VAP-1：重症失血性休克治疗的下一个靶点

重症休克通常指经输血、补液、血管活性药物、强心药物等传统治疗手段治疗后仍难以逆转的休克。休克进入“不可逆”阶段的主要特征是持续性低灌注以及顽固性低血压,它们分别由白细胞阻塞及血管平滑肌反应性降低引起。血管黏附蛋白-1是一种在哺乳动物体内广泛存在的多功能蛋白,其既是一种黏附分子,又是一种酶。其能在炎症条件下调节白细胞黏附至血管内皮,作为胞外酶可将伯胺类物质转化为相应的醛类并产生H2O2与NH3。鉴于休克进入“不可逆”阶段的两个因素：毛细血管无复流现象及血管反应性降低与血管黏附蛋白．1蛋白的功能均有联系,故认为血管黏附蛋白-1在重症休克病理过程中可能具有重要意义,对其进一步研究可能为救治重症休克提供一种新的治疗手段。     

重症难治性休克的机制和治疗

自1743年法国医师Le Dran第一个在论文中描述休克(希腊文choc)以来，经过260多年的研究，对休克的认识已从一组严重临床状态的判定和救治，深入到它的本质。然而进入21世纪的今天，在采用各种抗休克措施以后，有部分重症患者仍然摆脱不了灭顶之灾。这种重症难治性休克(irreversible     

重症失血性休克的抢救

抢救重症失血性休克260例.早期诊断、及时合理输液输血、控制性外科手术、确切手术止血、注意多脏器功能的维护等可以明显提高救治成功率.     

重症胸部创伤併失血性休克的急诊处置休会

目的 分析研究重症胸部创伤失血性休克的急诊处置措施以及临床应用价值.方法 选取接收的患有重症胸部创伤伴有失血性休克的病人49例,对49例相关临床资料给予分析.结果 通过及时、有效的临床治疗,49例重症胸部创伤伴有失血性休克的病人全部抢救成功.结论 对重症胸部创伤失血性休克采取早期临床抢救,可以使抢救成功率显著提高,使病人生存质量得到保障.     

过氧化亚硝酸根参与重症休克血管反应性低下的发生

目的　从血管平滑肌膜电位和细胞内钙离子变化 ,探讨一氧化氮 (NO)引起重症休克血管反应性下降的机制。　方法　复制大鼠失血性休克模型 ,测定脊斜肌微动脉对去甲肾上腺素(NE)的反应性。休克至血管反应性下降时分离肠系膜细动脉平滑肌细胞 (ASMC) ,用荧光探针和激光共聚焦显微镜测定NO供体S -亚硝基 -N -乙酰青霉胺 (SNAP)对ASMC膜电位和游离钙离子浓度的影响 ,用超氧阴离子清除剂Tiron、鸟苷酸环化酶抑制剂ODQ、钙激活钾通道 (Kca)抑制剂蝎毒 (ChTX)、ATP敏感钾通道 (KATP)抑制剂优降糖 (GLY)预处理细胞后观察上述影响的变化。　结果　SNAP使ASMC超极化 ,预加Tiron完全阻断该效应 ;分别加ODQ、ChTX、GLY和三者合用预处理细胞 ,可部分阻断SNAP的作用。SNAP还可使ASMC内游离钙浓度下降 ,Tiron能阻断该作用。　结论　大量NO与超氧阴离子 (O　 )形成的过氧化亚硝酸根 (OONO )引起血管平滑肌细胞超极化 ,带来平滑肌细胞内钙离子浓度下降 ,它是休克后期血管反应性下降的重要原因。OONO 可通过KATP、Kca、cGMP等途径引起血管平滑肌超极化     

Rho-激酶在失血性休克大鼠血管低反应发生中的作用

目的 观察Rho-激酶在失血性休克大鼠血管低反应发生中的作用。方法取失血性休克大鼠肠系膜上动脉（SMA），采用离体血管环张力测定技术，观察在失血性休克后不同时相点大鼠肠系膜上动脉血管环对梯度浓度去甲肾上腺素（NE）的收缩力，在去极化状态下（120mmol／LK^＋）血管环对梯度浓度Ca^2＋的收缩力，以及肠系膜上动脉Rho-激酶活性，分析不同时相点SMA对NE的反应性及Ca^2＋收缩反应性与Rho-激酶活性变化之间的关系；同时观察Rho-激酶激动剂血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）、Rho-激酶特异性抑制剂Y-27632对休克2小时大鼠SMA血管反应性和钙敏感性的影响。结果 休克早期SMA对NE和Ca^2＋的反应性明显升高，最大收缩力（Emax）明显升高（P〈0.05）；但休克2小时，血管环对NE反应性和钙反应性明显降低，Emax明显降低（P〈0．01）。与正常组相比，Rho-激酶活性在休克即刻升高（P〈0．05），休克1小时和2小时时，Rho-激酶活性明显降低（P〈0．05）。SMA对NE的反应性与Rho-激酶活性变化之间呈直线正相关，相关系数r=0．9861（P〈0．05）；SMA对Ca^2＋反应性与Rho-激酶活性变化之间呈直线正相关，相关系数r=0．9704（P〈0．05）。Rho-激酶激动剂Ang-Ⅱ（10^-9mol／L）可明显升高休克2小时血管环对NE和Ca^2＋的反应性（P〈0．05或P〈0．01），而休克2小时后，Rho-激酶特异性抑制剂Y-27632可进一步降低血管环对NE和Ca^2＋的反应性。结论 失血性休克时血管平滑肌细胞Rho-激酶活性明显降低，Rho-激酶通过调节钙敏感性调节血管反应性，并在失血性休克血管低反应性的发生中起重要作用。     

三七皂甙单体Rg1对失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体功能影响的研究

目的观察三七皂甙单体Rg1对失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体细胞色素氧化酶(COX)活性及膜电位的影响。方法健康Wistar大鼠24只,随机等分为4组:正常对照组(N)、失血性休克5小时组(HS)、单纯复苏对照组(RE)、复苏加Rg1治疗组(Rg),每组6只。采用荧光分光光度法检测线粒体膜电位;采用紫外分光光度法检测COX活性。结果失血性休克5小时大鼠肠上皮细胞线粒体摄取Rhoda-mine123减少,即膜电位水平显著降低(P0.01),单纯复苏组膜电位有轻微提高,复苏加Rg1治疗组线粒体膜电位明显提高,恢复到正常组水平。失血性休克5小时大鼠肠上皮细胞线粒体COX活性显著降低,单纯复苏后其活性仍然较低。复苏加Rg1治疗组COX活性较休克组比较有明显升高,并显著高于单纯复苏组。结论复苏加Rg1可显著提高失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体COX活性及线粒体膜电位。Rg1提高COX活性可能和提高该酶的产量和质量有关。     

精氨酸血管加压素对大鼠失血性休克的作用

目的 观察精氨酸血管加压素(AVP)对大鼠失血性休克的作用.方法 采用大鼠失血性休克模型,经股动脉和左心室插管分别测定平均动脉血压(MAP)和血流动力学指标,同时观察大鼠24小时存活率变化.实验分为正常对照组、休克组、休克 AVP(0.1U/kg)组和休克 AVP(0.4U/kg)组.休克组在休克2小时后输注2倍失血量乳酸林格氏液(LR);休克 AVP(0.1U/kg)组和休克 AVP(0.4U/kg)组在2倍量的LR中分别加入AVP(0.1U/kg)和(0.4U/kg)输注.结果 失血性休克后大鼠MAP明显降低,2倍量的LR输注可少量升高MAP,分别加以AVP(0.1U/kg)和(0.4U/kg)输注,MAP明显增加;休克后大鼠血流动力学参数包括左心室收缩压(LVSP)、左心室压力上升或下降的最大速率(±dp/dtmax)明显降低,AVP(0.1U/kg)和(0.4U/kg)可以明显改善其血流动力学指标,明显提高24小时存活率.结论 小剂量AVP具有明显的抗大鼠失血性休克的作用.     

失血性休克血管反应性变化与Rho激酶的关系

目的 观察休克后血管反应性变化与Rho激酶的关系.方法 分别从整体动物,离体血管环和原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC),观察Rho激酶活性调节剂对失血性休克后大鼠平均动脉压(MAP)、肠系膜上动脉血管管径对去甲肾上腺素(NE)收缩反应性、离体血管环和VSMC收缩反应性的影响.结果 失血性休克后大鼠对NE的升压反应和肠系膜上动脉对NE的收缩反应明显降低(P＜0.05或P＜0.01),Rho激酶激动剂精氨酸血管加压素(arginine vasopressin,AVP,0.4 U/kg)可增加失血性休克大鼠对NE的升压反应和肠系膜上动脉对NE的收缩反应(P＜0.05或P＜0.01),Rho激酶抑制剂Y-27632(3 μg/100 g)可拮抗由AVP引起NE的升压反应和肠系膜上动脉对NE收缩反应的升高.休克2 h和VSMC缺氧90 min后,血管环和VSMC对NE收缩反应性明显降低(P＜0.01).Rho激酶激动剂血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang-Ⅱ,10-9 mol/L)可明显升高休克2 h血管环和VSMC缺氧90 min对NE反应性(P＜0.05或P＜0.01),而Y-27632(10-5 mol/L)可拮抗由Ang-Ⅱ引起的休克2 h血管环和VSMC缺氧90 min对NE反应性的增高.结论 Rho激酶可明显升高休克后血管反应性.     

人食管癌EC9706细胞乏氧环境中放射敏感性变化及其机制

目的 观察乏氧干预对人食管癌细胞EC9706放射敏感性及乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子-A (VEGF-A)和血管内皮生长因子-D (VEGF-D)表达的影响,以及乏氧诱导因子-1o和血管内皮生长因子表达的相关性.方法 将人食管癌细胞EC9706体外常氧及乏氧培养6、12、24 h,置于6MVX射线下照射0、1、2、4、6、8 Gy,细胞克隆法绘制生长曲线;Western blot法检测常氧及乏氧培养6、12、24 h后各组HIF-1α、VEGF-A、VEGF-D蛋白表达情况;RNA干扰沉默HIF-1α后乏氧培养6、12、24 h,再以Western blot法检测各组HIF-1α、VEGF-A、VEGF蛋白表达情况.结果 乏氧组细胞存活分数(SF2)为0.62,常氧组SF2为0.43,而且乏氧组HIF-1α、VEGF-A、VEGF-D蛋白表达量随乏氧时间的延长逐渐增加(F=205.24、227.88、130.55,P＜0.05).RNA干扰后,乏氧EC9706细胞中HIF-1α、VEGF-A、VEGF-D蛋白表达量均未见升高.结论 乏氧环境下食管癌细胞EC9706对放射敏感性下降,这可能与乏氧诱导的HIF-1α及其下游因子VEGF-A和VEGF-D的蛋白表达增加相关.     

高压氧对家兔随意皮瓣血管内皮细胞生长因子和缺氧诱导因子的影响

目的 探讨高压氧对家兔随意皮瓣毛细血管增殖作用的机制.方法 建立家兔背部随意皮瓣模型,予高压氧治疗,观察3 d和7 d时对照组和高压氧组皮瓣的成活情况,皮瓣中毛细血管密度及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子(HIF-1)含量的变化情况.结果 3 d和7 d时,高压氧组皮瓣的成活面积明显高于对照组(P＜0.01);皮瓣毛细血管密度明显高于对照组(3 d时P＜0.05,7 d时P＜0.01);3 d和7 d时,高压氧组皮瓣VEGF表达明显高于对照组(P＜0.01),HIF-1、表达明显低于对照组(P＜0.05).结论 高压氧治疗提高随意皮瓣成活率的机制之一可能是通过增加皮瓣组织中VEGF的表达而促进新生毛细血管形成,高压氧治疗可下调皮瓣组织中HIF-1的表达.     

HMGB1促进人骨髓间充质干细胞迁移的实验研究

目的：构建人高迁移率族蛋白（HMGB1）全长编码基因的原核表达载体，诱导和纯化重组蛋白，分析其对人骨髓间充质干细胞的迁移作用。方法：RT—PCR方法从人的单个核细胞中扩增出HMGB1全长编码基因，克隆于原核表达载体pET-24a—d（＋），经IPTG诱导表达，通过亲和层析方法纯化得到携带（His）。标签的HMGB1融合蛋白；RT—PCR方法检测间充质干细胞HMGB1受体的表达；观察HMGB1对人骨髓来源间充质干细胞的迁移作用。结果：构建了融合蛋白HMGB1的原核表达载体，获得了高度纯化的HMGB1融合蛋白。RT-PCR方法检测到间充质干细胞表达HMGB1的某些受体如RAGE和TLR-4。HMGB1在体外能够诱导人骨髓来源的间充质干细胞的迁移。结论：重组HMGB1蛋白能够诱导骨髓间充质干细胞的迁移，此作用有可能通过RAGE和（或）TLR-4介导。     

严重创伤早期大鼠下丘脑HSP70与iNOS表达与分布的时效关系

目的研究严重创伤早期大鼠下丘脑热休克蛋白(HSP)70与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)转录表达变化分布和意义.方法采用BIM-Ⅲ型生物撞击机致大鼠胸部严重撞击伤,并造成单侧股骨骨折,运用S-ABC免疫组化、原位杂交技术测定下丘脑HSP70与iNOS及其mRNA的转录表达水平.结果正常对照组HSP70低水平表达,在伤后1小时即开始明显增高(P＜0.05),6小时达到峰值为正常的18倍,12小时后开始下降,24小时时主要集中在室旁核内;iNOS无基础表达,在伤后1小时开始出现,随HSP70同步增高,8小时达到高峰,较1小时时增加13倍.两者相关系数r=0.97601.结论严重创伤后早期下丘脑内HSP70和iNOS过度表达, 在严重创伤应激时下丘脑的损伤与抗损伤机制中起重要作用.     

高气压暴露对大鼠血浆内皮素-1含量、血清一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性的影响

目的 探讨高气压暴露对大鼠血浆内皮素-1(endothelin-1,ET-1)含量、血清一氧化氮(nitric oxide,NO)含量、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性的影响.方法 40只SD大鼠随机分为5组.A组为对照组,B组0.7 MPa空气暴露后缓慢减压,C组0.7 MPa空气暴露后快速减压,D组0.147 MPa纯氧暴露后减压,E组0.250 MPa纯氧暴露后减压.各组暴露时间均为60 min.采用放射免疫方法测定血浆ET-1含量,硝酸还原酶法测定血清NO含量,比色法测定血清NOS活性.结果 与对照组相比,安全减压组和高压氧组的血浆ET-1含量明显升高(P<0.05),原因可能与高分压氧有关(PO2=0.147 MPa/0.250 MPa);快速减压组血清NO含量、NOS活性明显升高(P<0.05),与血浆ET-1含量升高的3个组相比,血清NO、NOS升高得更为显著(P<0.01).结论 NO与ET-1在机体对高气压暴露的反应中呈拮抗关系.高气压与高压氧暴露导致血浆ET-1的释放增加,但快速减压刺激血管内皮细胞产生更多的NO,这种机制可能是通过提高血浆中的NOS活性实现的,这个现象可能是血管内皮系统对血管内气泡产生的应激性反应之一.     

Meier-Gorlin syndrome with prenatal ultrasound findings and successful growth hormone therapy: Six years follow-up of a rare case

Meire-Gorlin syndrome (MGS) is a rare autosomal recessive disorder characterized by a triad of short stature, microtia, and absent or hypoplastic patella. We report a 5-year-old male affected with the subtype MGS1, secondary to c.c2292t mutation of ORC1 gene. Our patient''s features included a triangular face, micrognathia, and delayed motor development. To the edge of our knowledge, this is the first diagnosed Iranian MGS patient and sixth case in the middle east. MGS1 subtype has never shown improvement to growth hormone therapy, therefore underlying molecular defect was suggested to be responsible for patients’ short stature rather than growth hormone deficiency. However, our patients’ growth velocity was improved by growth hormone. We recommend more studies to specify the role of ORC1 gene in this syndrome. In addition, this case report describes the prenatal investigations and sonographic examinations of MGS1 for the first time.     

The age-related expression decline of ERCC1 and XPF for forensic age estimation: A preliminary study

The age-related capacity decline of DNA damage repair in human peripheral blood has been demonstrated. Excision repair cross-complementation group1 (ERCC1) and Xeroderma pigmentosum complementation group F (XPF) were rate-limiting enzyme in nucleotide excision repair (NER) which was known as the most important DNA damage repair system. Consequently, we hypothesized that the expression and/or activity of ERCC1 and XPF may be associated with age. However, little was known about the quantitative relationship of ERCC1 and XPF expression levels with age. The aim of the present study was to analyze the correlation of ERCC1 and XPF expression levels with age by detecting the ERCC1 and XPF mRNA levels in peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) and protein levels in plasma in healthy ethnic Han Chinese individuals, and finally find new molecular markers for forensic age estimation by establishing the mathematical model between ERCC1 and XPF expression levels and age. The results showed that the ERCC1 and XPF mRNA relative expression levels in PBMCs declined in an age-dependent manner (r = −0.578/−0.844, respectively, P < 0.01). The formula for age estimation based on the ERCC1 and XPF mRNA relative expression levels decline in PBMCs were Y = 3.3E−5x²−0.0261x+1.9175 (R² = 0.3244, P < 0.01) and Y = 0.0003x²−0.0459x+2.0439 (R² = 0.729, P < 0.01), respectively. There were no significant differences of the ERCC1 or XPF protein expression levels in plasma between age groups (P > 0.05). Furthermore, there were no significant differences of the ERCC1 or XPF mRNA and/or protein expression levels between males and females(P > 0.05). It suggested that the ERCC1 and XPF mRNA expression levels could be considered as valuable additional tool in individual age estimation, especially in cases where traditional morphologic method was inefficient or absent in forensic practice.