Beclin1和LC3在口腔鳞状细胞癌“瘤芽”中的表达及其与颈淋巴转移的关系

目的探讨口腔鳞状细胞癌(简称鳞癌)"瘤芽"的自噬活性变化及其与颈淋巴转移的关系。方法应用免疫组化染色检测34例口腔鳞癌组织及"瘤芽"中自噬启动基因Beclin1和自噬标记蛋白LC3的表达,结合临床病理资料分析其表达与颈淋巴转移的关系。数据分析采用SPSS 19.0统计软件,计数资料之间比较采用卡方检验。结果 Beclin1和LC3在癌旁非肿瘤上皮、癌组织和"瘤芽"中的表达呈递减趋势,组间差异有统计学意义(P<0.05);有颈淋巴结转移和无颈淋巴结转移口腔鳞癌"瘤芽"的LC3表达差异有统计学意义(P=0.008),"瘤芽"中Beclin1和LC3表达水平较低的患者颈淋巴转移率较高;在TNM分期中,Ⅲ~Ⅳ期口腔鳞癌"瘤芽"的LC3表达水平显著低于Ⅰ~Ⅱ期口腔鳞癌"瘤芽"(P=0.002);但不同分化程度口腔鳞癌"瘤芽"的Beclin1和LC3表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论口腔鳞癌"瘤芽"自噬活性低于癌组织和癌旁非肿瘤上皮,"瘤芽"自噬水平越低,越容易发生颈淋巴转移,进一步证明降低自噬可以促进口腔鳞癌的颈淋巴转移。     

Ki-67、 PI3K、 Beclin1在口腔鳞癌组织中的表达及意义

目的：检测Ki-67、磷酸肌醇-3-激酶（PI3K）、Beclin1在口腔鳞癌组织中的表达及意义。方法：选取2017年1月—2018年12月南京市口腔医院收治的口腔鳞癌患者30例,取所有手术切除癌组织及癌旁组织标本,进行免疫组织化学染色处理,并检测Ki-67、PI3K、Beclin1的表达,采用Pearson分析TMSG-1、Ki-67、Pgp1之间的相关性。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果：口腔鳞癌癌组织中Ki-67、PI3K阳性表达率显著高于癌旁组织,Beclin1阳性表达率显著低于癌旁组织（P<0.05）。Ki-67、PI3K、Beclin1在高分化口腔鳞癌中的阳性表达率显著高于中分化、低分化口腔鳞癌（P<0.05）。Ki-67、PI3K在有淋巴结转移的口腔鳞癌中的阳性表达率显著高于无淋巴结转移的口腔鳞癌,Beclin1在有淋巴结转移的口腔鳞癌中的阳性表达率显著低于无淋巴结转移的口腔鳞癌（P<0.05）。Ki-67、PI3K、Beclin1在Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ+Ⅳ期口腔鳞癌中的阳性表达率无统计学差异（P>0.05）。Ki-67与PI3K的表达呈正相关（r=0.391,P=0.032）,Ki-67与Beclin1的表达呈负相关（r=-0.525,P=0.02）,Beclin1与PI3K的表达呈负相关（r=-0.367,P=0.045）。结论：Ki-67、PI3K、Beclin1的表达具有相关性,与患者有无淋巴结转移、病理分期有关,可能参与口腔鳞癌发生与发展。     

Beclin1和LC3在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中的表达和意义

目的:探讨自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白LC3表达和腮腺肿瘤之间的关系。方法:用免疫组化方法检测20例正常腮腺组织、37例腮腺多形性腺瘤、41例癌在多形性腺瘤中Beclin1和LC3的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:Beclin1在正常腮腺组织、腮腺多形性腺瘤、癌在多形性腺瘤中的阳性率分别为100%、92%、63%;LC3在这3种组织的阳性表达率分别为100%、86%、56%。淋巴结转移及TNM分期与Beclin1的表达间有显著性关系(P<0.05),不同侵袭性、有无淋巴结转移与LC3的表达间有显著性关系(P<0.05)。结论:Beclin1和LC3在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中表达下调,自噬功能改变可能在腮腺肿瘤形成中具有一定作用。     

口腔鳞状细胞癌中RhoA的表达及作用

目的探讨口腔鳞状细胞癌组织及其转移灶、癌旁组织、增生鳞状上皮和正常口腔黏膜中RhoA的表达及其意义。方法采用免疫组化检测40例口腔鳞状细胞癌,RT-PCR技术分析口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织、口腔鳞状细胞癌转移灶、鳞状上皮增生和正常口腔黏膜组织中RhoA的表达情况。结果RhoA在非癌组织均不表达或弱表达,40例口腔鳞癌中25例表达RhoA,阳性率为62.50%;两者之间具有显著差异(P<0.05)。低分化鳞癌中RhoA的阳性率为66.67%,中、高分化鳞癌中RhoA的阳性率为60.71%;两者之间有统计学差异(P<0.05)。16例有淋巴结转移的鳞癌组织中13例表达RhoA,阳性率为81.25%,24例无淋巴结转移的鳞癌组织中12例表达RhoA,阳性率为50%;两者之间有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR检测RhoA mRNA的表达水平,鳞癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于癌旁组织、增生鳞状上皮和正常口腔黏膜组织(P<0.01),低于转移灶(P<0.05)。结论RhoA的表达与鳞状细胞癌分化程度、转移程度有关,有望作为鳞状细胞癌预后和转移的参考指标。     

TGF-β1和Smad7在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad7在口腔鳞状细胞癌(OSCC)、正常口腔黏膜组织中的表达和意义。方法通过免疫组织化学SP法检测TGF-β1、Smad7在31例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常口腔黏膜组织中的表达,探讨TGF-β1、Smad7在口腔鳞状细胞癌中的表达及相关性因素。结果 TGF-β1、Smad7在口腔鳞状细胞癌中的阳性率高于正常口腔黏膜组织(P<0.05),二者在口腔鳞癌有淋巴结转移组的表达率明显高于无淋巴结转移组的表达率(P<0.05),二者在口腔鳞癌TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期中的阳性表达率低于Ⅲ+Ⅳ期的阳性表达率(P<0.05),与患者年龄和性别无关。TGF-β1和Smad7在口腔鳞癌中的表达呈显著正相关(r=0.379,P<0.05)。结论 TGF-β1、Smad7在口腔鳞状细胞癌组织中呈过表达,可能作为判断口腔鳞状细胞癌预后的指标。     

在口腔鳞状细胞癌中Pokemon、Ku70的表达及临床病理学意义的研究

目的：研究口腔鳞状细胞癌组织中Pokemon、Ku70的表达及其临床病理学意义。方法：采用免疫组化En-vision二步法检测Pokemon、Ku70在47例口腔鳞状细胞癌组、20例正常口腔黏膜组中的表达。结果：1）Pokemon在口腔鳞状细胞癌组及正常口腔黏膜组中阳性表达率分别为：68.1%（32/47）、25.0%（5/20）,P〈0.05。高分化组与中低分化组Pokemon的阳性表达率分别为45.0%、85.2%（P〈0.05）。不同TNM的口腔鳞状细胞癌组织中,Ⅰ期＋Ⅱ期组、Ⅲ期＋Ⅳ期组Pokemon的阳性表达率分别为88.0%、45.5%（P〈0.05）。有淋巴结转移组、无淋巴结转移组Pokemon的阳性表达率分别为86.7%、35.5%（P〈0.05）。2）Ku70在口腔鳞状细胞癌组及正常口腔黏膜组中阳性表达率分别为：61.7%（29/47）、30.0%（6/20）,P〈0.05。高分化组与中低分化组Ku70的阳性表达率分别为55.0%、66.7%（P〉0.05）。不同TNM分期的口腔鳞状细胞癌组织中,Ⅰ期＋Ⅱ期组、Ⅲ期＋Ⅳ期组Ku70的阳性表达率分别为72.0%、50.0%（P〉0.05）。有淋巴结转移组、无淋巴结转移组Ku70的阳性表达率分别为73.3%、35.5%（P〈0.05）。结论：提示Pokemon及Ku70在口腔鳞状细胞癌发生发展中起重要作用;Pokemon与Ku70可能成为判定口腔鳞状细胞癌预后的生物标志物。     

SMAD4在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的检测SMAD4在舌鳞状细胞癌中的表达水平,并分析其与肿瘤细胞分化程度及淋巴结转移之间的相关性。方法收集正常口腔黏膜组织石蜡标本8例、舌鳞癌组织石蜡标本38例。采用免疫组化方法检测正常组织及肿瘤组织中SMAD4表达水平。结果 SMAD4蛋白在舌鳞癌组织中的表达显著低于正常舌黏膜组织(P<0.05)。SMAD4蛋白在癌细胞中的整体表达水平在高分化鳞癌与中低分化鳞癌组中无明显统计学差异(P>0.05),但其核表达量在高分化鳞癌组显著高于中低分化组(P<0.05)。伴淋巴结转移鳞癌组中SMAD4在细胞核内的表达量低于不伴淋巴结转移鳞癌组(P<0.05)。结论SMAD4在舌鳞状细胞癌中的表达水平,尤其是核表达水平与舌鳞癌的细胞分化程度及淋巴结转移相关。     

自噬相关蛋白LC3Av1在口腔鳞状细胞癌中表达及甲基化对其的影响

目的:检测自噬相关基因LC3Av1在口腔鳞状细胞癌中的表达,及甲基化对表达的影响,初步探讨自噬与口腔肿瘤发生的关系。方法:提取18株口腔鳞癌细胞系的总RNA,检测LC3Av1的转录水平表达。并采用COBRA法检测LC3Av1启动子区域CpG岛的甲基化程度。结果:LC3Av1在18株口腔鳞癌中仅有3株表达(表达率为16.7%),而LC3B全部表达。有17株LC3Av1可检测出甲基化。结论:在口腔鳞癌中LC3Av1表达水平降低,提示口腔鳞癌的发生可能与LC3Av1依赖的细胞自噬障碍有关,其表达缺失可能与高甲基化相关。     

口腔鳞癌中MMP-1、MMP-2、uPA的表达与肿瘤侵袭和转移的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶-1、2(MMP-1、MMP-2)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)在口腔鳞癌中的表达及与肿瘤侵袭和转移的关系。方法:采用免疫组织化学通用型两步法检测80例口腔鳞癌患者的癌旁正常组织和癌组织中MMP-1、MMP-2、uPA的表达。结果:口腔鳞癌组织中MMP-1、MMP-2、uPA的表达明显高于口腔癌旁正常组织(P<0.05)。中低分化鳞癌中MMP-1的表达明显高于高分化鳞癌(P<0.05),高分化鳞癌中MMP-1的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05);高分化鳞癌与中低分化鳞癌中MMP-2、uPA的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05),高分化鳞癌与中低分化鳞癌中MMP-2、uPA的表达水平基本一致(P>0.05)。MMP-1的表达与口腔鳞癌的T分期、生长部位无明显的相关性,与生长方式、病理学分级、临床分期、淋巴结状况有明显的正相关性(r分别是0.363、0.375、0.479、0.506);MMP-2的表达与口腔鳞癌的生长方式、生长部位、病理分级无明显的相关性,与T分期、临床分期、淋巴结状况有明显的正相关性(r分别是0.300、0.552、0.626);uPA的表达与口腔鳞癌的生长部位、病理分级无明显的相关性,与T分期、生长方式、临床分期、淋巴结状况有明显的正相关性(r分别是0.292、0.279、0.525、0.524)。结论:MMP-1、MMP-2、uPA的表达与口腔鳞癌的侵袭、转移关系密切,有望在临床上成为判断侵袭、转移指标。MMP-1是口腔鳞癌颈淋巴结转移的危险因子。     

自噬相关蛋白PTEN、MAP1LC3在舌癌中的表达与意义

目的 探讨自噬相关蛋白人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and ten-sinhomology deleted on chromosome ten,PTEN)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3)在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)、癌前病变及癌旁组织中的表达及相关性,探讨其与TSCC发生、发展及转移的关系.方法 采用免疫组化SP法检测46例TSCC手术标本及13例癌前病变、13例癌旁组织标本中PTEN、MAP1LC3的蛋白表达,分析其与临床病理特征间的关系.结果 PTEN(X2=9.905,P=0.007)、MAP1LC3(X2=9.577,P=0.008)在TSCC组织、癌前病变、癌旁组织中的蛋白表达差异有统计学意义.在TSCC中,PTEN蛋白的阳性表达率(34.78%)明显低于癌旁组织(69.23%,X2=4.926,P=0.026)及癌前病变组织(76.92%,X2=7.302,P=0.007);MAP1LC3蛋白的阳性表达率(28.26%)明显低于癌旁组织(61.53%,X2=4.896,P=0.027)及癌前病变组织(69.23%,X2=7.275,P=0.007),差异均有统计学意义.PTEN与MAP1LC3蛋白表达与患者年龄、性别、吸烟、饮酒、细胞分化无关(P>0.05).颈淋巴结从无转移到转移以及临床分期越晚,PTEN蛋白及MAP1LC3蛋白的阳性表达率降低,差异有统计学意义(P<0.05).PTEN和MAP1LC3两种蛋白在复发组中阳性表达率皆较低,复发组与非复发组PTEN的蛋白表达差异有统计学意义(X2=4.269,P=0.039),而复发组与非复发组MAP1LC3的蛋白表达差异尚无统计学意义(X2=0.343,P=0.453).PTEN与MAP1LC3蛋白阳性表达呈正相关.结论 自噬相关蛋白PTEN与MAP1LC3的低表达与TSCC的临床病理特征相关,对TSCC的诊断与预后有一定参考价值.     

4-1BBL在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:研究4-1BBL在口腔鳞癌组织和炎症组织中的表达特征。方法:PCR、Real-time PCR、免疫组化检测4-1BBL mRNA和蛋白在口腔鳞癌组织、炎症组织和正常黏膜组织中的表达。结果:PCR 结果显示4-1BBL在口腔鳞癌组织、炎症组织和正常黏膜组织中均有表达,并且Real-time PCR结果显示:与正常组织组比较,口腔鳞癌组4-1BBL mRNA表达量为其2.2106倍,(P<0.05);炎症组织为其1.1151倍,也高于正常组织组(P<0.05);在不同分化期的口腔鳞癌中,高分化组是中分化组的1.516倍(P<0.05),同时也显著高于低分化组(P<0.05)。免疫组化结果:与正常组织比较,鳞癌组织4-1BBL表达显著增高;炎症组织4-1BBL表达介于正常组和鳞癌组之间。同时4-1BBL在不同分化程度的鳞癌组织中,其表达随分化程度的增高而增强。结论:口腔鳞癌组织4-1BBL mRNA和蛋白表达显著高于正常组织和炎症组织;且其表达随分化程度的升高而增强。     

Stat3在口腔疣状癌和鳞癌中的表达

目的:研究信号传导与转录激活因子3(Stat3)基因在口腔疣状癌和鳞癌中mRNA的表达.方法:将30名患者根据其病理结果分为3组:疣状癌组(n=10)、高分化鳞癌组(n=15)和中低分化鳞癌组(n=5).采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)对3组患者的癌组织、正常组织Stat3基因mRNA的表达进行检测.结果:疣状癌组癌组织、配对正常组织Stat3基因mRNA的表达差异无显著性(P＞0.05);而高分化鳞癌组和中低分化鳞癌组癌组织Stat3基因mRNA的表达明显低于配对正常组织(P＜0.05).其中,疣状癌组与高分化鳞癌组癌组织Stat3 mRNA的表达明显低于中低分化鳞癌组(P＜0.05);而疣状癌组与高分化鳞癌组的癌组织Stat3 mRNA的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:Stat3基因在口腔鳞癌中表达有增高,在疣状癌中的表达无明显增高.在中低分化鳞癌中的表达显著高于疣状癌和高分化鳞癌.     

RB1CC1在人和小鼠口腔癌发生发展中表达的比较研究

目的:比较视网膜母细胞瘤RB1-诱导卷曲蛋白1(RB1CC1)在人和小鼠正常口腔黏膜、上皮异常增生组织及口腔鳞状细胞癌中的表达,并探讨其在口腔癌发生发展过程中的作用。方法:采用免疫组化和RT-PCR检测人及小鼠在正常口腔黏膜、上皮异常增生、高分化鳞癌原发灶组织中RB1CC1蛋白及基因的表达情况。结果:RB1CC1蛋白在人上皮异常增生组、高分化鳞癌组的阳性表达高于正常组(P<0.05);RB1CC1蛋白在鼠正常组、异常增生组、高分化鳞癌组阳性表达逐渐增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。人RB1CC1 mRNA的表达量在异常增生组与高分化鳞癌组无明显差异,正常口腔黏膜组均高于异常增生组与高分化鳞癌组(P＜0.05);小鼠RB1CC1 mRNA的表达量在正常口腔黏膜组与异常增生组、高分化鳞癌组差别无统计学意义。结论:RB1CC1表达在人和小鼠相似, RB1CC1可能参与了口腔鳞癌的早期癌变过程。     

PTTG和bFGF在口腔鳞癌中的表达及意义

目的：探讨垂体肿瘤转化基因（pituitary tumor transforming gene，PTFG）和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）在口腔鳞癌中的表达及相互关系，研究它们的表达与肿瘤临床病理指标的联系。方法：应用SP染色法检测PTTG蛋白和bFGF在55例口腔鳞癌组织、10例正常口腔黏膜组织中的阳性率。结果：在口腔鳞癌中PTTG和bFGF的阳性表达率分别为78．2％和67．3％，其阳性率及表达等级均显著高于正常对照组（P〈0．05）。PTTG在中一低分化组和有淋巴结转移组中的表达显著高于高分化组和无淋巴结转移组（P〈0．05）。PTTG表达与bFGF表达成等级正相关（r=0．382，P〈0．05）。结论：PTFG或bFGF与口腔鳞癌生物学行为及预后有密切关系，二者的联合检测，有助于口腔鳞癌恶性程度和预后的判断。     

Lasp1 mRNA和蛋白在口腔鳞癌组织中表达上升及其临床意义

目的：探讨Lasp1基因与蛋白质水平在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织标本中的表达及其临床意义。方法：分别采用荧光实时定量RT-PCR和免疫组织化学方法,检测Lasp1在30例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织标本中mRNA和蛋白质表达水平,其表达水平与临床病理指标之间的关系采用SPSS10.0软件包进行统计分析。结果：口腔鳞癌组织标本中Lasp1 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于癌旁组织（P〈0.01）。Lasp1蛋白在临床晚期、淋巴结转移阳性病例中表达明显升高,与烟酒嗜好、肿瘤大小及肿瘤分化程度无关。结论：Lasp1在口腔鳞状细胞癌中表达上调,可能与肿瘤的发生、发展和淋巴结转移有关,可以作为一个潜在的生物标志物和治疗的靶标。     

OPN和MMP-3在口腔鳞癌组织中的表达及意义

目的　研究骨桥蛋白（OPN）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）在口腔鳞癌组织中的表达、临床意义及相关性。方法　采用免疫组化法检测60例口腔鳞癌组织、30例正常口腔黏膜组织中OPN、MMP-3的表达情况,分析病理特征及相关性。结果　(1)口腔鳞癌组织中OPN及MMP-3阳性表达率分别为68.0%和75.0%,与正常口腔黏膜组相比较差异有统计学意义(P＜0.05);(2)OPN及MMP-3在口腔鳞癌中的表达与颈淋巴结转移程度、肿瘤分化程度、临床分期有关（P＜0.05）;（3）口腔鳞癌组织中OPN及MMP-3的表达呈正相关,且Spearman相关系数=0. 269(P＜0.05)。结论　OPN、MMP-3 在口腔鳞癌中均高表达,与口腔鳞癌的发生、发展密切相关,且在口腔鳞癌的发生、发展过程中它们的高表达具有协同作用,有可能为口腔鳞癌的早期诊断、判断预后以及靶向治疗提供依据。     

Survivin在口腔鳞癌组织中的表达及其与COX-2相关性研究

目的:探讨凋亡抑制基因Survivin在口腔鳞癌组织中的表达及其与COX-2表达的相关性。方法:运用S-P免疫组化技术,检测Survivin和COX-2蛋白在50例口腔鳞癌组织、10例正常口腔黏膜组织中的阳性率。结果:Survivin蛋白在10例正常口腔黏膜组织中呈阴性,而在50例口腔鳞癌组织中有42例阳性,占84%,差异有极显著性差异(P<0.01),COX-2蛋白在口腔鳞癌组织中的阳性率为86%(43/50)。Survivin蛋白阳性率与年龄和性别不相关,而与COX-2蛋白阳性呈正相关(P<0.05)。Survivin蛋白在低分化癌组织中的表达比在高分化癌中高,但在统计学上无明显差异性。结论:肿瘤组织中Survivin蛋白的高阳性表达对口腔鳞癌的发生发展起重要作用;COX-2蛋白在口腔鳞癌组织中也有高阳性表达,并与Survivin有相关性。两者可能存在共同的激活机制,从而抑制口腔鳞癌细胞的凋亡。     

口腔鳞癌组织CK17蛋白与mRNA水平的表达及其临床意义

目的：探讨口腔鳞癌组织标本中细胞角蛋白17（cytokeratin 17,CKl7）的蛋白与基因水平的表达及其临床意义。方法：在30例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织标本中,分别采用免疫组织化学和荧光实时定量RT—PCR方法,检测CKl7的蛋白表达和mRNA水平,并与各临床病理指标进行统计学分析,采用SPSSIO．0软件包对数据结果进行统计分析。结果：口腔鳞癌组织标本中CKl7蛋白和mRNA表达水平均显著高于癌旁组织（P〈0．01）。CKl7的表达水平与烟酒嗜好、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、病理分化程度无显著相关性。结论：口腔鳞癌组织中CKl7蛋白质和mRNA表达上升,提示其与肿瘤的发生、发展具有一定关系。     

口腔鳞癌中RHAMM Mrna的表达研究

目的:探讨细胞内透明质酸结合受体(RHAMM )基因在口腔鳞癌中的表达及其意义。方法:选取14例口腔高分化鳞癌和4例口腔中分化鳞癌,并取自身的癌旁黏膜和正常口腔黏膜作对照。采用逆转录多聚酶链式反应(RT PCR)技术分别检测上述标本RHAMM的mRNA相对含量。结果:RHAMM基因在口腔高分化鳞癌的癌组织、癌旁黏膜及正常黏膜中都有不同程度的表达,其中癌组织表达量高于正常黏膜和癌旁黏膜(P <0 .0 5 ) ,正常黏膜和癌旁黏膜比较,无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论:RHAMM基因可能参与了口腔鳞癌的形成、进展和转移。