粒细胞集落刺激因子对骨髓移植及外周血祖细胞保护的骨髓造血重建

１１ 例急性白血病及中－ 高恶性度非何杰金氏淋巴瘤患者，采用自体／异基因骨髓移植和外周血造血祖细胞保护的大剂量化疗。骨髓或外周血造血祖细胞回输后，开始使用Ｇ－ ＣＳＦ ２．５－ ５ μｇ／ｋｇ，１／日。Ｇ－ＣＳＦ使用天数分别为：外周血造血祖细胞保护组１１±２ ｄ；自体骨髓移植组１８±２ ｄ；异基因骨髓移植组２０±２ ｄ。骨髓涂片显示：骨髓增生活跃。外周血象恢复时间缩短，骨髓及外周血ＣＦＵ－ＧＭ ，ＢＦＵ－Ｅ， ＣＦＵ －ｍ ｉｘ 培养和ＣＤ３４＋ ＣＤ３８＋ 、ＣＤ３４＋ ＣＤ３８－ 细胞检测表明造血祖细胞恢复良好。Ｇ－ＣＳＦ能促进骨髓造血重建，缩短骨髓空虚期，减少严重感染的发生     

C－myc基因表达水平与骨髓增生异常综合征临床特征的相关性分析

采用Ｓｐｅａｒｍａｎ秩次相关法分析了１５例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）的骨髓细胞中Ｃ－ｍｙｃ基因表达水平与诸临床特征间的相互关系。结果表明，Ｃ－ｍｙｃ－ｍＲＮＡ水平与ＭＤＳ患者的无白血病转化生存时间呈负相关（Ｐ＜０．０１），但与外周血白细胞、血小板数及血红蛋白含量无显著相关。同时对Ｃ－ｍｙｃ表达与骨髓幼稚前体细胞异常定位（ＡＬＩＰ）的关系进行了初步探讨。     

C—myc基因表达水平与骨髓增生异常综合征临床特征的相关性分析

采用Ｓｐｅａｒｍａｎ秩次相关法分析了１５例骨髓增生异常综合征的骨髓细胞中Ｃ－ｍｙｃ基因表达水平与诸临床特征间的相互关系。结果表明，Ｃ－ｍｙｃ－ｍＲＮＡ水平与ＭＤＳ患者的无白血病转化生存时间呈负相关，但与外周血白细胞，血小板数及血红蛋白含量无显著相关。同时对Ｃ－ｍｙｃ表达与骨髓幼稚前体细胞异常定位的关系进行了初步探讨。     

正常人骨髓CD34~＋造血干祖细胞的形态学及细胞化学特征

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干祖细胞的形态学及细胞化学特征１０００３９北京解放军第３０７医院奚永志，张双喜，李秀森，唐佩弦，孔繁华关键词造血干细胞；骨髓中国图书资料分类号Ｒ５５１．１ＣＤ３４＋ＨＳＣ／ＨＰＣ因具有自我更新、多向分化及重建长期造血的独特生...     

脐血与成人外周血,骨髓中造血干／祖细胞数量汲增殖比较

应用免疫磁珠分离法及甲基纤维素体外集落培养法分别观赏了脐血、成人外周血及骨骨右ＣＤ３４＾＋细胞数疸和ＣＦＵ－Ｍｉｘ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落形成情况，并进行了比较研究，结果显示脐血造血干／祖细胞数量及增殖能力明显高于成人外周血和骨髓，脐血中ＣＤ３４＾＋细胞数分别是成人外周血和骨髓的２０￣４０倍和４￣５倍，脐血外周血的４倍和３倍，而与骨髓基本相当。     

川芎嗪对小鼠骨髓基质细胞内皮抑素表达的影响

目的探讨同基因骨髓移植(BMT)小鼠骨髓基质细胞内皮抑素(endostatin,ES)的表达及川芎嗪对其影响。方法取健康BALBc小鼠,随机分为3组正常组(不做处理),骨髓移植对照组(BMT组)和骨髓移植川芎嗪治疗组(川芎嗪组)。BMT组和川芎嗪组分别胃饲生理盐水02ml只和川芎嗪注射液每次2mg只,2次d。在BMT后第7、14、21、28天处死小鼠,采用免疫组化、Westernblot方法检测骨髓基质细胞中ES蛋白表达水平,RTPCR检测骨髓基质细胞中ESmRNA表达水平。结果BMT后第7、14、21、28天川芎嗪组和BMT组ESmRNA和蛋白表达水平均显著低于正常组(P<005或P<001),随着时间延长其表达逐渐增高。BMT后第14、21、28天川芎嗪组ES表达水平始终低于BMT组(P<005);但骨髓有核细胞计数高于BMT组(P<005或P<001)。结论川芎嗪能反馈调节BMT小鼠骨髓基质细胞新血管生成抑制因子的表达,促进骨髓微环境的修复,加速移植后骨髓的造血重建。     

低氧高二氧化碳对肺动脉内皮素-1基因表达的影响

慢性阻塞性肺疾病(ＣＯＰＤ)发病的中心环节是肺动脉高压的形成,阐明肺动脉高压的形成机制以及寻求理想抑制肺动脉高压药物一直是ＣＯＰＤ、肺心病防治的重要研究课。作者采用慢性低氧(Ｏ2)高二氧化碳(ＣＯ2)肺动脉高压大鼠模型,研究肺动脉内皮素-1(ＥＴ-1)基因表达变化在肺动脉高压形成和肺血管结构重建中的作用及川芎嗪的影响。将ＳＤ大鼠分为正常对照组(Ａ组)、4周低Ｏ2高ＣＯ2组(Ｂ组)、4周低Ｏ2高ＣＯ2 川芎嗪组(Ｃ组)。采用透射电镜、图像分析、原位杂交等方法,研究4周低Ｏ2高ＣＯ2和川芎嗪对大鼠肺动脉平均压(ｍＰＡＰ)、颈动脉平均…     

川芎嗪促进急性放射损伤小鼠骨髓造血修复作用的研究

目的　探讨川芎嗪促进急性放射损伤小鼠骨髓造血修复可能的机理。方法　取 5 6只昆明小鼠 ,随机分为 3组 :正常组、对照组和川芎嗪组。对照组和川芎嗪组进行6 0 Coγ射线一次性全身均匀照射 ,总吸收剂量为 6 0Gy ,吸收剂量率为 0 5 6Gy min ,照射后分别胃饲相同剂量 (2mg 只 ,2次 d)的生理盐水和川芎嗪 ,分别于照射后第 3、7、14天计数骨髓单个核细胞 (BMNC) ,检测骨髓组织中造血组织面积和血管内皮生长因子 (VEGF)及骨髓单个核细胞PECAM 1的表达水平。结果　川芎嗪组第 3、7、14天BMNC计数及骨髓造血组织面积均显著高于对照组 (P <0 0 1) ;川芎嗪组VEGF、PECAM 1的表达水平在第 3、7天明显高于对照组 (P <0 0 1) ,而第 14天其表达降低并明显低于对照组 (P <0 0 5 )。结论　川芎嗪可能通过增强骨髓中黏附分子PECAM 1和VEGF的表达 ,以促进急性放射损伤后造血细胞和造血微环境的修复     

正常人骨髓CD34~＋造血干／祖细胞的高效富集与其功能亚群

正常人骨髓ＣＤ３４￣＋造血干／祖细胞的高效富集与其功能亚群１０００３９北京解放军第３０７医院奚永志，张双喜，唐佩弦，魏文，毛宁，孔繁华关键词造血干细胞，骨髓中国图书资料分类号Ｒ３２９．２４ＣＤ３４是目前所能认识的表达在人类ＨＳＣ／ＨＰＣ上的最早期白细...     

川芎嗪对放射损伤小鼠造血细胞粘附分子CD49d及细胞周期蛋白CyclinD2表达的影响

常用活血化瘀中药川芎嗪能通过改善骨髓微环境, 提高基质细胞粘附功能, 促进造血干细胞增生^[1].本文作者则进一步在分子水平上探讨川芎嗪对急性放射损伤小鼠骨髓造血细胞粘附分子CD_49d及脾脏单个核细胞周期蛋白Cy clinD₂表达水平的影响及意义。     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血干细胞的辐射防护作用

目的：骨髓造血干细胞（ｈｅｍｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＨＳＣ）损伤所致的造血抑制是急性骨髓型放射病死亡的重要原因之一，本实验旨在观察人基因工程重组超氧化物歧化酶（ｒｈＳＯＤ）对ＨＳＣ有无辐射防护作用以及化学修饰对ｒｈＳＯＤ抗辐射作用的影响。方法：实验用照射小鼠的外源性脾结节（ＣＦＵ－Ｓ）形成法。组间比较用ｔ检验。结果：ｒｈＳＯＤ和ＰＥＧ－ＳＯＤ均能明显提高ＣＦＵ－Ｓ形成数，其中ｒｈＳＯＤ在照射前１小时给药效果好，而ＰＥＧ－ＳＯＤ在照射前２～３小时给药作用更为明显。结论：ｒｈＳＯＤ具有对骨髓造血于细胞的辐射防护作用，化学修饰后ＳＯＤ的血浆半衰期延长而使药物作用持续时间延长。     

川芎嗪促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复的信号传导机理研究

目的　探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓造血微环境的影响及其信号传导机理。方法小鼠经60 Coγ射线 (6 0Gy)照射后即胃饲磷酸川芎嗪注射液 ,4mg 只 ,2次 d,连续 1 3d。分别于照射后第 3 ,7,1 4天处死小鼠 ,取尺骨制备石蜡切片 ,用免疫组化方法检测骨髓组织中因子Ⅷ相关抗原和VEGF受体flk 1的表达水平 ;培养骨髓基质细胞 ,用Westernblot方法分析骨髓基质细胞黏着斑激酶(磷酸化FAK)的表达水平。结果　川芎嗪组小鼠造血恢复明显比对照组快 ,照射后第 1 4天 ,川芎嗪组骨髓组织flk 1染色吸光度值 (A)显著高于对照组 (P <0 0 5) ,其基质细胞磷酸化FAK的表达在第1 4天时已接近正常水平 ,而对照组的表达仍较弱。结论　川芎嗪可以促进骨髓内皮细胞上flk 1的表达和基质细胞中FAK的磷酸化 ,是改善放射损伤小鼠骨髓微环境、促进造血恢复的的机理之一     

人正常骨髓CD34~ 造血细胞体外扩增形成红系及混合系造血祖细胞的能力

根据阳性选择策略，采用ＣＩＭＳ－１００免疫磁性无菌分离系统富集人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞，然后将其在含Ｅｐｏ＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋ＳＣＦ（简ＥＧＩＳ）组合造血生长因子的无基质液培体系中扩增４周，定期进行单个核细胞计数、ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｍｉｘ的培养。经ＦＡＣＳ鉴定所富集的ＣＤ３４＋造血细胞纯度平均＞９０％。人正常骨髓ＣＤ３４＋造血细胞在该条件下均可持续产生大量单个核细胞，最高可扩增１７７０倍。与ＨＰＰ－ＣＦＣ和ＣＦＵ－ＧＭ相反，ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－Ｍｉｘ扩增量较低，最高仅为２．３６和２．４倍，且仅在第１周出现，随后迅速减少至停止。     

邻苯二甲酸正丁酯净化自体骨髓移植治疗白血病

邻苯二甲酸正丁酯（ＤＢＰ）在体外具有选择性杀伤白血病细胞的特性，白血病骨髓体外培养体系中加入ＤＢＰ会加速白血病祖细胞的清除。在骨髓体外长期培养基础上，利用ＤＢＰ对１４例急性非淋巴细胞白血病病人骨髓进行体外净化并自体骨髓移植，骨髓细胞经过５～９ｄ与５０μｇ／ｍｌＤＢＰ共培养后，骨髓有核细胞回收率为６８％，ＣＦＵ－ＧＭ回收率为７０．１％，回输骨髓细胞悬液中检测不出残留ＤＢＰ。净化后骨髓回输给放，化疗预     

运动干预对饮食性高胆固醇血症大鼠肝脂肪变的影响

以高脂膳食诱导ＳＤ大鼠高胆固醇血症，观察了血清ＴＣ、ＴＧ和ＬＤＬ－Ｃ水平变化及肝脏脂肪变以及有氧运动干预对其的影响。结果表明，ＳＤ大鼠血清ＴＣ和ＬＤＬ－Ｃ水平显著提高，ＴＧ未呈显著性改变；普通病理学观察肝细胞呈明显脂肪病变，超微形态观察肝组织亚细胞结构损伤；８周有氧运动干预显著降低高胆固醇血症大鼠血清ＴＣ、ＴＧ和ＬＤＬ－Ｃ水平，明显改善肝脂肪变程度，研究提示，有氧运动对脂肪肝有明显的预防和治疗作用。     

两步法聚合酶链反应克隆编码CD34蛋白质胞外区的基因片段

两步法聚合酶链反应克隆编码ＣＤ３４蛋白质胞外区的基因片段刘明东马恩普韩颍刘秀珍北京放射医学研究所北京１００８５０ＣＤ３４抗原局限表达于造血干／祖细胞，在正常骨髓单个核细胞中仅有１％～３％的细胞表达ＣＤ３４，本研究通过逆转录后采用两次聚合酶链反应（ＰＣ...     

苓苯二甲酸正丁酯净化自体骨髓移植治疗白血病

邻苯二甲酸正丁酯（ＤＢＰ）在体外具有选择性杀伤白血病细胞的特性，白血病骨髓体外培养体系中加入ＤＢＰ会加速白血病祖细胞的清除。在骨髓体外长期培养基础上，利用ＤＢＰ对１４例急性非淋巴细胞白血病病人骨髓进行体外净化并自体骨髓移植，骨髓细胞经过５～９ｄ与５０μｇ／ｍｌＤＢＰ共培养后，骨髓有核细胞回收率为６８％，ＣＦＵ－ＧＭ回收率达７０．１％。回输骨髓细胞悬液中检测不出残留ＤＢＰ。净化后骨髓回输给放、化疗预处理后病人，骨髓造血全部重建。至今１４例病人平均存活时间已达１５个月，２例复发，３例非白血病死亡，其余均无病存活。初步证明ＤＢＰ结合骨髓体外培养是一种安全有效的体外净化措施。     

人脐血分次移植重症联合免疫缺陷小鼠的实验研究

目的：探讨提高脐血移植效果的新方法,进一步了解脐血造血干细胞体内生长特性。方法以经亚致死剂量γ射线照射后的重症联合免疫缺陷小鼠为动物模型,进行了冻存人脐血的分次移植。利用人粒－单系祖细胞培养及流式细胞仪,检测植入小鼠骨髓等器官中人源性细胞。结果与一次移植相比,分次移植相同细胞数时,小鼠骨髓中人ＣＤ４５＾＋、ＣＤ３４＾＋细胞水平明显提高;分次移植细胞数降低到２０％时,其造血及部分免疫功能恢复到相近水     

造血干细胞联合AGM基质细胞移植对骨髓移植小鼠造血重建的影响

目的探讨造血干细胞与主动脉-性腺-中肾（aorta—gonad—mesonephros，AGM）区来源的基质细胞联合移植对同基因骨髓移植（bone marrow transplantation，BMT）小鼠BMT后骨髓造血的影响。方法建立同基因骨髓移植小鼠模型，随机分成4组：空白对照组、BMT组、BMT联合AGM基质细胞移植组（联合移植组）及川芎嗪组，另设正常组。分别于BMT后7、14、21和28d检测外周血细胞、骨髓单个核细胞（bone marrow mono—nuclear cells，BMMNC），3、7、10、14、21和28d检测骨髓组织学变化。结臬联合移植组骨髓单个核细胞较川芎嗪组恢复快，联合移植组及川芎嗪组外周血血细胞、骨髓单个核细胞、骨髓组织恢复均较单纯BMT组快，差异有统计学意义。结论BMT联合AGM基质细胞移植对骨髓移植造血重建具有促进作用。     

骨髓间充质干细胞的生物学特性

从人骨髓中分离人间充质干细胞（ＭＳＣｓ）,台盼蓝拒染法测定细胞增殖状态,ＭＴＴ实验检测不同细胞因子对细胞增殖的影响。应用流式细胞学技术测定细胞周期及细胞表面抗原特征并观察细胞组织化学特点。结果：ＭＳＣｃ具有独特的表征,即ＣＤ２９,ＣＤ４４,ＣＤ１６６阳性,ＣＤ３４,ＣＤ４５,ＨＬＡ－ＤＲ和荆豆素阴性。细胞化学结果显示,几乎所有细胞酸性萘酚醋酸酯酶（ＡＮＡＥ）及糖原（ＰＡＳ反应）阳性,酸性磷酸酶（Ａ