Agilent 1100 LC/MSD XCT离子阱质谱仪上,大气压化学电离(APCI)源,正离子电离方式,以多离子反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 340→322(纳美芬)和m/z 383→337(纳络酮,内标物)。结果纳美芬的定量下限为0.10μg·L~(-1),线性范围为0.1～10μg·L~(-1)(r= 0.9995),样品提取回收率为65%～84%,日内RSD和日间RSD均≤15%,且稳定性良好。结论该法操作简便、快速、灵敏度高,可用来进行纳美芬的临床血药浓度和药动学研究。     

LC／MS／MS测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度

目的:用高效液相色谱-质谱联用方法同时测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度。方法:大鼠血浆用乙醚萃取法处理后,采用 LC/MS/MS 方法,测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度。HPLC 条件:大连依利特 Hypersil BDS C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,3μm),流动相:水(含0.1%甲酸)-乙腈(39:61,v/v),柱温:12℃,流速:200 μL·min~(-1),进样量:10 μL;质谱检测参数为电喷雾电离源(ESI);喷雾电压:3500 V;碰撞压力:0.1333 Pa;源内碰撞诱导电压:普萘洛尔,10 V;4-羟普萘洛尔,15 V;N-去异丙基普萘洛尔,15 V;扫描时间:0.3 s;检测离子:普萘洛尔 m/z 260[M H]~ ;4-羟普萘洛尔 m/z 276[M H]~ ;N-去异丙基普萘洛尔218[M H]~ 。结果:普萘洛尔线性范围2—1000 ng·mL~(-1),最低定量限为2 ng·mL~(-1)。4-羟普萘洛尔和 N-去异丙基普萘洛尔的线性范围1～200 ng·mL~(-1),最低定量限为1 ng·mL~(-1)。普萘洛尔的萃取回收率在90%以上,4-羟普萘洛尔和 N-去异丙基普萘洛尔的萃取回收率均为50%以上,日内、日间 RSD 皆小于15%。结论:适用于测定大鼠血浆中普萘洛尔及其代谢物4-羟普萘洛尔、N-去异丙基普萘洛尔的浓度及药动学的研究。     

LC-MS／MS法测定人血浆中米格列醇

目的:建立测定人血浆中米格列醇的 LC-MS/MS 法。方法:以盐酸格拉司琼为内标,以 Kromasil CN 柱(2.1 mm×150mm,3.0μm)为分析柱;采用0.05%三氟乙酸乙腈溶液-0.05%三氟乙酸水溶液(80:20)为流动相;流速0.2 mL·min~(-1);柱温45℃。质谱条件为电喷雾电离源(ESI~ ),以选择反应离子监测(SRM)方式进行检测,用于定量分析的反应离子分别为 m/z208.1→146.1(米格列醇),m/z 313.1→138.0(盐酸格拉司琼)。结果:米格列醇在0.01～4.0μg·mL~(-1)浓度范围内线性良好;最低检测限为2.0 ng·mL~(-1)(S/N=4);日内、日间精密度(RSD)均小于7%;低、中、高3个浓度的方法回收率均大于90%。结论:本法专属性强,灵敏度高,样品处理简单,可用于米格列醇临床药物动力学研究。     

HPLC法测定血浆中托瑞米芬浓度

目的:建立简便可靠的托瑞米芬(Tor)体内浓度的测定方法。方法:以吲哚美辛为内标,蛋白沉淀法进行预处理,用HPLC紫外检测,C_(18)(150mm×4.6mm,5μm,流动相:乙腈-0.1mol·L~(-1)乙酸铵(65:35,V/V),流速1.0mL·min~(-1),检测波长277nm。结果:Tor保留时间为9.1min,最低定量限为0.5μg·mL~(-1),线性范围0.5～10 μg·mL~(-1),r=0.9997,处理后血浆样品稳定性良好,平均批内、批间RSD均<4％。结论:该方法符合相应要求,适用于基础医学研究和Tor人体血药浓度检测。