α-硫辛酸对氧化损伤大鼠肝细胞及代谢酶影响

目的 探讨α-硫辛酸(α-liplic acid,α-LA)对过氧化氢(H_2O_2)氧化损伤的大鼠肝细胞及糖代谢酶的影响.方法 分别将50,100,200 μmol/Lα-LA作用于大鼠肝细胞24 h后,用H_2O_20.2 moVL损伤1 h,分别检测细胞活力、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)、细胞中葡萄糖激酶(GK)、糖原合成酶激酶-3(GSK-3)的含量.结果 α-LA各剂量组GsH-Px活力与SOD活性分别为141.552～208.171和10.852～13.151U/(mg·prot),均高于H_2O_2损伤组(P<0.05).α-LA各剂量组MDA含量为12.064～14.142 nmol/(mg·prot),明显低于H_2O_2损伤组(P<0.05).α-LA各剂量组葡萄糖激酶(GK)含量为0.928～1.020 mg/L,明显高于H_2O_2损伤组(P<0.05),不同剂量α-LA组GSK-3含量与H_2O_2损伤组比较差异无统计学意义(P<0.05).结论 α-LA对H_2O_2所致大鼠肝细胞氧化损伤具有一定的保护作用,且提高葡萄糖激酶含量.     

矽尘接触者和矽肺患者血清中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力的观察

目的 观察矽尘接触者和矽肺患者血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,探讨SOD、GSH-Px在矽肺发生发展中的作用.方法 选择100名不接触粉尘的对照人群(对照组),200名接触矽尘1年以上的接尘工人(接尘组),32名矽尘作业观察对象及130例矽肺患者(矽肺组),采用酶联免疫吸附法和化学比色法检测血清中SOD、GSH-Px活力.结果 与对照组[SOD:(75.239±24.020) U/ml,GSH-Px:(223.360±46.838) U/ml]比较,接尘组和矽肺组SOD活力[接尘组:(70.515±20.034) U/ml,矽肺组:(68.209±21.526) U/ml]均明显降低,GSH-Px活力[接尘组:(231.164±36.484) U/ml,矽肺组:(270.469±39.228) U/ml]均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);与接尘组比较,矽肺组血清中GSH-Px活力明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).随矽肺期别的升高,血清中GSH-Px活力有升高的趋势.与观察对象组和矽肺Ⅰ期比较,矽肺Ⅲ期患者,血清中GSH-Px活力明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 接尘人群和矽肺患者均存在氧化和抗氧化系统的失衡,矽肺组尤为明显,可能与矽肺的严重程度也有关.     

蛋白激酶Cδ对燃煤污染型砷中毒肝损伤的调控机制

目的 探讨蛋白激酶Cδ(protein kinase C8,PKCδ) mRNA转录和蛋白表达在燃煤型砷中毒肝损伤中的作用.方法 人群研究:选取符合条件的贵州省燃煤污染型砷中毒病区133例砷暴露者纳入砷暴露组,包括病区非病例组(25例)、无明显肝病组(38例)、轻度(43例)和中重度(27例)肝病组;选取非砷污染村34名健康居民纳入对照组.采集上述研究对象的尿液和外周血,测定尿砷含量及外周血PKCδ mRNA表达水平.动物实验:采用随机数字表法将30只Wistar大鼠分为对照组、饮水型砷中毒组和燃煤污染型砷中毒组(即低、中、高砷粮食污染组),每组6只.对照组常规喂养,饮水型砷中毒组给予10 mg/kg As2O3水溶液,燃煤污染型砷中毒组喂饲用病区高砷煤烘烤的玉米粉所配制的饲料(砷含量分别为25、50和100 mg/kg),均喂养3个月.测定其尿砷含量、外周血和肝组织PKCδ mRNA表达水平及肝组织磷酸化蛋白激酶C8 (phosphorylated protein kinase C8,pPKCδ)表达水平.结果 非病例组、无明显肝病组、轻度和中重度肝病组尿砷含量中位数(四分位数)分别为25.58(18.62 ～ 40.73)、56.66(38.93 ～ 76.77)、64.90(39.55 ～98.37)和75.47(41.30～109.70) μg/g肌酐,除病区非病例组外,其余组均高于对照组[23.34(17.84～37.45) μg/g肌酐](P值均＜0.05).大鼠饮水型砷中毒组和低、中、高砷粮食污染组尿砷含量分别为2223.61(472.98～3976.73)、701.16(194.01～1300.27)、1060.94(246.33～2585.47)和3101.11 (1919.97～5407.07) μg/g肌酐,均高于对照组[94.32(22.65 ～ 195.25) μg/g肌酐](P值均＜0.05);肝组织中pPKCδ蛋白表达水平分别为324.83±25.06、278.50±30.57、308.83±34.67、326.33±35.09,均高于对照组(240.17±28.07)(P值均＜0.05);肝组织细胞膜中pPKCδ蛋白表达水平分别为0.49±0.06、0.33±0.05、0.37±0.06、0.50±0.08,均高于对照组(0.28±0.04)(P值均＜0.05);细胞浆中pPKCδ蛋白表达水平分别为0.38±0.06、0.31±0.05、0.35±0.05、0.36±0.05,均高于对照组(0.24±0.05)(P值均＜0.05).结论 砷可能通过调控pPKCδ蛋白表达,诱导其膜转位活化,导致燃煤型砷中毒肝损伤的发生发展.     

维生素C对大鼠肌肉拉伤所致过氧化损伤的保护作用

目的建立骨骼肌拉伤动物模型,观察维生素C对肌肉拉伤导致的过氧化损伤的保护作用.方法将大鼠随机分为维生素C组、生理盐水(NS)组及对照组.利用大鼠建立骨骼肌拉伤动物模型,将维生素C组及NS组造成大鼠右侧腓肠肌拉伤.维生素C组经灌胃给予维生素C(2 g·kg-1·d-1),NS组给予同体积生理盐水,观察损伤后3、7、14 d大鼠血浆中肌肉损伤标志物肌酸激酶(CK)活力和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及总抗氧化能力(T-AOC)的变化.结果维生素C组血浆CK活力在伤后3、7、14 d[分别为(325.36±28.29)、(147.06±27.40)、(80.47±13.50)U/L]均低于NS组[分别为(403.67±25.17)、(193.03±26.31)、(92.98±8.93)U/L],差异均有显著性(P＜0.05).维生素C组血浆MDA含量在伤后3、7d[分别为(8.03±2.22)、(5.33±1.54)μmol/L]低于NS组[分别为(13.81±3.17)、(7.55±2.20)μmol/L].维生素C组SOD活力较NS组有升高趋势,且在第7天明显高于NS组[维生素C组为(104.33±11.56)NU/ml,NS组为(86.85±14.25)NU/ml],差异有显著性(P＜0.05);维生素C组GSH-Px活力、T-AOC在伤后3、7、14 d均高于NS组,差异亦有显著性(P＜0.05).结论本研究所用剂量的维生素C减低了腓肠肌拉伤所引起的氧化性损伤程度,并使两种抗氧化酶(SOD、GSH-Px)活力明显升高,且血浆总抗氧化能力明显增强.     

α-硫辛酸对高糖诱导GK大鼠肝氧化损伤的影响

[目的]探讨α-硫辛酸（α-LA）对高糖诱导GK大鼠肝氧化损伤的影响。[方法]选用GK大鼠36只,分为6组,阴性对照组普通饮水、阳性对照组及4个干预组分别给予等量30％蔗糖饮水,干预组分别给予不同剂量的α-LA（25、50、75、100mg／kg）灌胃。干预9周后观察不同剂量的α-LA对高糖诱导下GK大鼠肝组织脂质过氧化水平、抗氧化酶活力以及肝线粒体活性氧（ROS）水平的影响。[结果]阳性对照组大鼠丙二醛（MDA）和线粒体ROS水平明显高于阴性对照组（P〈0．05）,而超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平明显低于阴性对照组（P〈0．05）,提示高糖饮水明显增加了GK大鼠肝脏的氧化应激水平。在高糖诱导情况下,各α-LA干预组与对照组比较,给予25mg／kg和50mg／kg剂量的α-LA干预可以有效降低肝组织MDA浓度,提高SOD、GSH-P活性以及降低肝线粒体ROS水平（P〈0．05）,其抗氧化损伤的效果好于75mg／kg和100mg／kg两个高剂量干预组。[结论]25mg／kg和50mg／kg剂量的α—LA对高糖诱导的GK大鼠肝组织的氧化损伤具有保护作用,但这种保护作用并未呈现明显的剂量作用关系,高剂量的α-LA（75—100mg／kg）保护作用不如低剂量组。     

α-硫辛酸对甲基汞致大鼠脑谷氨酸代谢转运障碍的拮抗作用

[目的]探讨出硫辛酸（alpha—lipoicacid,α-LA）对甲基汞所致大鼠脑谷氨酸代谢转运障碍的拮抗作用。[方法]清洁级Wistar大鼠24只,按体重随机分为4组,分别为对照组,低、高甲基汞染毒组和α-LA干预组,每组6只,雌雄各半。对照组和低、高甲基汞染毒组先皮下注射0．9％氯化钠溶液,α-LA干预组皮下注射35gmol／kgct-LA;2h后,对照组腹腔注射0．9％氯化钠溶液,低、高甲基汞染毒组和α-LA干预组分别腹腔注射氯化甲基汞4、12和12lamol／kg。α-LA预处理隔日1次;染毒组每日1次,每周5次;连续处理4周。最后1次染毒24h后,分离大鼠大脑皮质,制备5％、10％的组织匀浆,测定大脑皮质汞（Hg）、谷氨酸（Glu）、谷氨酰胺（Gin）含量,及谷氨酰胺酶（PAG）、谷氨酰胺合成酶（GS）、Na＋-K＋ATPase、Ca2＋．ATPase活力。[结果]甲基汞高剂量染毒组大鼠脑汞为（17．72±1．36）μg,／g组织、Glu含量为（71．57±10．87）μmol／g白、PAG活力为（31．26±4．38）μmol／（min·g蛋白）,均高于对照组（P〈0．01）;CAn含量及Gs活力分别为（0．155±0．04）μmol／g蛋白及（23．89±3．60）u儋蛋白,Na＋-K＋-ATPase及Ca2＋-ATPase活力分别为（4．03±0．57）μmol／（mg蛋白·h）及（2．21±0．62）μmol／（mgg蛋白·h）,均低于对照组（P〈0．01）;与甲基汞高剂量染毒组比较,α-LA干预组大鼠脑汞含量未见明显变化;Glu含量（63．02±3．33）μmol／g蛋白及PAG活力（26．03±3．88）μmol/（min·g蛋白）均降低（P〈0．01或P〈0．05）,Gin含量（0．20±0．05）μmol／g蛋白、GS活力（34．05士4．23）U／g蛋白、Na＋-K＋-ATPase活力为（5．52±1．16）μmol／（h·mg蛋白）及Ca2＋-ATPase活力为（3．27±0．60）μmol／（h·mg蛋白）,均升高（P〈0．01或P〈0．05）。[结论]a-LA对甲基汞所致大鼠脑谷氨酸代谢紊乱有一定的拮抗作用。     

亚慢性染砷对小鼠脑组织线粒体琥珀酸脱氢酶活性及蛋白表达的影响

目的观察砷对小鼠脑组织线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性及其α亚单位(Sdha)蛋白表达的影响,以及牛磺酸和维生素C对上述影响的干预作用,为探讨砷的神经毒作用机制提供分子毒理学依据。方法SPF级小鼠50只,按体重将小鼠随机分为1 ppm三氧化二砷(As2O3)染毒组、4 ppm As2O3染毒组、牛磺酸抗氧化干预组(4ppm As2O3+150 mg/kg牛磺酸)、维生素C抗氧化干预组(4 ppm As2O3+45 mg/kg维生素C)和对照组。通过自然饮用含不同浓度As2O3蒸馏水的方式使小鼠染毒;干预剂以灌胃方式投给,每星期2次,连续染毒60 d。于染毒第0天、15天、30天、60天时取脑,提取脑组织线粒体,检测SDH的活性和Sdha蛋白表达。结果在染砷第60天,染砷组小鼠脑组织线粒体SDH活性和Sdha蛋白表达量均下降,尤其4 ppm染砷组小鼠脑组织线粒体的SDH活性和Sdha蛋白表达量都明显低于对照组(P<0.05);而牛磺酸和维生素C干预组,小鼠脑组织线粒体SDH活性和Sdha蛋白表达量均显著高于4 ppm染砷组。其中砷暴露后第30天和第60天的小鼠脑组织线粒体SDH活性... 更多还原     

维生素C对青春期邻苯二甲酸二丁酯暴露致大鼠卵巢氧化应激的干预作用

目的探讨维生素C(vitamin C,Vit C)对青春期邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)暴露致大鼠卵巢氧化应激的干预作用。方法将160只健康初断乳SPF级Wistar雌性大鼠随机分为5组,分别为对照(玉米油)组和低(100mg/kg)、高(500 mg/kg)剂量DBP暴露组及低(100 mg/kg)、高(500 mg/kg)剂量DBP+Vit C(125 g/L)干预组。采用灌胃方式暴露DBP,暴露容量为10 ml/kg,每天1次;采用自由饮水方式暴露Vit C,连续暴露30 d。分别于暴露第5、10、20、30天,测定大鼠卵巢组织中MDA、GSH含量和SOD、CAT、GSH-Px活力。结果与对照组相比,DBP暴露组大鼠卵巢组织中MDA含量均升高,而GSH含量和SOD、CAT、GSH-Px活力均下降;与相同剂量DBP暴露组相比,Vit C干预组大鼠卵巢组织中MDA均下降,而GSH含量和SOD、CAT、GSH-Px活力均升高。且随着DBP暴露剂量的升高,DBP暴露组和Vit C干预组大鼠卵巢组织中的GSH含量和SOD、CAT、GSH-Px活力均呈下降趋势,而MDA含量呈上升趋势。结论 DBP暴露可致青春期雌性大鼠卵巢组织产生脂质过氧化反应,诱导氧化应激,导致卵巢抗氧化能力下降;而抗氧化剂Vit C对于DBP所致生殖系统的氧化损伤具有一定的拮抗作用。     

α-硫辛酸拮抗氯化镉致HepG2细胞氧化损伤的保护作用

目的观察α-硫辛酸(α-LA)拮抗氯化镉(CdCl_2)致HepG_2细胞氧化损伤的保护作用。方法本实验以HepG_2细胞为研究对象,CdCl_2诱导细胞产生氧化损伤模型。实验分组如下:正常对照组、CdCl_2单独作用组、α-LA单独作用组和α-LA+CdCl_2联合作用组,用含不同浓度梯度α-LA(1μM、5μM、50μM)的培养液体外培养HepG_2细胞8 h,再加入终浓度为25μM CdCl_2,采用MTT法检测细胞存活率,彗星实验检测DNA损伤,并同时检测细胞内活性氧(ROS)水平和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量。结果与正常对照组相比,细胞经CdCl_2诱导处理后,细胞存活率(0.814±0.756)降低,胞内ROS水平(987.18±14.529)增高,MDA含量(1.256 3±0.964)增加,DNA(4.398±1.068)损伤严重。不同浓度(1μM、5μM、50μM)α-LA预处理后能减轻CdCl_2所致的细胞损伤[(0.843±0.658),(0.906±0.469),(0.954±1.163)],减少胞内ROS[(973.40±26.581),(935.49±14.358),(920.60±6.023)]累积,减轻脂质过氧化反应[(0.973 4±0.154),(0.672 9±0.125),(0.534 3±0.156)]及DNA损伤[(4.263±0.093),(3.764±0.087),(2.659±0.116)]的程度,且与α-LA浓度之间呈剂量-效应关系。结论α-LA可以拮抗CdCl_2致HepG_2细胞氧化应激,降低CdCl_2诱导HepG_2细胞产生的氧化损伤。     

冶炼作业人群铅、砷负荷对脂质过氧化和抗氧化能力的影响

目的探讨冶炼工人体内铅(Pb)、砷(As)负荷对脂质过氧化产物和抗氧化酶的影响。方法选取212名冶炼作业人员为接触组,以106名无Pb、As接触史的健康人为对照组,分别测定两组人员血清中Pb、As的含量为体内负荷指标,测定两组人员血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)水平,接触组按工龄分组将上述各项指标进行相关分析。结果接触组血清Pb、As平均水平分别为(0.18±0.03)和(0.39±0.01)μmol/L,血清SOD、GSH-Px和GST活力分别为(161.22±29.26)、(116.42±20.16)和(38.36±10.06)U,MDA含量为(7.32±2.35)μmol/L;对照组血清Pb、As平均水平分别为(0.07±0.02)和(0.11±0.07)μmol/L,血清中SOD、GSH-Px和GST活力分别为(181.61±28.34)、(153.14±20.36)和(46.20±10.26)U,MDA含量为(4.35±2.26)μmol/L。接触组与对照组上述对应各项指标进行统计学分析,差异呈高度显著性(P<0.01)。对接触组以工龄分组比较,显示≥10年工龄组较短工龄组(≤5年)血清Pb、As平均水平与MDA均较高(P<0.01);SOD、GSH-Px和GST活力较低(P<0.01)。结论Pb、As接触有增加体内脂质过氧化产物含量,降低机体抗氧化能力的作用。     

氟、砷染毒对大鼠空间学习记忆影响及机制

目的 探讨氟、砷及氟砷联合染毒对大鼠空间学习记忆及大脑皮质氧化损伤的影响.方法 初断乳SPF级雄性SD大鼠随机分4组,对照组(自由饮用蒸馏水),氟、砷处理组和氟砷联合染毒组(分别自由饮用120 mg/L氟化钠、70 mg/L亚砷酸钠、120 mg/L氟化钠+70 mg/L亚砷酸钠水溶液),染毒3个月;采用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,检测大鼠血清和大脑皮质总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果 氟、砷处理组和联合染毒组第4d逃避潜伏期分别为[(10.34±1.18)、(11.76±1.23)、(13.78 ±3.49)s],均高于对照组的(5.85±1.98) s(P ＜0.01);与对照组比较,染毒组大鼠首次到达平台时间明显延长,目标象限停留时间和穿越次数明显降低(P＜0.05);氟、砷处理组和联合染毒组大脑皮质T-AOC水平与GSH-Px活力分别为[(1.02 ±0.25)、(1.18 ±0.54)、(0.99±0.28) U/mgprot]和[(5.34±0.70)、(4.34±1.49)、(5.34±0.88) U/gprot],均低于对照组的(1.75±0.66)U/mgprot和(6.82±0.85) U/gprot;与对照组、氟处理组和联合染毒组比较,砷处理组大鼠大脑皮质SOD酶活力较低(P＜0.05);氟处理组和联合染毒组大脑皮质MDA含量均高于对照组(P＜0.05).结论 氟、砷及其联合作用可损害大鼠的空间学习记忆能力,其机制可能与大脑皮质氧化损伤有关.     

刺梨制剂对燃煤型砷中毒患者免疫功能的调节作用

目的 探讨刺梨制剂对燃煤型砷中毒患者免疫功能的影响.方法 依据地方性砷中毒诊断标准(WS/T 211-2001)选择贵州省燃煤型砷中毒病区患者62例,采用分层随机化分组法将其分为两组:刺梨汁组和强化超氧化物歧化酶(SOD)刺梨汁组,各31例,分别给予刺梨汁和强化SOD刺梨汁口服干预,剂量为120 ml/d,连续服用1个月;另选择12 km以外非燃用高砷煤的30名健康居民为对照组.采集研究对象的尿液50 ml及外周血2ml,并对其尿砷含量、外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+细胞的变异情况及血清中的IgG、IgM、IgA、补体C3和C4含量进行检测.对以上指标各组间的差异进行比较;分析尿砷含量与各项免疫指标的相关性.结果 刺梨汁、强化SOD刺梨汁组干预前及对照组尿砷含量分别为(76.55±23.02)、(72.60±25.91)、(26.33±11.30)μg/g肌酐,IgG分别为(11.31±1.68)、(11.35±1.94)、(9.23±1.75)g/L,差异均有统计学意义(F值分别为82.01、13.82,P值均＜0.05),二干预组干预后尿砷含量分别为(53.21±16.51)、(51.72±17.70) μg/g肌酐,均低于干预前(t值分别为5.80、3.78,P值均＜0.05);二干预组干预前及对照组的T淋巴细胞CD3+阳性率分别为(44.47±7.14)％、(43.44±6.61)％、(70.78±5.26)％,CD4+阳性率分别为(29.87±5.67)％、(29.42±5.87)％、(46.08±5.87)％,CD4+与CD8+比值分别为(1.25±0.42),(1.22±0.39)、(1.79±0.26),补体C4分别为(0.13±0.08)、(0.13±0.09)、(0.20±0.ll)g/L,差异均有统计学意义(F值分别为178.04、76.71、23.13、5.26,P值均＜0.05),干预后二干预组CD3+的阳性率分别为(59.73±7.38)％、(66.31±7.57)％,CD4+阳性率分别为(34.00±7.97)％、(39.11±5.81)％,CD4+与CD8+比值分别为(1.41±0.37)、(1.58±0.26),均高于干预前(t值分别为12.47、25.18、5.41、10.47、3.22、5.05,P值均＜0.05).尿砷与CD3+、CD4+阳性率、CD4+与CD8+比值、C4含量呈负相关,与IgG呈正相关(r值分别为-0.68、-0.56、-0.51、-0.43、0.36,P值均＜0.01).结论 燃煤型砷中毒患者尿砷水平与免疫功能抑制密切相关,刺梨制剂可有效提升燃煤型砷中毒患者免疫功能.     

营养干预对出海潜艇人员氧化损伤的防护效果

目的 研究营养干预对潜艇人员氧化损伤的保护作用.方法 选取某单位出海30 d潜艇作业的50名人员为调查对象,随机分为干预组和对照组,每组25名,干预组在出海期间,隔日服用维生素B25 mg、维生素C 200 mg、葡多酚胶囊50 mg,每周服用维生素A胶丸2.5万单位.出海前和出海后各抽取空腹静脉血1次,检测血浆总抗氧化能力(T-AOC)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、淋巴细胞增殖活性、红细胞溶血度和γ-干扰素等指标.结果 出海前干预组和对照组各指标的差异均无统计学意义(P>0.05).出海后干预组的T-AOC水平、SOD活力、淋巴细胞增殖活性和γ-干扰素[分别为(24.08±0.10)U/ml、(44.85±0.96)U/ml、0.27±0.04(加H2O2)、0.31±0.05(不加H2O2)、(34.21±3.52)pg/ml]较对照组[分别为(21.06±1.10)U/ml、(42.80±1.46)U/ml、0.23±0.01(加H2O2)、0.28±0.17(不加H2O2)、(31.89±3.52)pg/ml]明显升高,而MDA含量、红细胞溶血度明显降低[干预组分别为(2.15±0.28)nmol/ml、20.96%±0.10%,对照组分别为(2.44±0.33)nmol/ml、23.12%±0.77%],差异均有统计学意义(P<0.05).结论 营养干预对出海潜艇人员的氧化损伤有良好的防护作用.     

2,2',4,4'-四溴联苯醚对原代新生大鼠海马细胞氧化应激、DNA损伤和凋亡的影响

目的 探讨2,2',4,4'-四溴联苯醚(2,2',4,4'-tetrabromodiphenyl ethers,PBDE-47)对原代新生大鼠海马细胞氧化应激、DNA损伤和凋亡的影响.方法 原代培养的新生大鼠海马细胞暴露于10、20、40μg/ml PBDE-47,每组3个平行样,24h后,检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,细胞内丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、活性氧(ROS)水平以及DNA损伤和细胞凋亡情况.结果 与对照组比较,20和40μg/ml组LDH漏出率升高,差异有统计学意义(P＜0.05).各染毒组MDA含量均高于对照组,GSH-Px活力均低于对照组,且20和40μg/ml组与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);10、20、40μg/ml组GSH含量和SOD活力均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),但各染毒组之间差异无统计学意义(P＞0.05);20和40μg/ml组细胞内ROS水平高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).10、20、40μg/ml组尾部DNA百分率和Oliver尾矩均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);20和40μg/ml组细胞凋亡率均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),且呈上升趋势.相关分析表明,海马细胞DNA损伤、凋亡百分率与ROS水平呈正相关(r值分别为0.982,0.998,P＜0.05),细胞凋亡百分率与DNA损伤呈正相关性(r=0.967,P＜0.05).结论 PBDE-47可致原代新生大鼠海马细胞氧化应激和诱导细胞DNA损伤和凋亡,呈现一定的神经毒性.     

海藻萜类化合物联合VE对酒精性肝损伤大鼠影响

目的 研究凹顶藻萜类化合物(Laurencia extract,LET)与维生素E(VE)合用对乙醇诱导肝损伤大鼠的影响及其作用机制.方法 70只雄性Wistar大鼠随机分为7组.除空白组每天给予蒸馏水灌胃外,其余各组均每天乙醇12 mL/(kg·bw)灌胃,各干预组分别给予不同剂量LET加VE、VE、甘利欣灌胃,6周后测定血清肝功、血脂及肝匀浆中抗氧化指标.结果 不同剂量LET合用干预组血清肝功、血脂水平与乙醇模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);LET中、高剂量合用干预组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力分别为(59.523±11.015),(59.541±13.724)U/(mg·prot);丙二醛含量(MDA)分别为(5.018±1.239),(4.799±1.628)nmol/(mg·prot);高剂量合用干预组超氧化物歧化酶活力(SOD)为(147.690±9.989)U/(mg·prot),与乙醇模型组GSH-Px(45.624±10.589)U/(mg·prot)、MDA含量(10.593±1.716)nmol/(mg·prot)、SOD活力(100.153±13.632)12/(mg·prot)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 LET与VE合用能调整酒精性肝损伤大鼠体内脂质代谢,改善肝功能,减少脂质过氧化产物,对酒精造成的机体损伤表现出相应的保护效应.     

硒对砷致人脐静脉血管内皮细胞抗氧化功能及血管细胞黏附分子-1和胞间黏附分子-1表达的影响

目的 观察硒对不同剂量砷致体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)抗氧化功能及胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响.方法 调节处于对数期的HUVEC细胞密度为1.0×105/ml,分别加入0(含10％标准胎牛血清,对照)和砷浓度为0.05、0.1、0.5、1.5、3.0、6.0、12.0 μmol/L的三氧化二砷溶液及在此基础上加入0.1 μmol/L亚硒酸钠溶液培养48 h.采用分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ICAM-1和VCAM-1的表达.结果 随着砷暴露浓度的升高,HUVEC细胞培养液中SOD、GSH-Px活力均呈下降趋势,而MDA含量和ICAM-1、VCAM-1的表达呈升高趋势.与对照组相比,砷浓度为0.1～12.0μmol/L时,HUVEC细胞培养液中SOD 、GSH-Px活力均降低,ICAM-1的表达均升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);砷浓度为0.5～12.0 μmol/L时,HUVEC细胞培养液中MDA的含量和VCAM-1的表达均增加,差异有统计学意义(P＜0.01).砷浓度为0.05、0.5μmol/L时,加硒组HUVEC细胞培养液中SOD活力均高于不加硒组,差异有统计学意义(P＜0.05);砷浓度为0.05、0.1μmol/L时,加硒组HUVEC细胞培养液中GSH-Px活力均高于不加硒组,MDA含量和ICAM-1、VCAM-1的表达均低于不加硒组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 一定浓度的砷可使血管内皮细胞抗氧化功能降低,脂质过氧化反应增强,黏附分子表达增强,而硒可在一定程度上拮抗砷的损伤作用.     

1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮和牛磺酸联合应用对铝染毒大鼠肾功能及抗氧化系统的保护作用

目的探讨1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮(deferipone,DFP)和牛磺酸联合作用对染铝大鼠肾脏功能、抗氧化系统及ATP酶活力的影响。方法将56只SPF级雄性Wistar大鼠按体重随机分为7组,以灌胃方式染毒。其中,阴性对照组给予1.0 ml/d生理盐水,连续8周。前4周,铝染毒组、牛磺酸干预组、低剂量DFP干预组、高剂量DFP干预组、牛磺酸与低剂量DFP联用组、牛磺酸与高剂量DFP联用组均给予281.40 mg/(kg·d)AlCl_3·6H_2O;后4周,各组分别给予1.0 ml/d生理盐水、400 mg/(kg·d)牛磺酸、13.82 mg/(kg·d)DFP、27.44 mg/(kg·d)DFP、400 mg/(kg·d)牛磺酸+13.82 mg/(kg·d)DFP、400 mg/(kg·d)牛磺酸+27.44 mg/(kg·d)DFP。测定大鼠肾脏Na~+K~+-ATP酶、Mg~(2+)-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量及肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量。结果与铝染毒组相比,各干预组大鼠肾脏GSH-Px、Na~+K~+-ATP酶、Mg~(2+)-ATP酶活力均明显升高,肾脏MDA含量和血清BUN含量均明显降低,差异有统计学意义(P0.05);且高剂量DFP干预组及联合用药组大鼠肾脏SOD活力明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。与单独用药组相比,联合用药组Na~+K~+-ATP酶、Mg~(2+)-ATP酶、SOD、GSH-Px活力明显升高,MDA和血清BUN含量明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。各组间Ca~(2+)-ATP酶活力及血清Cr含量无明显差异(P0.05)。结论在一定剂量范围内,与牛磺酸或DFP单独用药相比,牛磺酸和DFP联合用药可以对染铝大鼠肾脏功能及抗氧化系统起到更好的保护作用。     

牛磺酸联合维生素E对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

为探讨牛磺酸联合维生素E对小鼠酒精性肝损伤的保护效果,将10月龄清洁级雄性昆明小鼠60只按体重随机分为3组,分别为正常对照(生理盐水)组、酒精性肝损伤组、牛磺酸+维生素E干预组,每组20只。酒精性肝损伤组和牛磺酸+维生素E干预组每天7:00以50度白酒灌胃,牛磺酸+维生素E干预组于19:00以0.5mol/L的牛磺酸灌胃,灌胃量均为10ml/kg,每天1次;维生素E通过添加在普通饲料中进行补充(400mg/kg饲料);连续染毒2周。测定血中甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、脂褐质(LF)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,并对大鼠肝脏进行病理及免疫组化量化分析。结果显示,酒精性肝损伤小鼠血清TG、MDA和LF含量较高,SOD、GSH-Px活力均较低,差异有统计学意义(P0.05)。而牛磺酸+维生素E能显著降低酒精性肝损伤小鼠血清TG、MDA和LF的含量,并增强血清中SOD以及GSH-Px的活力,差异有统计学意义(P0.05)。病理学观察显示,牛磺酸+维生素E能干预可显著改善酒精对小鼠肝脏的损伤。免疫组化定量分析显示,酒精性肝损伤组面密度高于正常对照组和牛磺酸+维生素E干预组,差异均有统计学意义(P0.05)。表明牛磺酸联合维生素E可能通过抗氧化的途径来减轻酒精对肝脏的损伤。     

矽肺患者氧化应激指标及外周血单核细胞NF-κB水平的变化

目的 观察矽肺患者氧化应激指标及外周血单核细胞NF-κB水平的变化,探讨矽肺发生发展的机制.方法 选择某铸造厂接触矽尘作业工龄在1年以上的工人200例为接尘组,该厂2008年住院及门诊随访的矽肺患者130例为矽肺组,32例0+病例为观察对象组,同时选择某酒店服务人员100例为对照组.分别测定超氧化物歧化酶(SOD)、血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)活力,一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC),外周血单核细胞核蛋白中NF-κB水平.结果 与对照组比较,接尘组和矽肺组NO含量明显升高,SOD活力明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.01).与对照组及接尘组比较,矽肺组T-AOC水平、NOS活力、MDA含量均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).与对照组[(223.360±46.838)U/ml]比较,接尘组及矽肺组GSH-Px活力[(231.164±36.484)、(270.469±39.228)U/ml]明显升高,且矽肺组GSH-Px活力明显高于接尘组,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与观察对象组[(256.906±21.418)U/ml]和Ⅰ期矽肺组[(259.594±34.790)U/ml]比较,Ⅲ期矽肺组GSH-Px活力[(290.750±39.129)U/ml]明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组[(59.71±9.27)ng/L]比较,接尘组及矽肺组NF-κB水平[(72.06±9.12)、(85.25±11.64)ng/L]明显升高,且矽肺组NF-κB水平明显高于接尘组,差异均有统计学意义(P＜0.01).血清中GSH-Px活力与矽肺分期呈正相关(r=0.507,P＜0.01).外周血单核细胞核蛋白NF-κB水平与矽肺分期、年龄、GSH-Px活力、NO含量呈正相关,差异均有统计学意义(r值分别为0.376、0.243、0.233、0.221,P＜0.01).结论 机体氧化和抗氧化系统的失衡与矽肺的发生发展有关,并与NF-κB的活化一致.

Abstract：

Objective To investigate the change of indicators of oxidative stress in serum and NF-κB in peripheral blood mononuclear cells of patients with silicosis, and explore the mechanism of the development of silicosis. Methods The subjects were divided into (1) 200 workers exposed to SiO2 for at least 1 years in a foundry served as the dust-exposure group; (2) 130 cases with silicosis (Ⅰ phase silicosis 64 cases, Ⅱ phase 46 cases Ⅲ phase 20 cases) served as the silicosis goup; (3) 32 cases with 0+ phase silicosis in the foundry served as the observed group,(4)100 subjects from a hotel served as the control group. The serum including superoxide dismutase (SOD), nitric oxide (NO), serum glutathione peroxidase (GSH-Px), total antioxidant capacity (T-AOC), nitric oxide synthase (NOS), lipid malondialdehyde (MDA) and NF-κB protein levels in peripheral blood mononuclear cells were determined, respectively. Results Compared with the control group,NO levels in dust-exposed group and silicosis group significantly increased, and SOD decreased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). Compared with the control group and dust-exposed group, T-AOC, NOS, MDA levels in silicosis group significantly increased (P＜0.05 or P＜0.01). GSH-Px in dust-exposed group and silicosis group were (231.164±36.484) and (270.469±39.228)U/md, respectively which were significantly than that [(223.360±46.838) U/ml] in control group (P＜0.05 or P＜0.01), and there was significant difference of GSHPx between the silicosis group and the dust-exposed group significantly (P＜0.01). GSH-Px level [(290.750±39.129) U/ml] in Ⅲ phase silicosis group were significantly higher than those [(256.906±21.41) and (259.594±34.79) U/ml] in observation group and Ⅰ phase silicosis group (P＜0.05). NF-κB levels [(72.06±9.12) and (85.25±11.64) ng/L] in dust-exposed group and silicosis group were significantly higher than that [(59.71±9.27) ng/L] in control group (P＜0.01), and there was significant difference of between the silicosis group and the dust-exposed group (P＜0.01). There was a positive correlation between serum GSH-Px level and the silicosis stages (r=0.507,P＜0.0l). Also there was a positive correlation between NF-κB level and silicosis stages, age, GSH-Px or NO levels (r=0.376, 0.243, 0.233, 0.221, P＜0.01). Conclusion The imbalance of oxidative and anti-oxidation system and the activation of NF-κB are related with the occurrence and development of silicosis. The monitoring of oxidative stress indicators and NF-κB is beneficial to the prediction and prognosis assessment of silicosis.     

维生素E和ω-3脂肪酸对大气PM_(2.5)心肺损伤的干预研究

目的观察维生素E(Ve)和ω-3脂肪酸(ω-3 FA)对大气细颗粒物(PM_(2.5))急性染毒所致心血管损伤的干预效果及可能作用机制。方法将SD大鼠随机分为8组,每组8只,分别为对照组,PM_(2.5)染毒组,Ve干预低、中、高剂量组[3、10和30 mg/(kg·d)],ω-3 FA干预低、中、高剂量组[10、30和90 mg/(kg·d)]。第1~14天,灌胃给予维生素E和ω-3脂肪酸,之后除对照组外其余各组以气管滴注的方式进行PM_(2.5)染毒,染毒剂量为10 mg/kg BW,对照组给予相同剂量的生理盐水。末次染毒后处死小鼠,取动脉血、肺脏和心脏,测量血清、肺灌洗液和心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,以及血清和心肌丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果肺脏和心脏病理学评分发现,与PM_(2.5)染毒组相比,随着Ve和ω-3 FA干预浓度的升高,炎症分数逐渐降低(P<0.05或P<0.01)。在肺灌洗液中,在Ve各干预组和ω-3 FA各干预组中,与PM_(2.5)染毒组相比,IL-1β、IL-6的含量随干预剂量的增加而呈一定的下降趋势,在Ve及ω-3 FA干预高剂量组,TNF-α的浓度下降明显(P<0.05)。在血清中,与PM_(2.5)染毒组相比,Ve干预组血清MDA含量明显降低、SOD活力明显升高且差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。而在ω-3FA干预组中,与PM_(2.5)染毒组相比,仅ω-3 FA高剂量组SOD活力水平明显升高(P<0.05)。同时,Ve和ω-3 FA的干预均能降低血清中IL-6、TNF-α的浓度(P<0.01)。在心肌组织中,与PM_(2.5)染毒组相比,Ve高剂量组MDA含量明显下降,SOD和GSH-Px活力有所升高(P<0.05或P<0.01)。在ω-3 FA干预组,仅高剂量组的GSH-Px活力显著升高(P<0.05)。随着Ve和ω-3 FA干预剂量的增加,心肌组织中IL-1β、TNF-α的浓度均呈现明显的下降趋势。结论 PM_(2.5)暴露可能会增加心肺组织的炎症反应和氧化应激,而补充Ve和ω-3 FA可以通过提高抗氧化物酶SOD及GSH-Px的活性,从而拮抗PM_(2.5)对机体所造成的心肺系统炎症反应和氧化应激损伤。