肾小球系膜细胞白细胞介素-6基因表达与白细胞介素-13的关系

目的探讨白细胞介素-13(IL-13)对于体外培养大鼠系膜细胞白细胞介素-6(IL-6)分泌及其基因表达的影响,以研究IL-13对肾小球疾病状态下肾脏系膜细胞炎症反应的抑制作用。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)测定系膜细胞IL-6分泌量,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞IL-6mRNA表达。结果正常培养条件下系膜细胞IL-6mRNA表达及IL-6分泌水平较低,脂多糖(LPS)可刺激系膜细胞IL-6mRNA的表达及IL-6分泌水平,而IL-13则呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞IL-6分泌及其mRNA表达。结论IL-13抑制LPS诱导的体外培养的系膜细胞IL-6产生,故可能对于肾小球疾病状态下肾脏的系膜细胞炎症反应具有抑制作用。     

白细胞介素-13对肾小球系膜细胞炎症细胞因子基因表达的影响

白细胞介素 (ＩＬ) 13是一种多效性的Ｔｈ2 细胞因子 ,能抑制脂多糖 (ＬＰＳ)诱导的外周血单核 /巨噬细胞炎症介质如ＩＬ 1β、ＩＬ 6、肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ) α、ＩＬ 2、ＩＬ 8和细胞间黏附分子 (ＩＣＡＭ)等[1] 。肾小球系膜细胞可表达ＴＮＦ α及ＩＬ 6等。目前ＩＬ 13对系膜细胞的作用国内外尚缺乏研究。我们观察了ＩＬ 13对体外培养的肾小球系膜细胞炎症细胞因子ＴＮＦ α及ＩＬ 6表达的影响 ,以探索肾小球肾炎的发病机制。一、材料与方法1.大鼠系膜细胞培养 :选取体重 10 0～ 12 0ｇ、2～ 3月龄的雄性ＳＤ大鼠 ,参考Ｌｏｖｅｔｔ…     

脂氧素A4抑制肿瘤坏死因子-α刺激系膜细胞增殖的机制研究

目的:研究脂氧素A4(LXA4)拮抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对肾小球系膜细胞的促增殖作用,并探讨其信号转导机制.方法:对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞,用不同浓度的LXA4预刺激,再加入TNF-α共同孵育;或单用TNF-α刺激系膜细胞.在孵育后用MTT渗入法检测肾小球系膜细胞增殖程度;用Western blot检测细胞周期素E、308位苏氨酸(Thr)磷酸化的蛋白激酶Akt1及细胞周期负调控蛋白p27Kip1表达量.结果:LXA4呈剂量依赖性地抑制TNF-α诱导的肾小球系膜细胞增殖与细胞周期素E的蛋白表达,并拮抗TNF-α诱导的肾小球系膜细胞中Akt1的磷酸化与p27kip1表达的下调.结论:LXA4能够拮抗TNF-α对肾小球系膜细胞的促增殖效应,其拮抗机制可能由Akt1/P27kip1信号转导途径所介导.     

慢性肾小球肾炎与细胞因子含量表达的相关性

目的探讨慢性肾小球肾炎发病与机体内细胞因子含量表达的相关性。方法应用酶联免疫吸附实验双抗体夹心法检测慢性肾小球肾炎患者血浆中转化生长因子(TGF)-β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β及IL-6的含量表达。并进行肾脏B超检查,详细记录肾脏形态学改变。结果 TGF-β、TNF-α、IL-1β、IL-6含量表达水平明显升高,与肾功能损害程度呈正相关。结论慢性肾小球肾炎患者血浆中炎症细胞因子含量表达水平与疾病的发生发展密切相关。临床上通过阻断炎症细胞因子的生物学效应可改善或减轻慢性肾小球肾炎患者肾功能损害。     

巨噬细胞与糖尿病肾病

糖尿病肾病是一种慢性炎性疾病,而巨噬细胞是重要的炎性细胞,在糖尿病肾病的发生、发展中起重要作用.血液中的单核细胞在选择素、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及骨桥蛋白等细胞黏附分子或趋化因子作用下经历滚动、黏附、迁移等过程,浸润于肾组织而分化成巨噬细胞,体内持续高血糖等因素使其活化,释放转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-18等细胞因子,促进肾小球系膜细胞分泌细胞外基质及成纤维细胞增殖,引起系膜细胞外基质沉淀、肾小球硬化及间质纤维化等肾损伤,从而促进糖尿病肾病的发展.调控巨噬细胞的浸润与活化可能是防治糖尿病肾病的新途径.     

大鼠急性心肌梗死后心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及辛伐他汀干预研究

目的探讨辛伐他汀对急性心肌梗死(AMI)后大鼠心脏炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达和蛋白质产生的影响。方法Wistar大鼠36只分3组:(1)假手术(Sham)组;(2)心肌梗死对照(MI-C)组;(3)辛伐他汀(MI-S)组。动物笼养4周取出心脏,沿乳头肌等分为二,一半用逆转录聚合酶链反应法测定心脏细胞因子mRNA表达,另一半用Western blot测定细胞因子蛋白质生成量。结果Sham组上述细胞因子均无明显表达,MI-C组TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10 mRNA和蛋白产生均显著高于Sham组;同MI-C组比较,MI-S组的TNF-α,IL-1β,IL-6 mRNA和蛋白生成均显著下降,而IL-10的mRNA和蛋白明显升高。结论辛伐他汀明显降低AMI后大鼠心脏的致炎症细胞因子,而升高炎症保护因子IL-10。     

细胞因子与脑出血

脑出血急性期血肿及其周围组织发牛炎症反应并表达多种细胞因子，如白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等。这些细胞因子在脑出血后血肿周围组织损伤病理过程中起重要作用。IL-1、IL-6和TNF-α具有促进脑水肿和炎症反应作用，1L-10具有抑制炎症反应和神经保护作用。     

活血通腑方对大鼠术后腹腔粘连巨噬细胞细胞因子的影响

目的探讨活血通腑方对大鼠术后腹腔粘连部位白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、精氨酸酶(Arg)-1 m RNA及IL-1、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-13等细胞因子的影响。方法雄性SD大鼠40只采用拙刀法建立腹腔粘连模型,分为模型组、四磨汤组、氟伐他汀组、活血通腑方组各10只,另10只为假手术组。通过粘连评分评价腹腔粘连水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6、TNF-α、Arg-1 m RNA表达水平及酶联免疫吸附试验检测IL-1、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-13细胞因子含量。结果与模型组相比,四磨汤组、氟伐他汀组及活血通腑方组的粘连评分均有不同程度的减轻(P0. 05,P0. 01),其中活血通腑方组和四靡汤组粘连评分降低显著(P0. 01);显著降低IL-6、TNF-α、Arg-1 m RNA表达水平及减少IL-1、IL-6、TNF-α细胞因子含量(P0. 05);显著提高IL-4、IL-10、IL-13细胞因子含量(P0. 05)。结论活血通腑方对大鼠术后腹腔粘连具有抑制作用,可能是通过调控巨噬细胞含量达到防治术后腹腔粘连的作用。     

白介素5受体α链在支气管上皮细胞的表达

目的白介素5(IL-5)作为参与嗜酸粒细胞(EOS)成熟、分化过程的最主要因子,其作用通过特异性受体白介素5受体α链(IL-5Rα)介导。本研究以支气管上皮细胞株为研究对象,发现支气管上皮细胞在炎症因子的刺激下可以表达IL-5Rα。方法通过促炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和Th2型细胞因子IL-4,IL-5,IL-13以及白三烯成分之一的白三烯C4(LTC4)对细胞进行单独或协同刺激,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法、流式细胞检测技术评价上皮细胞对IL-5Rα的基因和蛋白质的表达,同时评价在IL-5和TNF-α的协同刺激下IL-5Rα、细胞内黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的协同表达。结果正常支气管上皮细胞在Th2型细胞因子、LTC4和TNF-α的刺激下可以表达IL-5Rα基因,在TNF-α单独或与其他因子的协同刺激下表达显著增强,更可以表达IL-5Rα蛋白。流式细胞检测分析显示TNF-α单独或协同刺激后16hIL-5Rα蛋白表达最高,并随时间的延长表达下降。当TNF-α与IL-5协同刺激后上皮细胞可以同时表达VCAM-1和IL-5Rα,而ICAM-1呈持续表达。结论本研究通过对支气管上皮细胞的研究证实了支气管上皮细胞可以在炎症因子TNF-α和Th2型细胞因子的协同刺激下进一步表达IL-5特异性受体IL-5Rα,并在IL-5和TNF-α的刺激下进一步表达黏附分子VCAM-1,吸引EOS及其前体细胞浸润至气道参与炎症。说明支气管上皮细胞不仅在支气管哮喘炎症反应中是最主要的受累器官,也是导致炎症的参与者之一。     

生脉散对急性肝衰竭大鼠内毒素诱导抑制性-κBα及细胞因子的影响

目的:探讨生脉散对急性肝衰竭大鼠内毒素(LPS,即大肠杆菌脂多糖)诱导细胞因子水平及大鼠肠道组织抑制性-κBα(I-κBα)蛋白表达的影响.方法:采用D-氨基半乳糖(D-Gal)腹腔注射复制急性肝衰竭大鼠模型,观察LPS诱导2小时及8小时后生脉散对血清内毒素、细胞因子水平及大鼠肠道组织I-κBα蛋白表达的影响.结果:D-Gal能明显增加大鼠血清白细胞介素6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和白细胞介素1β(IL-1β)水平(P＜0.001),随着D-Gal作用时间延长,其增加的趋势明显减弱,但对血清LPS、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平无明显影响(P＞0.05);生脉散能显著降低D-Gal肝衰竭大鼠血清IL-6、ICAM-1和IL-1β水平(P＜0.001,P＜0.05).LPS攻击2小时和8小时,能明显升高D-Gal大鼠血清LPS、TNF-α、IL-6、ICAM-1和IL-1β水平(P＜0.001);除在8小时对TNF-α无影响外(P＞0.05),生脉散能明显减轻LPS攻击D-Gal大鼠后对血清LPS、TNF-α、IL-6、ICAM-1和IL-1β水平的影响(P＜0.001,P＜0.05);采用Western blot方法,检测大鼠肠道组织胞浆蛋白I-κBα表达发现,LPS可调节肠道组织I-κBα蛋白表达,诱导NF-κB激活,生脉散可抑制NF-κB激活.结论:在急性肝衰竭模型中,LPS能增加TNF-α、IL-1β、IL-6和ICAM-1等炎症因子水平,诱导I-κBα表达;生脉散可降低LPS水平,并抑制LPS诱导的炎症因子水平和I-κBα在胞浆内的表达,阻断了炎性介质及LPS本身对机体的损伤.     

老年冠心病抑郁患者血浆白细胞介素-17水平的变化

在炎症反应过程中,细胞因子起着重要的作用,在细胞因子介导作用下,C反应蛋白(CRP)水平增高,导致冠心病的发展.近年研究表明细胞因子在抑郁患者也有改变,Miller等[1]研究发现抑郁患者白细胞介素-6(IL-6)较对照组增加54%;其他升高的炎症因子尚有白细胞介素-1β(IL-1β)[2]、细胞间黏附分子(ICAM-1)[3]及肿瘤坏死因子(TNF-α)[4]等.     

核因子-κB反义寡核苷酸对系膜细胞炎症因子基因表达的影响

目的 :探讨NF κB反义寡核苷酸 (oligodeoxynucleotide ,ODN)对人肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响 ,为利用NF κB反义ODN治疗肾小球炎性病变奠定基础。　 方法 :人工合成p65反义、正义及错配ODN并行全程硫代磷酸化修饰。应用核酸酶保护法观察阳离子脂质体介导的不同浓度的反义ODN(0 0 0 1、0 0 1、0 1、1、1 0μmol/L)对系膜细胞TNF α、IL 1α、IL 1 β、MCP 1、IL 8、TGF β1mRNA表达的影响 ,以正义ODN(1 0 μmol/L)及错配ODN(1 0 μmol/L)作为对照组。　 结果 :正常培养状态下 ,系膜细胞可组成型表达TNF α、IL 1 β、IL 8和TGF β1mRNA ,而不表达IL 1α和MCP 1mRNA。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)刺激后上述 6种炎症因子表达显著上调。p65反义ODN可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞炎性细胞因子TNF α ,IL α,IL 1 β,MCP 1和IL 8的基因表达 ,而对TGF β1无显著抑制作用 ;p65正义及错配ODN均不能抑制炎性细胞因子的表达。　 结论 :p65反义ODN可明显抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞炎性细胞因子的表达 ,提示NF κB在肾小球疾病进展中起关键性调控作用 ,其反义ODN有可能应用于肾脏病变的实验性治疗之中     

泡型肝包虫病患者血清炎症因子的抗体芯片检测及分析

目的应用抗体芯片技术检测并分析泡型肝包虫病患者血清中炎症因子的表达及临床意义。方法选取泡型肝包虫病患者与健康对照组血清标本各3份,利用抗体芯片技术检测血清样品中炎症因子的水平,采用AAH-INF-G3数据分析软件进行分析。结果与对照组比较,泡型肝包虫病患者血清中多种炎症细胞因子(CSF-2/3、IL-1α、IL-2、IL-6、IL-8、IL-12p70、IL-13、IL-15、IL-17A、MCP-1/2、MIG、IFN-γ、TNF-α/β、TGF-β)表达水平发生显著变化(Fold change2,0.5;信号值400)。其中IL-1α、IFN-γ、TNF-α/β等细胞因子升高(2倍以上),IL-12p70、MCP-2等细胞因子下降(3倍以上)。结论免疫调节相关炎症因子可能参与泡型肝包虫病慢性炎症反应,可能是揭示泡型肝包虫病免疫逃逸机制的重要切入点。     

细胞因子与鼻息肉发病的关系

目的探讨鼻息肉发病与机体内炎症细胞因子含量表达的相关性。方法应用酶联免疫吸附实验双抗体夹心法检测鼻息肉患者血浆中转化生长因子(TGF)-β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β及IL-6的表达,分析鼻息肉发病与炎症细胞因子含量的关系。结果鼻息肉患者血浆中TGF-β、TNF-α、IL-1β及IL-6的表达水平明显升高,与鼻中隔偏曲及健康对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论鼻息肉患者血浆中炎症细胞因子表达水平与疾病的发生发展密切相关。     

老年骨质疏松症患者腰椎白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α的免疫组化研究

目的了解白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在骨质疏松症患者腰椎骨中的细胞定位、表达强度及其与骨密度(BMD)的关系.方法用免疫组织化学方法,分别以IL-6、TNF-α单克隆抗体对22例老年骨质疏松症患者腰椎椎板近关节突部松质骨组织中IL-6、TNF-α的表达水平进行检测,并取20例骨密度正常者相同部位骨作对照.结果实验组中IL-6、TNF-α表达呈强阳性,主要表达于成骨细胞和骨髓基质细胞,每高倍视野阳性细胞数分别为(107.9±42.6)个、(99.0±31.8)个;而对照组上述细胞表达呈弱阳性,每高倍视野阳性细胞数分别为(31.4±20.5)个、(28.5±17.1)个,两组比较差异有显著性(P＜0.01).试验组IL-6、TNF-α阳性细胞数随BMD减低而增强(相关系数分别为r1=-0.91,P＜0.01;r2=-0.84,P＜0.01).两组骨细胞IL-6、TNF-α染色均为阴性.结论IL-6、TNF-α作为调节骨代谢的细胞因子在骨质疏松症的发病机制中起一定作用.     

老年蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛患者黏附分子与细胞因子的表达

目的 探讨老年蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)患者黏附分子与细胞因子的表达,以及与脑血管痉挛(CVS)的关系.方法 选择47例老年SAH患者作为病例组并进行功能分级,以及根据是否发生CVS分组;选择同期老年健康体检者40例作为对照组.ELISA法检测血清细胞间黏附分子-1( ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)以及细胞因子包括白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果 病例组与对照组比较,黏附分子( ICAM-1、VCAM-1)和细胞因子(IL-6、TNF-α)的表达都明显增高(P＜0.05);且随着功能恶化,其表达也有升高趋势,以上指标在SAH后CVS组的表达显著高于非CVS组(P＜0.05).病例组中,ICAM-1和IL-6、TNF-α以及VCAM-1和IL-6、TNF-α的表达都呈明显的正相关(P＜0.05).结论 老年SAH发生时,患者血清黏附分子和细胞因子的表达显著增高,并且二者表达有密切的关系,共同参与了SAH病情恶化以及CVS的发生.     

核因子—kB反义寡核苷酸对系膜细胞炎症因子基因表达的影响

目的：探讨NF－kB反义寡核苷酸（oligodeoxynucleotide,ODN)对人肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响，为利用NF－kB反义ODN治疗肾小球炎性病变奠定基础。方法：人工合成p65反义、正义及错配ODN并行全程硫代磷酸化修饰。应用核酸酶保护法观察阳离子脂质体介导的不同浓度的ODN（0．001、0．01、0．1、1、10μmol/L)对系膜细胞TNF－α、IL－1α、IL－1β、MCP－1、IL－8、TGF－β1 mRNA表达的影响，以正义ODN（10μmol/L)及错配ODN（10μmol/L)作为对照组。结果：正常培养状态下，系膜细胞可组成型表达TNF－α、IL－1β、IL－8和TGF－β1 mRNA，而不表达IL－1α和MCP－1 mRNA。细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS)刺激后上述6种炎症因子表达显著上调。p65反义ODN可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞炎性细胞因子TNF－α，IL－α，IL－1β，MCP－1和IL－8的基因表达，而对TGF－β1无显著抑制作用；p65正义及错配ODN均不能抑制炎性细胞因子的表达。结论：p65反义ODN可明显抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞炎性细胞因子的表达，提示NF－kB在肾小球疾病进展中起关键性调控作用，其反义ODN有可能应用于肾脏病变的实验性治疗之中。     

阿托伐他汀钙对扩张型心肌病患者外周血单个核细胞分泌促炎性细胞因子的影响

目的探讨不同浓度的阿托伐他汀钙对脂多糖(LPS)诱导的扩张型心肌病(DCM)心力衰竭患者的外周血单个核细胞(PBMCs)促炎性细胞因子表达的影响.方法选择心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的稳定期DCM患者25例,清晨采外周静脉血并分离出PBMCs,然后用细胞因子刺激剂LPS刺激PBMCs并分别加入终浓度为0、10-7、10-6、10-5mol/L的阿托伐他汀钙培养24h,离心后提取上清液并用放射免疫法测细胞因子白细胞介素-1(IL-1)β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果随着阿托伐他汀钙浓度的增加,PBMCs分泌IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈进行性下降(P＜0.01);10-7、10-6、10-5mol/L阿托伐他汀钙组PBMCs分泌IL-1β、IL-6,TNF-α水平均显著低于0 mol/L组(均P＜0.05);10-5mol/L阿托伐他汀钙组PBMCs分泌IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著低于10-6、10-7mol/L组(均P＜0.05),而10-6mol/L组和10-7mol/L组IL-1β、IL-6、TNF-α水平则差异无统计学意义(均P＞0.05).结论阿托伐他汀钙呈剂量依赖性抑制LPS诱导的DCM患者外周血PBMCs促炎性细胞因子表达增加.这可能是他汀类药物对DCM有益的原因之一.     

急性时相血清淀粉样蛋白A与2型糖尿病颈动脉粥样硬化的关系

目的 探讨2型糖尿病患者急性时相血清淀粉样蛋白A与颈动脉粥样硬化的关系.方法 49例2型糖尿病患者根据颈动脉内中膜厚度(IMT)及斑块分为颈动脉粥样硬化组和无颈动脉粥样硬化组.空腹抽血测糖化血红蛋白(HbAlc)、血脂和炎症细胞因子.结果 颈动脉粥样硬化组C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)比无颈动脉粥样硬化组显著升高(P<0.01).颈动脉粥样硬化组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A-1(ApoA-1)显著降低(P<0.05)和甘油三脂(TG)显著升高(P<0.05)于无颈动脉粥样硬化组.Spearman相关分析显示,BMI、腰围与SAA、IL-6呈显著正相关(P<0.01),与CRP、TNF-α元显著相关性.SAA与TNF-α(P<0.01)、IL-6(P<0.01)显著正相关,而与CRP无相关性.结论 伴有颈动脉粥样硬化的2型糖尿病患者炎症细胞因子血清淀粉样蛋白A明显升高.炎症细胞因子SAA与肥胖和颈动脉粥样硬化密切相关.     

支气管哮喘大鼠单个核细胞Th1/Th2的变化及孟鲁司特的干预作用

CD+4T淋巴细胞的2个功能性亚群Th1/Th2及其产生的细胞因子在支气管哮喘(简称哮喘)气道炎症中起着关键性调控作用.Th1细胞亚群分泌白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等激活巨噬细胞,介导迟发性超敏反应,Th2细胞亚群产生IL-4、5、6、13、10、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)等,诱导嗜酸性粒细胞(EOS)的分化和募集,诱导B细胞免疫球蛋白亚型的转化与IgE的合成.免疫学上一般以IFN-γ和IL-4分别作为Th1和Th2细胞的特征性细胞因子,故我们检测哮喘大鼠和正常大鼠外周血单个核细胞(PBMC)产生这2种细胞因子的水平,以反映Th1/Th2的极化状态,并观察孟鲁司特(MK)对其功能状态的影响.