血管抑素基因联合5-FU腹腔化疗治疗大肠癌术后腹腔种植的实验研究

目的:观察血管抑素基因联合5-氟尿嘧啶(5-FU)腹腔化疗对预防大肠癌术后腹腔种植的作用.方法:RT-PCR扩增血管抑素基因,构建重组腺病毒载体.建立人结肠癌LoVo细胞腹腔种植的模型,给予血管抑素基因联合5-FU腹腔化疗,并观察其对大肠癌细胞腹腔种植的影响.结果:各组裸鼠的致瘤率和死亡率为100%.血管抑素基因联合5-FU腹腔化疗治疗组的腹水出现时间晚[(22.3±5.4)d],荷瘤生存时间长[(47.3±8.4) d],治疗组肿瘤组织中血管抑素基因表达为阳性,肿瘤微血管密度(3.64±0.58)明显低于其他各组.结论:血管抑素的基因治疗与传统的腹腔化疗联合应用,可能是预防大肠癌术后腹腔种植的一种有效方法.     

稳定转染Bcl-2 shRNA对胃癌细胞SGC-7901化疗敏感性的影响

目的:探讨稳定转染靶向Bcl-2基因的短发夹RNA(shRNA)对胃癌细胞株SGC-7901化疗敏感性的影响.方法:筛选出稳定转染Bcl-2 shRNA质粒的胃癌SGC-7901细胞株,将其与不同浓度的氟尿嘧啶(5-FU)或顺铂(DDP)作用,未转染的细胞作为对照.RT-PCR法检测稳定转染前后SGC-7901细胞Bcl-2 mRNA的表达水平,MTT法检测5-FU或DDP的IC50,流式细胞仪分析细胞的凋亡率.结果:稳定转染shRNA的胃癌SGC-7901细胞Bcl-2 mRNA的表达明显下降;shRNA联合5-FU的IC50为(14.36±1.63)mg/L,对照组为(35.62±1.95)mg/L,t=2.57,P＜0.05;shRNA联合DDP的半数抑制浓度(IC50)为(2.53±0.46)mg/L,对照组为(6.89±0.52)mg/L,t=2.52,P＜0.05;流式细胞术检测显示,shRNA联合化疗明显提高SGC-7901细胞的凋亡率,t=2.60,P＜0.05.结论:稳定转染Bcl-2 shRNA的胃癌SGC-7901细胞株,其Bcl-2 mRNA的表达能够在较长时间内受到抑制,并提高对化疗药物5-FU及DDP的敏感性.     

西茜铂对宫颈癌HeLa细胞体内外增殖抑制作用的研究

目的:评价超分子药物西茜铂(CCP)体内外抗宫颈癌HeLa细胞的作用.方法:细胞培养测定CCP对HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50);建立HeLa细胞移植裸鼠模型,比较CCP与卡铂(CBP)的抑瘤作用;HE染色判断肿瘤组织的坏死,CD34抗体免疫组化染色观察肿瘤组织中微血管的生长状况.结果:CCP和CBP对HeLa细胞的IC550分别是(44.4±8.5)μg/L和(103.7±8.2)/μg/L;在裸鼠移植瘤,高(20mg/kg)、中(15mg/kg)、低(10mg/kg)剂量CCP组和CBP组(20 mg/kg)的抑瘤率分别为56.1%~56.6%、37.6%~50.8%、33.0%~41.7%和21.1%~39.2%;高、中剂量CCP组的抑瘤率明显高于CBP组(20mg/kg),瘤质量低于CBP组,差异有统计学意义,t值分别为2.98和2.52,P均≤0.05.与葡萄糖组对比,CCP组的肿瘤组织血管生成受到抑制,坏死明显.结论:CCP在体内外均具有抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖作用,其作用明显高于CBP.     

γ-氨基丁酸抑制结直肠癌细胞增殖及其对化疗的增敏作用

目的:通过体内、体外实验,探讨γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)对结直肠癌SW480、HCT116细胞的抑制作用及其与化疗联用的增敏作用.方法:采用CCK-8方法分析GABA及其与抗癌药5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-ru)或奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)联用对结直肠癌SW480、HCT116细胞增殖的影响,流式细胞术分析GABA对SW480、HCT116细胞周期的影响.通过裸鼠成瘤实验观察移植瘤质量和体积,免疫组化法检测裸鼠肿瘤组织Ki67蛋白的表达,TUNEL染色观察裸鼠结直肠癌细胞的凋亡,体内实验研究GABA与OXA联用对肿瘤细胞生长的影响.结果:100 μmol/L GABA可显著抑制结直肠癌SW480、HCT116细胞的增殖,其抑制率分别为(37.38±2.62)％、(15.54±1.33)％,GABA浓度增加至200 μmol/L时,其抑制作用未见明显增强.GABA使SW480、HCT116细胞S期数量分别减少11.8％及10.7％.GABA与5-FU或OXA联用组对SW480细胞增殖抑制率高于5-FU或OXA组[(72.76±1.07)％ vs (63.82±3.29)％或(65.60±1.19)％ vs (57.09±1.25)％;q=4.079或4.128,P＜0.05],对HCT116细胞增殖抑制率也高于单用5-FU及OXA组[(79.53±1.12)％ vs(69.71±0.09)％或(73.19±0.07)％ vs(64.65 ±1.99)％;g=4.569或4.561,P＜O.05].实验结束时,GABA与OXA联用组小鼠移植瘤质量、体积显著低于对照组和OXA组[(0.20±0.016) vs (0.42±0.039)、(0.36±0.030)g和(250±27)vs(780±60)、(520±46) mm3,均P＜0.01];抑制Ki67蛋白在肿瘤组织的表达、促进肿瘤组织细胞的凋亡.结论:GABA对结直肠癌细胞增殖具有较强的抑制作用,与5-FU或OXA联用可增强化疗效果.     

经不同途径区域灌注氟尿嘧啶在肝癌、肝组织及血浆中的浓度差异

背景与目的:肝动脉、肝门静脉灌注区域化疗是肝癌的重要治疗手段,本研究探讨区域性灌注化疗时氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)在大鼠肝癌和肝脏组织及血浆中的分布,为临床肝脏肿瘤化疗提供参考。方法:将24只荷瘤大鼠随机分为4组,分别经外周静脉(尾静脉)、肝动脉、肝门静脉或结扎肝动脉后经肝门静脉灌注5-FU,剂量为20 mg/kg。采用高效液相色谱法测定肝癌、肝脏组织及血浆中5-FU的含量,并计算药物在血浆、肝脏和肝癌组织间的穿透比率。结果:结扎肝动脉的肝门静脉组5-FU浓度在肝脏和肝癌组织中最高,分别为(22.1±9.5)μg/g和(16.4±7.2)μg/g;其次为肝动脉组;肝门静脉组5-FU浓度在肝癌组织中的浓度较低,为(8.9±3.7)μg/g;外周静脉组5-FU浓度在肝脏和肝癌组织中的药物浓度均为最低,肝癌组织中的浓度仅为(4.3±2.2)μg/g。在血浆中的5-FU浓度正好相反,外周静脉组浓度最高(26.8±12.5)μg/m L,肝动脉组(16.4±9.7)μg/m L、结扎肝动脉的肝门静脉组(15.9±10.1)μg/m L和肝门静脉组(14.9±8.5)μg/m L等3组浓度相近,均明显低于外周静脉组(P<0.05)。5-FU的肝癌/血浆穿透比率依次为结扎肝动脉的肝门静脉组(103.47%),肝动脉组(92.94%),肝门静脉组(59.58%)和外周静脉组(16.08%)。结论:与外周静脉注射全身化疗比较,区域性灌注化疗可显著提高肝癌和肝脏组织中的药物浓度,同时减少化疗药物在外周血中的分布,其中经结扎肝动脉的肝门静脉灌注和经肝动脉灌注是肝癌区域性化疗2种较好的途径。     

羟基喜树碱联合奥沙利铂诱导人大肠癌耐药细胞株LoVo/5-FU的凋亡机制

目的:体外观察羟基喜树碱(HCPT)联合奥沙利铂(L-OHP)对人大肠癌耐药细胞株LoVo/5-FU增殖抑制及诱导凋亡作用,并初步探讨其诱导凋亡方面机制.方法:MTT法测定HCPT联合L-OHP对LoVo/5-FU细胞增殖抑制作用,并根据中效原理判断两药合用时的效应.流式细胞仪观察两药对LoVo/5-FU细胞的凋亡诱导作用.半定量RT-PCR方法检测单药及联合作用后X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP) mRNA表达变化.结果:HCPT联合L-OHP对LoVo/5-FU细胞有明显的抑制增殖作用,细胞增殖的抑制率与药物浓度呈正相关.在抑制率(fa)>0.18时合用指数(CI)<1,两药表现为协同作用.HCPT浓度分别为0.02、0.04和0.08 mg/L.作用48 h后,LoVo/5-FU细胞凋亡率分别为5.92±0.58、9.93±0.62和3.76±0.45.当0.04 mg/L HCPT联合L-OHP作用48 h后,其凋亡率为18.44±0.57,联合组与单药组比较差异有统计学意义,P<0.05.耐药细胞LoVo/5-FU较亲本细胞LoVo高表达XIAP mRNA(0.88±0.03 vs 0.11±0.02,P<0.01),两药联合作用后XIAP mRNA降低明显为0.21±0.03,P<0.01.结论:HCPT联合L-OHP能够协同抑制LoVo/5-FU细胞增殖,其机制可能与诱导细胞凋亡有关,抑制XIAP表达发挥作用.     

三氧化二砷联合5-FU治疗大肠癌裸鼠皮下种植瘤的初步研究

目的观察联合应用As2O3和5-FU治疗大肠癌裸鼠皮下移植瘤的疗效.方法建立裸鼠皮下人大肠癌移植瘤模型,应用As2O3和5-FU治疗后,观察肿瘤生长曲线,计算抑瘤率,并用HE染色观察有无器官毒副作用.结果实验表明治疗组肿瘤生长明显抑制,As2O3组抑瘤率为55.5%,而联合治疗组抑癌率为77%(P＜0.05),HE染色未观察到各器官病理改变.结论联合应用As2O3和5-FU能提高As2O3治疗大肠癌的疗效,且没有明显的毒副作用.     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人前列腺癌裸鼠移植瘤生长及雄激素受体表达影响的研究

目的探讨5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’deoxycytidine,5-Aza-CdR)对LNCaP荷瘤裸鼠的肿瘤生长及雄激素受体(androgen receptor,AR)表达的影响。方法裸鼠皮下接种LNCaP细胞,建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,待肿瘤长至300 mm3大小时,荷瘤裸鼠腹腔内注射5-Aza-CdR,0.25 mg/kg,隔天1次。对照组给予生理盐水注射。每3天测量肿瘤体积1次,共观察24天。实验结束时处死裸鼠,取出肿块称重后,肿瘤组织抽提RNA和蛋白质,分别应用实时定量PCR和western blot方法,检测AR在mRNA和蛋白质水平上的表达。结果 LNCaP荷瘤裸鼠经5-Aza-CdR治疗后,与对照组相比,肿瘤生长缓慢。第24天观察结束时,5-Aza-CdR处理组肿瘤体积[(982±83)mm3]显著低于对照组[(1 867±195)mm3](P<0.01)。移植瘤重量与对照组相比明显下降[(796±178)mg vs(1 267±252)mg],抑瘤率为37.2%,差异有统计学意义(P<0.01)。5-Aza-CdR组游离PSA(FPSA)浓度相对对照组显著下降,分别为(40.25±13.3)ng/mL和(79.7±13.2)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.01)。荷瘤裸鼠经5-Aza-CdR处理后,AR在mRNA水平上的表达下降为对照组的0.5倍,在蛋白质水平上的表达也显著降低(P<0.01)。结论 5-Aza-CdR能够有效抑制LN-CaP荷瘤裸鼠移植瘤的生长,并显著降低AR基因表达,为前列腺癌的去甲基化治疗提供了理论依据。     

慢病毒RNA干扰E2F-1对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响

目的 观察E2F-1基因沉默的慢病毒载体E2F-1/RNAi-LV对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响.方法 将人胃癌SGC7901-顺铂(DDP)耐药细胞接种于裸鼠皮下,建立人胃癌耐药裸鼠皮下瘤模型.将成瘤的36只裸鼠随机分为E2F-1/RNAi-LV组、LV-scrRNAi组和PBS组,每组12只.隔日向3组裸鼠肿瘤内分别注射E2F-1/RNAi-LV、LV-scrRNAi或PBS,并按体重腹腔注射DDP,共9次.注射期间和处死裸鼠后测量各组裸鼠的肿瘤体积.应用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡指数,应用半定量RT-PCR和Western blot法检测肿瘤组织中E2F-1、c-Myc、survivin、多药耐药基因1(MDR1)和多药耐药相关蛋白(MRP) mRNA和蛋白的表达.结果 注射慢病毒后,E2F-1/RNAi-LV组肿瘤的生长速度明显减慢.处死裸鼠后,E2F-1/RNAi-LV组裸鼠的肿瘤体积为(745.13±154.42)mm3,明显低于LV-scrRNAi组[(1988.80±171.35) mm3]和PBS组[(1633.48±215.25) mm3,P＜0.05].E2F-1/RNAi-LV组肿瘤组织的凋亡指数为(27.5±9.7)％,明显高于LV-scrRNAi组[(7.0±1.1)％]和PBS组[(7.3±1.2)％,P＜0.05].E2F-1/RNAi-LV组肿瘤组织中E2F-1 mRNA和蛋白的表达量分别为0.40±0.32和0.35±0.01,明显低于LV-scrRNAi组和PBS组(P＜0.05).E2F-1/RNAi-LV组c-Myc、survivin、MDR1和MRP mRNA和蛋白的表达量亦明显低于LV-scrRNAi组和PBS组(均P＜0.05).结论 慢病毒载体E2F-1/RNAi-LV瘤内注射可降低人胃癌SGC7901-DDP耐药细胞对DDP的耐药性,抑制人胃癌耐药裸鼠皮下瘤的生长.     

Avastin对胃癌裸鼠原位移植模型血管生成的影响

背景与目的:血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和肿瘤的生长和转移密切相关,本实验通过VEGF单克隆抗体Avastin联合或不联合氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU),对人类胃癌裸鼠原位种植模型的肿瘤生长和转移进行干预治疗,从而探讨Avastin对胃癌生长、转移和血管生成的抑制作用。方法:应用原位移植方法建立裸鼠胃癌转移模型,术后10天将裸鼠随机分为4组:对照组、5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组。经过6周的治疗,对裸鼠原位肿瘤的瘤重、抑瘤率、肿瘤微血管密度、凋亡指数以及肝脏转移灶进行检测和分析。结果:和对照组相比,5-FU单药组、Avastin单药组和联合用药组原位移植肿瘤重量明显降低,抑瘤率分别为37.52%,58.76%和98.51%。微血管密度Avastin单药组和联合用药组均比对照组明显减少(8.40±1.26和7.20±1.23vs15.30±1.06),而5-FU组与对照组之间没有显著的差别;Avastin单药组和联合用药组的凋亡指数比对照组明显升高[(11.50±1.58)%和(13.60±1.35)%vs(4.70±1.70)%]。联合应用Avastin和5-FU对肝脏转移灶具有明显的抑制作用,而其他3组的抑制肝转移效果没有明显的差别。结论:抗VEGF抗体Avastin通过抑制肿瘤新生血管的生成而诱导胃癌细胞凋亡,进而显著抑制裸鼠原位肿瘤的生长。联合应用Avastin和5-FU不仅对原位肿瘤的生长抑制最为明显,而且对肝脏转移有显著的抑制作用。因此,联合应用Avastin和传统的细胞毒化疗药物对胃癌的治疗效果更显著。     

罗非昔布对裸鼠人胃癌组织中新生血管及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨罗非昔布对裸鼠人胃癌组织中新生血管及血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）表达的影响。方法建立BALB/C nu/nu裸鼠人胃腺癌SGC-7901细胞株原位种植转移模型,在种植术后1周以罗非昔布0.2 mL,5 mg.kg-1.d-1给裸鼠灌胃,连续8周后,对荷瘤鼠行彩色多普勒探查,观察胃肿瘤新生血管的形态和数量,通过免疫组织化学Envision法及RT-PCR方法检测胃癌组织中的VEGF蛋白及VEGFmRNA的表达。结果各治疗组肿瘤血管体积[罗非昔布组（9.96±3.58）,5-FU组（9.74±2.83）及联合组（8.25±3.14）]与生理盐水对照组（13.10±4.00）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。VEGF蛋白表达及VEGFmRNA检测结果显示,各治疗组与生理盐水对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论环氧合酶-2抑制剂罗非昔布可以通过降低胃癌肿瘤组织中VEGF蛋白及VEGFmRNA的表达,减少肿瘤血管数量,抑制胃癌细胞的生长和转移。     

尼妥珠单抗联合PF方案治疗晚期食管鳞癌的探索性研究

目的观察尼妥珠单抗联合PF方案治疗晚期食管鳞癌的近期疗效及不良反应。方法人选的46例患者随机分为两组,每组23例。PF方案组给予顺铂80mg／m2,静脉滴注,4周为1疗程;5-FU750mg／m2,持续24小时泵入X5天,4周为1疗程;联合组在PF组的基础上,给予尼妥珠单抗,第1周400mg/（次-周）,第2-8周200mg/（次·周）,静脉滴注。结果联合组治疗后的有效率为34．8％,疾病控制率为73．9％,均优于单纯PF方案组（21．7％和47．8％）（P〈0．05）;发生Ⅲ～Ⅳ级骨髓抑制的患者数少于PF组（P〈0．05）;疾病进展时间、中位生存时间和1年无进展生存率均长于PF组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论尼妥珠单抗联合化疗治疗晚期食管鳞痹安伞有效．值得讲一彤扩大样本研究．     

复治性晚期结直肠癌多通道编程输液泵IFL方案时辰化疗临床观察

目的：探讨伊立替康（CPT-11）联合氟尿嘧啶（5FU）及亚叶酸钙（LV）组成的IFL方案时辰化疗治疗晚期结直肠癌的疗效和毒副作用,与常规FOLFIRI方案化疗进行比较。方法：2009—04—01—2012—05—30中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院83例晚期结直肠癌复治患者分别采用IFL方案时辰化疗和FOLFIRI方案常规化疗。时辰组（42例）采用Melodie多通道编程输液泵,CPT-11160mg／m2,d1,2：00--8：00持续静脉滴入,高峰为凌晨5：00;5-FU600mg／（m2·d）,d2～d5,22：00～10：00持续静脉滴入,高峰为凌晨4：00;LV200mg／（m2·d）,d2～d5,用法同5-Fu。常规组（41例）白天给药：CPT-11160mg／m2静脉滴入,d1;LV200mg／（m2·d）,静脉滴入2h,d1～d2;5-FU400mg／（m2·d）静脉推注,d1～d2;5-FU600mg／（m2·d）,持续静脉滴入22h,d1～d2。结果：时辰化疗方案和FOLFIRI方案的总有效率（RR）分别为26．2％和71．4％,疾病控制率（DCR）分别为19．5％和63．4％;时辰化疗方案的中位无进展生存（PFS）为4．9个月,中位总生存时间（OS）为9．3个月;FOLFIRI方案的PFS为4．1个月,OS为8．6个月,两组比较差异均无统计学意义,P〉0．05。两方案常见的毒副作用为恶心呕吐、中性粒细胞减少和脱发,但多以1～2级为主;3～4级毒副作用在时辰化疗方案中的发生率低于FOLFIRI方案,P〈0．05。结论：IFL方案时辰化疗毒副作用发生率较低,患者耐受性较好,可作为晚期结直肠癌患者的二线治疗选择方案。     

硒联合5-FU对MCF-7乳腺癌细胞株和裸鼠移植瘤抑制作用研究

目的研究硒和5-氟尿嘧啶（5-FU）对MCF-7乳腺癌细胞株及其裸鼠移植瘤的抑制作用。方法实验分对照组（NS）、5-FU组、亚硒酸钠组（Na2SeO3）和联合用药组（5-FU＋Na2SeO3）4组,体外培养MCF-7乳腺癌细胞,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组MCF-7细胞的增殖情况,AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率;建立裸鼠皮下移植瘤模型,监测各组裸鼠移植瘤的生长情况,免疫组织化学及蛋白质印迹法检测移植瘤组织中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达情况。结果加药处理后,与对照组相比,各用药组MCF-7细胞的增殖均受到抑制,P值均〈0.001,两药联合没有交互性,P=0.864;各用药组MCF-7细胞的凋亡明显增加,P值均〈0.001,两药联合有交互作用,P=0.031;各用药组裸鼠移植瘤质量及体积均显著减小,P值均〈0.001,两药联合有协同作用,P〈0.001;免疫组织化学检测移植瘤组织中Bcl-2蛋白的表达,5-FU组（P=0.036）和Na2SeO3组（P=0.006）显著减少,两药联合没有交互性,P=0.957;Bax蛋白的表达,5-FU组（P=0.006）和Na2SeO3组（P=0.008）显著增加,两药联合没有交互性,P=0.516;Caspase-3蛋白的表达,5-FU组（P=0.004）和Na2SeO3组（P=0.002）显著增加,两药联合没有交互性,P=0.372;蛋白质印迹检测移植瘤组织中Bcl-2蛋白的表达,5-FU组和Na2SeO3组显著减少,P值均〈0.001,两药联合有交互性,P〈0.001;Bax蛋白表达,5-FU组和Na2SeO3组显著增加,P值均〈0.001,两药联合有交互性,P=0.015;Caspase-3蛋白表达,5-FU组和Na2SeO3组显著增加,P值均〈0.001,两药联合无交互性,P=0.139。结论硒和5-FU均可抑制MCF-7乳腺癌细胞株及其裸鼠移植瘤的生长,两药联合具体作用有待进一步实验证实。     

人参皂苷免疫纳米对人胃癌裸鼠移植瘤生长抑制机制探讨

目的研究人参皂苷免疫纳米（VEGFR3-mediated immune-nanoemulsion of ginsenoside Rg3,VRIN）对胃癌生长及其淋巴管生成的机制。方法通过外科原位移植能表达红色荧光蛋白人胃癌NUGC-4细胞的方法建立裸鼠胃癌模型,将32只Balb/c无胸腺裸鼠随机分为生理盐水组、5-氟尿嘧啶（5-FU）组（20mg/kg）、VRIN高剂量组（1mg/kg）和VRIN低剂量组（0.1mg/kg）4组,每组8只。实验终点处死所有受试裸鼠,在开放荧光系统下观察肿瘤生长及转移情况,切除移植肿瘤测瘤质量和瘤体积。免疫组织化学法检测肿瘤组织中微淋巴管密度（lymphatic microvessel density,LMVD）,Real time-PCR和免疫组织化学法检测VEGF-C蛋白和mRNA表达。结果实验终点开放体内荧光成像显示,胃癌NUGC-4细胞肿瘤生长抑制率VRIN高剂量为72.9%,低剂量组为14.5%,5-FU组为69.2%,VRIN高剂量组和5-FU组较生理盐水组瘤质量明显减轻,P〈0.001。生理盐水组淋巴转移率为87.5%（7/8）,5-FU组为50.0%（4/8）,VRIN高剂量组为12.5%（1/8）,低剂量组为37.5%（3/8）,VRIN高剂量组与生理盐水组差异有统计学意义,P=0.01。LMVD计数结果显示,生理盐水组为9.29±2.06,5-FU组为6.42±1.38,VRIN高剂量组为4.25±1.08,差异有统计学意义,F=20.895,P〈0.001;VRIN高剂量组VEGF-C蛋白表达量为0.190±0.059,与生理盐水组（0.269±0.051）差异有统计学意义,P=0.014;VEGF-C mRNA表达结果显示,生理盐水组为1.05±0.19,5-FU组为0.62±0.25,VRIN高剂量组为0.49±0.19,差异有统计学意义,F=8.190,P=0.002。结论 VRIN可抑制人胃癌细胞祼鼠移植瘤生长及淋巴结转移,并通过下调VEGF-C表达抑制肿瘤淋巴管生成。     

重组人生长激素及联合5-氟尿嘧啶对人结肠癌荷瘤裸小鼠的影响研究

目的探讨重组人生长激素（rhGH）及联合5-氟尿嘧啶（5-FU）对人结肠癌荷瘤裸小鼠的影响。方法建立人结肠癌LOVO裸小鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸小鼠随机分为对照组、GH组、5-FU组、GH/5-FU组,每组8只,同时治疗10天,观察裸鼠体重、皮下移植瘤体积、重量的变化,以流式细胞术测定细胞周期及凋亡情况。将另外32只小鼠编为第二大组,同法分为4组,并分别给于上述处理,观察生存期。结果与对照组比较,GH组裸鼠的体重明显增加（P〈0.05）;与5-FU组比较,GH/5-FU组裸鼠的体重明显增加（P〈0.05）。与对照组比较,5-FU组、GH/5-FU组肿瘤体积、重量明显减少（P〈0.05）。与5-FU组比较,GH/5-FU组裸鼠的肿瘤体积、重量差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,GH组S、G2/M期细胞百分比及增殖指数（PI）差异无统计学意义（P〉0.05）。与5-FU组比较,GH＋5-FU组的S、G2/M期细胞百分比及PI差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,5-FU组、GH＋5-FU组的凋亡率均升高（P〈0.05）。与5-FU组比较,GH＋5-FU组的凋亡率差异也无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,5-FU、GH/5-FU组明显延长（P〈0.05）;与5-FU组比较,GH/5-FU组延长,但无统计学意义（P〉0.05）。结论生长激素在荷瘤裸鼠体内不刺激肿瘤生长,对机体也无不良影响。联合化疗时,未发现增敏现象。     

康莱特注射液对结肠癌肝转移裸鼠血浆骨桥蛋白的影响

目的　建立人结肠癌ＬｏＶｏ细胞裸鼠肝转移模型,观察康莱特注射液（ＫＬＴ）对该模型裸鼠血浆骨桥蛋白的影响。方法　将３０只裸鼠随机分为５组：对照组、环磷酰胺（ＣＴＸ）组、ＫＬＴ组、ＣＴＸ＋ＫＬＴ组和正常组。前４组将０.２ｍｌＬｏＶｏ细胞悬液（１×１０７个／ｍｌ）接种于裸鼠脾脏,建立结肠癌肝转移模型,分别经腹腔注射给予生理盐水、ＣＴＸ、ＫＬＴ和ＣＴＸ＋ＫＬＴ。正常组未接种肿瘤细胞。接种４５天后处死全部裸鼠,称取４组脾脏接种瘤和肝脏转移瘤重量,并检测血浆骨桥蛋白浓度。结果　与对照组相比,ＣＴＸ组、ＫＬＴ组、ＣＴＸ＋ＫＬＴ组的脾脏接种瘤和肝脏转移瘤重量均减轻（Ｐ＜０.０５）,其中ＫＬＴ组分别为（４０１.７±５３.１）ｍｇ和（３５３.３±３９.８）ｍｇ,ＣＴＸ组＋ＫＬＴ组分别为（２３５.０±５２.４）ｍｇ和（１８５.０±２７.４）ｍｇ。与正常组相比,其余４组裸鼠血浆骨桥蛋白浓度均升高（Ｐ＜０.０５）;对照组血浆骨桥蛋白浓度为（２.１０±０.５５）ｎｇ／ｍｌ,ＣＴＸ＋ＫＬＴ组为（０.９２±０.３１）ｎｇ／ｍｌ,两组差异有统计学意义（Ｐ＜０.０５）,而ＣＴＸ组、ＫＬＴ组与对照组比较差异无统计学意义（Ｐ＞０.０５）。结论　ＫＬＴ联合ＣＴＸ可以抑制模型裸鼠的脾脏接种瘤及肝脏转移瘤的生长,抑制其血浆骨桥蛋白的浓度。     

二烯丙基二硫对人胶质瘤U251细胞增殖及细胞周期的影响

目的 研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人恶性胶质瘤U251细胞增殖及细胞周期的影响.方法 采用MTT法、流式细胞术等方法检测DADS对U251细胞的增殖抑制及细胞周期的影响.免疫细胞化学、qRT-PCR与Western blot检测cyclin B1与c-Myc表达.结果 MTT法显示,15、30、45、60 mg/L DADS处理U251细胞48小时后,生长抑制率分别为22.0％、38.8％、49.2％、55.3％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术结果显示,15、30、45、60 mg/L DADS作用U251细胞48小时后,G2/M期细胞分别为(14.1±1.2)％、(25.0±0.6)％、(41.2±1.4)％、(53.5±3.3)％,较对照组(9.6±0.9)％差异具有统计学意义(P＜0.05).免疫细胞化学显示,45 mg/L DADS处理U251细胞48小时后,cyclin B1与c-Myc蛋白平均光密度值分别从0.52±0.09、0.56±0.08显著下降至0.23 ±0.02、0.39+0.04 (P ＜0.05).qRT-PCR结果显示,cyclin B1与c-Myc mRNA表达分别下调42.0％与63.0％ (P ＜0.05).Western blot结果显示,cyclin B1、c-Myc蛋白与β-actin的平均灰度值比分别为1.12±0.14与1.20 ±0.15,明显低于对照组1.74 ±0.15与2.23 ±0.19(P ＜0.05).结论 DADS可明显抑制恶性胶质瘤U251细胞增殖与阻滞G2/M期,机制与下调cyclin B1、c-Myc有关.     

放疗同期DDP单药方案与PF联合方案治疗局部晚期鼻咽癌近期疗效的对照研究

目的对比观察顺铂(DDP)单药用于局部晚期鼻咽癌同期放化疗与顺铂加5-氟尿嘧啶(5-FU)联合方案同期放化疗的近期疗效及不良反应。方法 112例初治局部晚期鼻咽癌患者随机分成两组:同期DDP单药放化疗组(单药组)40例,同期DDP加5-FU(PF)方案放化疗组(联合组)72例,两组放疗方案相同,单药组在放疗第1至第7周每周给予25 mg/m2的低剂量DDP化疗,联合组在放疗第1、4周分别给予25 mg/m2DDP+450 mg/m25-FU化疗。结果联合组患者中有2例患者未完成化疗,所有入组患者都完成放疗。放疗60 Gy时、放疗后3月两组患者鼻咽原发灶、颈部转移淋巴结的消退率差异均无统计学意义(P>0.05)。不良反应,单药组的口腔黏膜反应显著轻于联合组(P<0.05);白细胞下降、血小板减少、恶心呕吐、放射性皮炎、肝功能损伤等其他不良反应,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论低剂量顺铂单药用于局部晚期鼻咽癌同期放化疗与顺铂加5-氟尿嘧啶联合方案同期放化疗的近期疗效相近,急性不良反应较轻,值得进一步研究。     

蜂胶黄酮PB3A对人大肠癌SW480细胞株CXCL1和FOS基因表达的影响

目的 探讨蜂胶黄酮短叶松素-3-乙酸酯(pinobanksin-3-acetate,PB3A)处理SW480细胞后CXCL1和FOS基因表达的改变及其与PB3A抑制人大肠癌细胞增殖的关系.方法 采用实时荧光定量RT-PCR和Westernblot法检测PB3A(100 mg/L)处理24小时后SW480细胞的CXCL1和FOS基因转录和蛋白质表达水平.结果 药物干预诱导CXCL1基因的mRNA转录水平下调,差异倍数为0.03(△CT比较,P＜0.01),蛋白质表达强度也降低(0.24±0.03)与非干预的对照组(0.52±0.04)比较表达水平差异有统计学意义(P＜0.01);药物干预诱导FOS基因的mRNA转录水平上调,差异倍数为13.64(△CT比较,P＜0.01),蛋白质表达水平也升高(1.43±0.16),与非干预的对照组(0.58±0.07)比较表达水平差异有统计学意义(P＜0.01).结论 蜂胶黄酮PB3A抗人大肠癌细胞的作用可能与其下调CXCL1基因和上调FOS基因的表达有关.