慢性间歇低氧对幼鼠学习记忆的影响

目的 建立慢性间歇低氧幼鼠模型,研究其空间学习记忆能力和海马CA1区神经元超微结构的变化.方法 八臂迷宫训练成功的3～4周龄SD幼鼠40只随机分2周间歇低氧组(2H)、对照组(2C)和4周间歇低氧组(4H)、对照组(4C),建立慢性间歇低氧动物模型,间歇低氧结束后八臂迷宫测试学习记忆能力,透射电镜观察海马CA1区神经元的超微结构变化.结果 间歇低氧组参考记忆错误[(3.30±1.06)次、(2.00±0.67)次]、工作记忆错误[(2.30±0.67)次、(1.00±0.82)次]和总错误次数[(5.40±1.78)次、(3.00±0.82)次]均高于对照组(P＜0.05),且随着间歇低氧时间的延长,这种错误次数增多(P＜0.05);电镜下间歇低氧组海马CA1区神经细胞的形态、胞浆内的细胞器均有明显变化.结论 慢性间歇低氧可引起幼鼠空间学习记忆能力下降,这可能和海马CA1区神经元超微结构改变有关.     

慢性间歇低氧对幼鼠学习记忆的影响

目的建立慢性间歇低氧幼鼠模型,研究其空间学习记忆能力和海马CA1区神经元超微结构的变化。方法八臂迷宫训练成功的3~4周龄SD幼鼠40只随机分2周间歇低氧组(2H)、对照组(2C)和4周间歇低氧组(4H)、对照组(4C),建立慢性间歇低氧动物模型,间歇低氧结束后八臂迷宫测试学习记忆能力,透射电镜观察海马CA1区神经元的超微结构变化。结果间歇低氧组参考记忆错误[(3.30±1.06)次、(2.00±0.67)次]、工作记忆错误[(2.30±0.67)次、(1.00±0.82)次]和总错误次数[(5.40±1.78)次、(3.00±0.82)次]均高于对照组(P<0.05),且随着间歇低氧时间的延长,这种错误次数增多(P<0.05);电镜下间歇低氧组海马CA1区神经细胞的形态、胞浆内的细胞器均有明显变化。结论慢性间歇低氧可引起幼鼠空间学习记忆能力下降,这可能和海马CA1区神经元超微结构改变有关。     

间歇低氧幼鼠8-异前列腺素F2α变化及芹菜素的干预效果

目的：观察间歇低氧幼鼠血清及海马8-异前列腺素F2α（8-ISO—PGF2α）的变化及芹菜素的干预效果。方法：取3～4周龄健康雄性SPF级SD幼鼠32只，随机分为间歇低氧组（IH）、空气对照组（C）、芹菜素十二甲基亚矾组（Q）和二甲基亚砜组（R），每组8只，以间歇低氧舱建立间歇低氧幼鼠模型，99．99％的纯氛和99．50％的医用氧交替输入舱内，90s为一次低氧-复氧循环；间歇低氧2周后，ELISA法测定各组血清及海马8-ISO—PGF2α水平。结果：血清中，IH组和R组8-ISO—PGF2α的含量分别高于C组和Q组（均P〈0．01），而C组与Q组比较差异无显著性（均P〉0．05），IH组与R组比较差异无显著性（均P〉0．05）；在海马中，结果类似；血清和海马组织中8-ISO—PGF2α含量呈正相关（r=0．818，P〈0．01）。结论：间歇低氧后幼鼠血清及海马中8-ISO—PGF2α表达均升高，芹菜素可降低血清和海马中的8-ISO—PGF2α水平，在治疗间歇低氧造成的损伤中具有应用前景。     

慢性间歇低氧对幼鼠脑区JNK表达的影响

目的：研究慢性间歇低氧对幼鼠学习记忆脑区JNK表达的影响。方法：SPF级健康雄性SD幼鼠（3～4周龄）40只,随机分为4组：间歇低氧2周组（2IH组）、间歇低氧4周组（4IH组）、对照2周组（2C组）和对照4周组（4C组）。建立慢性间歇低氧幼鼠模型,以RT-PCR法和Western blot法分别测幼鼠海马及前额叶皮层JNK1 mRNA和磷酸化JNK（p-JNK）蛋白的表达。结果：2IH、4IH组幼鼠海马、前额叶皮层的JNK1 mRNA和磷酸化JNK（p-JNK）蛋白均明显高于相应对照组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：JNK的激活可能参与了慢性间歇低氧幼鼠脑损伤过程。     

内质网应激诱导慢性间歇低氧幼鼠认知相关的脑损害

目的 探讨内质网应激对慢性间歇低氧幼鼠脑损害的机制。方法 取SPF级健康雄性SD幼鼠32只,随机分为4组：间歇低氧（IH）2、4周组（2IH,4IH组）,对照2、4周组（2C,4C组）,每组8只。采用八臂迷宫测试各组幼鼠工作记忆错误（WME）、参考记忆错误（RME）、总错误数（TE）,观察海马神经元凋亡变化,测定免疫球蛋白结合蛋白（BiP）、转录激活因子4（ATF4）、C/EBP同源蛋白（CHOP）和磷酸化RNA激活蛋白激酶的内质网类似激酶（p-PERK）的表达水平。结果 慢性间歇低氧导致幼鼠学习记忆能力下降,与2周组比较,4周组明显（WME：3.38±0.52 vs 2.12±0.84;RME：4.25±0.71 vs 3.00±0.93;TE：7.62±0.74 vs 5.12±0.64,P均<0.01）;IH组海马神经元发生凋亡,4周组最明显（20.78%±2.63% vs 14.94%±1.59%,P<0.01）。IH组幼鼠海马BiP、ATF4和CHOP mRNA表达均增加,4IH组ATF4、CHOP mRNA表达显著升高（ATF4：3.50±0.24 vs 1.92±0.13,P<0.01;CHOP：3.09±0.22 vs 1.95±0.18,P<0.01）。2IH、4IH组p-PERK、CHOP蛋白表达上调,4IH组表达明显升高（p-PERK 3.72±0.21 vs 1.85±0.07,P<0.01;CHOP：4.29±0.27 vs 2.69±0.11,P<0.01）。结论 慢性间歇低氧可上调记忆相关脑区BiP、CHOP、ATF4 mRNA和p-PERK、CHOP蛋白的表达,表明内质网应激诱导慢性间歇低氧幼鼠认知相关的脑损害;PERK/ATF4/CHOP信号通路可能是内质网应激的分子机制。     

慢性间歇低氧对幼鼠海马神经细胞凋亡及 caspase-12表达的影响

目的：探讨慢性间歇低氧对幼鼠海马神经细胞凋亡及caspase-12表达的影响。方法：取体重为80～100g健康雄性SPF级SD幼鼠（3～4周龄）40只,随机分为间歇低氧2周（2IH）组、4周（4IH）组,空气对照2周（2C）组、4周（4C）组,每组10只。以间歇低氧舱建立慢性间歇低氧幼鼠模型。采用TUNEL法检测海马神经细胞凋亡,RT-PCR检测海马区caspase-12 mRNA表达,免疫组织化学染色检测海马区caspase-12蛋白的表达。结果：间歇低氧组凋亡指数（AI）、caspase-12 mRNA及其蛋白表达均高于对照组（均P＆lt;0.01）;4IH的AI,caspase-12 mRNA及其蛋白表达均高于2IH（均P＆lt;0.01）。结论：慢性间歇低氧幼鼠海马神经细胞caspase-12 mRNA及其蛋白表达随间歇低氧时间延长而增加,内质网应激参与慢性间歇低氧幼鼠海马神经细胞凋亡过程。     

脂多糖诱导的阿尔茨海默病炎症模型的建立

目的：通过侧脑室注射脂多糖（Lipopolysaccharides,LPS）建立阿尔茨海默病（Alzhei mer’s disease,AD）炎症模型。方法：18只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组,先进行八臂迷宫训练,训练成功后,模型组大鼠侧脑室注射脂多糖,对照组大鼠侧脑室注射等量生理盐水,2周后进行八臂迷宫测试分析大鼠的记忆能力,之后处死大鼠,进行HE染色观察和胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）免疫组化观察。结果：模型组大鼠的记忆能力明显减退,总记忆错误（TE）、参考记忆错误（RME）、工作记忆错误（WME）均明显增多,与对照组相比,P〈0.01;模型组海马出现神经元损伤;模型组大鼠海马内GFAP、TNF-α表达明显强于对照组,P〈0.01。结论：大鼠侧脑室注射LPS能够比较成功地复制AD炎症模型。     

睡眠剥夺减弱幼鼠空间学习记忆能力及海马信号转导

目的对pERK在幼鼠睡眠剥夺所致的学习记忆障碍中的作用进行初步探讨,以明确睡眠剥夺对儿童学习记忆的影响及其信号机制。方法 1月龄幼鼠分为正常对照组、大平台对照组、睡眠剥夺组,使用睡眠剥夺箱建立睡眠剥夺模型,使用Morris水迷宫训练检测幼鼠学习与记忆能力,使用免疫组织化学染色方法检测水迷宫测试后幼鼠海马CA1、CA2区pERK1/2表达水平。结果睡眠剥夺组幼鼠CA1、CA2脑区pERK1/2表达则明显少于两对照组（P值均小于0.01）,且着色浅淡。训练第1天,各组平均潜伏期无明显差异,但从第2天开始,睡眠剥夺组幼鼠的平台潜伏期较其它两个对照组出现延长（P〈0.05）,而且在最后1天进行的空间探索试验中,睡眠剥夺组幼鼠穿环数与正常及大平台对照组相比均明显减少（P〈0.01）。结论 幼鼠海马容易受到睡眠剥夺的影响,从而导致空间记忆的破坏和海马ERK磷酸化的减弱。同时也说明海马ERK激活的下降参与了睡眠剥夺导致的空间记忆的破坏。     

腺苷A2A受体在慢性间歇低氧小鼠空间记忆损害中的作用

目的 探讨腺苷A2A受体(A2A receptor,A2AR)在慢性间歇低氧所致小鼠记忆损害中的作用及机制。方法 取42只清洁级健康雄性C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组、空气模拟对照组、慢性间歇低氧模型组(模型组)、模型组+A2AR激动剂CGS21680组(A2AR激动剂组)、模型组+A2AR抑制剂SCH58261组(A2AR抑制剂组)、模型组+A2AR基因敲除组(A2AR敲除组)及模型组+DMSO溶剂对照组(溶剂对照组),每组6只。采用八臂迷宫测试各组幼鼠参考记忆错误、工作记忆错误及总错误数,尼氏染色法观察并计算海马CA1区神经元数量,膜片钳技术进行海马CA3-CA1区神经元长时程增强重要参数场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potential, fEPSP)的测定,蛋白免疫印迹法检测海马突触融合蛋白syntaxin表达水平。结果 与对照组比较,模型组参考记忆错误、工作记忆错误及总错误次数均升高(P＜0.01),fEPSP斜率及syntaxin蛋白水平下降(P均＜0.01);与模型组比较,A2AR抑制剂组、A2AR基因敲除组参考记忆错误、工作记忆错误及总错误次数减少(P＜0.05),fEPSP斜率及syntaxin蛋白水平升高(P均＜0.05),A2AR激动剂组参考记忆错误、工作记忆错误及总错误次数增多(P＜0.01),fEPSP斜率及syntaxin蛋白水平下降(P均＜0.05)。结论 慢性间歇低氧可通过激活腺苷A2AR,导致海马CA3-CA1区神经元突触可塑性降低,造成小鼠空间记忆损害;敲除或抑制腺苷A2AR可改善海马神经元突触可塑性,减轻小鼠记忆损害。     

乌龙丹对慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的影响

目的探讨乌龙丹对慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的影响。方法实验分为假手术组、慢性脑缺血模型组、乌龙丹高,中,低剂量组、银杏叶片组。采用双侧颈总动脉永久性结扎建立慢性脑缺血模型;术后第2天开始灌胃给药,连续8周。通过Morris水迷宫和避暗实验检测大鼠的空间学习记忆能力和被动回避学习记忆能力;尼氏染色观察大鼠海马组织结构的变化。结果与模型组比较,乌龙丹给药组和银杏叶组大鼠在Morris水迷宫实验中寻台时间明显缩短（P〈0.05,P〈0.01）;在避暗实验中潜伏期明显延长、错误次数减少（P〈0.05,P〈0.01）。尼氏染色：模型组海马CA1区神经细胞数量显著减少,排列紊乱,细胞核固缩,与假手术组和乌龙丹高剂量组比较具有明显差异。结论乌龙丹能改善慢性脑缺血大鼠学习记忆能力,其机制可能与保护大鼠海马组织结构有关。     

间歇低氧大鼠神经元特异性烯醇化酶蛋白的表达及其对学习记忆功能的影响

目的 通过观察间歇低氧后大鼠脑内及血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）蛋白表达及学习记忆功能的影响,探讨NSE蛋白表达与学习记忆功能改变的关系.方法 成年雄性Wistar大鼠48只,采用随机数字表法分为2组：空白对照组（UC组）、7.5％慢性间歇性低氧组（7.5％CIH组）.采用自制低氧舱模拟7.5％慢性间歇低氧模型.分别在第2,4,6,8周应用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆功能;采用免疫组化法检测海马CA1区神经细胞NSE蛋白表达,同时采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清NSE蛋白表达.结果 与空白对照组比较,7.5％ CIH组在2,4,6,8周大鼠逃避潜伏期时间分别为（44.13±2.84）s、（50.35±1.96）s、（57.47±1.66）s、（62.85±1.80）s,从第2周起随低氧时间延长大鼠逃避潜伏期时间延长（P＜0.05）;跨越目标象限时间分别为（48.81±2.09）s、（42.04± 1.84）s、（36.82±2.07）s、（31.81士1.68）s,从第2周起随低氧时间延长大鼠跨越目标象限时间缩短（P＜0.05）.7.5％CIH组海马CA1区神经细胞NSE蛋白表达在2,4,6,8周分别为（9.69±1.37）、（17.10±1.87）、（24.79±3.51）、（34.16±5.35）,血清NSE蛋白表达在2,4,6,8周分别为（6.03±0.91） μg/L、（11.04±1.89）μg/L、（16.39±1.00） μg/L、（24.22±3.73） μg/L,均多于空白对照组,差异有统计学意义（P均＜0.05）;7.5％CIH组海马CA1区神经细胞及血清NSE蛋白表达均有明显的时间差异性,均随时间的延长逐渐升高,差异有统计学意义（均P＜0.05）,海马CA1区NSE蛋白的阳性表达相对值与血清NSE蛋白的表达呈正相关（r=0.94、P＜0.01）;空白对照组NSE蛋白表达无时间差异性（均P＞0.05）.结论 间歇低氧可引起血清及脑组织NSE水平明显升高,两者动态变化均可以反映大鼠学习记忆功能下降的严重程度.     

他莫昔芬对雌性大鼠学习记忆能力的影响

目的：探讨腹腔注射选择性雌激素受体调节剂他莫昔芬（tamoxifen,TC）对雌性大鼠学习记忆能力的影响。方法：将60只成年雌性SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、TC2．5mg·kg^-1组、TC5．0mg·kg^-1组、TC10．0mg·kg^-1组5组,采用Morris水迷宫、跳台及八臂迷宫等行为学实验检测TC对雌性SD大鼠空间辨别学习记忆能力、被动回避条件反射能力及主动学习记忆能力的影响。结果：与溶剂对照组相比,3周后,TC各剂量组被动回避条件反射能力明显下降（P〈0．05）,表现为跳台实验中的逃避潜伏期显著减少,错误反应次数明显增加。6周后,TC各剂量组大鼠的空间辨别学习记忆能力、被动回避条件反射能力及主动学习记忆能力均明显下降（P〈0．05）,表现为Morris实验定位航行的潜伏期增加,目的象限的停留时间减少,第一次到达平台的时间延长;跳台实验中逃避潜伏期显著减少,错误反应次数明显增加;八臂迷宫实验中主动学习过程中总路程明显延长,典型性错误次数显著增加。结论：雌性SD大鼠腹腔注射TC6周后,其学习记忆能力随着TC剂量的增加而降低,TC对雌性SD大鼠的学习记忆能力具有明显的损伤作用。     

外源性硫化氢对海洛因成瘾大鼠学习记忆能力的影响

目的研究硫化氢对海洛因成瘾大鼠学习记忆能力的影响。方法实验动物随机分成3组：对照组、海洛因依赖（Heroin）组、海洛因依赖＋硫氢化钠（Heroin＋NariS）组。采用Morris水迷宫通过定位航行实验及空间探索实验测定各组大鼠学习记忆能力。结果①Morris水迷宫定位航行实验中,Heroin组和Heroin＋NariS组大鼠逃避潜伏期均较对照组明显延长（P〈0．01）,Heroin＋NariS组较Heroin组大鼠逃避潜伏期缩短（P〈0．01）。②空间探索实验中,Heroin组和Heroin＋NariS组与对照组比较,原平台所在象限（第四象限）游泳时间均显著缩短（P〈0．01）,且Heroin组第四象限游泳距离占总距离的百分比以及穿越平台次数均较对照组明显减少（P〈0．01）;Heroin＋NariS组与Heroin组比较,第四象限游泳时间延长（P〈0．01）,第四象限游泳距离占总距离的百分比增大（P〈0．01）,穿越平台次数也增多愀0．05）。结论海洛因成瘾可损害大鼠的学习记忆能力,外源性H2S供体NaHS减轻了海洛因对大鼠学习记忆的损害。     

艾灸百会穴对AD大鼠学习记忆能力及海马区CaMKⅡ mRNA表达的影响

目的:观察艾灸百会穴对阿尔茨海默氏病(AD)大鼠学习记忆能力和海马区钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA表达的影响。方法:用Morris水迷宫进行筛选建立AD大鼠模型。将符合模型标准的20只AD大鼠随机分模型组、艾灸组,每组10只。另外随机选取10只正常老年大鼠为对照组。艾灸组用特制艾条在百会穴施温和灸,共治疗6个疗程。治疗结束后进行Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,并用RT-PCR法检测大鼠左侧海马组织CaMKⅡ表达水平。结果:模型组平均逃避潜伏期较对照组和艾灸组明显延长(P<0.05,P<0.01),有效区停留时间较对照组和艾灸组明显缩短(P<0.05,P<0.01);上述二指标艾灸组与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。三组之间平台停留次数无显著性差异(P>0.05)。模型组左侧海马区CaMKⅡmRNA相对表达量较对照组和艾灸组显著下降(P<0.05,P<0.01),艾灸组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:艾灸百会穴可通过上调海马区CaMKⅡmRNA表达以提高AD大鼠学习记忆能力。     

氯离子通道阻滞剂通过抑制MAPK通路减轻低氧高二氧化碳性肺血管收缩

目的：探究氯离子通道阻滞剂尼氟灭酸对低氧高二氧化碳性肺血管收缩（HHPV）的影响及与MAPK信号通路的关系。方法：采用大鼠HHPV模型,将所有二级肺动脉环随机分为：常氧组（N组）、低氧高二氧化碳组（H组）、DMSO组（HD组）、尼氟灭酸组（NFA组）、尼氟灭酸＋SB203580组（NFA＋SB组）、尼氟灭酸＋U0126组（NFA＋U组）,按照低氧高二氧化碳反应性测定的方法测定各组肺动脉环的张力变化。结果：NFA＋SB组、NFA＋U组二级肺动脉环的收缩峰值较HD组均明显下降（P〈0．05和尸〈0．01）,但I期快速收缩和I期快速舒张均无明显差异（均P〉0．05）;NFA＋SB组的收缩峰值较NFA组明显下降（P〈0．05）,但NFA＋U组的收缩峰值较NFA组无明显变化（P〉0．05）。结论：氯离子通道阻滞剂可通过抑制MAPK信号通路,减轻二级肺动脉环Ⅱ期持续性收缩,并逆转为舒张状态,从而发挥拮抗HHPV的作用。     

急性低压低氧对小鼠学习记忆能力及海马组织一氧化氮和内皮素-1水平的影响

目的 探讨模拟高原急性低压低氧环境对小鼠学习记忆行为及脑组织含水量、海马组织一氧化氮（Nitric oxide,NO）和内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）的影响.方法 将小鼠随机分为常压常氧组和低压低氧组（模拟海拔6000 m 8 h）,用Morrs水迷宫测定小鼠的空间学习记忆能力;用干湿质量法测定脑组织含水量的变化;用酶联免疫吸附法观察其海马组织NO和ET-1的变化.结果 与常压常氧组比较,低压低氧组小鼠寻找平台的潜伏期延长[常压常氧组：（26.39±8.44）s,低压低氧组：（44.60±7.80）s,P＜0.01],目标象限停留时间减少[常压常氧组：（22.98±6.14）s,低压低氧组：（19.78±2.74）s,P＜0.05],脑组织含水量增加（P＜0.05）,海马组织NO[常压常氧组：（2.37± 1.07） μmol/gProt,低压低氧组：（4.48±1.45）μmol/gProt,P＜0.01]和ET-1水平增高[常压常氧组：（38.87±6.17） ng/L,低压低氧组：（52.09±6.75） ng/L,P＜0.01].结论 急性低压低氧环境小鼠学习记忆能力下降,这可能与急性低压低氧所致的脑水肿、海马组织NO和ET-1水平增加有关.     

罗红霉熬caveolin-1-p—ERK1／2对离体哮喘大鼠气道平滑肌细胞cyclinD1表达的影响

目的探讨罗红霉素（RXM）经caveolin-1-P-ERKl／2对离体哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）cyclinDl表达的影响。方法将30只SPF级雄性SD大鼠随机均分为对照组和哮喘组,以卵自蛋白致敏和激发复制哮喘气道重塑模型;采用Im—age—ProPlusVersion60图像分析软件测定支气管壁和支气管平滑肌层厚度;透射电镜观察两组大鼠ASMCs微囊表达情况;CCK-8检测不同浓度RXM[A组（只含0．1％DMSO）、R10组（含RXMl0．g／ml＋0．1％DMSO）、R25组（含RXM25ug／ml＋01％DM—S0）、R50组（含RXM50ug／ml＋0．1％DMSO）、R100组（含RXM100tJg／ml＋0.1％DMSO）1干预哮喘ASMCs后细胞的增殖情况,Westernblot测定caveolin-1、P—ERK、cyclinDl的蛋白表达。结果哮喘组支气管壁和支气管平滑肌层明显增厚,而微囊表达匮乏。哮喘组大鼠支气管壁与平滑肌层厚度均高于对照组（均P〈0．01）。各RXM干预组ASMCsA值均低于A组,其中R100组明显低于A组（P〈0．05）。R100组caveolin-1表达明显高于A组及R10组,cyclinDl表达明显低于A组及Rt0组,差异均有统计学意义（P〈0,05或O．01）;R25、R50、R100组P—ERK表达均明显低于A组,差异均有统计学意义（P〈0．05或001）。哮喘ASMCs增殖活性与caveolin-1蛋白表达呈负相关（P〈0．05）,与P—ERK及cyclinDl蛋白表达呈正相关（P〈005或0．01）;caveolin-1与P—ERK蛋白表达呈负相关（P〈0．01）,与cyclinDl蛋白表达呈正相关（P〈001）;P—ERK与cyclinD1蛋白表达呈正相关（P〈0．01）。结论RXM可能通过上调caveolin-1表达、抑制ERK1／2活化,进而影响cyclinD1的表达,从而抑制哮喘大鼠ASMCs增殖。