实验性重症肌无力大鼠模型的研究

目的 从丁氏双鳍电鳐的电器官分离乙酰胆碱受体(AChR)免疫大鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型.方法 参照徐氏法从丁氏双鳍电鳐的电器官提取AChR蛋白,并采用Folin-酚试剂法及酶联免疫吸附法检测提取蛋白的含量及活性;以提取的蛋白主动免疫Lewis大鼠,每天观察其临床表现,并于免疫后7周进行低频重复电刺激、单纤维肌电图及血清中AChRAb水平的检测.结果 提取蛋白的含量为35.4 mg/mL,AChR提取物可以与阳性血清中的AChRAb发生结合反应.免疫后1周左右,实验组有3只大鼠出现轻度的肌无力症状,持续2～5d自行缓解;免疫后5周左右实验组8只大鼠均表现出不同程度的肌无力症状.实验组大鼠低频重复电刺激阳性率达75%,其衰减率明显高于对照组.实验组大鼠单肌纤维动作电位平均连续差(MCD)值与正常对照组比较明显延长(P＜0.01),而福氏完全佐剂(CFA)对照组与正常对照组间MCD值无明显差异.实验组大鼠AChRAb水平明显高于CFA对照组(P＜0.01);实验组7只大鼠AChRAb的P/N值＞2.1,而CFA对照组P/N值均＜1.4.结论 从丁氏双鳍电鳐的电器官提取的AChR蛋白成功地诱导EAMG动物模型,可为重症肌无力进一步研究创造条件.     

兔重症肌无力模型的建立

目的:探讨兔重症肌无力模型(MG)的建立方法。方法:采用亲和柱层析法从电鳐电器官中提取乙酰胆碱受体(AChR),给16只日本大耳白兔分两次注射200μg AChR与等量的弗氏完全佐剂混合液,两次注射相隔3周,采用自行设计的评分标准评定其症状的严重性。结果:12只日本大耳白兔出现重症肌无力表现,积分12.83±6.19分。结论:从电鳐电器官中提取AChR,并主动免疫日本大耳白兔能够复制出重症肌无力模型。     

重症肌无力中枢神经系统损害的研究

重症肌无力(myasthenia gravis，MG)是一种自身免疫疾病。血中存在抗烟碱型乙酰胆碱受体抗体(nicotinic acetylcholine receptor antibody，AchRab)主要引起神经肌肉接头(neuromuscular junction，NMJ)突触后膜烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor，AchR)损害，是其发病机制。部分MG患者有癫痫发作、锥体束征阳性、脑脊液(ccrebral spinal fluid，CSF)可检出AchRab(肌型)，     

重症肌无力相关细胞因子研究进展

<正>重症肌无力(MG)是一种T细胞依赖、抗体介导的神经-肌肉接头处(NMJ)信号传递功能障碍所引起的自身免疫性疾病,人群发病率为32～64/10万人[1] ,目前我国约有60万MG患者.MG主要症状为波动性肌无力和易疲劳,多累及眼和四肢,累及呼吸肌可导致窒息死亡[2].NMJ有5种重要的功能性蛋白,即乙酰胆碱受体(AChR)、肌肉特异性激酶(MuSK)、聚集蛋白、突触受体相关蛋白(rapsyn)和     

抗乙酰胆碱受体单克隆抗体A7诱导实验性重症肌无力

目的:探讨抗乙酰胆碱受体单克隆抗体A7(Anti-AChR mAbA7)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的作用.方法:Lewis大鼠腹腔注射5ml 20倍浓缩的含Anti-AChR mAbA7培养上清液,建立EAMG被动转移模型.对照组腹腔注射同体积的PBS.每8 h监测体重和临床症状评分.48h后处死实验动物.用放射免疫法检测AChR,并计算出AChR的损失率.结果:Anti-AChR mAbA7诱导的EAMG模型AChR损失率高,为24.3%～45.2%.而且AChR损失率与临床症状评分相关(r=0.74,P＜0.01).Anti-AChR mAbA7攻击的位点在终板的AChR上.结论:Anti-AChR mAb A7可用作诱导EAMG模型而应用于重症肌无力的研究.     

实验性自身免疫性重症肌无力小鼠免疫功能状态的研究

目的：探讨实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）模型小鼠免疫应答特点。方法：根据临床症状及重复电刺激试验结果将造模小鼠分为成模组及未成模组,检测其免疫功能状态的改变,包括血清中乙酰胆碱受体抗体（AchRab）的水平,脾脏CD4^＋T细胞数量,用淋巴细胞增殖试验检测脾细胞经刀豆蛋白A（ConA）活化的非特异增殖能力,检测脾脏T细胞因子白细胞介素4（IL-4）,干扰素γ（IFN-γ）分泌水平。并与弗氏佐剂（CFA）对照组及正常对照组进行比较。结果：与未成模组、弗氏佐剂对照组及正常对照组相比,成模组小鼠AchRab显著增高,脾脏CD4^＋T细胞数升高;外周脾细胞对ConA刺激的非特异性增殖能力显著升高;脾脏T细胞细胞因子IL-4,IFN-γ显著升高,（均P〈0.01）,IFN-γ升高的程度高于IL-4（P〈0.01）。结论：EAMG发生是一个自身免疫应答参与的过程,体液免疫、细胞免疫应答参与了EAMG的发生。     

受体相关蛋白对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠乙酰胆碱受体的作用

目的：探讨受体相关蛋白(Bapesyn)对实验性自身免度性重症肌无力(EAMG)动物终板乙酰胆碱受体的作用。方法：用基因工程的方法制备提取pcDNA-Rapsyn，并将其注入动物肌肉左大腿外侧，右大腿相应部位注射相同剂量的空白质粒(Vector)以方波刺激使其进入细胞膜内，2w后用单克隆抗体35（mAb35)诱导出EAMG模型并进行症状评估,mAb3S诱导48h后取双大腿外侧肌，用放射免疫法检测AChR，并计算出AChR的损失率。结果：在EAMG模型中，被pcDNA-Rapsyn预处理的肌肉从AChR损失率明显低于未经处理的肌肉。结论：Bapsyn蛋白对EAMG模型的AChR有保护作用。     

重症肌无力的免疫吸咐疗法

重症肌无力的免疫吸咐疗法王海萍，丛志强，于杨重症肌无力（ＭＧ）是神经肌肉接头处传递障碍的慢性自身免疫性疾病。长期以来，本病的治疗多采用抗胆碱酯酶类药物、免疫抑制剂、胸腺切除或化疗及血浆交换等方法，但均有其不足之处。近年来，国内外尝试用免疫吸附疗法治疗...     

小儿重症肌无力综合治疗及非特异性预防

本文对37例重症肌无力患儿采用短期、间歇激素疗法,小剂量抗胆硷脂酶药物,人血丙种球蛋白以及辅助药物等综合治疗措施取得了满意结果,而且副作用少。症状痊愈后以人血丙种球旦白作非特异性免疫预防,随访2年无复发。通过临床观察发现综合治疗能减少各种药物的用量,缩短治疗时间,最大限度地发挥药物的药理作用。以人血丙种球蛋白作非特异性免疫预防能调节患儿的体液和细胞免疫功能,抑制自身免疫抗体产生。从而消除诱发因素。     

ABC-ELISA测定重症肌无力患者血清抗乙酰胆碱受体抗体水平的研究

采用ABC-ELIsA法检测了50例重症肌无力(MG)患者,20例其它中枢神经系统(CNS)疾病患者及30例正常人血清。发现:临床对照及正常对照组乙酰胆硷受体抗体(AchRAb)均为阴性。50例MG中有21例阳性(42%),全身型MG阳性率明显高于单纯眼肌型(P<0.005),随着病程延长,病情好转,大多患者的AchR抗体OD值呈下降转阴趋势。个别病例抗体比值与临床不符,可能是由于AchRAb的异质性所造成。ABC-ELISA法简便、快速可靠,为MG深入研究提供了有效手段。     

中西医结合治疗重症肌无力的效果评价

目的研究中西医结合治疗重症肌无力(MG)的疗效。方法选择在我院确诊的MG患者62例,随机分成观察组和对照组。对照组使用皮质类固醇药泼尼松及抗胆碱酯酶药吡啶斯的明,观察组在对照组的基础上结合中药复方扶正强筋片,1个疗程结束后对两组患者疗效和乙酰胆碱受体抗体变化进行比较。结果观察组总有效率为87.5%高于对照组总有效率63.33%,差异具有统计学意义(P<0.05)。抢救成功后,两组患者MG临床症状改善的同时,乙酰胆碱受体抗体明显降低,而且观察组比对照组改善明显。结论中西医结合治疗MG,临床效果显著且具有良好的安全性。     

重症肌无力的研究进展

重症肌无力是由乙酰胆碱受体抗体介导的，针对神经肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体的自身免疫性疾病。本文主要对其发病机制中的抗体(前膜抗体、抗肌联蛋白抗体、RyR抗体)、细胞因子、淋巴细胞亚群的研究进展及神经电生理改变和治疗中的问题作一综述。     

重症肌无力患者INF—γ、TNF-α与AchRAb水平相关性研究

目的探讨重症肌无力患者细胞因子INF-γ、TNF-α与AchRAb水平的关系，以揭示儿童MG的发病机制，为临床治疗提供一定的实验理论依据。方法对10例MG患儿和10例同年龄非自身免疫病正常对照组采集血清，用双抗体夹心法测定血清细胞因子INF-γ、TNF-α与AchRAb的水平。统计学分析采用SPSS10．0软件对数据进行处理，以α=0．05作为检验标准。结果儿童重症肌无力患者血清中细胞因子INF-γ、TNF-α水平增高且与血清AchRAb水平呈正相关。结论INF-γ、TNF-α与AchRAb水平正相关表明其可能参与自身AchRAb的形成，与自身反应性疾病的发生有关。     

小儿重症肌无力血清乙酰胆碱受体抗体的测定及其临床意义

为研究小儿重症肌无力(MG)血清乙酰胆碱受体抗体(AchRab)的含量改变及其临床意义。采用固相酶联免疫吸附法检测血清AchRab的含量。结果MG患儿血清AchRab阳性率为81%,明显高于健康对照组和非MG病人组(P<0.01)。MG患儿治疗后血清AchRab的含量明显低于治疗前,其阳性率分别为55%和81%(P<0.05)。结果提示AchRab的测定可作为MG患儿早期诊断和疗效观察的指标。     

重症肌无力转基因小鼠模型的建立

[目的]建立人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力模型．[方法]用电鳐电器官分离纯化的乙酰胆碱受体免疫人免疫球蛋白转基因小鼠，以肌肉收缩力判定病情，以放射免疫测定法测定动物血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度及动物全身肌肉乙酰胆碱受体浓度．[结果]实验动物血清中抗乙酰胆碱受体抗体滴度为6～296nmol，全身肌肉乙酰胆碱受体损失率最高达65％，部分动物出现肌肉收缩无力表现．[结论]成功地建立了人免疫球蛋白转基因小鼠实验性自身免疫性重症肌无力模型．