贵州省县级和省级疟疾诊断实验室检测结果比较分析

贵州省省级疟疾诊断实验室通过PCR法和镜检法对各县级疟疾诊断实验室上报的疟疾网报病例进行复核,以PCR和镜检一致的结果作为判定依据,对县级疟疾诊断实验室镜检结果进行评价。共对89份血样进行复核,PCR检出24份阳性,15份为恶性疟原虫,7份为间日疟原虫,2份为卵形疟原虫,均为输入性病例;省级镜检和PCR结果一致的有21份。县级与省级检测结果的总符合率为79.8%(67/84),县级漏检率为9.5%(2/21),误检率为23.8%(15/63),两级实验室检测的Kappa值为0.6,属于中、高度一致。     

2012-2014年云南省疟疾实验室诊断质量分析

目的分析云南省的省、县两级实验室疟疾镜检诊断质量及影响因素。方法 2012年8月-2014年10月,云南省各疫情报送单位采集镜检确诊为疟疾的患者血样,制作血涂片和滤纸血送至省级疟疾参比实验室进行镜检和基因检测,并统计分析省、县两级实验室疟疾诊断的符合性。结果 2012年8月-2014年10月云南省的72个县镜检确诊疟疾病例1 400例,其中恶性疟、间日疟和未分型疟疾分别占18.4%(252/1 400)、79.3%(1 105/1 400)和3.1%(43/1 400),未分型疟疾比例最高为2012年的3.5%(9/257)。2012年云南各县与省级疟疾参比实验室疟原虫镜检结果的虫种符合率为70.1%(845/1 216),为2012-2014年期间的最低水平,血片疟原虫阳性符合率为77.6%(943/1 216)。各县的疟原虫镜检结果与省级实验室基因检测的虫种符合率、阳性符合率也是2012年最低,分别为81.3%(150/185)和85.0%(157/185)。省级实验室镜检与基因检测结果的不符合率为8.7%(97/1 120),不符合类型中以镜检阴性而基因检测为恶性疟原虫、间日疟原虫或恶性疟/间日疟原虫混合感染为主,占57.7%(56/97)。各县采集疟疾病例血样的覆盖率最低为2012月11月的46.9%(82/175)。2012-2014年全省血涂片制作质量得分分别为69.8、70.4和78.8(P0.05)。结论 2013年后除个别县外,云南省的县级疟疾实验室诊断各环节的工作质量均显著提高。     

2011-2017年江苏省疟疾镜检工作质量分析

目的 了解消除疟疾阶段江苏省发热病人疟原虫血涂片制作质量和实验室人员疟原虫镜检能力,为各级疟疾诊断实验室建设和消除疟疾效果评价提供科学依据。方法 对2011-2017年江苏省全部网报疟疾病例血涂片和随机抽取的县级疟疾中心镜检站已复核阴性血片,以及辖区内门诊镜检站已检阴性血片进行镜检复核,从血片制作、染色、清洁度、镜检结果及虫种符合情况进行综合分析。结果 2011-2017年共抽检复核已检血片19 109张,血片制作、染色、清洁度合格率分别为87.5%、89.3%、87.6%,不同年份血片质量差异有统计学意义（P均< 0.05）,并有逐年增高的趋势。不同设区市血片质量差异有统计学意义（P < 0.05）。复核2012-2017年网报疟疾病例血片1 860张,总符合率为87.4%,阳性符合率为98.9%。恶性疟、间日疟、三日疟、卵形疟、混合感染虫种符合率分别为95.4%、33.3%、56.0%、76.5%、9.1%,差异有统计学意义（P < 0.05）。2012-2017年不同年份网报疟疾病例血片复核总符合率分别为85.0%、90.1%、86.0%、85.3%、90.0%、87.6%,差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 江苏省基层门诊镜检站的血片质量达到省疟疾诊断参比实验室制定的判定标准,血片诊断符合率较高,但虫种鉴别能力有待进一步提高。     

山东省泰安市2015—2019年输入性疟疾病例实验室诊断与复核结果分析

省、市、县三级实验室分别采用镜检法、胶体金法及巢式PCR法对泰安市2015-2019年输入性疟疾进行诊断与复核。共诊断与复核输入性疟疾病例122例,其中镜检法和胶体金法的符合率分别为94.3%(115/122)和95.9%(117/122),镜检阴性率为5.7%(7/122),均为恶性疟;胶体金法阴性率为4.1%(5/122),3例非恶性疟和2例恶性疟阴性,3种检验方法符合率差异有统计学意义(P <0.05)。其中恶性疟和间日疟诊断符合率最高,均达100%,对卵形疟诊断符合率最低,仅为12/18,对4种疟原虫实验室诊断符合率差异有统计学意义(P <0.01)。医疗机构中初诊合格率为94.3%(115/122),市、县级疾病预防控制机构复核合格率分别为97.5%(119/122)和95.1%(116/122),差异无统计学意义(P> 0.05)。今后应继续加强市、县级疟疾实验室镜检人员技能培训,积极开展疟疾核酸检测,以进一步提升医疗及疾病预防控制机构的疟疾诊断水平。     

巢式PCR技术在输入性疟疾监测中的应用

目的评价巢式PCR技术在高疟区回国人员疟疾监测中的应用价值。方法收集2007-2009年自非洲、东南亚等疟疾流行区回国人员中疟疾现症患者及其他无症状高危人群的滤纸血,采用巢式PCR技术检测疟原虫ssRNA基因,并与血片镜检结果进行比对。结果巢式PCR检测53例血检确诊的疟疾现症患者均为阳性,两法的阳性符合率为100%,其中PCR检出恶性疟、间日疟混合感染6例,高于镜检检出的3例。检测疟疾流行区返回的高危人群157人,镜检阳性3例,阳性率1.91%;巢式PCR阳性5例,阳性率为3.18%;其中,镜检阳性、巢式PCR阴性的1例,镜检阴性、巢式PCR阳性的3例,两种方法的阳性符合率为66.7%,阴性符合率为98.1%,两法检测结果一致的血样占检测血样的97.5%。结论巢式PCR技术对输入性疟疾的监测具有实用价值。     

2017-2019年上海市各区疟疾实验室检测能力分析

目的上海市疾病预防控制中心(简称上海市疾控)对各区疾控送检的疟疾病例血样进行复核,并对复核结果进行分析,为进一步提升各区疾控疟疾诊断水平提供依据。方法 2017—2019年上海市疾控通过镜检和疟原虫核酸检测(巢式PCR)分别对各区疾控疟疾实验室送检的血涂片和血样进行复核。以市疾控结果为标准,分析各区疾控疟疾实验室镜检和疟原虫核酸检测的符合率,以及核酸检测敏感性和特异性。并于2019年对各区疾控进行了一次疟原虫核酸检测盲样考核。结果 2017—2019年区疾控共送检疟疾复核病例样品232份,其中完整的样品225份(同时具备血涂片和血样),完整率99.1%(225/227)。225份完整的样品中,金山区占44.0%(99/225),静安区占15.6%(35/225),浦东新区占7.6%(17/225),虹口区占6.7%(15/225),青浦区和崇明区较少,分别为0份和1份,其余各区送样量均占比6.0%以下。225份样品中,区疾控与市疾控的镜检总符合率、阳性符合率和阴性符合率分别为96.0%(216/225)、 98.8%(170/172)和86.8%(46/53),疟原虫核酸检测的符合率为88.8%(103/116)。区疾控疟疾核酸检测采用实时荧光PCR (qPCR)法,敏感性为76.6%(85/111),与市疾控巢式PCR法87.4%(97/111)的敏感性差异有统计学意义(P 0.05);市区两级疾控的两种核酸检测方法的特异性均为100%。上述2种检测方法对225份样品进行综合评价,区疾控的符合率为96.9%(218/225);误判率3.1%(7/225),其中定性错误5份,定种错误2份。2019年,市疾控对区疾控进行的疟疾核酸盲样考核的总正确率为97.5%(78/80),其中恶性疟原虫样品的正确率为94.1%(32/34),与间日疟、卵形疟、三日疟原虫和阴性样品的正确率差异均无统计学意义(P 0.05)。结论 2017—2019年上海市各区疾控疟疾实验室的镜检能力较强,但疟原虫核酸检测的敏感性尚待提高。     

2017-2019年湖北省疟疾诊断参比实验室病例复核结果分析

目的　分析湖北省疟疾诊断参比实验室对网络报告疟疾病例的复核结果,为进一步提高全省疟疾防控水平提供科学依据。 方法　由湖北省疟疾诊断参比实验室对全省2017—2019年网络报告疟疾病例样本采用镜检和巢式PCR法进行复核,并分析病例和虫种等符合情况。 结果　2017—2019年,湖北省共有网络报告疟疾病例410例;湖北省疟疾诊断参比实验室共复核407例样本,确诊疟疾病例374例,总体疟疾诊断阳性符合率为91.89%（374/407）、虫种符合率为89.04%（333/374）;不同市（州）报告疟疾病例复核阳性符合率为50.00%～100.00%、虫种符合率为66.67%～100.00%,差异均有统计学意义（χ2 = 40.46、42.30,P均 < 0.01）;恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫复核虫种符合率分别为95.80%、100.00%、58.33%和51.92%,差异有统计学意义（χ2 = 76.66,P < 0.01）;镜检法与巢式PCR法检测结果一致率为89.83%（362/403）。结论　湖北省各级医疗卫生机构疟疾诊断质量总体较高,但部分地区诊断能力仍有待提高。     

2016—2020年湖北省各级疟疾实验室检测能力评价

目的湖北省省级疟疾诊断参比实验室对各级疟疾实验室上送的输入性疟疾病例留存血样进行复核,并对诊断和复核结果进行分析,评估全省各级疟疾实验室的检测能力。方法收集中国疾病预防控制信息系统中2016—2020年湖北省报告的输入性疟疾病例诊断单位、诊断结果和留存样品,对诊断单位进行描述性分析,并由省级疟疾诊断参比实验室对疟疾病例样品采用血涂片镜检和巢式PCR进行复核,比较各级疟疾实验室诊断结果与省级疟疾诊断参比实验室复核结果的阳性和虫种符合情况,分析不同疟原虫虫种诊断符合情况,应用SPSS 17.0软件进行统计学分析。结果2016—2020年湖北省共报告疟疾病例608例,疟疾病例诊断单位医疗机构占89.5%(544/608),疾病预防控制中心占10.5%(64/608),其中地市级医疗机构诊断病例占54.6%(332/608)。2016—2020年医疗机构占疟疾病例诊断单位的比例分别为84.1%(132/157)、 84.4%(92/109)、 90.4%(122/135)、95.2%(157/165)和97.6%(41/42)(χ2=16.815, P 0.05)。省级疟疾诊断参比实验室共复核604例留存样品,其中92.4%(558/604)的病例被各级疟疾实验室确诊为疟疾,88.5%(494/558)感染虫种判定正确。不同年份疟疾病例诊断疟原虫阳性符合率为82.9%(34/41)～96.2%(151/157)、虫种符合率为79.4%(77/97)～94.4%(118/125),差异均有统计学意义(χ2=9.273、 13.787, P 0.05)。医疗机构的诊断疟原虫阳性符合率(93.2%, 503/540)和虫种符合率(89.5%, 450/503)均高于疾病预防控制中心的(85.9%, 55/64)和(80.0%,44/55),省、市、县、乡级医疗机构诊断疟原虫阳性符合率分别为100%(74/74)、 93.3%(308/330)、 90.2%(110/122)、和11/14,虫种符合率分别为100%(74/74)、 88.3%(272/308)、 86.4%(95/110)、 9/11,呈现级别越高诊断正确率越高的趋势(χ2=13.092、 15.598, P 0.05)。恶性疟原虫、间日疟原虫、三日疟原虫、卵形疟原虫、混合感染诊断虫种符合率分别为96.9%(373/385)、 96.0%(72/75)、 10/16、 48.8%(39/80)和0,差异有统计学意义(χ2=132.880, P 0.05)。结论湖北省疟疾病例的诊断单位主要是医疗机构,各级疟疾实验室检测能力总体较高,对非恶性疟原虫的虫种鉴别能力有待提高。     

2012-2015年上海市实验室疟疾检测能力比较分析

目的 比较疟原虫镜检、抗原快速检测（RDT）和核酸检测（PCR）3种方法在上海市级和区县级疾病预防控制中心（疾控中心）的应用情况,对该市疟疾实验室检测能力进行分析。方法 由上海市疾控中心收集2012-2015年上海市疟疾病例和疑似疟疾病例的血涂片、全血血样、病例复核确认记录单和上海市疟疾病例疫情资料,并对检测结果进行比较分析。结果 2012-2015年,上海市各区县共送检数据完整的样本212份,各区县中以金山区送样量最多（41.98%）,报告医院以三级医院送样量最多（82.07%）;1-10月间送检样本量逐渐增多。市疾控中心对212份血样均采用显微镜检、RDT和PCR 3种方法同时进行检测,综合判定疟疾确诊样本共计167份（78.77%）,阴性样本45份（21.23%）。区县级实验室使用显微镜检和国产RDT对样本进行检测,判定疟疾阳性样本153份（72.17%）,其中阳性未分型41份（19.34%）,阴性样本53份（25.00%）,未检测6份（2.83%）。报告医院与区县疾控中心镜检符合率为78.16%,区县疾控中心与市疾控中心镜检符合率为93.20%;区县级实验室RDT使用率为73.58%,国产RDT检测和市疾控中心进口RDT检测的符合率为93.59%。以市疾控中心检测结果作为标准,区县级实验室误判37份。99.37％的疟疾确诊病例为境外输入,包括非洲（85.44％）、亚洲（13.92％）和美洲（0.63％）。结论 上海市消除疟疾后的监测工作应结合多种检测方法,整合资源开展。     

四川省网报疟疾病例血片镜检复核与分析

目的了解和评估四川省区县疾控疟原虫镜检人员的检测技术、血片制作和染色水平,提高镜检质量,为顺利实施《四川省消除疟疾行动计划(2010-2012年)》目标提供科学依据。方法以全省所有区县为单位收集、登记2010年至2013年5月30日的阳性血片,由省疾控具有相当经验的镜检技术人员进行逐片复核评分。结果根据网络直报系统及防治工作年报表,预估计应收总疟原虫血片数(网络直报血检阳性数)623张,实际上交阳性血片数224张,实际收片率为35.96%;复核224张血片,复检符合率62.95%;其中疑似血片(初检为阴性血片)和初检为阳性血片复检符合率分别为78.79%、60.21%;血片制作和染色优中等血片分别占75.89%、78.59%。结论四川省基层疟疾防治疟原虫镜检人员血片保存率、镜检符合率不高,存在漏检、虫种错检、假阳性及制作染色质量不佳等问题。