SFPQ在肝细胞癌组织中的表达及其对BEL-7402细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨SFPQ在肝细胞癌组织中的表达特点及其对BEL-7402细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响. 方法 收集原发性肝细胞癌患者的癌组织和对应癌旁组织各30例,采用免疫组织化学法检测SFPQ蛋白的表达.采用OncoLnc数据库分析SFPQ和肝细胞癌患者总生存预后的相关性.采用小干扰RNA(siRNA)技术敲低肝癌细胞BEL-7402中SFPQ 的表达量,继而分别采用CCK8、Transwell以及Western-blot实验检测细胞增殖、迁移、侵袭能力以及上皮-间质转化(EM T)相关标志物的变化. 结果 30例肝细胞癌患者中,癌组织SFPQ蛋白的染色评分为(5.37 ± 0.64),显著高于癌旁组织[(3.27 ± 0.43),P<0.01].高表达SFPQ提示肝细胞癌患者的总生存时间缩短(P<0.001).敲低SFPQ表达可以抑制BEL-7402细胞的增殖、迁移和侵袭能力,逆转细胞EM T进程. 结论 SFPQ可能作为肝细胞癌患者潜在的预后指标,并可能通过调控细胞增殖、迁移、侵袭以及EM T特性影响肝细胞癌的转移复发.     

circPVT1在食管鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、凋亡的影响

目的 分析环状RNA circPVT1在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系,并探讨circPVT1对ESCC细胞增殖、凋亡的影响.方法 收集2017年9月至2019年12月在河北省胸科医院行手术治疗的ESCC患者的ESCC组织及相应癌旁组织,共40例.采用qRT-PCR检测ESCC组织与...     

PD-L1对肝细胞癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的 探讨程序性死亡配体(PD-L1)在肝癌细胞增殖、侵袭、迁移中的作用。 方法 转染有效的PD-L1基因siRNA干扰片段进入人肝细胞癌HepG2细胞中,下调细胞中PD-L1表达。采用荧光定量PCR法检测HepG2细胞中PD-L1基因表达情况,采用Western blotting法检测HepG2细胞中PD-L1蛋白表达情况。通过MTT实验观察其对HepG2细胞增殖能力的影响,采用细胞划痕实验检测细胞融合率,采用Transwell小室进行侵袭实验,观察其对HepG2细胞迁移及侵袭能力影响。 结果 下调PD-L1后,HepG2细胞PD-L1基因表达量、PD-L1蛋白表达量和细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力均明显低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.01),阴性对照组和正常对照组上述指标差异均无统计学意义(P＞0.05)。 结论 下调PD-L1后,肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力有一定程度下降,PD-L1可能成为肝细胞肝癌免疫治疗中的一个新基因靶位。      

miR-34a在膀胱癌细胞中的表达及对细胞的增殖、迁移的影响

目的:探究在膀胱癌细胞中miR-34a的表达及对细胞的增殖、迁移的影响。方法:在ATCC细胞库购买膀胱癌细胞株,随机分为3组,miR-34a组通过转染方法将miR-34a mimics转染到膀胱癌细胞中;膀胱癌组(BC组)单纯膀胱癌细胞株不做其他处理,正常培养;抑制组(IN组)将miR-34a inhibitor转染到膀胱癌细胞株中。通过TUNEL法、CCK-8法、克隆实验、Transwell分析3组膀胱癌细胞凋亡、增殖、迁移、侵袭情况的差异性来探究在膀胱癌细胞中miR-34a的表达及对细胞的增殖的影响。结果:结果显示,IN组癌细胞内的miR-34a mRNA表达量最低,miR-34a组癌细胞内的miR-34a mRNA表达量最高,IN组和BC组、miR-34a组相比较miR-34a mRNA含量下降,说明转染成功(P<0.05)。IN组癌细胞凋亡数量最少,miR-34a组癌细胞大量凋亡,IN组和BC组、miR-34a组相比较癌细胞分布明显稀疏,数量明显减少(P<0.05)。组间两两比较发现IN组和miR-34a组之间OD值具有明显差异,IN组癌细胞的增殖数量最多,miR-34a组癌细胞的增殖数量最少,IN组显著高于BC组,BC组癌细胞的生长情况显著高于miR-34a组(P<0.05)。对3组癌细胞进行克隆迁移实验。由结果明显可知,IN组癌细胞迁移能力强,显微镜下细胞数量多(P<0.05),IN组和BC组、miR-34a组相比较整体迁移能力明显增强,癌细胞数量明显增多(P<0.05)。由结果明显可知,IN组膀胱癌细胞侵袭能力强,miR-34a组膀胱癌细胞显微镜下细胞数量少,侵袭能力弱(P<0.05),IN组和CO组、miR-34a组相比较,数量显著上升,整体侵袭能力增强(P<0.05)。结论:在膀胱癌细胞中,过表达的miR-34a能够抑制癌细胞生长,降低miR-34a的水平含量可以促进膀胱癌细胞的增殖。     

syndecan-1表达对肝细胞癌增殖、血管生成和转移的影响

目的 探讨syndecan-1在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)表达的临床病理意义,及其与肿瘤转移、增殖和血管生成的关系.方法 用免疫组织化学染色检测了syndecan-1在30例HCC原发癌组织、癌旁组织和肝内转移灶的表达,血管内皮生长凶子(vascularendothelial growth factor,VEGF)和CD34-微血管密度(microvessel density,MVD)在原发灶和肝内转移灶的表达,及Ki-67在原发灶的表达.结果 与HCC癌旁组织相比,syndecan-1在原发癌组织表达水平明显增高,syndecan-1在肝内转移灶表达水平明显下降(x2 =25.62,P<0.001).在HCC原发癌组织中,syndecan-1表达强度与Ki-67指数呈正相关(r=0.386,P<0.05).在肝内转移灶中,syndecan-1表达强度与CD34-MVD呈正相关(r=0.370,P<0.05).结论 HCC组织syndecan-1表达可能影响肿瘤转移、增殖和血管生成,提示syndecan-1在HCC生长和转移中的特殊作用可能为HCC有效治疗策略提供新思路.     

干扰ETNPPL表达对肝细胞癌增殖的影响

目的:研究ETNPPL是否能够影响肝细胞癌细胞系的增殖表型如细胞活性和克隆形成。方法:Western blot检测ETNPPL在不同肝细胞癌细胞系中的基础表达量后,设计并构建ETNPPL的靶向siRNA,验证敲低效果,采用CCK-8实验和平板克隆形成实验,观察细胞的增殖能力。结果:与对照组相比,干扰ETNPPL的表达可以显著抑制肝细胞癌细胞系97H和LM3的增殖能力(P<0.05)和克隆形成能力(P<0.05)。结论:ETNPPL具有调控肝细胞癌细胞增殖和克隆形成能力的功能;ETNPPL可能是治疗肝细胞癌的一个潜在靶点。     

增殖细胞核抗原在肝细胞癌、肝硬化组织中的表达

目的 :探讨肝硬变、肝细胞不典型增生 (L CD)与肝细胞癌 (HCC)的关系。方法 :应用 S- P免疫组化技术检测了 2 7例 HCC、 90例肝硬变组织中 PCNA的表达。结果 :肝癌组织中 PCNA阳性表达明显高于肝硬变组织 (P <0 .0 5 ) ;伴有 L CD改变或 HBV感染的肝硬变组织 PCNA阳性率明显高于无 L CD改变和 HBV感染者 (P <0 .0 5 )。结论 :(1) PCNA可能是检测各种细胞增殖状态的很有价值的标记物 ;(2 )具有较高 PCNA阳性表达率的 L CD有活跃的增殖能力 ,可能是一群具有肿瘤性增殖潜能的癌前细胞。     

PAGE5基因在肝细胞癌中的表达及对增殖与转移的影响

目的 研究PAGE5基因在肝细胞癌(以下简称肝癌)样本及肝癌细胞株中的表达情况以及被沉默后对肝癌细胞株PLC/PRF/5及Focus细胞生长及转移能力的影响,分析PAGE5与甲胎蛋白(AFP)基因在肝癌组织样本中表达的相关性.方法 采用半定量PCR方法检测PAGE5在32例肝癌组织样本及其癌旁组织以及12株人肝癌细胞株中的表达;分析48例肝癌组织样本中PAGE5与AFP基因表达;同时观察干扰PAGE5表达后肝癌细胞增殖及转移能力的改变.结果 在34.4％的肝癌组织样本中PAGE5基因表达上调;PAGE5基因表达与AFP表达水平呈正相关;利用RNA干扰技术沉默PAGE5基因表达后,PLC/PRF/5及Focus转移能力明显下降.结论 PAGE5基因在肝癌发生及维持肝癌细胞恶性表型中可能起到重要作用,深入研究PAGE5基因在肝癌中的功能,有望成为肝癌诊断标志物及潜在的治疗靶点.     

长链非编码RNA HOXC13-AS在肝细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响

目的观察长链非编码RNA HOXC13反义RNA(RNA HOXC13-AS)在肝细胞癌中的表达,探讨其对肝癌细胞增殖和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝癌细胞株及正常肝细胞株中HOXC13-AS相对表达水平。体外培养HepG2细胞,设置空白对照组(不转染)、LV-NC组(转染携带HOXC13-AS-NC慢病毒)、LV-HOXC13-AS-shRNA组(转染携带HOXC13-AS-shRNA慢病毒),CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Transwell法及细胞划痕实验检测各组肝癌细胞侵袭及迁移能力,蛋白免疫印记(WB)法检测增殖与侵袭相关蛋白表达水平。结果与人正常肝细胞株L02(0.22±0.03)比较,肝癌细胞株HepG2(1.02±0.04)、SMMC-7721(0.71±0.03)、HUH7(0.59±0.03)、SNU-182(0.41±0.03)中HOXC13-AS的表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P0.05),以肝癌细胞HepG2中HOXC13-AS相对表达水平最高。与空白对照组、LV-NC组比较,LV-HOXC13-AS-shRNA组中HepG2细胞增殖、迁移与侵袭能力及基质金属蛋白酶-2、Ki-67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)相对表达水平明显降低,而组织金属蛋白酶抑制剂-2蛋白相对表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 HOXC13-AS在肝癌细胞中高表达,HOXC13-AS低表达可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭。     

STC1在肝细胞癌组织中的表达及对预后的影响

目的：考察肝细胞癌(HCC)组织中人斯钙素1(STC1)的表达情况,分析其表达与HCC临床病理特征的关系及对预后的影响。方法：收集2016年1月—2018年12月期间在蚌埠医学院第一附属医院接受手术切除的肝癌患者的临床病理资料,采用免疫组化技术检测75例肝癌及癌旁组织中STC1蛋白的表达情况,分析STC1蛋白表达与肝癌患者临床病理参数之间的关系,并进一步分析STC1蛋白的表达对临床预后的影响。结果：STC1在75例HCC组织中阳性表达率为60%,显著高于癌旁组织中的36%(P<0.05)。HCC组织中STC1表达与患者的性别、年龄、肿瘤AJCC分期以及是否有肝硬化无关(P>0.05),但与淋巴结转移、脉管癌栓及肿瘤分化程度有关(P<0.05)。STC1阳性表达与HCC患者较差的总生存期(OS)相关(P<0.05)。结论：STC1在HCC中高表达,且和脉管癌栓、淋巴结转移及分化程度有关。STC1的阳性表达可能与HCC患者的预后不良相关。     

SQSTM1在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌侵袭、迁移和增殖能力的影响

目的:探究SQSTM1在甲状腺乳头状癌中的表达及其对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1侵袭和迁移能力的影响。方法:采集2019年4至6月郑州大学第一附属医院收治的21例甲状腺乳头状癌患者切除手术的癌组织和癌旁组织,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）方法检测组织中SQSTM1的表达情况;通过慢病毒转染在TPC-1细胞中...     

FHIT在原发性肝细胞癌中的表达及其与细胞凋亡及增殖的关系

目的:通过检测原发性肝癌组织中FHIT蛋白的表达及观察细胞凋亡、增殖状况,探讨原发性肝癌中FHIT蛋白的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和图像分析技术检测50例肝癌及相应的癌旁组织和30例正常肝组织中的FHIT蛋白和Ki-67抗原,采用TUNEL法和图像分析技术检测上述组织中的细胞凋亡状况....     

siRNA沉默Msi1表达对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法针对Msi1基因mRNA序列设计合成siRNA,转染人宫颈癌Hela细胞;实验分Msi1siRNA组、空白对照组、脂质体组及阴性对照组;通过RT-PCR法检测Msi1基因在mRNA水平的表达;分别利用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色试验、群体倍增时间及平皿克隆实验分析干扰Msi1基因对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制效应;通过细胞划痕实验观察干扰Msi1对细胞迁移能力的影响;利用Transwell小室实验观察干扰Msi1对细胞侵袭能力的影响。结果Msi1siRNA能有效抑制人宫颈癌Hela细胞中Msi1基因的表达;Msi1siRNA转染Hela细胞24、48、72h后,与其他各组比较,Msi1siRNA组Hela细胞的生长、增殖速度明显减缓（均P＜0.05）。空白对照组Hela细胞群体倍增时间为（20.18±0.01）h,而干扰Msi1基因处理后的Hela细胞,群体倍增时间延长至（35.68±0.04）h（P＜0.05）;同时平皿克隆实验结果发现,Msi1siRNA处理后的Hela细胞与其他各组相比,Hela细胞生长明显减慢（均P＜0.05）;细胞划痕实验和Transwell小室实验分别显示处理后的Hela细胞其迁移和侵袭能力均明显下降,与其他各组相比差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭有负性调节作用。     

TRAP1在肝细胞癌中的表达及作用

<正>原发性肝癌是常见的恶性肿瘤,以肝细胞癌(HCC)为主,约为70%～90%,男性多于女性,我国占全球HCC新增病例和死亡病例的50%^[1]。目前,HCC的治疗以手术切除为主,包括新辅助化疗以及术后放化疗。但是,对于失去手术机会的患者来说,延长其生存期及生活质量,寻找能特异性杀伤HCC且没有明显不良反应的治疗靶点非常迫切。肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)是热休克蛋白90(HSP90)的家族成员之一,     

Tie2在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对细胞增殖、迁移及上皮-间充质转化过程的影响

目的 研究酪氨酸激酶受体2(tyrosine kinase receptor 2, Tie2)在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma, OSCC）中的表达情况及其对细胞增殖、迁移及上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）过程的影响。方法 采用免疫组织化学（immunohistochemistry, IHC）检测Tie2在OSCC组织与正常口腔黏膜组织中的表达。Western blot检测DOK细胞及OSCC细胞株中Tie2的表达,选取Tie2高表达细胞株作为实验株。将沉默Tie2的慢病毒载体成功转染至实验株用于后续实验。CCK-8及克隆形成实验检测细胞增殖、克隆能力;细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移能力;激光共聚焦显微镜检测细胞骨架纤丝状肌动蛋白（F-actin）重塑能力及上皮钙黏素（E-cadherin）、神经钙黏素（Ncadherin）的表达;Western blot检测EMT相关标志性蛋白E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白（vimentin）的表达以及蛋白激酶...     

MMP-1在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的明确MMP-1在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测MMP-1在正常肝组织和肝癌组织中的表达,采用卡方检验评估MMP-1表达与临床病理参数的相关性,对预后因素进行多元回归分析。结果 MMP-1在正常肝组织呈低表达,在肝癌组织中高表达,与肝细胞癌复发、TNM分期以及门静脉浸润显著相关(P<0.01)。在多元回归分析中,MMP-1表达是影响患者总生存率与无病生存率的独立预后因素(P<0.01)。结论 MMP-1可作为预测肝细胞癌患者复发和转移的新指标,也是预后不良的重要指标。     

Notch1、Jagged1在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Notch1、Jagged1在肝细胞癌组织中的表达及临床意义。方法选择2010年3月～2012年6月手术治疗并经病理证实为肝细胞癌的患者35例,每例患者均取癌组织及癌旁组织（距癌组织2～3 cm处）,其中肝细胞癌组织35例,癌旁肝硬化组织13例,癌旁正常肝组织22例。采用实时荧光定量PCR法检测Notch1mRNA、Jagged1 mRNA在肝细胞癌组织、癌旁肝硬化组织及癌旁正常肝组织中的表达;免疫组织化学染色法检测Notch1、Jagged1蛋白的表达,并分析两种蛋白的表达与肝细胞癌临床病理特征的关系。结果①肝细胞癌组织中Notch1 mRNA、Jagged1 mRNA的表达分别为（4.58±0.77）、（4.96±0.87）,显著高于癌旁正常肝组织,差异有统计学意义（P〈0.05）;与癌旁肝硬化组织[（1.16±0.37）、（1.42±0.58）]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;而癌旁正常肝组织与癌旁肝硬化组织比较差异无统计学意义（P〉0.05）。②肝细胞癌组织中,Notch1、Jagged1的阳性表达率分别为71.4%（25/35）、68.6%（24/35）;癌旁正常肝组织中,Notch1、Jagged1的阳性表达率分别为36.4%（8/22）、40.9%（9/22）;癌旁肝硬化组织中,Notch1、Jagged1的阳性表达率分别为30.8%（4/13）、30.8%（4/13）。Notch1、Jagged1的阳性表达率在肝细胞癌组织中明显高于癌旁正常肝组织（χ^2otch1=6.81,χ^2agged1=4.24,P〈0.05）及肝硬化组织（χ^2otch1=6.55,χ^2agged1=5.57,P〈0.05）。Notch1、Jagged1的阳性表达率在癌旁正常肝组织与肝硬化组织间差异无统计学意义（P〉0.05）。Spearman相关分析显示,肝细胞癌组织中Notch1的表达与Jagged1的表达呈正相关（r=0.38,P〈0.05）。③Notch1、Jagged1蛋白的阳性表达率与患者的年龄、性别、肿瘤直径、数目、有无癌栓形成无关（P〉0.05）;与有无淋巴结转移、病理分级密切相关。有淋巴结转移者Notch1、Jagged1阳性表达率高于无淋巴结转移者;低分化癌组织Notch1、Jagged1的阳性表达率明显高于中高分化癌组织,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Notch信号通路中Notch1、Jagged1对肝细胞癌的发生发展起促进作用,可为判断临床预后提供参考价值。     

维生素D结合蛋白在结肠癌中的表达及其对细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的 GC蛋白在大部分恶性肿瘤中呈高表达,且对肿瘤的形成、发生及发展起着重要的作用,然而GC蛋白对结肠癌的形成进展影响并不清楚,本文探讨结肠癌中的GC蛋白表达及其对细胞生物学行为的影响。方法应用RT-PCR检测结肠癌细胞中GC蛋白的表达情况,选取GC蛋白表达量最高的SW1116细胞株为研究对象,分为干扰组(GC-siRNA组),阴性对照组(Negative control siRNA组),空白对照组(Blank组),运用siRNA干扰技术,沉默SW1116中GC蛋白的表达,分别对各组细胞运用MTT法检测细胞增殖的情况,运用Transwell试验检测细胞迁移能力的变化,运用Annexin.V.PI双染法流式细胞术检测细胞的凋亡状况,观察沉默GC基因对SW1116细胞生物特性的影响。结果 GC在大肠癌细胞中呈高表达,显著高于正常结肠细胞株CCD18Co,差异有统计学意义(SW480 vs.CCD18Co,P=0.003;SW620 vs.CCD18Co,P<0.01;SW116 vs.CCD18Co,P<0.01),其中SW1116细胞表达最高(RQ值4.3±3.5);沉默SW1116细胞GC基因后,相比两对照组,GC-siRNA组细胞活性率在转染后48 h和72 h显著下降,差异有统计学意义(24 h,P=0.034;48 h,P=0.009);Transwell实验结果显示GC-siRNA组迁移过纤维膜细胞数为(51.6±9.4)个,阴性对照组(182.1±16.1)个,空白对照组(174.3±22.8)个,迁移能力减低(P<0.01);Annexin V-FITC细胞凋亡实验结果显示干扰组凋亡率为(28.5±5.9)%,明显高于阴性对照组(5.6±2.1)%和空白对照组(6.1±2.3)%,细胞诱导凋亡增加(P<0.01);两对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论沉默结肠癌细胞中的GC蛋白表达后,细胞的增殖减慢,迁移能力减低,凋亡诱导增加,GC基因可能与结肠癌的发生与进展相关,或可作为结肠癌基因治疗的靶点。