沙立度胺对人乳腺癌细胞增殖及血管内皮生长因子表达的影响

[目的]观察沙立度胺对人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖以及血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用.[方法]应用MTT方法及半定量RT-PCR技术,分别观察沙立度胺对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖及VEGF表达的抑制作用.[结果]沙立度胺在(10～100)μg/ml范围内对MCF-7和MDA-MB-231细胞有明显的抑制增殖作用,并伴随VEGFmRNA表达水平下降;50μg/ml明显抑制两株细胞VEGFmRNA的表达.[结论]沙立度胺在一定浓度范围内能抑制乳腺癌细胞VEGFmRNA的表达,抑制细胞增殖反应.     

沙立度胺抑制乳腺癌细胞增殖的体外实验

背景与目的:观察沙立度胺对体外乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的抑制作用,以及对细胞凋亡细胞周期的影响.材料与方法:经不同浓度(10μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml.、200 μg/ml)的沙立度胺处理MCF-7和MDA-MB-231细胞不同时间(24 h、48 h、72 h)后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活和生长情况,分析量效关系、时效关系.采用流式细胞仪检测沙立度胺对细胞凋亡和细胞周期的影响.结果:在10～200μg/ml浓度范围,沙立度胺对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖均有抑制作用(P＜0.01＝.在药物作用48 h后,对各组细胞的抑制率均达到高峰,尤以100μg/ml浓度组抑制率最高.沙立度胺作用后的乳腺癌细胞在流式细胞分析图上见细胞凋亡峰(亚G1峰),100μg/ml沙立度胺作用48 h后,MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率分别为9.66%和11.18%,与对照组凋之率比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:沙立度胺对MCF-7和MDA-MB-231细胞的体外增殖具有明确抑制作用,并可诱导细胞凋亡.     

沙利度胺抗肿瘤作用研究进展

沙利度胺(TLD)早期被作为一种止吐剂用于治疗妊娠呕吐，但由于严重的致畸作用而被禁用。随后研究发现TLD可治疗由免疫失调引起的多种疾病。近期研究发现TLD在血液系统肿瘤尤其是多发性骨髓瘤(MM)的治疗中显示出明显疗效，对实体肿瘤也有一定治疗作用，但其作用机制尚不完全明了。     

化学修饰的siRNA对乳腺癌细胞VEGF基因表达抑制及凋亡的诱导作用

目的：体外水平探讨化学修饰的小干扰RNA（siRNA）介导的RNAi治疗乳腺癌的可行性。方法：选用阳离子脂质体Lipofectamine2000^TM作为转染试剂,将化学修饰的针对人VEGF基因的siRNA转染人类乳腺癌细胞株MCF-7。半定量RT—PCR和蛋白印迹试验分别检测转染前后细胞中VEGF、Bcl2和baxmRNA和蛋白水平表达的变化,Hoechst33258荧光染色分析细胞凋亡。结果：与未转染的正常细胞组相比,靶向VEGF基因的siRNA转染MCF-7后,细胞中VEGF及Bcl-2mRNA和蛋白表达水平显著降低,P〈0．01。bax基因的表达未发生明显变化,Bcl-2和bax比值下降。Hoechst33258荧光染色显示转染siRNA72h后细胞内可见凋亡小体。结论：化学修饰的siRNA介导的RNAi下调靶基因VEGF的表达,并对MCF-7细胞有明显的凋亡诱导作用。     

VEGF上调survivin和bcl-2表达及抑制乳腺癌细胞凋亡的机制探讨

目的研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)对乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡及凋亡相关基因survivin和bcl-2表达的影响,探讨VEGF自分泌作用抑制肿瘤细胞凋亡的机制.方法构建VEGF165真核表达质粒,采用脂质体转染VEGF165 cDNA MCF-7细胞, 通过RT-PCR及ELISA方法鉴定转染克隆MCF-7/hVEGF165细胞中VEGF mRNA及蛋白的表达,Western blot 方法比较MCF-7/hVEGF165及MCF-7、MCF-7/pcDNA3细胞中survivin、bcl-2蛋白表达,流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期.结果 MCF-7/hVEGF165细胞VEGF mRNA表达量增加,细胞培养上清中VEGF蛋白浓度为(354.50±31.93)ng/L,高于MCF-7细胞的(178.54±16.52)ng/L和MCF-7/pcDNA细胞的(190.75±13.32)ng/L(P<0.01).与MCF-7、MCF-7/pcDNA3组相比较,MCF-7/hVEGF165细胞凋亡百分数显著下降(P<0.05),分别为(2.47±0.51)% (MCF-7/hVEGF165),(7.74±1.56)%(MCF-7/pcDNA3)和(7.35±0.33)%(MCF-7);survivin和bcl-2蛋白表达增高了近3倍,但各组细胞周期变化不明显(P>0.05).结论 VEGF诱导凋亡抑制基因suvivin和bcl-2高表达,可能在自分泌VEGF抑制MCF-7凋亡中发挥重要作用.     

沙利度胺抗肿瘤作用研究进展

沙利度胺(TLD)早期被作为一种止吐剂用于治疗妊娠呕吐,但由于严重的致畸作用而被禁用.随后研究发现TLD可治疗由免疫失调引起的多种疾病.近期研究发现TLD在血液系统肿瘤尤其是多发性骨髓瘤(MM)的治疗中显示出明显疗效,对实体肿瘤也有一定治疗作用,但其作用机制尚不完全明了.     

地塞米松联合沙立度胺治疗多发性骨髓瘤临床观察

多发性骨髓瘤（MM）是B淋巴细胞恶性增生性疾病,约占血液系统恶性肿瘤的10％。虽然现在应用联合化疗方案已使患者生存期明显延长,但本病仍是一种无法治愈的疾病,多次化疗易产生耐药,骨髓移植后易复发。本院采用大剂量地塞米松联合沙立度胺治疗多发性骨髓瘤21例,取得较好疗效,现报告如下。     

氟他胺对乳腺癌HCC1937细胞的增殖抑制作用及机制研究

目的 探讨氟他胺对乳腺癌HCC1937细胞增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度（5、10、20μmol／L）的氟他胺对人乳腺癌HCC1937细胞体外生长的抑制作用;Annexin V-FITC／PI流式细胞仪检测细胞凋亡情况;蛋白印迹法（Western blotting）检测核因子κB（NF-κB）和半胱天冬酶（Caspase-3）的蛋白表达水平。结果 不同浓度氟他胺作用于HCC1937细胞12、24、36、48h后,细胞生长受到抑制且呈时间和剂量依赖性。不同浓度氟他胺作用HCC1937细胞24、48h后,可显著促进细胞凋亡,并呈时间和剂量依赖性。氟他胺作用HCC1937细胞24h后,随着药物浓度的增加,NF-κB蛋白表达水平逐渐下降,而Caspase-3蛋白表达水平逐渐升高。结论 氟他胺能够抑制HCC1937细胞增殖和促进其凋亡,其作用机制可能是通过上调Caspase-3和下调NF-κB蛋白表达实现的。     

沙立度胺联合地塞米松治疗初发多发性骨髓瘤25例

目的观察沙立度胺联合地塞米松方案治疗多发性骨髓瘤的疗效及其不良反应。方法沙立度胺,口服,起始剂量每天50mg,50mg每晚顿服,根据患者耐受情况每周增加剂量50mg/d,直到最大剂量达到400mg/d。地塞米松40mg/d,第1～4日,第9～12日,第17～20日分别静脉或口服给药,每28日为1个疗程。该方案治疗至少3个月。结果完全缓解4例(16%),部分缓解6例(24%),进展10例(40%),无效5例(20%),总有效率80%。常见的不良反应为便秘、嗜睡、疲乏、水肿、指端麻木等。结论沙立度胺联合地塞米松是初治多发性骨髓瘤有效的治疗方案,不良反应少。     

肝癌衍生生长因子在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨肝癌衍生生长因子（HDGF）在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测113例乳腺癌和32例乳腺良性增生性病变中HDGF表达及乳腺癌中人类表皮生长因子受体2（HER-2）、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的表达。比较HDGF与ER、PR、HER-2表达以及其与临床病理因素之间的关系。采用Kaplan-Meier法对不同HDGF表达水平乳腺癌患者进行单因素生存分析,利用Cox模型进行多因素生存分析。结果腺癌组织中HDGF高表达率显著高于乳腺良性增生性病变组织（P<0.01）。HDGF表达与患者的年龄、绝经状况及病理类型、ER、PR表达无明显相关性(P>0.05）,但与患者瘤体大小,淋巴结转移,远处转移、临床分期及HER-2表达显著相关(P<0.01或0.05)。5年生存率HDGF低表达组明显高于高表达组（P<0.01）。HDGF是乳腺癌预后的一项重要因素(RR=1.263,P<0.05)。结论HDGF高表达与乳腺癌的预后不良有关,可作为一个新的判断乳腺癌预后的参考指标。     

趋化因子CCL18与乳腺癌临床病理特征的关系及其对乳腺癌细胞EMT过程的影响

目的 探讨趋化因子CCL18与乳腺癌临床病理特征的关系及其对乳腺癌细胞EMT过程的影响.方法 选取行手术切除治疗的50例乳腺癌患者为研究对象,其中Ⅰ期3例,Ⅱ～Ⅲ期28例,Ⅳ期19例.采用免疫组织化学法检测乳腺组织中CCL18表达情况,分析其与临床病理特征的关系.选取乳腺癌细胞系BT-474和MDA-MB-231,分别...     

Effect of Phosphatidic Acid on Human Breast Cancer Cells Exposed to Doxorubicin

We previously demonstrated that phosphatidic acid (PA) induces chemotactic migration of highly metastatic breast cancer cells MDA-MB-231. The widely used anticancer drug doxorubicin was reported to induce apoptosis of cancer cells. Growth factors such as epidermal growth factor (EGF) and bioactive lipids such as lysophosphatidic acid (LPA) and sphingosine 1-phosphate (SPP) have been shown to enhance viability and to protect cancer cells against apoptosis. In this study, we investigated the effect of PA on MDA-MB-231 cells exposed to the anticancer drug doxorubicin. Cell migration toward PA was partially inhibited by doxorubicin treatment, and PA moderately diminished cell cycle arrest of cells exposed to doxorubicin. Although PA itself was not able to induce apoptosis of MDA-MB-231 cells, apoptosis of cells exposed to doxorubicin was markedly enhanced by PA treatment. Thus, PA is able to increase the apoptotic potential of doxorubicin, and may regulate the effects of doxorubicin used for chemotherapy.     

乳腺癌相关成纤维细胞对乳腺癌细胞的作用

目的研究乳腺癌相关成纤维细胞（CAFs）对乳腺癌细胞株增殖和乳腺癌干细胞比例的影响。方法分离和鉴定人乳腺癌相关成纤维细胞和非肿瘤成纤维细胞（NAFs）,用无血清培养液培养CAFs和NAFs,收集上清液,分别与乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-468共培养48h,通过细胞计数以及流式细胞术,检测其对乳腺癌细胞增殖和细胞周期的影响;并利用流式细胞术,检测乳腺癌干细胞（CD44+CD24-）的细胞比例。结果NAFs和CAFs中表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的细胞比例分别为（6.00±0.57）% 、（53.33±2.33）%(P<0.001);培养NAFs和CAFs的上清液对乳腺癌细胞株的增殖和细胞周期没有明显的影响,上清液处理48h后,MCF-7细胞对照组、NAFs组和CAFs组的G2/M期细胞比例分别为（5.32±0.02）%、（5.63±0.03）%、（6.03±0.03）%(P>0.05);CAFs和NAFs均能诱导乳腺癌干细胞的产生,CAFs组和NAFs组的MCF-7干细胞比例分别为对照组的3.51和1.41倍(P<0.05);MDA-MB-468干细胞比例分别为对照组的4.76和1.35倍(P<0.05)。结论乳腺CAFs高表达α-SMA,培养CAFs的上清液在体外对乳腺癌细胞的增殖没有明显影响,但能诱导乳腺癌干细胞的产生,提示其可能在肿瘤复发和转移中起重要作用。     

碘125粒子对乳腺癌细胞VEGF表达的抑制作用

目的 探讨¹²⁵I粒子对乳腺癌血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响及其抑制肿瘤细胞增殖的作用机制。方法 建立人类乳腺癌细胞株MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为8组,对照组为C7、C14、C21、C28组,实验组为T7、T14、T21、T28组,每组6只,对照组植入空白粒子（0Bq）,实验组植入¹²⁵I粒子（14.8MBq）。观察粒子植入后瘤体生长情况,分别在粒子植入后7、14、21、28 d四个时间点处死两组荷瘤裸小鼠。用半定量RTPCR、免疫组织化学染色方法检测VEGF基因及其蛋白的表达。结果 植入¹²⁵I粒子后,实验组肿瘤生长缓慢,肿瘤抑制率为53.27%。粒子植入28 d,与对照组相比,实验组中肿瘤组织的VEGF mRNA及蛋白表达明显降低,差异有统计学意义。结论 ¹²⁵I粒子抑制乳腺癌细胞增殖重要分子生物学机制之一是其抑制乳腺癌细胞VEGF基因和蛋白的表达。     

醋酸甲地孕酮联合沙利度胺治疗晚期癌症恶液质的效果

目的探究醋酸甲地孕酮联合沙利度胺对晚期癌症恶液质的改善效果。方法选取晚期癌症恶液质患者60例,随机分为对照组(30例)和观察组(30例)。对照组给予一般对症治疗和营养支持并加用醋酸甲地孕酮160mg/次,1次/天。观察组在对照组基础上加用沙利度胺50 mg/次,2次/天,观察周期4周。比较2组治疗前后KPS评分、体质量、进食量、相关生化指标及T细胞亚群的改善情况。结果治疗后,相比于对照组,观察组KPS评分、体质量、进食量、相关生化指标及T细胞亚群水平改善更加明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论醋酸甲地孕酮联合沙利度胺能显著改善晚期癌症恶液质症状,值得临床推广应用。     

乳腺癌手术前后血清扩散因子(scatter facter,SF)水平测定的意义

目的:探讨扩散因子(SF)在乳腺癌发生发展中的作用及其与乳腺癌生物学行为之间的关系.方法:采用ELISA法检测健康女性、乳腺良性病变及乳腺癌手术前后各组患者血清中SF的浓度水平.结果:乳腺癌组(术前)血清SF水平较正常组、乳腺良性病变组明显升高(P＜0.05).乳腺癌患者手术后的血清SF水平较术前明显降低(P＜0.05).乳腺肿块直径≥5cm患者血清SF水平较肿块直径≤2cm的为高(P＜0.05).乳腺癌Ⅲ期患者血清SF水平明显高于Ⅰ期、Ⅱ期患者(P＜0.05).乳腺癌各病理类型之间的血清SF水平无明显差异(P＞0.05).有腋淋巴结转移患者血清SF水平较无腋淋巴结转移者的高(P＜0.05).结论:SF在乳腺癌的发生发展中起着重要的促进作用,与乳腺癌的增殖和侵袭等生物学行为密切相关.提示SF有可能成为乳腺癌诊断、转移及预后判断的有效瘤标.     

AKAP12在HER2阳性乳腺癌中表达及其临床意义

目的探讨人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌中A激酶锚定蛋白12(AKAP12)表达及与HER2阳性乳腺癌患者临床病理特征的关系和临床意义。方法采用UALCAN数据库分析乳腺癌组织和正常组织中AKAP12 mRNA表达情况;免疫组织化学法检测120例HER2阳性乳腺癌组织、癌旁组织及8例转移灶组织中AKAP12蛋白表达,分析癌组织中AKAP12蛋白表达与临床病理因素关系;Bc-GenExMiner v4.4用于分析AKAP12 mRNA表达与HER2阳性乳腺癌预后的关系,GraphPad Prism 7.0分析AKAP12蛋白表达与HER2阳性乳腺癌预后的关系。结果乳腺癌组织中AKAP12显著低于癌旁组织(P<0.05),HER2阳性乳腺癌转移灶中AKAP12蛋白显著低于原发灶(P<0.05)。AKAP12蛋白与肿瘤大小、TNM分期负相关(P<0.05)。生存分析发现AKAP12 mRNA和蛋白低表达患者总生存期较高表达者显著缩短(P<0.05)。单因素及多因素Cox回归分析发现AKAP12蛋白表达、脉管浸润及放射治疗是影响HER2阳性乳腺癌预后的独立风险...