细胞因子对心脏微血管内皮细胞与淋巴细胞粘附的影响

目的：观察细胞因子对心脏微血管内皮细胞表面细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）的表达的调控，及对内皮细胞与激活淋巴细胞粘附的影响。方法：体外培养大鼠心脏微血管内皮细胞，以肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）、白细胞介素－６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ－６）和白细胞介素－１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１β，ＩＬ－１β）诱导。采用免疫组织化学染色法观察内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１表达；采用粘附试验和抗ＩＣＡＭ－１或抗ＬＦＡ－１单克隆抗体阻断抑制试验。结果：ＴＮＦ－α、ＩＬ－６和ＩＬ－１β诱导内皮细胞１８～２４ｈ，均可使内皮细胞与淋巴细胞的粘附率显著增加，ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β的诱导还可使内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１分子表达明显增强，表现为ＩＣＡＭ－１表达阳性细胞数增多，着色加深。用１０～２０ｍｇ／Ｌ抗ＩＣＡＭ－１或抗ＬＦＡ－１单克隆抗体均可部分抑制内皮细胞与淋巴细胞的粘附。结论：ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β可以有效地激活心脏微血管内皮细胞，通过诱导内皮细胞ＩＣＡＭ－１表达增多，促进内皮细胞与淋巴细胞的粘附     

GST-人可溶性成纤维细胞生长因子受体1融合蛋白在酵母细胞中的表达及活性测定

目的：表达重组人可溶性成纤维细胞生长因子受体１（ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　１，ｓＦＧＦＲ１），研究其对成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）生物学活性的拮抗作用。方法：采用逆转录－ＰＣＲ（ＰＴ－ＰＣＲ）技术自人肺成纤维细胞获得ｓＦＧＦＲ１　ｃＤＮＡ，测序确证后，将其克隆人酵母细胞表达载体ｐＹＥＸ４Ｔ－１；重组质粒转化入酵母细胞（ＤＹ１５０）中进行诱导表达，表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及 Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ鉴定。利用 ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖抑制实验检测重组人 ｓＦＧＦＲ１的生物学活性。结果：经 ＣｕＳＯ４诱导，酵母细胞表达出重组谷胱苷肽转移酶（ＧＳＴ）－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白，此蛋白在凝胶上表现为 １条约 ６０ｋＤ的阳性区带，在 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ实验中可被ＧＳＴ特异性抗体识别。重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白的粗提物在体外能够桔抗ＦＧＦ介导的促ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖的活性。结论：重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白在酵母表达系统中得到有效表达，并具有很好的生物活性。     

环磷酸腺苷类似物对高转移人肺癌细胞体外生长及分化作用的研究

目的研究两种具有不同作用位点选择性的环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）类似物对高转移性人肺癌细胞体外生长和分化的作用。方法采用细胞培养，体外侵袭和集落形成实验，免疫细胞化学及电镜技术，研究了高转移性人肺癌细胞系ＰＧ对无作用位点选择性（ｄｂ－ｃＡＭＰ）及有作用位点选择性（８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ）的不同反应。结果经ｄｂ－ｃＡＭＰ处理７天后，ＰＧ细胞的生长被抑制４８％，而８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ处理７天后，ＰＧ细胞的生长抑制可达７０％。ｄｂ－ｃＡＭＰ对ＰＧ细胞的生长抑制作用是可逆的，而８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ的作用是不可逆的。经两种ｃＡＭＰ类似物处理后ＰＧ细胞的体外侵袭及集落形成能力均降低，光镜下可见细胞突起伸长或增多，神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）及嗜铬素表达增强。结论可以通过选择性激活ｃＡＭＰ依赖性蛋白激酶达到有效抑制恶性肿瘤的目的。     

全反式维甲酸对克隆化高转移人肺癌细胞浸润和转移的抑制作用

用５μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸（ＲＡ）处理克隆化高转移人肺癌细胞（ＰＧＣＬ３）５天后，细胞的体外生长速度、穿过Ｂｏｙｄｅｎ小室人工基底膜胶的浸润能力都受到一定的抑制，其中尤以１０μｍｏｌ／ＬＲＡ的作用明显。实验性转移显示，ＲＡ体外处理ＰＧＣＬ３细胞可在一定程度上降低其实验性转移的能力。此外通过ＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交还发现ＰＧＣＬ３细胞经１０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理５天后，人组织金属蛋白酶抑制剂基因（Ｔｉｍｐ－１和Ｔｉｍｐ－２）表达有一定水平的增高，这有助于进一步阐明ＲＡ抑制肿瘤细胞浸润和转移的机理。     

人细胞间粘附分子1基因功能区Ⅰ,Ⅱ的克隆及高效表达

用ＰＣＲ聚合酶链反应技术从人细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）ｃＤＮＡ中获取了其编码细胞外氨基端功能区Ⅰ、Ⅱ１８５个氨基酸的ＤＮＡ序列，构建了重组质粒ｐＥＴ／ｒｓＩＣＡＭ－１。经转化宿主菌，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，薄层扫描和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ，证明目的基因在大肠杆菌中获得了高效表达。     

一种新的人内皮细胞可诱导性粘附分子PTA1的表达,调？…

观察ＰＴＡ１分子在活化人内皮细胞的表达,调度及其所参与的粘附功能。方法用间接免疫荧光染色结合流式细胞仪分析观察ＰＴＡ１在内皮细胞的表达物分布;用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测内皮细胞中ＰＴＡ１ｍＲＮＡ的表达;用Ｎａ２＾５１ＣｒＯ４标记静止和ＴＰＡ活性Ｊ细胞,采用４ｈ粘附实验观察不同条件下内皮细胞和Ｊｕｒｋａｔ细胞间的粘附以及ＰＴＡ１／Ｉｇ融合蛋白 粘附阻断作用。结果（１）静止内皮细胞表达很弱的ＰＴＡ１分子,     

转化生长因子-α、表皮生长因子受体与胃癌发生的关系及其与增殖细胞核抗原的相关性分析

目的研究在胃癌发生的不同阶段转化生长因子－α（ＴＧＦ－α）、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达情况及与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的关系。方法应用免疫组化ＬＳＡＢ法。结果（１）ＴＧＦ－α在癌周正常粘膜、肠化生组织中的表达明显高于非癌正常粘膜及肠化生（Ｐ＜０．０１）。（２）ＥＧＦＲ在肠化生、不典型增生粘膜表达较正常、癌组织明显升高（Ｐ＜０．０１）。（３）ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ共同表达常伴不典型增生。（４）ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ表达与ＰＣＮＡ表达有明显的相关性。（５）ＴＧＦ－α、ＥＧＦＲ、ＰＣＮＡ表达与肿瘤外侵、淋巴结转移无关。结论ＥＧＦＲ／ＴＧＦ－α是胃癌前病变的一项有意义的标志，结合ＰＣ－ＮＡ监测高危人群可能有助于发现早期胃癌。     

人核糖体磷酸蛋白P2基因的克隆及鉴定

利用聚合酶链式反应技术（ＰＣＲ），从人肺巨细胞癌ＰＬＡ－８０１母系细胞系统克隆化高转移细胞株Ｄ中特异性扩增Ｐ２ ｃＤＮＡ（Ｈｕｍａｎ ｒｉｂｏｓｏｍａｌ ｐｈｏｓｐｈｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｐ２ ｇｅｎｅ ｃＤＮＡ），并将扩增产物克隆入ｐＧＥＭ－３Ｚ载体，获得了重组质粒ｐＭＰ２，对其中两个克隆ｐＭＰ２－１、ｐＭＰ２－２的Ｐ２ ｃＤＮＡ进行了序列分析。结果表明：ｐＭＰ２－１的Ｐ２ｃＤＮＡ序列与文献报道基本     

内源性E2,EGFR,PCNA在大肠癌中作用及其相互关系

目的：明确内源性雌激素（Ｅ２）和相生长因（ＥＧＦＲ）在大肠癌中的作用及相互关系，方法；免疫组化检测４８例大肠癌内源性Ｅ２ＥＧＦＲ和ＰＣＮＡ的表达。结果：内源性Ｅ２阳性２９（６０．４％）例，其阳性细胞平均百分率为４１．１％，与肿瘤淋巴结转移呈负相关（Ｐ〈０．０５），ＥＧＦＲ过表达３２（６６．７％）例，ＰＣＮＡ增殖指数高，且两者均与肿瘤淋巴结转移呈正相关（Ｐ〈０．０５），内源性Ｅ２阳性细胞百分率与ＥＧ     

糖皮质激素受体阻断对大鼠白细胞粘附的作用

目的明确ＧＲ阻断后对白细胞粘附的作用及可能的作用机制。方法１．在体实验。观察肠系膜微循环白细胞贴壁粘附数。 ２．高体实验。（１）ＰＭＮ与玻璃珠粘附;ＰＭＮ粘附率（％）粘附：ＰＭＮ粘附率（％）＝粘附前ＰＭＮ计数一洗脱液ＰＭＮ计数（３）ＰＭＮ粘附 粘附前ＰＭＮ计数分子ＣＤ１８：ＥＬＩＳＩＡ检测;（４）ＣＤ１８表达和ＰＭＮ与ＩＣＡＭ－１包被磁珠粘附的关系：ＰＭＮ与ＩＣＡＭ－１包被磁珠粘附,同时测定ＣＤ１８表达。结果１．在体实验。对照组仅有少量白细胞贴壁粘附（２．５０±２．１７）,阻断ＧＲ后白细胞贴壁粘附±Ｄｅｘ组的粘附率与ＴＮＦ组相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）,Ｄｅｘ±ＴＮＦ组的粘附率与ＴＮＦ组相比有下降趋势．但差异不显著。ＴＮＦ＋Ｄｅｘ＋ＲＵ４８６组的粘附率与ＴＮＦ组和对照组相比均有差异（分别是 Ｐ＜０． ０５,Ｐ＜０． ０１）。 ２． ＰＭＮ与 ＥＣ粘附： ＴＮＦ组与ＴＮＦ＋Ｄｅｘ组结果同ＰＭＮ与玻璃珠粘附。Ｄｅｘ＋ＴＮＦ组的粘附率与ＴＮＦ组相比差异显著（Ｐ＜０．０５）。ＴＮＦ＋Ｄｅｘ＋ＲＵ４８６组的粘附率与对照组相差十分显著（Ｐ＜０．０１）,与ＴＮＦ组相比,两者无明显差异。３．ＰＭＮ与ＩＣＡＭ－１包被磁珠粘附：ＴＮＦ     

ICA、PJA逆转人高转移肺癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸机制的研究

目的：研究ICA、PJA对人高转移肺癌细胞PG细胞免疫逃逸的逆转作用。方法：MTT法检测ICA、PJh对PG细胞增殖的影响以及对CD3AK杀伤敏感性的影响。流式细胞仪检测细胞表面分子Fas、FasL表达水平和细胞凋亡。应用PG细胞与Jurkat T细胞其培养的方法体外研究FasL诱导T淋巴细胞凋亡的作用。结果：PG细胞高表达FasL，低表达Fas，对CD3AK细胞杀伤敏感性较低，并在与Jurkat T细胞共培养中诱导高表达Fas的Jurkat T细胞凋亡。：ICA、PJA对PG细胞有明显的增殖抑制作用。ICA可明显提高PG细胞Fas的表达率。ICA、PJA可明显降低PG细胞FasL的表达率。ICA、PJA可使PG细胞与Jurkat T细胞共培养中，降低Jurkat T细胞的凋亡率。ICA、PJA可提高CD3AK细胞对PG细胞的杀伤活性。结论：ICA、PJA可逆转人高转移肺癌细胞PG通过Fas／FasL途径逃避机体免疫活性细胞的攻击。     

小檗碱抑制高转移性人巨细胞肺癌PG细胞侵袭和迁移的研究

目的：研究小檗碱对高转移性人巨细胞肺癌PG细胞侵袭和迁移的作用并探讨其作用机制。方法：采用琼脂糖滴法观察PG细胞的运动能力，用下室加FN的Transwell小室法观察PG细胞的趋化运动能力，用铺Martrigel的Transwell小室观察PG细胞的侵袭能力。通过SABC免疫细胞化学法及图像分析软件，半定量PG细胞MMP2、TIMP2的表达；RT－PCR法检测PG细胞MMP2 mRNA和TIMP2 mRNA的表达。结果：小檗碱（10 mg/L）处理PG细胞 24 h 后：（1）PG细胞的迁移距离明显比对照PG短（P<0.01），趋向FN迁移的穿膜细胞数明显少于对照组（P<0.01）；（2）PG细胞与FN、Martrigel的黏附减少，与对照组比有显著差异（P<0.01）；（3）穿过铺Martrigel的Transwell小室微孔滤膜的PG细胞数明显减少，即可抑制PG细胞的侵袭能力(P<0.05)； （4）MMP2表达明显减少(P<0.05)，而TIMP－2的表达有升高趋势，与对照比无显著差异，但MMP2/TIMP2比值降低；（5） 小檗碱使PG细胞TIMP2 mRNA表达明显增加(P<0.05)，而对MMP2 mRNA表达无影响，MMP2 mRNA/TIMP2 mRNA比值降低。结论：抑制肿瘤细胞的运动能力、与细胞外基质的黏附、对细胞外基质侵袭，调节MMP2/TIMP2表达的平衡，从而维持细胞外基质的完整性，可能是小檗碱抗侵袭和转移作用的机制之一。     

体外罗勒多糖抗人高转移肺癌细胞侵袭转移作用及机制探讨

目的：体外观察罗勒多糖对人高转移肺癌细胞侵袭、转移行为的影响，并探讨其可能的作用机制。 方法： 在体外侵袭模型中观察不同浓度罗勒多糖对人高转移肺癌细胞侵袭、转移行为的影响；划痕标记染料示踪技术检测罗勒多糖对细胞通讯功能的影响；RT-PCR检测肿瘤细胞内转移相关分子c-myc、nm23-H1与Tiam-1 mRNA表达水平的改变。 结果： 罗勒多糖处理组细胞的侵袭与转移能力明显低于对照组（P<0.05）；细胞通讯功能有一定程度的恢复，荧光染料传递毗邻3-4列细胞；细胞内促进肿瘤细胞转移的基因c-myc、Tiam-1表达程度低于对照组，而抑制肿瘤细胞转移的基因nm23表达程度高于对照组（P<0.05）。 结论： 罗勒多糖是一种具有抗人高转移肺癌细胞侵袭以及转移作用的新药，它的作用是通过多个药效靶点综合作用的结果。     

敲减NOB1基因表达对人结肠癌SW480细胞药物敏感性及侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨通过小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)技术敲减NOB1基因表达对人结肠癌SW480细胞活力、药物敏感性、凋亡、细胞周期及侵袭和迁移能力的影响。方法:利用脂质体Lipofectamine 3000将NOB1 siRNA转染至SW480细胞,采用real-time PCR和Western blot检测转染后SW480细胞中NOB1 mRNA和蛋白表达的变化;采用MTT法检测敲减NOB1基因表达后SW480细胞活力及其对不同化疗药物(顺铂、5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和卡培他滨)敏感性的变化;流式细胞术检测敲减NOB1基因表达对SW480细胞凋亡和周期的影响;Transwell方法检测敲减NOB1基因表达对结肠癌SW480细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:转染NOB1 siRNA后,SW480细胞中NOB1的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P0.05);与对照组和阴性对照siRNA组相比,NOB1 siRNA转染组的SW480细胞在24～72 h的细胞活力显著降低,顺铂、5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和卡培他滨对该细胞的半数抑制浓度均显著降低,细胞凋亡率显著增加,细胞周期受到阻滞,细胞侵袭和迁移能力显著降低(P0.05)。结论:NOB1 siRNA转染能够抑制结肠癌SW480细胞活力及侵袭和转移能力,并增强细胞对药物的敏感性,促进细胞凋亡。NOB1能够成为结肠癌诊断和治疗的新靶点。     

20(S)-人参皂苷Rg3抑制人急性单核细胞白血病THP-1细胞迁移和侵袭

目的：观察低极性20(S)-人参皂苷Rg₃(S-Rg₃)体外抑制人急性单核细胞白血病THP-1细胞迁移和侵袭的作用。方法：将不同浓度(0、20、40和80 mg/L)的S-Rg₃加入THP-1细胞培养体系,Transwell小室检测S-Rg₃抑制细胞迁移的作用。采用免疫细胞化学、免疫荧光、Western blot和RT-qPCR等多种方法,检测S-Rg₃对THP1细胞黏附、迁移和侵袭相关蛋白表达的影响及其相关机制。结果：S-Rg₃能有效地抑制THP-1细胞迁移,下调黏附相关蛋白N-cadherin,迁移相关蛋白C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)和基质细胞衍生因子1(SDF-1),以及侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达,但上调抑制迁移侵袭相关蛋白E-cadherin、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)和TIMP3表达,同时下调CXCR4 mRNA表达,上调E-cadherin和TIMP1 mRNA表达,呈剂量依赖性。此外,S-Rg_...     

Euxanthone Impairs the Metastatic Potential of Osteosarcoma by Reducing COX-2 Expression

Osteosarcoma (OS) is one of the most common malignancies of bone. This study was aimed to explore the anti-metastatic effect of euxanthone on OS. Adhesion assay and Transwell assay were used to examine the effect of euxanthone on adhesion, migration and invasion of OS cells. COX-2-over-expressing plasmid was applied to transfect OS cells to assess whether COX-2 affects the anti-metastatic function of euxanthone. PDCD4 knockdown and miR-21 mimic were applied to assess whether euxanthone suppresses the transactivation of c-jun via modulating miR-21-PDCD4 signaling. The effect of euxanthone in vivo was also examined by lung metastasis assay. Euxanthone, a xanthone derivative extracted from Polygala caudata, has been found to exhibit anti-neoplastic activities. In present study, our results showed that euxanthone suppressed cell adhesion, migration, and invasion in OS cells. Our experimental data also showed that repression of COX-2 by euxanthone mediated its anti-metastatic activities. Moreover, our findings revealed that euxanthone modulated the COX-2 expression through the miR-21/PDCD4/c-jun signaling pathway. The anti-metastatic activities of euxanthone were also validated in a pulmonary metastasis model. Taken together, our results highlighted the potential of euxanthone to be used in the treatment of OS. Anat Rec, 302:1399–1408, 2019. © 2018 Wiley Periodicals, Inc.     

山柰酚通过Wnt/β-catenin信号通路抑制HBx-HepG2细胞增殖、侵袭及迁移

目的:探讨山柰酚对HBx-HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并研究其潜在分子作用机制。方法:利用实时荧光定量PCR检测相关基因的表达水平,利用蛋白印迹实验检测相关蛋白的水平,流式细胞术检测细胞的凋亡率,MTT实验和平板集落形成实验检测细胞的增殖,Transwell侵袭实验和划痕愈合实验检测细胞的侵袭和转移。结果:山柰酚(10~200μmol/L)能够剂量和时间依赖性地抑制HBx-HepG2细胞的增殖。山柰酚(100μmol/L)能显著抑制HBx-HepG2细胞的集落形成数量、细胞侵袭能力以及细胞愈合率,诱导HBx-HepG2细胞凋亡,引起cleaved caspase-3、cleaved caspase-9及Bax蛋白水平上升,Bcl-2蛋白水平下降,降低β-catenin、c-Myc和cyclin D1 mRNA及蛋白的表达水平。山柰酚(100μmol/L)同时能够降低p-GSK-3β蛋白水平以及细胞质和细胞核中的β-catenin蛋白水平,对GSK-3β蛋白水平没有影响。Li Cl处理能够反转山柰酚(100μmol/L)对HBx-HepG2细胞的增殖、侵袭以及迁移抑制作用。结论:山柰酚对HBx-HepG2细胞的增殖、侵袭及转移有显著的抑制作用,这种抑制作用很有可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性来实现的。     

棕榈酸刺激的巨噬细胞对HepG2细胞侵袭和迁移的影响

目的:研究棕榈酸刺激的巨噬细胞对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:应用棕榈酸(0.16 mmol/L)刺激人急性单核细胞白血病细胞系THP-1来源的巨噬细胞,并取其上清液处理HepG2细胞。细胞迁移实验检测巨噬细胞的迁移能力,侵袭实验和划痕实验分别观察HepG2细胞的纵向迁移能力和横向迁移能力;RT-qPCR检测巨噬细胞和HepG2细胞的炎症/趋化因子及HepG2细胞上皮-间充质转化标志蛋白(E-cadherin和N-cadherin)的mRNA表达水平。结果:棕榈酸促进了巨噬细胞迁移,显著上调巨噬细胞白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达;用棕榈酸刺激巨噬细胞的上清液处理HepG2细胞,其纵向迁移能力和横向迁移力明显强于未经棕榈酸处理组,且HepG2细胞的多种炎症因子和N-cadherin表达上调,E-cadherin表达下调。结论:棕榈酸可以增强巨噬细胞的迁移能力,刺激巨噬细胞产生大量炎症因子/趋化因子,进一步通过旁分泌/内分泌作用于HepG2细胞,促进HepG2细胞的上皮-间充质转化,增强HepG2细胞的侵袭与迁移能力。     

沉默吲哚胺2,3-双加氧酶2基因对黑色素瘤细胞B16-BL6增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨沉默吲哚胺2,3-双加氧酶2(IDO2)基因对小鼠黑色素瘤B16-BL6细胞增殖、迁移及侵袭等生物学行为的影响。方法:IDO2-siRNA转染体外培养的黑色素瘤细胞B16-BL6,应用real-time PCR和Western blot检测IDO2和IDO1基因的表达;平板集落形成实验检测IDO2基因沉默对肿瘤细胞增殖的影响;细胞划痕实验和Transwell小室细胞迁移实验观察IDO2对肿瘤细胞迁移的影响;Transwell小室侵袭实验观察肿瘤细胞侵袭能力。结果:沉默B16-BL6细胞中IDO2基因能使细胞单集落形成密度降低,划痕迁移变慢,Transwell小室细胞迁移数减少,侵袭细胞数减少。结论:沉默IDO2可以影响黑色素瘤细胞B16-BL6的增殖、迁移和侵袭能力。     

HOXB7基因沉默对人胃癌细胞活力、迁移和侵袭的影响

目的:探讨靶向沉默HOXB7基因对人胃癌SGC-7901细胞活力、迁移和侵袭作用的影响及潜在机制。方法:设计靶向HOXB7的siRNA,然后瞬时转染胃癌SGC-7901细胞,实时荧光定量PCR和Western blot法检测siRNA靶向沉默的效果。MTT法检测细胞的活力,Western blot法检测细胞周期相关蛋白CDK4和cyclin D1蛋白的表达水平,Transwell小室侵袭实验检测SGC-7901细胞的侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western blot法检测胃癌SGC-7901细胞PTEN和VEGF的表达水平以及p-AKT的蛋白水平。结果:胃癌组织中HOXB7基因在mRNA和蛋白水平的表达均显著高于对照组织。siRNA可有效靶向沉默SGC-7901细胞中HOXB7的表达,且沉默HOXB7表达后SGC-7901细胞活力明显下降,同时细胞周期相关蛋白CDK4和cyclin D1的表达亦下调。靶向沉默HOXB7可明显抑制SGC-7901细胞中AKT的磷酸化水平,抑制胃癌细胞的侵袭转移,同时下调VEGF的表达水平,抑制胃癌组织中的肿瘤血管生成。结论:HOXB7作为一个癌基因,可上调细胞周期相关蛋白CDK4、cyclin D1和侵袭相关分子VEGF的表达,上调AKT的磷酸化水平,进而抑制PTEN的功能,促进胃癌细胞SGC-7901的生长、迁移和侵袭能力。