核医学技术在实验性基因治疗中的应用研究

基因治疗是近年来的研究热点，它是将有意义的目的基因通过合适的基因转移方法导入受体细胞，借其表达的产物治疗疾病。本文在简要介绍基因治疗基本概况的基础上，就核医学技术在基因治疗中的应用研究现状作一综述。一、基因治疗的基本概况１．基因治疗的主要技术环节。主要包括：目的基因的分离、目的基因导入人体和导入体内基因的表达调控等［１］。目的基因可由真核细胞、原核细胞或病毒获得，然后利用重组ＤＮＡ技术，将其插入质粒或病毒性（如腺病毒、逆转录病毒）基因转移载体中，由载体介导将目的基因导入受体细胞中。目前基因治疗…     

介入手段实现的局部转导在肿瘤基因治疗系统中的应用

肿瘤的基因治疗主要包括自杀基因治疗、抑癌基因治疗、反义癌基因治疗和免疫基因治疗等，相应的载体可选用病毒类或非病毒类载体。在临床与研究中，介入手段实现的局部转导主要包括转基因载体的肿瘤瘤体内注射和经导管血管内灌注，具体手段的选择与治疗机理、载体以及肿瘤特性等多种因素相关。     

光化学基因转染技术

肿瘤基因转染技术虽然发展很快,仍有许多限制因素制约着它的临床应用,特别是缺乏有效而特异的体内基因转递技术,难以保证基因转染效率。大量研究表明,尽管目前基因治疗载体种类很多,但无论病毒载体或是合成载体都存在着生物安全性、体内转染效率等方面的限制。特别是多数基因载     

介入手术实现的忆部转在肿瘤基因治疗系统中的应用

肿瘤的基因治疗主要包括自杀基因治疗、抑癌基因治疗、反义癌基因治疗和免疫基因治疗等，相应的载体可选用病毒类或非病毒类载体。在临床与研究中，介入手段实现的局部转导主要包拓转基因载体的肿瘤瘤体内注射和经导管血管内灌注，具体手段的选择与治疗机理、载体以及肿瘤特性等多种因素相关。     

腺病毒载体与肿瘤治疗研究进展

基因导入系统是基因治疗的核心技术，可分为病毒载体系统和非病毒载体系统。对于病毒载体而言，大多数野生型病毒对机体都具有致病性，因此需要对其进行改造后才能用于人体。近年来，一些病毒如反转录病毒（包括HIV病毒）、腺病毒、腺病毒伴随病毒、疱疹病毒（包括单纯疱疹病毒、痘苗病毒及EB病毒）、甲病毒等被成功地改造成为基因转移载体并开展了不同程度的应用。对于腺病毒载体，由于它具有①靶细胞种类多，导入效率高；②既可感染分裂期细胞，对增殖停止期细胞也有很高的导入效率，这是逆转录病毒载体所不具备的；③不整合到宿主基因组中从而不会引起插入突变。     

肿瘤基因治疗载体的选择及使用安全性的研究进展

随着对肿瘤发生发展分子机制认识的不断深入,肿瘤的基因治疗已成为攻克和治愈肿瘤最具希望和挑战的研究领域。如何建立安全有效的治疗基因导人系统成为研究者们首要解决的问题。目前,常用的载体主要有病毒载体和非病毒载体两类：病毒载体的转移效率高,在基础研究和临床试验中应用广泛,但近年来因存在安全性的问题,其使用受到了一定的制约;非病毒载基因导入的效率相对较低,但具有安全性好且容易制备的特点,日益受到人们的重视。现就近年来国内外对于肿瘤基因治疗载体的使用选择及安全性研究作一综述。     

基因治疗中的动物病毒载体

基因治疗是新近发展起来的一种新治疗技术,有着广阔的应用前景,它的迅猛发展与真核细胞基因转移技术的发展密切相关.目前常用的基因转移技术主要有:①病毒方法:包括RNA病毒和DNA病毒载体;②化学方法:如磷酸钙共沉淀法;③膜融合的方法:即利用包被着DNA分子的膜性载体,如脂质体、红细胞膜、原生质体等;④物理方法     

腺病毒载体的研究进展

基因治疗技术的发展已逐步成为解决生物学基本问题的一种手段,载体技术研究与开发得到迅速发展。现在应用的载体可分为两大部分：非病毒载体和病毒载体,而腺病毒载体是几个常用病毒载体之一,与其他病毒载体不同,腺病毒载体的诸多优点决定了腺病毒载体在基因治疗领域中具有广阔的应用前景。     

肝癌基因治疗研究新进展

肝癌是我国常见的恶性肿瘤,目前治疗方法较多,其中基因治疗是当前热点问题。本文对肝癌基因治疗的几个方面:反义基因治疗、自杀基因治疗、免疫基因治疗、抑癌基因治疗、联合基因治疗、基因载体等方面进行了综述。     

腺病毒载体的研究进展

基因治疗技术的发展已逐步成为解决生物学基本问题的一种手段，载体技术研究与开发得到迅速发展。现在应用的载体可分为两大部分：非病毒载体和病毒载体，而腺病毒载体是几个常用病毒载体之一，与其他病毒载体不同，腺病毒载体的诸多优点决定了腺病毒载体在基因治疗领域中具有广阔的应用前景。     

基因治疗与放射学

基因治疗是医学中发展最快的领域之一。它与放射学关系密切 ,作为放射学医生应对它有一个基本的认识 ,并应该积极地参与进去。放射科医生应了解其基本技术和方法。包括识别和克隆基因 ,并把它植入载体 ,然后直接在哺乳动物细胞中表达 ;ＤＮＡ运送系统 ,包括逆转录病毒载体 (ＲＮＡ病毒 ) ,腺病毒载体 (ＤＮＡ病毒 )和阳离子脂质体等 ;从转移技术来看 ,有ＵＳ介导的基因转移 ,ＣＴ介导的基因转移 ,经导管的基因转移 (特别是经肝动脉的基因转移 )。正在作临床前试验和临床试验的基因 ,包括癌基因、抗癌基因 (肿瘤抑制基因 )、自杀基因、常规抗…     

创伤骨科转基因治疗的研究进展

基因治疗是借助基因转移 (ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｒ)或基因转染 (ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ)技术将具有生物学作用的基因材料或信息(称为目的基因 )转入细胞内 ,以改变细胞的功能来治疗或预防疾病[1 ] 。可以通过病毒载体、脂质体或基因枪将基因转入到细胞内。基因治疗为疾病的防治开辟了一条新途径。目前 ,通过体内 (ｉｎｖｉｖｏ)和体外 (ｅｘｖｉｖｏ)基因转移技术 ,将编码核酸或蛋白质的调节因子 (如生长因子及其受体、转录因子等 )的基因成功地转入了骨骼肌肉系统的组织中 ,包括骨、关节软骨、半月板、肌腱、韧带等组织[2 ] ,…     

用于肿瘤基因治疗载体的肿瘤特异性配体研究进展

肿瘤靶向基因治疗的主要目的是用靶向性的载体将治疗基因靶向传递到肿瘤细胞。本文综述了3类用于肿瘤靶向基因治疗载体的肿瘤特异性配体：天然分子、单克隆抗体和靶向性多肽，以及由它们修饰的载体系统用于靶向性肿瘤基因治疗的研究进展。     

人p58.2重组逆转录病毒载体的构建及稳定包装细胞系的鉴定

目的　构建并稳定携带人p5 8.2基因的重组逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系。方法　用PCR技术从pSPORT1 -p5 8.2扩增出编码p5 8.2N端 1～ 345个氨基酸的全长基因 ,定向克隆入逆转录病毒载体pMSCV neo中 ,酶切鉴定 ;脂质体法将重组逆转录病毒转入包装细胞系PT6 7,G4 1 8筛选建立稳定产病毒的细胞株。结果　双酶切鉴定 ,成功构建重组逆转录病毒载体 ;重线逆录病毒载体转入包装细胞 ,经G4 1 8筛选 ,形成了抗性克隆 ,并测得病毒滴度为 3× 1 0 5cfu/ml,提示构建携带人p5 8.2基因的逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系成功。结论　构建人p5 8.2基因的逆转录病毒载体可行 ,并且可望成为一种很好的对血液系统疾病进行基因治疗的方法     

基因转移技术与基因靶向性核素治疗

随着在细胞分子水平上对疾病发病机制认识的深入,基因治疗已成为目前医学分子生物学最重要的研究领域之一。基因治疗过程中基因转移技术起着关键作用,携带目的基因的载体有待进一步开发和改进。在基因治疗过程中,需要进行基因监测,基因显像是其最有效的方法。将基因治疗与靶向核素治疗相结合,即"基因靶向核素治疗"为肿瘤基因治疗开辟了一条崭新的途径。     

影像学技术辅助慢性血管性疾病基因治疗的研究进展

基因治疗在治疗慢性血管性疾病方面显示出巨大的潜力,利用各种影像学技术如MR、超声、核医学及导管技术等可提高基因治疗的效果.影像学技术辅助基因治疗的作用主要体现在治疗前准确的评价和病例的筛选、对治疗靶点的精确定位以及对基因药物进行输送并实时监控、增加基因的转染、直接或间接显示载体和功能基因的分布及表达情况,以及治疗效果的短期和长期评价等.     

重组腺病毒载体Ad5-hVEGF165-EGFP的构建与鉴定

目的人血管内皮生长因子（的hVEGF165）为靶基因,增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因构建体的复制缺陷型腺病毒载体,为基因治疗牙周进一步再生奠定了基础。方法质粒的pDC316-的VEGF165为模板,PCR扩增基因片段进行消化,获得的hVEGF165用于连接到含有绿色荧光蛋白标记基因重组质粒的消化方法的pDC316-MCMV-EGFP质粒载体,PCR鉴定和双酶切证实成功构建重组质粒;使用ADMAX包装系统,改造的质粒共转染用质粒骨架293包装细胞系和重组病毒的扩增;扩增病毒的离子交换纯化;TCID50测定病毒粒子和效价的数目;的荧光的荧光显微镜重组腺病毒表达。结果 PCR鉴定,酶切分析和测序证实成功构建人VEGF基因的携带绿色荧光蛋白标记（的hVEGF165）重组质粒的pDC316-的hVEGF165-MCMV-EGFP和同源重组腺病毒Ad5的-的hVEGF165-EGFP的成功。扩增和纯化后,腺病毒颗粒的数量测量5.4×1011VP/mL,约2.0,为1.8×1010CCID50/mL的滴度OD260/OD280值。结论成功构建携带hVEGF165基因重组腺病毒载体Ad5-hVEGF165-EGFP并获得高滴度病毒颗粒,为hVEGF165基因功能研究以及细胞移植、基因治疗提供有效的工具。     

心血管疾病基因治疗

本文综述了基因治疗方法在冠心病，高血压和血栓性疾病等眩血管疾病治疗中应用，包括目的基因的选择，基因载体的选择及其因转移的方法，并提出了目前基因治疗在心血管疾病治疗中所存在的问题和今后的发展前景。     

基因转移技术与基因靶向性核素治疗

随着在细胞分子水平上对疾病发病机制认识的深入，基因治疗已成为目前医学分子生物学最重要的研究领域之一。基因治疗过程中基因转移技术起着关键作用．携带目的基因的载体有待进一步开发和改进。在基因治疗过程中，需要进行基因监测，基因显像是其最有效的方法。将基因治疗与靶向核素治疗相结合，即“基因靶向核素治疗”为肿瘤基因治疗开辟了一条崭新的途径。     

影像学技术辅助慢性血管性疾病基因治疗的研究进展

基因治疗在治疗慢性血管性疾病方面显示出巨大的潜力,利用各种影像学技术如MR、超声、核医学及导管技术等可提高基因治疗的效果.影像学技术辅助基因治疗的作用主要体现在治疗前准确的评价和病例的筛选、对治疗靶点的精确定位以及对基因药物进行输送并实时监控、增加基因的转染、直接或间接显示载体和功能基因的分布及表达情况,以及治疗效果的短期和长期评价等.