微卫星不稳定性与结直肠癌的研究进展

结直肠癌(CRC)在全球范围内的发病率和死亡率均较高。目前研究认为CRC是一种由各种原因造成的遗传不稳定性长期积累、共同作用所致的异质性疾病,微卫星不稳定性(MSI)是其中的主要途径之一。本文就MSI与CRC的研究进展作一综述。     

散发性结直肠癌微卫星不稳定性及其与临床病理生物学的关系

目的:探讨分析中国人散发性结直肠癌微卫星不稳定的变异及其与临床病理生物学特征的关系.方法:应用荧光多重PCR方法检测105例散发性结直肠癌初诊患者微卫星状态,分析MSI结直肠癌潜在的相关临床病理生物学特征.结果:105结直肠癌中,MSI检出率24.7%,其中MSI-H 14例(13.3%),MSI-L 12例(11.4%);队列中各位点突变率分别是D5S346(5.7%),BAT26(8.6%),BAT25(10.5%),D17S250(8.6%),D2S123(10.5%);MSI结直肠癌的组织分化程度与淋巴结转移情况与MSS结直肠癌有显著的统计学差异(P=0.047,P=0.029),但在患者年龄、肿瘤位置、病理性质无显著临床意义(P＞0.05).结论:MSI结直肠癌具有低分化癌多见,淋巴结转移少等特点,淋巴结转移少可能是MSI结直肠癌具有生存优势的原因之一.     

散发性结直肠癌46例微卫星不稳定性的研究

结直肠癌可以分为遗传性的和非遗传的,遗传性结直肠癌有两种,一种是家族性腺瘤样息肉病(familial adenomatous polyposis,FAP);另一种是遗传性非息肉样结直肠癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer,HNPCC).非遗传性结直肠癌即为散发性结直肠癌.     

结直肠癌线粒体DNA拷贝数与其微卫星不稳定关系的研究

目的 探讨结直肠癌(CRC)的线粒体DNA(mtDNA)拷贝数异常与临床指标及微卫星不稳定(MSI)的关系.方法 选取50例CRC及相应癌旁组织标本,分别提取基因组DNA.对非编码区微卫星位点进行测序;对线粒体ND1基因进行荧光定量PCR,进而计算出mtDNA拷贝数;然后与临床指标和非编码区MSI进行比较分析.结果 CRC组织的mtDNA平均拷贝数/细胞数为312±185,而相应的癌旁组织为525±125,前者显著低于后者(P<0.001).mtDNA拷贝数高低与非编码区MSI有明显相关性(P<0.001),与性别、年龄、病理分型、TNM分期无相关性(P>0.05).结论 CRC的mtDNA拷贝数明显降低,这种降低与线粒体的MSI相关.     

上海石化地区老年人血吸虫病相关性结直肠癌临床病理特征及预后分析

目的 探讨血吸虫病对老年人结直肠癌组织学分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等恶性生物学行为以及预后的影响.方法 收集我院2004年1月至2010年12月间60岁及以上老年人结直肠癌根治标本184例,分为两组:血吸虫病相关结直肠癌(colorectal carcinoma with schistosomiasia,CRCS)组102例,单纯结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)组82例.以CRC组为对照,分析血吸虫病对老年人结直肠癌临床病理特征的影响.同时,收集2004年1月至2006年12月间40例老年人结直肠癌预后资料并进行相关分析.结果 184例老年人结直肠癌中55.4％(102/184)合并血吸虫病.与CRC组比较,老年人结直肠癌发生部位、生长方式、分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期与血吸虫病密切相关(x2值分别为16.53、10.81、10.46、6.71、3.90、5.73,均P＜0.05).生存分析发现血吸虫病对老年人结直肠癌患者生存时间影响不明显(x2=0.14,P＞0.05).结论 合并血吸虫病与老年人结直肠癌的恶性生物学行为有关,但对术后生存时间无显著影响.     

结直肠癌合并2型糖尿病患者的临床病理特征

目的:分析结直肠癌合并2型糖尿病患者的临床病理特征.方法:本研究的观察组对象是2018年12月至2020年12月在我院接受治疗的30例结直肠癌合并2型糖尿病患者,对照组对象是同时间段内于我院接受治疗的30例结直肠癌患者(未合并2型糖尿病),统计两组研究对象的各项基础资料,以及两组病患的TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转...     

结直肠癌错配修复蛋白和微卫星不稳定检测的对比分析

目的目前最常用的筛查结直肠癌DNA错配修复基因缺失的方法是免疫组化检测错配修复（MMR）基因相关蛋白的表达,以及基于PCR检测多个微卫星位点判断有否微卫星不稳定（MSI）这2种方法,本研究主要目的是比较这二种检测之间的一致性,并对分子病理室作室内质量控制。 方法收集2014年8月至2015年10月湖北省肿瘤医院结直肠癌368例手术切除标本,免疫组化常规检测癌组织MLH1,PMS2,MSH2及MSH6这4种蛋白的表达。免疫组化显示任一蛋白完全缺失,判读为MMR蛋白缺失（dMMR）;如癌细胞4个MMR有多少不等的核着色,判读为MMR无缺失（pMMR）。选取其中的65例行PCR-毛细管电泳法检测MSI,其中28例为pMMR,37例为dMMR。然后对这65例组织用PCR毛细管电泳法检测Bethesda推荐的5个微卫星位点。比对这65例患者上述二种检测结果之间的一致性,并分析、整理其临床病理特征。 结果368例结直肠癌中有37例免疫组化结果为dMMR中,其余331例为pMMR。37例中剔除2例后对其中35例行毛细管PCR法检测,显示高频MSI者32例,微卫星稳定（MSS）者3例。选取331例中的28例行PCR检测,显示MSS者27例,MSI-H者1例。免疫组化法检测的敏感度和特异性分别为97.0%和90.0%,PCR检测结果的敏感度和特异性分别为91.4%和96.4%;二者总的一致性为93.7%。伴MSI的结直肠癌原发灶以右半结肠最多见（占48.6%）,病理形态以低分化腺癌伴淋巴细胞浸润和粘液分泌最常见,病理TNM分期以Ⅱ期和Ⅲ期为主。 结论免疫组化检测MMR蛋白和基于PCR的毛细管电泳法检测MSI二者的一致性高,其中免疫组化法可以作为临床初筛结直肠癌微卫星不稳定性的一种经济而便捷的方法,值得推广。     

中青年与老年结直肠癌患者临床病理特征比较

背景：近年我国结直肠癌发病率呈持续上升趋势,且发病年龄早于西方国家.目的：探讨中青年与老年结直肠癌患者临床、病理特征的差异.方法：选取2005年1月～2010年11月于上海曙光医院宝山分院确诊的结直肠癌患者,根据年龄分为中青年组（≤60岁）和老年组（＞60岁）,对两组临床、病理资料进行回顾性分析.结果：79例中青年和158例老年结直肠癌患者纳入研究.两组均以男性和直肠癌为主.与老年患者相比,中青年患者有肿瘤家族史者比例较高,多以血便或排便习惯改变为首发症状,贫血发生率较低,确诊时间较短,肿瘤Dukes分期和组织学类型与老年患者无明显差异.结论：中青年结直肠癌患者的发病受遗传因素影响大,首发症状与老年患者有明显差异,病理特征与老年患者相似.对可疑病例应及早行结肠镜检查.     

线粒体异常与结直肠癌

最近研究已证实许多肿瘤中存在线粒体突变,如点突变、大片段缺失以及编码区和非编码区微卫星不稳定性,而正常组织中却未发现。目前尚不能证明线粒体突变是肿瘤形成的惟一原因,但其在细胞凋亡和活性氧簇引起的DNA损伤过程中起重要作用,因此线粒体突变可能与肿瘤的发生有关。本文就线粒体异常与结直肠癌的关系作一综述。     

青年人结直肠癌的临床病理特征及预后因素分析

目的 分析青年人结直肠癌的临床病理特征及预后因素.方法 回顾性分析144例青年结直肠癌患者(青年组)和142例老年结直肠癌患者(老年组)的临床资料,分析青年人结直肠癌的临床病理特征及影响预后因素.结果 青年结直肠患者临床症状缺乏特异性,易漏诊和误诊;其原发肿瘤部位较低,直肠中下段占60.4％;标本大体类型以溃疡型多见(占83.3％),组织学类型以腺癌多见;分化程度以低、中分化多见,Duke's分期B、C、D期占91.7％.青年组1、3、5年生存率分别为96％、74％、67％,与老年组(87％、65％、55％)比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).Duke's分期和年龄是影响预后的重要独立因素(P均＜0.05).结论 青年结直肠癌肿瘤部位较低,其组织学类型、分化程度较差,恶性程度高,预后差.Duke's分期和年龄是影响预后的重要独立因素.     

结直肠锯齿状病变的微卫星状态研究

目的 比较结直肠锯齿状病变与传统腺瘤、腺癌的微卫星状态的差异,以期间接验证传统型锯齿状成瘤通路的存在.方法 收集北京军区总医院病理科保存的75例大肠息肉及肿瘤组织蜡块标本,其中锯齿状腺癌(Sca)15例,非锯齿状腺癌(N-Sca)20例,传统型锯齿状腺瘤(TSA)20例,普通腺瘤20例.抽提基因组DNA,采用荧光标记引物扩增BAT25、BAT26两个位点,随后使用DNA自动测序仪检测其微卫星状态,并对实验结果进行统计学分析.结果部分标本扩增失败,对于成功扩增的68例标本:18例TSA中6例为高度微卫星不稳定型(MSI-H),12例为低度微卫星不稳定型(MSI-L)/微卫星稳定型(MSS);18例普通腺瘤均为MSS;13例Sca中3例为MSI-H,10例为MSI-L/MSS;19例N-Sca中仅1例为MSI-H,18例为MSI-L/MSS.统计学分析表明,普通腺瘤组、N-Sca组MSI-H发生率明显低于TSA组和Sca组(P<0.05),而后两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 与普通腺瘤、N-Sca相比,MSI-H更多见于TSA、Sca,由此推断存在一条有别于传统"腺瘤-癌"发生模式的传统型锯齿状成瘤通路,但尚需大规模前瞻性研究确认.     

遗传性非息肉病性结直肠癌的微卫星不稳定研究

目的　探讨国人北方人群HNPCC的微卫星不稳定 (microsatelliteinstability ,MSI)发生情况及其意义。方法　 44例患者来源于 3 0个HNPCC (hereditarynonpolyposiscolorectalcancer)家系 ,这些家系主要分布于北方 5省市。所有患者均符合BGl 3 (Bethes dal 3 )HNPCC诊断标准。以荧光标记法检测 44例患者的石蜡包埋组织微卫星稳定性。结果　 44例患者中高度微卫星不稳定 (highfrequencymicrosatelliteinstability ,MSI H)为 81.81( 3 6/ 44 ) ,低度微卫星不稳定 (lowfrequencymicrosatelliteinstability ,MSI L)为 6.82 ( 3 / 44 ) ,微卫星稳定 (microsatellitestable ,MSS)为 11.3 ( 5 / 44 ) ;所选择的 5个微卫星位点中Bat2 5和Bat2 62个位点MSI H的表达率较高 ,分别为 10 0 %和 97.2 2 %。符合AmsterdamⅡ和符合BGl 3标准的HNPCC患者的MSI H表达率分别为 85 .2 9%和 81,81% ,仅符合BGl 3标准 ,而不符合AmsterdamII的 10个患者中 ,7个发现MSI H。结论　HNPCC肿瘤的MSI H发生率高 ,MSI检测方法简便、易行 ,可作为错配修复基因种系突变初筛方法 ,Bethesdal 3标准可更多地收集到可疑的HNPCC患者     

Telomerase activity in colorectal cancer, prognostic factor and implications in the microsatellite instability pathway

AIM： To determine whether the telomerase activity is related to the Microsatellite instability （MSI） genetic pathway and whether it means a difference in the survival.
METHODS： The population consisted of 97 colorectal cancer patients. MSI determination was performed in accordance with the NCI criteria using PCR and Genescan. Telomerase activity was determined by the TRAP-assay, an ELISA procedure based on the amplification of telomeric repeat sequences.
RESULTS： 6.2% showed high MSI （MSI-H）, 10.3% showed low MSI （MSI-L） and 83.5% did not show this alteration （MSS）. Positive telomerase activity was detected in 92.8% of the patients. 83.3% of MSI-H tumors showed positive telomerase against 93.8% of MSS tumors. In the overall survival analysis the absence of telomerase activity conferred a better prognosis.
CONCLUSION： Previous works have shown that tumors which develop via the MSI pathway present a better prognosis. No link between telomerase activity and MSl status is observed, although sample sizes are small. Patients with telomerase negative tumors had better overall survival than patients with telomerase positive tumors.     

结合CT影像学及临床病理学特征评估直肠癌术前N分期

目的探讨影响直肠癌N分期的CT影像学及临床病理学特征及其结合评估直肠癌术前N分期的作用。 方法回顾性收集四川大学华西医院胃肠外科2010年7月至2013年7月间行直肠癌根治性切除术的300例中低位直肠癌患者的临床资料,根据术后病理将患者分为淋巴结阴性组（164例）和淋巴结阳性组（136例）,分析影响淋巴结分期的CT影像学及临床病理特征,并分析其结合评估直肠癌术前N分期的作用。 结果与淋巴结阴性组比较,淋巴结阳性组CEA较高（Z=-3.636,P<0.001）、肿瘤大小较大（t=-4.460,P<0.05）,并且T分期较晚（Z=-4.895,P<0.05）、分化程度较低（Z=-4.861,P<0.05）;两组间性别、年龄、CA199、肿瘤位置、手术方式、肿瘤分型的差异无统计学意义（P>0.05）;此外淋巴结阳性组CT片淋巴结数目较多（Z=-5.134,P<0.001）,平均长径（t=-6.462,P<0.05）、平均短径（t=-6.900,P<0.05）、最长长径（Z=-4.128,P<0.001）、最长短径（t=-7.183,P<0.05）以及CT值（Z=-6.560,P<0.001）均较大;淋巴结位置两组间差异有统计学意义（χ²=8.202,P<0.05）。多因素分析显示只有T分期、分化程度是淋巴结分期的独立影响因素。CT片指标与CEA、T分期、或分化程度结合可提高诊断特异性至80%以上。 结论T分期与分化程度是淋巴结分期的独立影响因素,CT片指标与CEA、T分期、或分化程度结合可提高诊断特异性至80%以上,但是敏感性和准确性仍较低,需要研究发现其他新的淋巴结分期方法。     

应用MNA-SF和NRS2002评价老年结直肠癌患者营养状况

目的旨在通过运用营养风险筛查2002(NRS-2002)及微型营养评估精法(short-form mini-nutritional assessment,MNA-SF)工具对125例老年结直肠癌患者进行营养评估,并探讨NRS2002和MNA-SF与传统营养评价方法的相关性。 方法选定2012年3月至2013年9月哈尔滨医科大学附属第二医院普外科新入院结直肠癌患者125例作为研究对象。患者入院后48小时内采集营养相关指标,并应用NRS-2002和MNA-SF对患者进行营养评估,分析研究对象营养风险的总体情况,计算两种方法与传统指标的相关性。 结果125例结直肠癌患者应答率100%,无额外费用。用BMI中国标准判定营养不足发生率为30.0%,NRS2002营养风险率为32.8%,MNA-SF营养风险率为59.2%,NRS2002与BMI、Alb、Hb呈显著负相关系(P<0.05),MNA-SF与BMI、Alb、Hb呈显著正相关系(P<0.05)。 结论本组老年结直肠癌患者营养不良发生率较高,NRS2002和MNA-SF均适用于老年结直肠癌患者的营养评估,但尚未发现联合应用的额外获益。     

Dinucleotide microsatellite repeats are essential for the diagnosis of microsatellite instability in colorectal cancer in Asian patients

AIM: The molecular diagnosis of microsatellite instability (MSI) in colorectal cancer (CRC) is based on the analysis of five microsatellite markers. Among them, the two mononu-cleotide microsatellite repeats are considered more informative for this analysis than the three dinucleotide ones. The aim of this study is to establish the most relevant markers for MSI analysis in colorectal cancers from Asian patients. METHODS: The MSI analysis of 143 CRC cases in a routine molecular diagnostic laboratory was reviewed. Analysis by fluorescence-based PCR of the five recommended microsatellites was performed, followed by data interpretation according to internationally accepted guidelines. The results were analyzed to address (1) the rate of success in the analysis of histopathological samples not specifically prepared for molecular analysis; (2) the relative importance of individual markers in the diagnosis of high-MSI (H-MSI). RESULTS: MSI analysis was unsuccessful in 34 cases (24%), but for tissues archived in recent years the unsuccessful rate was 5%. We found the D2S123 marker the most vulnerable to inadequate tissue preservation, failing to amplify in 58 instances. Approximately 30% (32/109) of the cases were H-MSI, while 7/109 (6%) were low-MSI. A detailed analysis of the H-MSI cases revealed that the dinucleotide repeats (and D5S346 in particular) were more relevant than the mononucleotide repeats in assigning the correct MSI status. CONCLUSION: The analysis of dinucleotide repeats is essential for the establishment of MSI status in Asian CRC patients.     

HNPCC大肠腺瘤及癌组织微卫星不稳定与TGFβRII表达的关系

目的观察遗传性非息肉病性大肠癌（HNPCC）和大肠腺瘤癌组织中TGFβRRII、错配修复基因（hMLH1、hMSH2、hMSH6）蛋白表达和微卫星不稳定（MSI）的关系。方法以来源于33个HNPCC家系的大肠腺瘤28例和大肠腺癌14例为观察对象，以32例散发性大肠腺瘤和24例散发性大肠癌作为对照。采用免疫组织化学技术，检测大肠腺瘤及大肠腺癌组织中TGFβRRII、hMLH1、hMSH2、hMSH6蛋白表达。从活检组织中提取DNA，选择BAT-25、BAT-26、D2S123、D5S346、D17S250五个微卫星位点行荧光标记聚合酶链反应（PCR），以GeneMapper软件分析PCR产物。通过与正常黏膜微卫星序列PCR片断长度进行比较，判定腺瘤和癌组织的MSI情况。结果64．29％的HNPCC大肠腺瘤和71．43％的HNPCC大肠癌表现为MSI—H，明显高于散发性大肠腺瘤9．38％和散发性大肠癌12，5％。分别有67．86％的HNPCC大肠腺瘤和71.43％的HNPCC大肠癌表现为MMR蛋白表达缺失。明最高于散发性大肠腺瘤3．13％和散发性大肠癌12．5％。分别有57．14％的HNPCC大肠腺瘤和78.57％的HNPCC大肠癌表现为TGFβRRII低表达，明显高于散发性大肠腺瘤9．38％和散发性大肠癌41．67％。在MSI．H的HNPCC大肠腺瘤中，TGFl3RII低表达者占77．78％，MSI—H的HNPCC大肠癌中90％出现TGFβRRII的低表达。MSI—H的散发性大肠腺瘤中TGFβRRII的低表达率为66．67％，MSI—H的散发性大肠癌TGFβRRII的低表达率为100％。结论大部分HNPCC大肠腺瘤和大肠癌出现MSI—H，大部分MSI-H大肠腺瘤和大肠癌表现为TGFβRRII低表达。MSI、MMR、TGFβRRII的检测对腺瘤癌变风险的估计具有重要意义。