Cox-2/PGE-2及IL-6在Wnt/β连环蛋白-骨代谢信号通路中的作用机制

<正>Wnt/β连环蛋白信号通路在Wnt信号通路中最为经典,其对应力刺激敏感,能够将机械信号转化为生物化学信号,并对OPG/RANKL/RANK骨代谢信号进行调控。COX-2/PGE-2作为Wnt/β连环蛋白信号对骨代谢信号通路调控的中间途径,     

应力刺激对-连环蛋白的影响以及Wnt/-连环蛋白在骨代谢信号通路中的作用

<正>在Wnt家族及其作用途径的相关信号分子中,无论何种亚型或分子的异常表达都可能破坏Wnt系统的平衡机制,导致骨骼发育或代谢异常。Wnt与受体结合激活3类信号途径,其中Wnt/-连环     

鼻咽癌组织中β-连环蛋白基因表达水平的初步研究

目的 观察鼻咽癌组织中β-连环蛋白(pcatenin)的基因表达水平,以进一步研究其与鼻咽癌发生、发展的关系。方法 采用RT-PCR半定量方法检测鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中β-连环蛋白的表达情况。结果 15例鼻咽癌组织中有11例β-连环蛋白基因表达水平减弱(占73．3%)。结论 β-连环蛋白的异常表达在一定程度上改变了鼻咽癌组织的分子正常功能及其介导的信号传导作用,提示β-连环蛋白是一个与鼻咽癌的发生、发展相关的生物学指标。     

糖原合成激酶-3β/β-连环蛋白信号通路在贫铀致人肾近曲小管上皮细胞损伤中的作用

目的 探索糖原合成激酶-3β（GSK-3β）/β-连环蛋白信号通路对贫铀（depleted uranium,DU）致人肾近曲小管上皮HK-2细胞损伤的作用。方法 不同浓度DU染毒HK-2细胞3~24 h,采用免疫荧光法检测肾损伤分子-1（KIM-1）和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）表达水平以观察DU诱导HK-2细胞的损伤,免疫荧光法检测β-连环蛋白核转位,Western blot法检测p-GSK-3β（S9）、GSK-3β、β-连环蛋白及c-myc蛋白表达变化,观察GSK-3β/β-连环蛋白信号通路的时相变化;采用GSK-3β（KD）质粒瞬时转染和GSK-3β特异性抑制剂TDZD-8处理抑制HK-2细胞的GSK-3β活性,采用β-连环蛋白质粒瞬时转染HK-2细胞使其过表达,观察GSK-3β活性和β-连环蛋白表达变化对DU染毒致HK-2细胞损伤的影响。结果 300和600 μmol/L DU染毒致HK-2细胞KIM-1和NGAL阳性细胞率随染毒时间的延长和染毒剂量的增加而增加,染毒后6、9和24 h明显高于空白对照组（KIM-1阳性细胞率：t=11.06、18.97、30.49,P<0.05;t=6.79、16.02、85.45,P<0.05;NGAL阳性细胞率：t=11.78、11.37、34.29,P<0.05;t=7.34、21.63、36.84,P<0.05）;p-GSK-3β（S9）/GSK-3β比值和核β-连环蛋白阳性细胞率于染毒后3、6、9和24 h明显高于空白对照组;核β-连环蛋白阳性细胞率：t=4.61、6.52、36.64、14.93,P<0.05）,于染毒后9 h达峰值,还激活了β-连环蛋白下游靶基因c-myc的蛋白表达。瞬时转染GSK-3β（KD）质粒明显抑制了HK-2细胞的GSK-3β活性（t=8.07,P<0.05）,降低了DU致染毒HK-2细胞的KIM-1阳性细胞率（t=24.77,P<0.05）。TDZD-8抑制GSK-3β活性的同时提高了β-连环蛋白核转位,亦能显著降低DU染毒诱导HK-2细胞的KIM-1阳性细胞率（t=6.25、6.73,P<0.05）。而且,β-连环蛋白过表达显著减轻了DU诱导的HK-2细胞损伤（t=7.48,P<0.05）。结论 GSK-3β/β-连环蛋白信号通路是调控DU致HK-2细胞毒性的关键通路,抑制GSK-3β活性及β-连环蛋白表达能有效拮抗DU诱导的HK-2细胞损伤。     

大鼠角膜缘上皮细胞的体外培养以及碱烧伤后β-连环蛋白表达的实验研究

目的探讨角膜缘上皮细胞的体外培养以及碱烧伤后β-连环蛋白(β-catenin)的表达规律。方法消化法培养大鼠角膜缘上皮细胞,并对其生物学特征[细胞形态、泛角质蛋白抗体(AE1/AE3)和细胞核增殖抗原(PCNA)]做初步鉴定;构建体外碱烧伤模型,利用实时定量聚合酶链反应和免疫荧光技术检测伤后各时相点β-catenin的表达。结果体外培养的角膜缘上皮细胞具典型的上皮细胞特点,大部分细胞分化程度较低且生活状态良好;核酸和蛋白水平均显示,伤后24小时β-catenin的表达有显著升高(P0.05),至伤后48小时达到峰值(P0.01)。结论在一定程度上可以利用角膜缘上皮细胞的研究结果来近似反映角膜干细胞的特点;Wnt经典信号途径参与了碱烧伤后的细胞修复过程。     

Wnt/β-catenin信号转导通路与卵巢癌的相关研究

目的研究Wnt/β-catenin信号通路的枢纽分子β-连环素(β-catenin)及其下游靶基因c-Myc在卵巢癌中的表达。方法应用免疫组化S-P法检测60例卵巢癌、24例卵巢上皮良性肿瘤以及26例正常卵巢上皮组织中β-catenin和c-Myc的表达情况。结果β-catenin在卵巢癌组织的异位表达与正常卵巢组织相比,差异有统计学意义(P<0.05);β-catenin与卵巢癌的组织学分型以及分化程度具有相关性(P<0.05);c-Myc在卵巢上皮癌中表达分别与卵巢上皮良性肿瘤和正常卵巢上皮组织组相比,差异有统计学意义(P<0.05);c-Myc与卵巢癌分化程度相关(P<0.05);在卵巢癌组织中,β-catenin的异位表达与c-Myc的表达具有相关性(P<0.05)。结论Wnt/β-catenin信号通路可能是卵巢癌的发生途径。     

Wnt1介导的信号通路在肿瘤发病中的作用及研究现状

截止到目前,在人类染色体中已发现19种Wnt基因家族成员,其编码的分泌性糖蛋白含有24个保守的半胱氨酸残基,是Wnt信号传导通路的启动因素。Wnt信号传导通路有两条主要的分支：经典的Wnt/β-catenin通路和非经典的细胞极性通路/Wnt-Ca2＋通路。研究发现,在经典通路中,Wnt1蛋白与家族中其他成员一样,     

Wnt/β-catenin信号通路——乳腺癌的潜在治疗靶点

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤之一,目前主要采取手术结合放化疗的综合治疗手段进行治疗,但是乳腺癌的异质性使得部分亚型尤其是三阴性乳腺癌的治疗疗效欠佳,预后也相对较差.目前研究表明Wnt/β-catenin信号通路异常表达在乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌中广泛存在,其与乳腺癌的发生、发展、侵袭、转移和预后不良密切相关;抑制Wnt/β-catenin信号通路能有效抑制乳腺癌细胞的生长和对化疗药物的多药耐药,而且Wnt/β-catenin信号通路与辐射抗性密切相关.随着对Wnt/β-catenin信号通路的深入了解,它将有希望成为乳腺癌特别是三阴性乳腺癌靶向治疗和放射增敏治疗的新靶点.     

Wnt／β-catenin信号通路与银屑病相关性研究进展

银屑病是一种多基因遗传决定的、多环境因素刺激诱导的免疫异常性慢性炎症性增殖性皮肤病，而成熟的体细胞中Wnt信号通路异常活化可导致多种疾病和肿瘤形成，目前国内外关于Wnt／β-catenin信号通路与银屑病的相关性研究越来越多，本文就此研究进展做一综述。     

选择性COX-2抑制剂celecoxib对子宫肌瘤细胞的增殖抑制及其分子机制

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）选择性抑制剂塞来昔布（celecoxib）对子宫肌瘤细胞的增殖抑制作用和分子机制。方法给予原代培养的子宫肌瘤细胞不同浓度的celecoxib处理,MTT法测定细胞生长抑制率;半定量RT-PCR法检测子宫肌瘤细胞Wnt信号通路的关键基因Wnt5b、β-catenin、c-myc的表达及塞来昔布对子宫肌瘤细胞增殖活化的影响。结果塞来昔布可显著抑制体外培养的人子宫肌瘤细胞增殖,随着药物剂量的增加和时间的延长,子宫肌瘤细胞的增殖和活化明显抑制,呈剂量和时间依赖性,而这种作用是通过抑制Wnt信号通路实现的。结论子宫肌瘤细胞中存在Wnt信号通路且celecoxib在体外能抑制此通路活化,从而抑制肌瘤细胞的增殖。     

Wnt信号途径在胃癌组织和细胞系中的活化

目的研究Wnt通路在胃癌组织中的活化状态及其与胃癌发生发展的关系。方法应用免疫组化、免疫荧光、RT-PCR和Western蛋白印迹等方法,在胃癌组织和细胞系中检测Wnt信号途径的活化状态。结果Wnt 2、β-catenin和TCF4在胃癌组织中的表达明显高于癌前病变组织(P<0.01);Wnt组与Wnt-组中癌前组织和胃癌组织的分布具有显著统计学差异(P<0.001)。结论Wnt信号通路在胃癌组织中呈活化状态,并与胃癌发生发展密切相关。     

模拟微重力效应对骨细胞Wnt/β-catenin通路的影响

目的探究模拟微重力效应对骨细胞Wnt/β-catenin信号通路活性的影响,以阐明微重力导致骨质丢失的发生机制。方法将骨细胞MLO-Y4分为两组:模拟微重力组和静置对照组。细胞旋转培养以模拟微重力效应,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞Wnt/β-catenin信号通路相关组分的基因和蛋白表达水平。结果 RT-PCR结果显示,模拟微重力组的Cyclin D1和Lef-1 mRNA水平显著低于对照组(P0.05),CX43和抑制剂SOST的mRNA水平显著高于对照组(P0.05),而两组的Wnt3a、Lrp5和β-catenin的mRNA水平无显著性差异。Western blot结果显示,模拟微重力组的β-catenin和Cyclin D1的蛋白表达水平显著低于对照组(P0.05),Lef-1和抑制剂SOST蛋白质的表达水平显著高于对照组(P0.05),而两组Wnt3a、Lrp5/6和CX43的蛋白表达水平无显著性差异。结论模拟微重力效应下骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活性有所下降。     

氯硝柳胺对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的放射增敏作用研究

目的 研究氯硝柳胺对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的放射增敏作用及其与Wnt/β-连环蛋白信号通路相关的作用机制。方法 四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度的氯硝柳胺对MDA-MB-231细胞生长的抑制效应,求得IC₅₀值。将细胞分为空白对照组、氯硝柳胺单纯给药组、单纯照射组和氯硝柳胺+照射组,氯硝柳胺预处理的浓度为1.0和1.5 μmol/L,¹³⁷Cs γ射线的照射剂量为0、2、4和6 Gy;克隆形成试验检测氯硝柳胺对MDA-MB-231细胞的放射增敏作用;免疫荧光法检测辐射诱导的γH2AX 焦点形成;流式细胞仪检测细胞周期的变化;Western blot法检测磷酸化和非磷酸化β-连环蛋白和Cyclin D1蛋白表达。结果 氯硝柳胺抑制MDA-MB-231细胞生长24 h的IC₅₀值为13.63 μmol/L;1.0和1.5 μmol/L氯硝柳胺对MDA-MB-231细胞均有较好的放射增敏作用,放射增敏比SER分别为1.37和1.62,随给药剂量的增大而增强;氯硝柳胺预处理使受照MDA-MB-231细胞的γH2AX焦点形成率较单纯照射组显著增加（t=3.91, P<0.05）,G₂/M期阻滞明显减少（t=8.05,P<0.01）,并显著抑制了辐射诱导的磷酸化β-连环蛋白（S675）、非磷酸化β-连环蛋白和Cyclin D1蛋白表达的升高。结论 氯硝柳胺对MDA-MB-231细胞具有显著的放射增敏作用,其作用机制与抑制Wnt/β-连环蛋白信号通路,从而抑制DNA DSBs修复和减少辐射诱导的G₂/M期阻滞有关。Wnt/β-连环蛋白信号通路可能是有效的三阴性乳腺癌放射增敏的新靶点。     

姜黄素调控Wnt信号通路治疗脊髓损伤研究进展

脊髓损伤(SCI)具有高致残率、低死亡率的特点。原发性脊髓损伤难以逆转,故临床干预主要针对继发性脊髓损伤。Wnt信号通路参与继发性脊髓损伤中神经细胞凋亡、胶质瘢痕形成、轴突再生、炎症反应及骨质丢失等病理过程。因此,调控Wnt信号通路有助于治疗脊髓损伤。姜黄素可以多靶点调控Wnt信号通路而修复损伤的脊髓组织。本文就Wnt信号通路、Wnt信号通路与脊髓损伤以及姜黄素调控Wnt信号通路治疗脊髓损伤等方面进行综述。     

Wnt信号通路在创伤微环境诱导的表皮细胞去分化过程中的作用

目的 研究创伤微环境对表皮细胞的去分化诱导作用,并探讨Wnt通路在这一过程中的作用. 方法 包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮.分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞.处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到BALB/c裸鼠背部全层皮肤缺损创面,5 d后用免疫组化法检测皮片内细胞的表型特征,RT-PCR和Western blot检测表皮细胞表型转化过程中Wnts分子及下游分子的表达变化. 结果 未经处理的表皮片基底部细胞呈CK10染色阴性,CK19和β1整合素染色阳性;Ⅳ型胶原处理后的表皮片内细胞全呈CK10染色阳性.而去基底皮片移植后5 d,在皮片的基底侧重新出现CK10染色阴性、CK19和β1整合素染色阳性的细胞.同时在移植皮片内Wnt-10b、Wnt-4和Wnt-7a mRNA的表达分别增加了3.1倍、2.2倍和1.4倍,而Wnt通路下游β-catenin、cyclin D1和c-myc蛋白表达分别增加了3倍、1.5倍和2倍(P<0.01). 结论 创伤微环境可诱导表皮细胞去分化,Wnt/β-catenin信号通路可能在这一过程中起关键性的调控作用.     

盐霉素在前列腺癌治疗中的进展

前列腺癌是男性泌尿系统常见恶性肿瘤之一,且有年轻化趋势.盐霉素是一种离子载体抗生素,后被发现对乳腺癌细胞有特异性杀伤作用,因此盐霉素成为抗肿瘤的热门药物.现研究发现盐霉素可通过Wnt/β-catenin信号通路、PI3 K/AKT信号通路、mTOR信号通路、内质网应激等方面对前列腺癌有抗肿瘤疗效,这对治疗前列腺癌有着重要意义.本文从盐霉素对前列腺癌抗肿瘤机制角度进行综述.     

TGF-β/Smads信号通路与慢性阻塞性肺疾病的研究进展

COPD以不完全可逆的气流受限为特征，与气道炎症和气道重塑密切相关，TGF-β/Smads信号通路作为多功能性信号通路，在COPD的发生及进展中起着重要作用，本文就TGF-β/Smads信号通路在COPD中的研究进展进行综述。     

β-连环蛋白在人毛囊发育形成中的表达

目的：研究β-连环蛋白(β—catenin)在人毛囊从胚胎到成熟发育过程中的表达及意义。方法：采用SP免疫组化技术(IHC)对不同胚胎龄及成年期的正常人头皮标本进行染色，分析比较不同时期毛囊β-catenin表达及其差异。结果：β—catenin蛋白的表达与毛囊发育的不同阶段具有相关性，早期形成的毛芽中未见β-catenin表达，而胚胎毛囊发育后期的外根鞘及膨突区中出现β-catenin表达，在成人发育成熟的毛囊中，β—catenin表达明显增强，阳性细胞集中于毛囊外根鞘内侧。结论：β—catenin在毛囊不同发育阶段表达与分布的差异，提示β-catenin可能在毛囊从发生到成熟过程中发挥重要作用。     

Oct-4与Wnt／β-catenin信号通路在胃癌组织中相互关系

目的：讨论Oct-4、Wnt/β-catenin信号通路在人胃癌组织、胃癌细胞系中的表达情况,并总结它们之间的相互作用。方法通过比较分析胃癌组织、癌旁组织、正常组织的Oct-4表达,Oct-4、Wnt5b、β-catenin的mRNA表达,并在SiRNA-Oct-4沉默人胃癌HepG2细胞Oct-4表达后,检测干细胞有关基因的表达变化,以讨论Oct-4、Wnt/β-catenin信号转导通路的相互作用和关系。结果 Oct4、β-catenin在胃癌组织中的表达要显著高于癌旁组织和正常组织,正常组织未见明显的Oct-4表达;SiRNA-Oct-4沉默胃癌HepG2细胞后, Oct-4的表达与β-catenin、Sox2、Nanog表达均明显下调,但是Wnt5b的表达显著上升。结论 Oct-4在胃癌组织中具有极高的表达,可以作为反映胃癌发生的早期事件。 Oct-4、Wnt5b、β-catenin的动态变化,揭示了Oct-4与Wnt β-catenin在胃癌发展中存在相互作用。     

经典Wnt通路与肿瘤放射抗性关系的研究进展

放疗是治疗恶性肿瘤的重要手段,放射抗性是影响放疗疗效的重要因素,也是放疗失败的主要原因之一。近年来经典Wnt信号通路与肿瘤放射抗性的关系,逐渐受到学者的关注。本文检索了近10年来有关经典Wnt信号通路与肿瘤放射抗性的相关研究,并进行综述,对经典Wnt信号通路参与放射抗性形成的分子机制及功能进行系统分析和梳理,力求寻找某些规律和不同作用途径的内在联系,为进一步深入研究寻找有价值的线索。