高效液相色谱法测定人血清中司帕沙星药物浓度

目的建立测定人血浆中司帕沙星药物浓度的方法。方法采用二氯甲烷萃取，高效液相色谱法测定。色谱柱：GeminiC18（250mm×4．6mm，5μml流动相：0．01mol·L^-1，磷酸二氢钾-三乙胺（磷酸调PH=3．0）-甲醇（34．8：0．2：65）；流速：1．2mL·min^-1；紫外检测器：波长292nm，柱温30℃。结果司帕沙星的保留时间为9．6min，定量线性范围：0．016。2．000μg·ml^-1，方法回收率〉90％（n=5），日内、日间RSD〈10％（n=5）。结论本方法快速，定量准确，可用于血药浓度测定及人体药代动力学研究。     

HPLC法测定人血浆中5-氟尿嘧啶的浓度

目的：建立测定人血浆中5-氟尿嘧啶（5-FU）浓度的方法。方法：血浆采用乙酸乙酯二次提取处理后以高效液相色谱法进样测定,其中,色谱柱为Ultimate C18,流动相为10mmol·L-1 KH2PO4溶液,流速为1．0mL·min-1,检测波长为265nm,柱温为40℃。结果：5-Fu血药浓度在0．48-61．4μg·mL。范围内线性关系良好（r=0．9998）,最低检测浓度样品在为0．48μg·mL-1,日内和日间RSD分别为5．12％～9．98％、5．28％～10．95％（n=5）,高、中、低3种浓度的方法回收率均高于85％。样品在室温放置、冷冻保存、反复冻融条件下稳定性良好。结论：该方法具有操作简便可靠、准确、稳定性高等特点,适用于人血浆中5-Fu浓度的测定。     

LC-ESI-MS／MS法快速测定人血浆中托莫西汀的浓度

目的建立一种快速灵敏测定人体血浆中托莫西汀浓度的高效液相色谱串联质谱（LC-ESI-MS／MS）检测方法。方法以Agalent C18反相柱（150mm×2．1mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈（1％甲酸）：0．02mol·L-1甲酸铵水溶液=80：20（V/V）;流速0．3mL·min-1,柱温40℃。采用选择反应监测（SRM）对托莫西汀（m／z256．1→44．1）和内标氟西汀（m／z 310．1→44．2）进行测定。结果托莫西汀的高（1000μg·L-1）、中（500μg·L-1）、低（2μ·L-1）质量浓度标准血样的平均回收率分别为107．00％、103．51％和105．76％,日内（n=5）、日间（n=3）RSD均〈15％;线性范围为1—1500μg·L-1,回归方程为Y=0．5821p-2．5814×10^-4,r=0．9975（n=5）,分析方法的最低定量限为1μg·L-1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于托莫西汀临床血药浓度监测和药动学研究。     

LC-MS／MS法测定人血浆中利培酮及其代谢物9-羟基利培酮的浓度

目的建立LC-MS／MS法测定人血浆中利培酮及其代谢物9-羟基利培酮浓度的方法。方法血浆经特丁基甲醚提取,采用同位素内标（氘4-利培酮、氘4-9-羟基利培酮）进行测定。色谱柱：CAPCELL PACK C18Ⅲ（100mm×2．0mm,5μm）,流动相为乙腈-5mmol·L^-1醋酸铵氨水缓冲液（pH=8）（50：50,11／V）,等度洗脱;流速0．4mL·min^-1;进样体积lO皿;电喷雾离子化,正离子MRM扫描。结果利培酮及9-羟基利培酮线性范围均为0．1—50μg·L^-1（r〉0．9999）,定量下限均为0．1μg·L^-1,平均提取回收率均〉80％,批内、批间精密度RSD均〈10％。结论本方法灵敏度高、专一性好、操作简单,适用于利培酮的药动学研究。     

LC—ESI—MS／MS法快速测定人血浆中环丙沙星的浓度

建立测定人血浆中环丙沙星浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾法（LC-ESI-S／MS）。方法以Agilent ZORBAX C18反相柱（Agilent ZORBAX TC-C18 column,4．6mm×150mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈（含1％甲酸）-0．02mol·L^-1甲酸铵水溶液：90：10（V：V）,流速为0．8mL·min^-1,柱温：25℃,采用乙腈沉淀簧白法。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测（SRM）对环丙沙星（rdz332．2—314．2）和洛美沙星（m／z352．2→265．1）进行测定。并用此法测定20例健康受试者单次口服500mg后的血药浓度。结果环丙沙星的高（2500μg·L^-1）、中（250μg·L^-1）、低（10μg·L^-1）3个浓度的平均回收率分别为101．22％、102．31％和93．19％,日内（n=5）、日间（n=3）RSD均小于15％;分析方法的最低定量限为5μg·L^-1。线性范围为：5～5000μg·L^-1,回归方程为：F=30692．75ρ-0．0014,r=0．997（n=8）．权重为1／ρ^2。结论该方法灵敏、准确、简单、快速．可用于临床血浓监测和药动学研究。     

人血浆中阿加曲班浓度测定的方法学研究

目的建立血浆中阿加曲班药物浓度的高效液相色谱测定方法。方法血样中阿加曲班用有机溶剂（乙酸乙酯-异丙醇=4：1）提取浓缩后测定。色谱柱为Kromasil C18（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-2％三乙胺溶液（45：55）,检测波长为333nm。结果阿加曲班浓度在0．5～50μg·mL^-1呈良好线性关系（r=0．9995）,最小可定量浓度为0．5μg·mL^-1,方法回收率为94．3％～102．4％（n=5）,日内RSD为2．4％～7．8％（n=5）;日间RSD为3．7％～8．1％（n=15）。结论本方法简单、快速、准确、灵敏,可用于阿加曲班的血药浓度监测。     

HPLC-ESI／MS法测定大鼠血浆及脑组织中H102肽的浓度

目的建立大鼠血浆和脑组织中H102肽浓度测定的HPLC．ESI／MS法。方法血浆和脑组织样品采用甲醇沉淀蛋白后进样测定。色谱柱：GeminiC18（50mill×2．00lnrn,5／．tm）,流动相：乙腈（0．1％甲酸）．水（0．1％甲酸）（14．5：85．5）,流速0．4mL min-1,柱温40-12。采用电喷雾正离子模式离子化,选择m／x645．3和m／z843．2分别作为H102肽及内标安普利泰的检测离子。结果血浆及脑组织中H102肽在5—500μg·L-1内线性良好（r=0．9992,0．9993）;日内、日间精密度良好（RSD均〈15％）;提取回收率〉85％。SD舍大鼠鼻腔给予H102肽溶液（2mg·kg-1）后,主要药动学参数：l。。5min,pmax 103．13μg·L-1。大鼠嗅球、大脑、小脑及海马中H102肽的AUC0-60min分别为3149．07＇、266．98、243．72及407．77μg·min·L-1。结论本方法快速、准确、重复性好,适用于大鼠体内H102肽浓度的测定。     

LC-MS／MS法测定人血浆中氯沙坦及其代谢物E-3174的浓度

目的建立LC-MS／MS法测定人血浆中氯沙坦及其代谢物E-3174血药浓度的方法。方法血浆酸化后用乙醚提取,采用同位素内标（氘3-B3174）进行测定。色谱柱：CAPCELLPACKC18Ⅲ（100mm×2．0mm,5μm）,流动相：0．02％甲酸乙腈-水溶液（53：47,v／v）;等度洗脱;流速0．3mL·min-1;进样体积5μL;电喷雾离子化,正离子MRM扫描。结果氯沙坦和E-3174线性范围均为5—500μg·L-1（r〉0．999）,最低定量限均为5μg·L-1,平均提取回收率均〉50％,批内、批间精密度RSD均〈8％。结论本方法灵敏度高、专一性好、操作简单,适用于氯沙坦的药动学研究。     

顶空气相色谱法测定注射用甲磺酸吉米沙星中基因毒性杂质

目的：建立测定注射用甲磺酸吉米沙星中甲磺酸烷基酯类基因毒性杂质的顶空气相色谱法。方法：以Supelco 毛细管柱（30m×250μm,0．25μm）为色谱柱,程序升温：氮气为载气,流速为0．5mL·min-1：采用微池电子捕获检测器,检测器温度为250℃：顶空进样,平衡温度为60℃,平衡时间为30min,进样口温度为110℃,进样量为1mL;分流比为1：10。结果：基因毒性杂质甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯和甲磺酸异丙酯在限度为20％～120％的范围内线性关系良好,定量限分别为0．0100、0．2500和1．2500μg·L-1．检测限分别为0．0020、0．0100和0．2500μg·L-1,平均回收率分别为99．20％、99．45％和99．98％（n=9）。结论：该方法准确、简便,适用于甲磺酸吉米沙星中基因毒性杂质的检测及限度控制。     

反相高效液相色谱法检测人血浆帕珠沙星浓度

目的：建立人血浆帕珠沙星检测的高效液相色谱方法。方法：血浆经高氯酸沉淀,以Agilent TC—C18为色谱柱;流动相为乙腈-0．1％三氟乙酸-水体系,流速为0．8ml·min^-1;检测波长314nm。结果：帕珠沙星浓度在0．10～20．00mg·L^-1范围内线性关系良好（r=0．9998）;高中低三个浓度（0．25,5．00,15．00mg·L^-1）的相对回收率分别为（101．47±4．53）％、（99．50±3．63）％和（100．71±3．33）％;日内RSD分别为3．12％、2．85％和2．63％,日间RSD分别为4．18％、3．29％和2．81％。结论：该方法简便、快速、准确可靠,适用于人血浆帕珠沙星浓度的测定及其药物动力学研究。     

RP-HPLC-FLD法测定人血浆中的阿替洛尔

目的建立RP-HPLC-FLD方法测定血浆中阿替洛尔的浓度。方法血浆样品用有机溶剂（乙酸乙酯-异丙醇=4：1）提取浓缩后测定,内标法定量。色谱柱为Phenomenex C18柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-水（含25mmol·L^-1磷酸二氢钠和5mmol·L^-1十二烷基磺酸钠）=30：70（v／v）;激发波长：226nm,发射波长：310nm。结果阿替洛尔浓度在9．6～1200．0ng·mL^-1呈良好线性关系（r=0．9993）,最低定量下限浓度为9．6ng·mL^-1,方法回收率为94．3％～104．5％（n=15）,日内RSD为6．1％～11．8％（n=15）,日间RSD为6．0％～11．1％（n=45）。结论本方法准确、简单、灵敏,可用于阿替洛尔的药动学研究。     

HPLC法测定硝呋太尔的4种中间体的含量和有关物质

目的建立硝呋太尔合成过程中4种中间体2-(甲硫基甲基)-氧杂环丙烷(MMOP),3-甲硫基-2-羟基-丙基肼(HMPL),N-氨基-5-甲硫基甲基-2-噁唑烷酮(AMOD)和5-硝基糠醛(5-NFA)的HPLC分析方法。方法 MMOP和5-NFA以70 mmol.L-1磷酸氢二钠溶液-甲醇(85∶15)为流动相,HMPL和AMOD以70 mmol.L-1磷酸氢二钠溶液-乙腈(97∶3)为流动相,MMOP、HMPL和5-NFA以Agilent ZORBAX SB-Phenyl柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分析,AMOD以Agilent Eclipse XDB-C8柱(150mm×4.6 mm,5μm)测定,检测波长分别为210,205,205和312 nm。结果 MMOP、HMPL、AMOD和5-NFA分别在7.4~266.4,26.0~2 600,38.0~3 800和18.5~1 850μg.mL-1范围内,峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.9%,99.8%,100.1%和100.1%。4种中间体在酸、碱、氧化、直火和光照条件下的破坏实验时主成分峰与各降解产物及有关物质峰均能很好地分离。结论该方法简单、准确、重复性好,可用于硝呋太尔4种中间体的质量控制。     

HPLC法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定癫痫患儿血浆中拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用外标法,以甲醇沉淀法处理血样后进样测定,色谱柱为Intersil ODS-3,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70),流速为1.0mL·min-1,检测波长为225nm,柱温为27℃。结果:拉莫三嗪血药浓度在0.8～40μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),定量下限为0.5μg·mL-1;平均回收率为(99.35±3.93)%,日内、日间RSD均<5%。20例癫痫患儿拉莫三嗪血药浓度的范围为1.3～15.4μg·mL-1,中位数为4.7μg·mL-1。患儿血浆中拉莫三嗪的血药浓度随年龄的减小,波动范围明显增大。结论:该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于拉莫三嗪的血药浓度监测及其药动学研究。年龄越小的患儿,越需要对拉莫三嗪进行血药浓度监测。     

LC-MS/MS法测定人血浆中曲美他嗪的浓度及其药动学研究

目的:建立以高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定人血浆中曲美他嗪浓度的方法,并研究其在健康人体内的药动学。方法:色谱柱为Shimadzu Shim-pack VP-ODS,流动相为甲醇-0.2%甲酸(12∶88),流速为0.8 mL·min-1,柱温为室温;采用电喷雾离子源(ESI源),选择正离子监测(SIM)质荷比(m/z)为267.25(曲美他嗪,[M+H]+)和338.05(法莫替丁,[M+H]+)的正电荷的准分子离子峰。结果:曲美他嗪血药浓度在2～250 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.997 8),方法的定量下限为2 ng·mL-1;日内、日间RSD均≤9.3%,提取回收率在71.1%～75.8%之间(RSD≤5.4%)。22名受试者单剂量口服盐酸曲美他嗪片40 mg后曲美他嗪的平均药动学参数分别为:cmax(156.2±24.4)μg·L-1、tmax(2.16±0.36)h、t1/2(5.44±0.75)h、AUC0～24(1 191±205)μg·h·L-1、AUC0～∞(1 260±212)μg·h·L-1。结论:本方法简便、准确、灵敏、专属性强,适用于人血浆中曲美他嗪浓度的测定及其药动学研究,对于评价盐酸曲美他嗪疗效和安全性有重要意义。     

UPLC-MS/MS方法测定健康人体氟氯西林血浆药物浓度及其药动学研究

目的：应用超高效液相串联质谱联用方法（UPLC-MS/MS）测定健康人体氟氯西林血浆药物浓度,并对其药动学特征进行分析。方法：采用开放、随机设计试验方案,选择24位健康志愿者,男女各半,随机分成3组,分别静脉给予1.0 g、2.0 g、4.0 g三个剂量试验药物,采用UPLC-MS/MS方法测定血浆中氟氯西林药物浓度。流动相由乙腈：10 mmol·L^-1甲酸铵水溶液=35∶65（v/v）组成。色谱柱为BEHTM C18（Waters）,1.7μm,柱长100 mm×2.1 mm I.D,流速为0.2 mL·min-1,柱温40℃,自动进样器温度4℃,进样量2.5μL。质谱条件：离子源温度120℃;去溶剂气温度：350℃;氟氯西林（m/z 454.1〉160.3）,内标氯唑西林钠（m/z 436.1〉277.3）。结果：氟氯西林标准曲线线性范围为0.2μg·mL^-1~1000μg·mL^-1,线性关系良好（r〉0.99）,最低定量限：0.2μg·mL^-1,高、中、低3种浓度的批内和批间变异（RSD%）均小于15.0%,血浆提取回收率为89.7%~114.7%。结论：本方法处理过程简单可靠,可快捷、准确地应用于氟氯西林的血浆药物浓度测定。     

简单灵敏的高效液相色谱法测定人血浆中去甲万古霉素的浓度

目的建立血浆中去甲万古霉素含量的HPLC测定方法。方法采用高效液相色谱检测法,分析柱为Tskgel ODS-80TS（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为10mmol·L^-1甲酸铵（0．1％甲酸）-甲醇（0．1％甲酸）=（82：18,v／v）,流速：1．0mL·min^-1,柱温：30℃,检测波长：236nm,进样量：20μL.血浆样品用三氟醋酸直接沉淀后,进样分析。结果去甲万古霉素在1～1000μg·mL^-1与峰面积线性关系良好（r=0．999）,最低检测浓度为1μg·mL^-1。平均回收率为96％;日间、日内RSD均〈15％。结论研究建立的HPLC法快速、简便、高效,精密度和准确度高,适合血样中去甲万古霉素浓度的检测。     

HPLC测定大鼠海马中谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量

目的建立了邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生高效液相荧光色谱法检测大鼠海马中谷氨酸（GLU）、γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。方法采用AlltimaC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为50mmol·L^-1乙酸钠（pH6.8）、甲醇、四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0mL·min^-1。激发波长（λEx）338nm,发射波长（λEm）425nm。结果GLU、GABA线性范围分别为1.03～20.6μg·mL^-1（r=0.9992）和1.13～22.6μg·mL^-1（r=0.9997）;当信噪比为3时,GLU和GABA的检出限分别为5.27×10-4μg·mL^-1和7.35×10-4μg·mL^-1;测得精密度RSD分别为3.4%和3.5%;加样回收率分别为90%～96%,85%～91%。结论本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,适用于海马中GLU和GABA的含量测定。     

HPLC-ELSD测定妥布霉素滴眼液的含量

目的建立高效液相色谱一蒸发光散射检测器检测法（HPLC—ELSD）测定妥布霉素滴眼液的含量。方法选用耐酸性的Agilent Zorbax SB-C18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱;流动相为0．2mol·L^-1三氟乙酸溶液,甲醇（92：8）,柱温为35℃,流速为0．8mL·min^-1,进样体积为10μL;ELSD检测器漂移管温度为45℃,雾化气体压力为3．5bar,信号增益（GA跗）为5。结果妥布霉素在55．6～1396．7μg,mL^-1内,其峰面积的对数与浓度的对数呈良好的线性关系（r=0．9997）,检测限和定量限分别为0．15μg·mL^-1和0．45μg·mL^-1。结论方法专属性强,准确可靠,适用于妥布霉素滴眼液产品质量控制。     

RP-HPLC法同时测定复方甘草酸苷片中三组分的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定复方甘草酸苷片中甘草酸单铵盐、甘氨酸和蛋氨酸的含量。方法：采用Diamonsil C18色谱柱（150mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-0.01mol·L^-1磷酸溶液（40：60）,流速1.0mL·min^-1,甘草酸单铵的检测波长为257nm,甘氨酸和蛋氨酸的检测波长为262nm。结果：甘草酸单铵盐、甘氨酸和蛋氨酸浓度分别在50.52～505.20μg·mL^-1、10.6～106.0μg·mL^-1、10.4～104.0μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为（100.32±1.35）%、（101.02±1.80）%和（100.75±1.86）%,RSD分别为1.35%、1.78%和1.85%（n=9）。结论：本法可用于同时测定复方甘草酸苷片中甘草酸单铵盐、甘氨酸和蛋氨酸的含量,方法简便,结果准确。     

HPLC法测定血浆中头孢丙烯浓度及其人体药动学研究

目的:建立测定人血浆中头孢丙烯(CFPZ)浓度的高效液相色谱法,并应用于人体药动学研究。方法:10名男性健康受试者单次空腹口服CFPZ片500mg,采用高效液相色谱法测定CFPZ的血药浓度,色谱柱为KromasilKR100-5C18,流动相为0·01mol·L-1KH2PO4水溶液-乙腈(100:9·5),检测波长为254nm,柱温为室温,流速为1·0mL·min-1,进样量为20μL。结果:CFPZ血药浓度在0·25～15μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0·9999),最低检测浓度为0·25μg·mL-1;低、中、高(0·25、0·5、2·5μg·mL-1)3种浓度(n=5)的日内RSD分别为4·8%、3·5%、1·3%,日间RSD分别为12·6%、6·7%、1·6%,相对回收率分别为97·7%、102·5%、103·6%,绝对回收率分别为88·5%、87·8%、85·3%。受试者单次空腹口服CFPZ片500mg后的Cmax为(8·66±1·57)mg·L-1,tmax为(1·85±0·8)h,t1/2为(1·4±0·18)h,AUC0～10为(28·28±3·28)mg·h·L-1,AUC0～∞为(29·43±3·54)mg·h·L-1。结论:CFPZ片体内过程符合血管外二室模型,口服后吸收迅速。本方法准确、灵敏、简便、特异性强、重现性好,适合于临床药动学研究。