离子液体协同超声微波提取秦皮总香豆素工艺的优化

目的优化离子液体协同超声微波提取秦皮总香豆素的工艺。方法以离子液体类型及浓度、提取功率、提取时间、液料比为影响因素,秦皮总香豆素提取率为评价指标,在单因素试验基础上采用Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为0.86 mol/L溴代-1-丁基-3-甲基咪唑([C_4mim]Br)离子溶液,提取功率500 W,提取时间20 min,液料比35∶1,秦皮总香豆素提取率为27.2 mg/g,与预测值(28.0 mg/g)接近。结论该方法稳定可行,重复性好,可用于提取秦皮总香豆素。     

秦皮总香豆素大孔树脂纯化工艺研究

目的优化大孔树脂对秦皮总香豆素的纯化工艺。方法以秦皮总香豆素及秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素4种香豆素的吸附率、解析率、转移率为考察指标,采用单因素方法,考察纯化秦皮总香豆素的树脂类型,树脂吸附、解吸附性能及纯化效果。结果所选择的7种大孔树脂中ADS-5最适合秦皮总香豆素的纯化。吸附参数:吸附容量为生药量-树脂0.8 g/g,上样药液质量浓度为生药0.75 g/m L,上样药液p H值为4.0~4.3(原药液),上样体积流量为2~4 BV/h;洗脱参数:水清洗杂质1 BV,洗脱溶剂25%乙醇,洗脱体积流量2 BV/h,洗脱体积3 BV。经纯化,秦皮总香豆素转移率达74.27%,4种香豆素成分转移率达83.06%,秦皮总香豆素提取物出膏率为7.35%,除杂率达14.00%,其中总香豆素的量为54.72%,4种香豆素成分的量之和为36.01%,总香豆素提取率为4.02%。结论 ADS-5对秦皮总香豆素纯化效果较好,该纯化工艺稳定,提取物量符合中药5类新药的要求。     

正交试验优选秦皮中总酚的超声辅助提取工艺

目的优选秦皮总酚的超声辅助提取工艺。方法以总酚提取率为评价指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验优选秦皮中总酚的超声辅助提取工艺条件。结果最佳提取工艺条件为60%乙醇,超声功率320 W,料液比(g∶mL)1∶50,超声提取时间40 min。此工艺条件下,秦皮中总酚的提取率为5.30%。结论该工艺简便合理、稳定可行,可用于秦皮中总酚的提取。     

超声波法提取独活总香豆素工艺研究

采用超声波法提取中药独活总香豆素,以乙醇溶液为香豆素的提取溶剂,通过正交试验考察了乙醇提取浓度、超声时间、液料比对独活总香豆素得率的影响,结果表明,各因素对对独活总香豆素得率的影响大小依次为:乙醇提取浓度>超声时间>液料比;优化的提取工艺参数为:60%乙醇,料液比1:80,超声提取40min,此条件下独活总香豆素含量2.29%。     

紫花地丁中秦皮乙素、总香豆素大孔树脂纯化工艺研究

目的优选紫花地丁中秦皮乙素、总香豆素的大孔树脂纯化工艺条件。方法以秦皮乙素、总香豆素为评价指标,通过7种大孔树脂(AB-8、D101、HPD-100、HPD-450、HPD-750、DM130、HPD-600)的静态吸附、动态解吸试验,确定HPD-100为最佳树脂,经L_9(3~4)正交及单因素试验进行纯化工艺研究。结果最佳纯化条件为HPD-100大孔树脂,上样液pH值为5.0、柱径高比为1∶9、上样液浓度为1.0 g/g、上样体积流量为0.5 BV/h、洗涤用水量为4 BV、解吸溶剂为4 BV 50%乙醇、洗脱体积流速为2 BV/h,纯化后,秦皮乙素、总香豆素含量分别提高5.4倍、5.5倍。结论 HPD-100大孔树脂分离纯化紫花地丁效果良好,工艺稳定可行。     

秦皮总香豆素对实验性痛风性关节炎及尿酸代谢的影响

 目的观察秦皮总香豆素对实验性痛风性关节炎及尿酸代谢的影响。方法用微晶型尿酸钠诱导大鼠足跖肿胀和家兔急性关节炎模型,观察灌胃给予秦皮总香豆素对足跖肿胀程度、关节液及滑膜组织的影响。用正常小鼠以及腹腔注射黄嘌呤造成的高血尿酸模型小鼠,观察灌胃给予秦皮总香豆素对血尿酸代谢的影响。结果微晶型尿酸钠(MSU)混悬液局部注射诱发大鼠急性足爪肿胀1～8 h,秦皮总香豆素40,80,160,320 mg·kg^-1剂量组的肿胀率与对照组肿胀率经统计学处理具有差异显著性。秦皮总香豆素20,40,80,160 mg·kg^-1剂量组可以显著抑制微晶型尿酸钠混悬液局部注射诱发急性关节肿胀和减少关节腔积液量,关节囊组织病理学观察可见,模型组滑膜组织表层可见明显充血水肿,滑膜细胞可见变性、甚至坏死,伴有淋巴细胞、中性白细胞浸润,秦皮总香豆素所试剂量范围可以显著减轻上述病理改变。秦皮总香豆素对正常小鼠血尿酸以及高尿酸小鼠血尿酸均有显著降低作用。结论秦皮总香豆素对微晶型尿酸钠混悬液局部注射诱发的大鼠足爪肿胀以及家兔急性痛风性关节炎均有对抗作用,降低正常小鼠血尿酸以及高尿酸小鼠血尿酸。     

不同基原秦皮、香豆素单体抗菌作用对比研究

目的研究4种基原秦皮提取物、5种香豆素单体、5种单体混合物、苦枥白蜡树树皮已知香豆素指纹区样品、未知成分指纹区样品的体外抑菌作用。方法采用体外抑菌试验微量定量检测方法,测定最小抑菌浓度及最低杀菌浓度。结果4种基原秦皮苦枥白腊树、尖叶白腊树、白腊树、宿柱白腊树树皮均有明显抑菌、杀菌作用,抑菌强度依次为：宿柱白腊树〉苦枥白腊树〉尖叶白腊树〉白腊树。5种香豆素单体秦皮素、秦皮乙素对9种细菌均有明显抑菌、杀菌作用,秦皮甲素、秦皮苷对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有一定抑菌、杀菌作用,抑菌作用依次为：秦皮素〉秦皮乙素〉秦皮甲素〉秦皮苷〉6,7-二甲氧基-8-羟基香豆素。苦枥白腊树树皮提取物对所试9种细菌均有明显抑菌作用;单体混合物,已知香豆素指纹区样品对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、卡他菌有明显抑菌作用;未知成分指纹区样品对金黄色葡萄球菌有明显抑菌作用,对表皮葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌也有一定抑菌作用。结论秦皮抑菌强弱与已知香豆素成分含量高低基本一致。秦皮中苷元的抑菌作用优于苷,5种香豆素类单体中秦皮素、秦皮乙素抑菌作用最强。     

秦皮总香豆素降低小鼠慢性高尿酸血症血尿酸水平及机理研究

目的：研究秦皮总香豆素对慢性高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响,并初步探讨其作用机理。方法：采用黄嘌呤600mg/kg（ig.）＋氧嗪酸钾100mg/kg（sc.）建立小鼠慢性高尿酸血症模型,给予不同剂量秦皮总香豆素（440mg/kg、220mg/kg、110mg/kg）,观察高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿尿酸、黄嘌呤氧化酶、血清肌酐及尿素氮水平。结果：秦皮总香豆素组小鼠的血清尿酸及尿尿酸值明显低于模型组,有效抑制黄嘌呤氧化酶活性,血清肌酐及尿素氮值显著低于阳性对照组,均以大、中剂量组为佳。结论：秦皮总香豆素能明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸及尿尿酸水平,对肾功能损害较小,其机理可能与有效抑制黄嘌呤氧化酶活性有关。     

HPLC法测定秦皮中香豆素类成分的含量

秦皮为常用中药，《神农本草经》列为上品。《中华人民共和国药典》2000年版一部规定秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance、白蜡树F．chinensis Roxb．、尖叶白蜡树F．szaboana Lingelsh．或宿柱白蜡树F．stylosa Lingelsh．的干燥枝皮或干皮。本实验对苦枥白蜡树树皮进行了研究，从中分离到5种香豆素类成分，并进行了结构鉴定，它们是秦皮乙素(I)、秦皮素(Ⅱ)、6，7-二甲氧基-8-羟基香豆素(Ⅲ)、秦皮苷(IV)、秦皮甲素(V)，化合物Ⅱ～IV为首次从该植物中获得。对上述成分的提取、分离、鉴定已在秦皮化     

秦皮总香豆素降低小鼠急性高尿酸血症血尿酸水平及机理研究

目的:研究秦皮总香豆素对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响,并初步探讨其作用机理。方法:采用氧嗪酸钾腹腔注射复制小鼠急性高尿酸血症模型,给予不同剂量秦皮总香豆素(440、220、110mg/kg),观察高尿酸血症小鼠血清尿酸水平及肝脏黄嘌呤氧化酶、鸟嘌呤脱氢酶和腺嘌呤脱氢酶水平。结果:秦皮总香豆素组小鼠的血清尿酸值明显低于模型组,其中以大、中剂量组为佳;对黄嘌呤氧化酶的活性有明显的抑制作用;而对小鼠鸟嘌呤脱氢酶和腺嘌呤脱氢酶的影响无统计学意义。结论:秦皮总香豆素能明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平,其机理可能和抑制黄嘌呤氧化酶的活性有关。     

秦皮药材HPLC指纹图谱研究

目的：建立秦皮药材的指纹图谱，为科学评价秦皮质量提供参考依据。 方法：采用高效液相色谱技术，Agilent Extend C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm )，甲醇-0.4% 醋酸水溶液梯度洗脱，检测波长0～60 min，340 nm；60～74 min，254 nm；74～75 min，340 nm，柱温40 ℃，流速1.5 mL·min-1。4个品种药材各测定10批，分别建立指纹图谱。结果：指纹图谱研究的各项参数均符合有关规定， 苦枥白蜡树10批药材有15个共有峰，尖叶白蜡树10批药材有11个共有峰，白蜡树10批药材有11个共有峰，宿柱白蜡树10批药材有19个共有峰，秦皮药材40批药材有5个共有峰，与对照图谱相比较，每个品种药材指纹图谱相似度均在0.96以上。40批秦皮药材指纹图谱相似度大于0.90，40批药材中检测出4个有效成分(秦皮甲素，秦皮乙素，秦皮苷，秦皮素)及1个未知成分。结论：建立了苦枥白蜡树树皮，白蜡树树皮，尖叶白蜡树树皮，宿柱白蜡树树皮指纹图谱及秦皮药材的指纹图谱，方法学考察结果符合指纹图谱技术要求。     

浊点萃取HPLC法测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量

目的:建立浊点萃取高效液相色谱法测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素含量的方法。方法:选择以表面活性剂Genapol X-080作为萃取剂,考察了表面活性剂浓度、液固比、盐浓度、平衡温度、平衡时间等因素对萃取结果的影响。结果:获得最佳萃取条件为Genapol X-080的质量浓度为0.18 g·m L-1,液固比定为100∶1,盐浓度1.5 mol·L-1,平衡温度60℃,平衡时间35 min。结论:浊点萃取是一种安全、高效、简便的样品处理方法。在最佳条件下,秦皮甲素和秦皮乙素的加样回收率分别为95.3%,96.0%,RSD分别为2.3%,2.1%。利用此方法成功测定了秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量。     

Comparison on HPLC Fingerprints between Fraxini Cortex and Its Eye Drop

Objective To compare the HPLC fingerprints of Fraxini Cortex and its eye drop.Methods Using esculin and esculetin as reference substances,HPLC method was established for fingerprint chromatography of Fraxini Cortex and its eye drop.The similarity was analyzed by similarity evaluation and system cluster analysis.Results For Fraxini Cortex,eight peaks were separated,among which four common peaks were obtained;for eye drop,eleven peaks were separated including six common peaks.Similarities of both fingerprints were good.Cluster analysis further showed that different sources resulted in the variance of ingredients in crude drug.Both materials and eye drop had some common peaks such as esculin and esculetin,on the other hand,they had some different peaks which might be caused by extracting process.Conclusion HPLC fingerprint chromatogram could be applied for the quality control of Fraxini Cortex and its preparations;the pharmaceutical process may be responsible for the variance of ingredients.     

秦皮醇提物对亚急性衰老小鼠的抗衰老作用

目的:观察秦皮醇提物(EEFC)对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用。方法:将ICR小鼠60只随机分为空白组(生理盐水100 mg·kg-1),模型组(D-半乳糖100 mg·kg-1),阳性药维生素E组(D-半乳糖100 mg·kg-1+维生素E30 mg·kg-1),EEFC低剂量组(D-半乳糖100 mg·kg-1+秦皮醇提物37.5 mg·kg-1)、中剂量组(D-半乳糖100 mg·kg-1+秦皮醇提物75 mg·kg-1)和高剂量组(D-半乳糖100 mg·kg-1+秦皮醇提物150 mg·kg-1),每组10只。连续ig给药60 d,末次给药后摘眼球取血,之后取脑、胸腺、脾脏、肝、皮肤,测定脑、胸腺、脾脏的脏器指数;测定血清、脑、肝、皮肤超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)。结果:模型组的脑、胸腺、脾脏指数比空白组明显降低(P<0.05,P<0.01),小鼠血清、肝脏、皮肤、脑模型组T-AOC,SOD,CAT的值与空白组明显降低,MDA升高。秦皮醇提物各剂量组与模型组相比,高剂量组的脑、胸腺、脾脏质量指数显著增加(P<0.05,P<0.01)。秦皮醇提物组血清、脑组织、肝和皮肤中的SOD,CAT活性均显著增强(P<0.05,P<0.01),MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),T-AOC显著增强(P<0.05,P<0.01),血清和皮肤中的GSH-Px活性显著增强(P<0.05,P<0.01)。结论:秦皮醇提物具有延缓D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的衰老作用。     

秦皮提取物中香豆素类成分含量测定方法研究

目的分别建立秦皮提取物总香豆素和4种主要香豆素成分紫外分光光度法(UV)和高效液相色谱法(HPLC)含量测定方法。方法采用UV,以秦皮甲素为对照品,在334 nm测定秦皮提取物总香豆素的含量;采用HPLC,用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.01%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,在334 nm测定秦皮提取物中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素4种主要香豆素成分的含量。结果秦皮甲素的质量浓度在5.76~23.04μg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.6%(RSD=1.8%);4种香豆素成分秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的质量分别在0.055 0~3.850 0μg(r=0.999 7)、0.053 9~3.773 0μg(r=0.999 8)、0.060 0~0.660 0μg(r=0.999 9)、0.056 2~0.618 2μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.97%(RSD=1.26%)、100.80%(RSD=2.22%)、99.04%(RSD=2.47%)、98.77%(RSD=1.94%)。结论 2种含量测定方法简便、准确、可靠,可用于秦皮提取物总香豆素和主要香豆素成分的质量控制。     

HPLC法测定秦皮中秦皮甲素,秦皮乙素的含量

采用高效液相色谱法测定中药秦皮中泰皮甲素、秦皮乙素的含量．固定相为十八烷基硅烷健合硅胶柱，流动相为甲醇—水（24：76），检测波长348nm．浓度在16μg／ml～176μg／ml范围内线性关系良好，相关系数分别为0．9995，0．9994，加样回收率秦皮甲素99．1±1．5％（n=5），秦皮乙素99．8±2．5％（n=5）。本方法日内精密度和日间精密度分别为0．8％和6．2％．该方法简便、快速、准确。     

秦皮及其3种混淆品的鉴定研究

目的 通过对秦皮的生药学研究，为该药的鉴定及正确使用提供科学依据。方法 显微鉴别法、薄层色谱法、HPLC法。结果 秦皮正品与混淆品在显微、荧光、薄层、HPLC色谱图方面均有区别。结论 为正确鉴定秦皮及混淆品提供科学依据。     

秦皮的药理作用研究进展

秦皮(Cortex Fraxini)为常用中药，种类繁多，资源丰富，价格低廉，具有多种药理活性，且临床应用范围广，是极其重要并有很大开发利用价值的道地中药材。现代药理研究表明，秦皮具有抗病原微生物作用、抗炎镇痛作用、抗肿瘤作用、抗氧化作用以及神经保护和血管保护等作用。临床上秦皮主要用于治疗多种炎症、细菌性痢疾等疾病，并可用于清热解湿、止咳平喘。作者对秦皮的药理作用及其临床应用的国内外最新研究现状作一综述，为我国道地药材秦皮的新药开发研究提供参考。     

UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分

目的:建立UPLC同时测定秦皮配方颗粒中7种成分(秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯)的方法,比较不同厂家及批次秦皮配方颗粒中7种成分含量的差异,为秦皮配方颗粒的科学质量控制提供依据。方法:采用Waters超高效液相色谱仪,Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~1 min,5%~10%A;1~10 min,10%~12%A),流速0.4 m L·min~(-1),进样量2μL,柱温38℃,检测波长220 nm。结果:色谱峰纯度结果表明方法专属性良好。秦皮甲素、毛柳苷、秦皮乙素、丁香苷、秦皮苷、秦皮素和东莨菪内酯分别在各自范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.0%(RSD 2.0%),99.5%(RSD2.1%),99.9%(RSD 1.5%),99.7%(RSD 2.2%),99.4%(RSD 1.4%),100.8%(RSD 1.8%),99.4%(RSD 2.6%)。结论:该方法简便、准确,适用于秦皮配方颗粒中7种成分的同时定量测定,分析时间明显缩短,并对秦皮配方颗粒中除秦皮甲素和秦皮乙素之外的多种成分首次进行了定量测定,不同厂家及批次的秦皮配方颗粒主要成分含量存在一定的差异。