食品中玉米赤霉烯酮化学发光酶免疫方法建立

目的建立检测食品中玉米赤霉烯酮(ZEN)快速灵敏化学发光酶免疫方法。方法采用棋盘滴定法确定化学发光检测ZEN最佳工作条件(抗原包被浓度、包被量、一抗和二抗的工作效价、线性范围和检出限等),建立化学发光检测ZEN的方法并对实际样品进行检测,同时将检测结果与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)结果进行比较。结果经多次实验,化学发光检测ZEN的工作条件为:玉米赤霉烯酮-牛血清蛋白(ZEN-BSA)最佳包被浓度为0.1μg/mL,包被量为100μL/孔,抗ZEN单克隆抗体的最佳工作效价为1:1600,标准曲线线性范围0.01~50 ng/mL,50%抑制浓度为13.04 ng/mL,ZEN的最低检出浓度为0.007 ng/mL,样品中ZEN的最低检出量为0.15μg/kg,在20~400μg/kg添加水平的回收率范围为66%~115%;用所建方法对23个食品样品进行分析,检测结果与LC-MS/MS结果高度相关(r²=0.98)。结论所建方法准确、灵敏,适用于食品中ZEN污染水平的批量筛选。     

LC-MS/MS法测定人体血浆中多潘立酮含量

[目的]建立液相-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人体血浆中多潘立酮(Domperidone,DP)的含量.[方法]采用AP13000型LC-MS/MS液质联用系统,Ultimate C18分析柱(50×2 mm,5μm),文拉法辛作为内标,流动相为甲醇:水:甲酸=80:20:0.1,流速0.3 ml/min.样品在碱性条件下用二氨甲烷提取浓集后,以液相色谱分离、电喷雾离子化串联质谱进行检测,DP的MRM扫描离子通道m/z选择为426.4/175.1.[结果]DP在0.125～40 ng/ml范围内线性关系良好(r=0.999 5).最低定量限为0.125μg/ml.日内、日间RSD分别为2.95%～4.26%及2.67%～5.00%,准确度分别为96.4%～110.6%.[结论]该方法的样品预处理快速简便,检测专一灵敏,可满足DP临床研究药物浓度测定的要求.     

食品中丙烯酰胺的高效液相色谱测定法

[目的]建立食品中丙烯酰胺的高效液相色谱定量测定方法。[方法]选择适宜的样品前处理方法提取待测成分,对检测波长、流动相、方法的线性范围和最低检出量、精密度和准确度进行实验研究。[结果]丙烯酰胺在0～100μg／ml范围内，浓度与峰面积呈直线相关关系；方法最低检出量为0．0021μg；最低检出浓度为0．50mg／kg。对浓度为0．10～10．0μg／ml的样品，连续测定6次，RSD为2．6～3．2％；加标量为0．10～00μg／ml的样品，回收率为98～110％。[结论]本方法简便、快速、灵敏、精密、准确，可用于食品中丙烯酰胺的测定。     

肠衣中醋酸甲羟孕酮残留ELISA检测方法的应用

[目的]为醋酸甲羟孕酮残留检测提供一种快速、灵敏的分析方法。[方法]利用MPA-BSA免疫新西兰大耳白兔获得抗醋酸甲羟孕酮的多克隆抗体。建立了MPA的ciELsIA方法，并对肠衣样品进行了样品添加回收试验。[结果]MPA浓度在0.4-50ng/ml范围内具有良好的线性关系，线性方程为y=6.29-1.7χ，r^2=0．9995，IC50为3.7ng／ml，向样品中分别添加1、2、5ng／g 3个浓度水平的MPA标准品，回收率为85％-110％之间，变异系数为7．1％～9．9％，最低检测限0．8ng／g。药物交叉反应性试验符合要求。[结论]该ELSIA方法快速、灵敏、方便，满足了醋酸甲羟孕酮残留检测的要求。     

ELISA检测小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的优化

目的针对ELISA法检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),对小麦粉样品中DON提取和DON标准工作液制备进行优化。方法以超声提取法提取小麦粉样品中的DON,以含10%甲醇的DON阴性样品提取液作DON的ELISA标准工作液溶解相,对检测方法进行优化,并以优化的方法对50份小麦粉样品进行检测。结果检测方法经优化后,样品经超声提取仅需10 min,2 500.00 ng/g、500.00 ng/g、100.00 ng/g 3个浓度水平的平均回收率为94.69%~102.71%,平均CV%为6.50%,50份小麦粉样品DON检出率为30.00%,DON污染水平在57.26~112.37μg/kg,中位数为84.12μg/kg,所有样品中DON含量均未超过国家规定的限量标准。结论优化后的检测方法,大大缩短了样品提取时间,提高了样品提取率,降低了样品基质的干扰,方法重复性良好。     

液相色谱-串联质谱法检测人血清25羟维生素D_3水平及条件控制分析

目的人血清25羟维生素D3[25-(OH)D3]测定对于评价体内维生素D的水平十分重要。本文拟建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血清25-(OH)D3的方法。方法人血清样本(400μl)用纯甲醇去蛋白,离心后用正己烷进行液-液萃取。采用大气压化学离子源(APCI源),正离子多反应监测模式。色谱柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm);流动相:100%甲醇;流速:0.2ml/min。结果 LC-MS/MS的检出限为1.0ng/ml,25-OHD3浓度在6～120ng/ml范围内,峰面积与浓度线性关系良好(r=0.999),平均回收率为99.5%(范围:97.1%～103.4%),RSD为4.7%。分别用LC-MS/MS和放射免疫法检测53例血清样本,两种方法的平均浓度分别为23.69ng/ml和20.1ng/ml,LC-MS/MS比放射免疫法(RIA)平均高17.69%(P=0.083)。二者的相关性良好,RIA=LC-MS/MS-3.57,相关系数为0.883。结论本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度,易于操作,与放射免疫法相关性好,可用于测定人血清中25-(OH)D3的含量。     

进出口食品中微量铜的测定

[目的]建立一种简便、准确、实用测定食品中微量铜的方法。[方法]按照火焰原子化法(GB／TS009．13-1996)，样品经炭化、灰化、酸浸制成供试样，导入火焰原子吸收池测定。[结果]该法背景吸收低、稳定、灵敏、方法检出限2．9ng／ml，标准曲线最佳线性范围0-1．99μg/ml，线性相关系数0．9999．RSD5％，平均标样回收98％～112％。[结论]方法快捷、准确、简便、实用。     

某市动物性食品环境雌激素活性的调查与分析

目的对某市动物性食品雌激素活性进行研究,以综合评价食品中环境雌激素(EES)的污染状况。方法结合重组酵母雌激素筛检法(YES)及高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行分析。结果 YES结果表明,生物雌二醇(E2)当量浓度(EEQbio)为(6.11～25.45)ng/g。LC-MS/MS结果显示,所有样品均检测到17β-雌二醇(E2)和双酚A(BPA),大部分样品检测到乙炔基雌二醇(EE2),含量分别是(2.87～5.05)ng/g、(0.48～3.57)ng/g和(1.23～7.38)ng/g。样品的化学雌二醇当量(EEQchem)范围在(3.15～15.14)ng/g之间。两种方法测得的EEQ均值,有一定的相关性(R2=0.443)。结论所有样品均检测到了一定的雌激素活性,且生物实验与化学分析相结合,可以更有效的评价动物性食品环境雌激素的总体效应及污染现状。     

液质联用法同时检测动物源性食品中氯霉素和甲硝唑

目的 建立同时检测动物源性食品中氯霉素和甲硝唑的液相色谱-串联质谱法。方法 在试样中加入d5-氯霉素和d4-甲硝唑,经提取净化、浓缩、过滤后用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时进行检测。结果 该方法线性范围均为0.25~5.0ng/ml,氯霉素和甲硝唑的检出限均为0.1μg/kg(S/N=3),定量限均为0.3μg/kg(S/N=10),线性范围均为0.25~5.0ng/ml,方法相对标准偏差(RSD)小于8%,样品加标回收率在85%~101%之间。240份畜肉样品中未检出氯霉素和甲硝唑;禽肉样品中氯霉素检出率为3.3%(2/60),甲硝唑检出率为1.7%(1/60)。水产品中氯霉素检出率为34.3%(24/70),未检测出甲硝唑,其中贝类样品中氯霉素检出率为43.3%(13/30)。结论 该方法快速、灵敏、准确,可用于动物源性食品中氯霉素和甲硝唑同时测定。     

液-质联用法同时测定食品中罗丹明B和苏丹红染料

目的:建立同时测定食品中非法添加的罗丹明B和苏丹红工业染料的液相色谱-串联离子阱质谱法。方法:样品经正己烷提取、中性氧化铝固相萃取柱净化后,以甲醇(A)和1%甲酸(B)为流动相经BioBasic-18 PIONEER柱(150 mm×2.1 mm,5μm)梯度洗脱分离,串联离子阱质谱在电喷雾电离正离子(ESI+)-全扫描(full)-二级质谱(MS/MS)模式下测定罗丹明B和苏丹红含量。结果:方法的线性范围:罗丹明B0 ng/ml～20 ng/ml,苏丹红0 ng/ml～100 ng/ml,r≥0.992。方法的定性检出限为:罗丹明B与苏丹红I、II、III、IV分别为0.1μg/kg、0.5μg/kg、5.0μg/kg、2.0μg/kg、2.0μg/kg。罗丹明B与苏丹红在3种基质高、低两个浓度水平的加标回收率85.2%～109.5%,精密度<20%。结论:本方法灵敏、准确,可用于食品中罗丹明B和苏丹红等非法添加的工业染料的同时测定及确证。     

居住区大气中铍的桑色素荧光分光光度法检验方法的改良

[目的]对居住区大气中铍的卫生检验标准方法-桑色素荧光分光光度法进行优化改良。[方法]按照国家环境污染物监测方法标准制修订技术导则,对我国现行的居住区大气中铍的卫生检验标准方法-桑色素荧光分光光度法进行了优化改良,并对改良后的方法进行方法学评价。[结果]方法的检出限为0.05ng/ml,测定下限为0.2ng/ml,测量范围为0.0002～0.005μg/ml,对空气中铍的测定范围为0.002～0.05μg/m3(采样体积为1m3)。相对标准偏差分别为2.5%～4.2%(n=6)。回收率为98.0～106.0%。[结论]改良后的方法比原标准方法更加简便易操作,提高了方法灵敏度、测定的精密度和准确度。     

液相色谱-质谱联用法同时测定食品中37种农药残留

[目的]建立一种食品中农药残留的液相色谱质谱测定方法。[方法]本法采用乙腈匀浆提取,盐析离心后,经固相萃取柱净化,用乙腈＋甲苯（3＋1）洗脱农药,根据不同检测要求用液相色谱-质谱联用法检测农药多残留组份。[结果]所有37种农药均在40 min内流出,农药标准的线性范围在0.01-1.0μg/ml,相关系数r均在0.99以上,低、高浓度加标回收率均在78%-96%之间,相对标准偏差均小于10%,方法最低检出限在0.001-0.04 mg/kg（S/N=3）。[结论]方法选择性强,适合于食品中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯、除草剂农药残留的测定,且准确度好,精密度高,可快速一次检测37种农药,达到残留量检测中所要求的检测浓度水平。     

面制食品中铝的分光光度检测方法研究

目的建立适用于面制食品中铝含量的分光光度检测方法。方法样品经微波消解法或湿消解法消解后,用分光光度法测定食品中铝的含量。结果铝浓度在0.25～5.0μg/ml范围内呈现良好的线性关系,相关系数r=0.9998。检出限(LOD)为:2.3ng/ml;定量限(LOQ)为:7ng/ml。结论该方法用于面制食品中铝含量的测定,方法简便、快速,结果准确可靠。     

基质分散固相萃取和超高效液相色谱-串联质谱法测定水果、蔬菜中的11种杀菌剂

目的 建立水果、蔬菜中11种杀菌剂的基质分散固相萃取-液相色谱-串联质谱分析方法。方法 样品中的杀菌剂经乙腈提取,以PSA、石墨化炭黑和C18为吸附剂的基质分散固相萃取净化,最后用C18柱分离,以乙腈和0.05%甲酸水为流动相,经电喷雾离子源(ESI+)电离,多反应监测(MRM)模式串联质谱检测。结果 腐霉利的检测线性范围为10~500ng/ml,检出限为10μg/kg,其余10种杀菌剂的检测线性范围1.0~50ng/ml,检出限为1μg/kg;11中杀菌剂的平均加标回收率在80.3%~115.6%之间,相对标准偏差在3.9%~11.2%之间。结论 该方法前处理简单、快速、有效、准确灵敏、稳定和安全,适合于水果蔬菜中11种杀菌剂的检测。     

液相色谱-串联质谱检测鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的残留量

目的建立一种检测鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量分析方法。方法优化检测条件:用乙腈进行样品提取,选择C18固相萃取小柱和无水硫酸镁对提取样品净化后进行液质联用检测。结果经过优化后液相条件:流动相由2mmol/L的甲酸铵水溶液和甲醇组成,采用梯度洗脱方式在C18反相色谱柱中进行分离,进样量为4μL。质谱条件:离子源采用ESI负离子,通过SRM模式对样品中氟虫腈及其代谢物进行定量检测。优化后,氟虫腈及其代谢物在0~20ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,R2均>0.9993,检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别0.2~0.4μg/kg和0.66~1.32μg/kg。实际样品中添加4.0、20.0、40.0μg/kg 3个质量浓度水平下,平均回收率在76.60%~98.24%,相对标准偏差(RSD)为1.03%~3.41%,符合定量检测要求。结论该方法操作简便、灵敏度高,可满足鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的检测要求。     

超高效液相色谱-质谱联用法测定小龙虾虾肉及虾黄中的孔雀石绿及隐色孔雀石绿

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱同位素内标法测定小龙虾虾肉及虾黄中孔雀石绿及隐色孔雀石绿的残留量。方法 样品经匀浆后加入内标和乙腈提取,提取液经中性氧化铝净化。净化液浓缩后,采用电喷雾（ESI+）多反应监测（MRM）模式进行检测。结果 孔雀石绿及隐色孔雀石绿在0.10～2.00 ng/ml浓度范围内线性关系均良好,相关系数均大于0.999,方法检出限在0.01～0.04 μg/kg之间,平均回收率在92.1 %～104.5 %之间,相对标准偏差（RSD）在2.2 %～7.9 %之间。结论 该方法简便灵敏重现性好,可适用于小龙虾虾肉及虾黄中的孔雀石绿和隐色孔雀石绿的测定。     

凝胶净化色谱-三重四级杆串联气相色谱质谱法检测植物源性食品中氟虫腈及其代谢物残留量

目的采用凝胶净化色谱-三重四级杆串联气相色谱质谱法(GPC-GC/MS/MS)对植物源性食品中氟虫腈及其代谢物氟甲腈、氟虫腈亚砜、氟虫腈砜农药残留量进行分析。方法样品经乙腈超声提取后采用QuECHRS萃取包净化,用SH-Rxi-5il MS(30 m×0.25 mm,0.25μm)毛细管色谱柱分离,外标法定量分析。结果用本法测定,氟虫腈及其代谢物氟甲腈、氟虫腈亚砜、氟虫腈砜色谱峰得到很好的分离,在0.01μg/ml^0.5μg/ml浓度内呈现良好的线性关系。相关系数均达到0.9999,方法检出限均为0.003 mg/kg,氟虫腈及其代谢物在3个浓度添加水平下的加标回收率为89%~116%,相对标准偏差在1.10%~7.22%。结论该方法实现了氟虫腈及其代谢物检测的自动化、快速、高灵敏度和高稳定性分析,能够满足目前植物源性食品中氟虫腈及其代谢物残留检测限量的要求。     

采用高效液相色谱法测定薯片及饼干中丙烯酰胺的研究

[目的] 建立测定薯片及饼干中丙烯酰胺含量的高效液相色谱方法。[方法] 采用纯水作提取剂,样品经正己烷去脂、高速冷冻离心、过SPE小柱净化后,进行高效液相色谱分析。[结果] 该方法标准曲线的相关系数为0.9995,平均加标回收率为98.2%,相对标准偏差(RSD)为7.8%,方法的检出限和定量检出限分别为10 μg/kg和31 μg/kg。[结论] 该方法操作简便快捷、经济、灵敏度高,适用于一般实验室开展日常食品检测和监测。