肿瘤坏死因子β基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的 探讨脑梗死(CI)患者肿瘤坏死因子β的基因型和等位基因频率分布特点.探讨肿瘤坏死因子β等位基因多态性与CI易感性的关系.方法 采用PCR方法扩增TNFβ第一外显子到第二外显子包含G-A突变在内DNA片段,扩增产物用限制性内切酶Nco I酶切后电泳,分析TNFβ的基因型.对56例脑梗死患者(CI组)和108例健康者(对照组)的肿瘤坏死因子β基因多态性进行分析.结果 CI组TNFβ等位基因分布频率与对照组差异有显著性(P=0.002),其中TNFβ2/2基因型频率(46.4%)明显高于正常人(30.6%),但TNβ*1与TN地Fβ*2等位基因频率差异无显著性(P>0.05).结论 CI患者组TNFβ各基因型频率与健康对照组相比存在显著差异,说明TNFβ*2/2基因型可能与CI发病有关.     

子宫内膜异位症与肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性与子宫内膜异位症的关系。方法运用聚合酶链反应技术检测200例子宫内膜异位症及200例正常人肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性。结果子宫内膜异位症组TNFα-238G/A、G/G、A/A表型频率分别为：0.9300、0.070、0,对照组分别为：0.9500、0.0500、0;子宫内膜异位症组TNFα-238G、TNFα-238A基因频率分别为：0.9650、0.0350,对照组分别为：0.9750、0.0250,肿瘤坏死因子TNFα-238G/A各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性与子宫内膜异位症无明显相关。     

COMT基因Met多态与子宫内膜异位症的关系

目的探讨COMT基因Met多态与子宫内膜异位症的关系。方法采用蛋白酶K消化-饱和酚氯仿法提取外周血白细胞基因组DNA,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分别对120例子宫内膜异位症患者(内异症组,含59例腺肌病患者)和65例非内异症及腺肌病女性(对照组)进行COMT基因分型。结果 (1)内异症组和对照组G/G、G/A和A/A基因型频率分别为17.5%、43.3%和39.2%,9.2%、50.8%和40.0%,差异无统计学意义;内异症组和对照组A等位基因频率分别为27.1%和29.2%,两组比较差异无统计学意义;(2)G/A、A/A基因型个体发生子宫内膜异位症的相对危险度分别为G/G型个体的0.516倍(0.185-1.441,P>0.05)和0.450倍(0.165-1.232,P>0.05),差异无统计学意义。结论 COMT基因Met多态与子宫内膜异位症无相关性。     

转化生长因子β1-509C/T基因多态性与子宫内膜异位症关系研究

目的:研究转化生长因子(TGF)β1-509C/T基因多态性与子宫内膜异位症的关系.方法:用聚合酶链反应扩增TGF β1-509C/T基因片段,Eco81I内切酶进行限制性酶切反应并经测序证实.结果:子宫内膜异位症组T℃F β1-509 C/C、C/T、T/T表型频率分别为0.180 0、0.430 0、0.390 0,对照组分别为0.150 0、0.440 0、0.4100;子宫内膜异位症组TGF β1-509C、TGF β1-509T基因频率分别为0.395 0、0.605 0,对照组分别为03700、0.630 0,TGFβ1-509C/T各种基因型频率在对照组与子宫内膜异位症组之间的差异无显著性(P>0.05).结论:TGF β1-509C/T基因多态性与子宫内膜异位症无关联.     

聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测肿瘤坏死因子β基因多态性

目的：建立酶链反应限制性片段长度多态性（PCR－RFLP）检测肿瘤坏死因子β（TNFβ）多态性的方法。方法：采用PCR方法扩展TNFβ第一外显子到第二外显子包含G→A突变在内的DNA片段，扩增产物用限制性内切酶Nco I酶切后电泳，分析TNFβ的基因型。结果：TNFβ检测到3种基因型，分别为TNFβ＊1／1、TNFβ＊1／2和TNFβ＊2／2。结论：PCR－RFLP检测肿瘤坏死因子β多态性方法快速、简便、准确、可靠，适合普通实验室开展及大规模研究。     

雌激素受体α及β基因多态性与子宫内膜异位症易感性关系的研究

目的:探讨雌激素受体α(estrogin receptorα,ERα)及ERβ基因多态性与子宫内膜异位症易感性间的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析检测58例子宫内膜异位症(EM)患者和107例非EM患者的ERα和ERβ基因型多态性。结果:ERα内切酶PvuⅡ位点的pp、Pp、PP基因型频率在EM组和对照组分别为34.5%和30.8%、48.3%和58.9%、15.5%和9.3%;内切酶XbaⅠ位点的xx、Xx、XX基因型频率在子宫内膜异位症组和对照组分别为56.9%和59.8%、32.8%和37.4%、8.6%和1.9%,2组比较基因分布频率差异无统计学意义(P>0.05)。ERβ内切酶AluⅠ位点的aa、Aa、AA基因型频率在EM组和对照组分别为0%和0%、19.0%和25.2%、81.0%和74.8%,内切酶RsaⅠ位点基因型频率rr、Rr、RR在EM组和对照组分别为20.7%和11.2%、32.8%和42.1%、46.6%和46.7%,2组比较基因分布频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ERα及ERβ基因多态性与EM的发病易感性间无明显相关性。     

肿瘤坏死因子基因多态性与脓毒症易感性和预后的关联研究

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)α和TNFβ基因多态性以及血清TNFα水平与脓毒症发病和预后的关系。方法以56例脓毒症患者为病例组,依据病情转归分为存活组和死亡组,60例健康志愿者为对照组。采用聚合酶链-限制性片段长度多态性方法进行TNFα和TNFβ基因多态性分析,应用双抗体夹心酶联免疫方法测定血清中TNFα水平。结果①TNFα2等位基因频率在脓毒症组和对照组间差异有统计学意义(0.25vs0.067,P<0.05,RR=4.667),TNFβ基因型分布和等位基因频率在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。②TNFα2等位基因频率在脓毒症死亡组和存活组间差异有统计学意义(0.429vs0.19,P<0.05,RR=4.163),TNFβ基因型分布和等位基因频率在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。③TNFα基础水平在脓毒症存活组和死亡组间差异有统计学意义[(65.24±6.55)pg/mLvs(76.54±7.45)pg/mL,P<0.05]。④TNFα水平与TNFα基因多态性有关,与TNFβ基因多态性无关。结论TNFα基因多态性可能通过影响TNFα水平而影响脓毒症的发病和预后,而TNFβ基因多态性与脓毒症不相关。     

IgA肾病与肿瘤坏死因子β基因多态性的关联性研究

目的：探讨江苏汉族人群肿瘤坏死因子β(tumor necrosis factorβ，TNFβ)1069位点等位基因多态性与IgA肾病的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法对84名健康人和45例IgA肾病患者TNFβ基因的单碱基突变多态性进行了分析。结果：IgA肾病患者的TNFβ*2等位基因频率(67．4％)较正常A．(55．1％)明显升高(P=0．015，RR=1．68)。结论TNFβ*2等位基因频率与IgA肾病发病易患性相关。     

肿瘤坏死因子基因多态性与非胰岛素依赖型糖尿病关系的研究

目的　分析中国汉族正常人群和非胰岛素依赖型糖尿病 (NIDDM)患者肿瘤坏死因子 (TNF)基因多态性分布 ,探讨汉族人群TNF基因多态性与NIDDM的关系。方法　应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法 (PCR RFLP)检测 2 15例正常汉族人和 5 5例NIDDM患者TNFα和TNFβ 基因型 ,同时检测血葡萄糖、血脂水平。结果　正常人群和NIDDM人群中TNFβ 基因型均以TNFβ1/ 2型最为多见 ,而TNFα基因型均以TNFα1/ 1型频率最高 ,两组人群均未检测到TNFα2 / 2基因型。 2种多态性基因型分布和等位基因频率在正常和NIDDM人群组间和组内比较均无显著差异 (P >0 .0 5 )。正常对照组和NIDDM组各种临床参数水平在TNFα和TNFβ 基因型间比较均无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　TNF虽然与胰岛素抵抗相关 ,但其基因多态性可能在NIDDM及代谢紊乱的发生发展中不起重要作用     

中国西南地区汉族人群肿瘤坏死因子基因多态性与鼻咽癌遗传易感性

目的:分析肿瘤坏死因子基因多态性分布与中国西南地区汉族人群鼻咽癌易感性的关系。方法:选择2000-10/2005-09在华西医科大学第一附属医院就诊的100例鼻咽癌患者为鼻咽癌组,均经过病理科活检确诊,其中包括未治疗44例,放疗后37例,放疗加化疗后19例,选择100名同期入院健康体检者为对照组。所有受试对象为中国西南地区汉族人,均对检测项目知情同意。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法检测100例中国西南地区汉族鼻咽癌患者和100名健康对照者肿瘤坏死因子α基因启动子区-308位点及肿瘤坏死因子β基因第一内含子252位点的等位基因以及基因型频率,分析两位点多态性与鼻咽癌遗传易感性的关系。结果:鼻咽癌组患者肿瘤坏死因子β( 252)位点G/A杂合子基因型频率显著高于对照组(57%,29%,P<0.01),野生型(G/G基因型)频率低于健康对照组(23%,51%,P<0.01),等位基因A的频率高于健康对照组(48.5%,13%,P<0.01);肿瘤坏死因子α(-308)位点基因型以及等位基因频率与对照组相比较无统计学差异。结论:本实验人群中未发现肿瘤坏死因子α(-308)位点多态性与鼻咽癌易感性无关;肿瘤坏死因子β( 252)位点基因多态性与鼻咽癌具有相关性,A等位基因可能是鼻咽癌的遗传易感基因,G/A杂合子基因型个体较易患鼻咽癌。     

肿瘤坏死因子β1069位点等位基因多态性与创伤后严重脓毒血症的关系研究

目的 为了探讨江苏汉族人群中肿瘤坏死因子β(TNFβ)等位基因多态性与创伤后严重脓毒血症的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)方法对58例创伤后并发严重脓毒血症病人TNFB基因的单碱基突变多态性进行分析。结果 创伤后并发严重脓毒血症病人的TNFβ*2基因频率较正常人明显升高(创伤后严重脓毒血症病人68．9％，正常人55．1％，P=0．015，RR=1．73)。结论 TNFβ*2基因频率与创伤后严重脓毒血症易患性相关。     

PCR-RFLP法检测肿瘤坏死因子受体基因多态性

目的：建立聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（PCR－RFLP）检测肿瘤坏死因子受体Ⅱ（TNF R2）第6外显子基因多态性的方法。方法：用碘化钾法从外周血白细胞中提取基因组DNA，PCR扩增其TNF R2包括编码196位氨基酸残基在内的第6外显子基因，扩增产物用限制性内切酶NIa Ⅲ酶切后干含溴化乙锭的35g/L琼脂糖凝胶中电泳，紫外灯下直接观察TNF R2的基因型。结果：通过观察电泳条带可确定TNF R2的三种基因型，196R／R纯合子、196M／M纯合子、196M／R杂合子分别出现一、二、三条条带；江苏地区健康汉族人TNF R2第6外显子各基因型的频率为：196M／M61．6％，196R／R5．6％，196M／R32．8％；等位基因的频率为196M77．9％，196R22．1％。结论：RCR－RFLP是一种高效敏感、简单快速、准确可靠的分析TNFR2基因多态性的方法，适于普通实验室开展。     

内蒙古地区汉族人群TNFβ基因多态性与IgA肾病的相关性

目的研究内蒙古地区汉族人群IgA肾病与TNFβ基因多态性的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对79例IgA肾病患者及80例正常对照TNFβ1 069位点等位基因A→G单碱基突变多态性进行分析。结果内蒙古地区汉族IgA肾病患者TNFβ*1／1纯合子和TNFβ*2／2纯合子检出率与正常对照组比较均有较大差异(均P< 0．05);TNFβ*2等位基因频率(68．99％)较正常人(53．75％)显著升高(P<0．01)。结论TNFβ*2基因可能与IgA肾病易患性相关。     

MICA基因外显子2～4多态性与习惯性流产的关系

目的研究MICA基因外显子2～4多态性与习惯性流产(RSA)的关联。方法采用PCR-SSP方法分别对56例RSA患者和78例正常对照组的MICA基因外显子2～4的多态性进行分析。结果在RSA组中共检出8种等位基因,各等位基因及频率分别为:MICA*001(4.5%),MICA*00201/020(17.9%),MICA*004(8.0%),MICA*00801/02(30.4%),MICA*00901/02(9.8%),MICA*010(22.3%),MICA*01201/02(5.3%),MICA*018(1.8%)。其中MICA*00801/02为最常见等位基因,基因频率最高,占30.4%,MICA*018最低,频率为1.8%,在对照组中共检出9种等位基因,经统计分析,RSA组与正常对照组之间MICA基因外显子2～4各等位基因频率均无显著性差异。结论MICA基因外显子2～4多态性与RSA之间无相关性,但该基因外显子5多态性与RSA之间是否存在关联还有待于进一步研究。     

CYP17基因单核苷酸多态与子宫内膜异位症和子宫腺肌病易感性的关系

目的探讨CYP17基因T-C单核苷酸多态与子宫内膜异位症(内异症)和子宫腺肌病(腺肌病)易感性的关系。方法蛋白酶K消化-饱和酚氯仿法提取外周血白细胞基因组DNA,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对61例内异症(内异症组)、59例腺肌病(腺肌病组)和65例健康女性(对照组)进行基因分型。结果①内异症组和腺肌病组A1A1基因型频率及A1等位基因频率均高于对照组,差异均有统计学意义;内异症组与腺肌病组之间差异均无统计学意义。②A1A1和A1A2基因型个体发生内异症的相对危险度(OR)分别是A2A2型个体的4.615倍(1.704-12.504,P=0.002)和3.467倍(1.339-8.977,P=0.009),发生腺肌病的相对危险度分别是A2A2型个体的3.692倍(1.337-10.196,P=0.010)和3.867倍(1.505-9.933,P=0.004),差异均有统计学意义。结论 A1A1、A1A2基因型增加内异症和腺肌病的易感性,A1等位基因可能是内异症和腺肌病的遗传易感基因,内异症和腺肌病发病机理相似。     

肿瘤坏死因子α基因启动子多态性与乙型肝炎易感性的相关性分析

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF α)基因启动子多态性与乙型肝炎易感性的关系.方法以病例对照的研究方法,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测146例乙型肝炎患者和165名正常对照者TNF α-238位点和-308位点基因型.结果 TNF α-238位点G/G和G/A基因型在病例组为94.5%和5.5%,对照组为97.0%和3.0%,2组基因型和等位基因频率分布差异无显著性(P>0.5).而TNF α-308位点G/G和G/A基因型在病例组为95.2%和4.8%,对照组为87.9%和12.1%,2组基因型和等位基因频率分布差异有显著性(P<0.05).结论 TNF α-308位点G等位基因可能是乙型肝炎易感性的遗传标记;TNF α-308位点G/G基因型个体乙型肝炎病毒感染的风险率增高.     

肿瘤坏死因子基因多态性与多脏器功能障碍综合征的相关性研究

目的探讨肿瘤坏死因子基因多态性与MODS易感性之间的相关性。方法采用聚合酶链式应-限制性片段长度多态性(polymerasechainreactionrestrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP)析正常人群和MODS患者TNF-α启动子-308位点及TNFβ第一内含子+252位点基因多态性之间的异同。采用ELISA方法检测MODS患者的血浆TNF的浓度。结果45例MODS患者的TNFB2等位基因频率为.7%,正常对照组为53%(P<0.05),TNFB2纯合子患者血浆TNF-α浓度和病死率高于杂合子及TNFB1合子患者(P<0.05);而两组的TNFα-308位点的基因频率及各基因型之间的血浆TNF-α浓度和病死率差异无统计学意义(P>0.05)。另外,两个TNF位点间存在连锁不平衡,单倍型分析提示,TNFB2:F1是MODS的危险因素,TNFB1:TNF1是MODS的保护性因素。结论TNFβ第一内含子+252位点的等基因TNFB2与MODS易感性相关。     

肿瘤坏死因子基因启动子多态性与重症急性胆原性胰腺炎及其脓毒症休克的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)启动子基因多态性与急性胆原性胰腺炎及其脓毒症休克的关系。方法 该研究包括127例急性胆原性胰腺炎(轻型66例，重型61例)患者，对照组为102例正常志愿者。多态性检测是利用PCR扩增目的基因片段，用Ncol内切酶消化酶切位点，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析酶切产物显示TNF2和TNF1。检测血浆TNF-α浓度用酶联法。结果 TNF2出现的频率在急性重症胆原性胰腺炎(ASBP)组和急性轻型胆原性胰腺炎(AMBP)组无显著性差异，在急性胆原性胰腺炎(ABP)组和对照组也无显著性差异。TNF2出现的频率在脓毒症休克组明显高于无脓毒症休克组，其差异具有显著性。TNF-α-308各核型在．ABP组和对照组、ASBP组和AMBP组出现的频率均无显著性差异。TNF2与血浆TNF-α浓度无相关性。结论 TNF2与ABP的易感性及严重程度无关，与血浆TNF-α浓度也无相关性。TNF2能提高ASBP患者脓毒症休克的易感性。     

迟发性阿尔茨海默病的肿瘤坏死因子-αG-308A基因多态性研究

目的 探讨迟发性阿尔茨海默病的肿瘤坏死因子-α G-308A基因多态性.方法 将57例迟发性阿尔茨海默病患者设为研究组,抽取52例健康志愿者设为对照组,采用聚合酶链反应、限制性片段长度多态性方法检测两组肿瘤坏死因子-α G-308A多态性. 结果 两组脂蛋白E-4等位基因分布显著不同（χ2=19.39,P〈0.01）,脂蛋白E-4等位基因携带者罹患迟发性阿尔茨海默病风险很高（OR=2.49,95%CI 1.53-4.07,P〈0.01）;肿瘤坏死因子-αAA基因与脂蛋白E-4等位基因的交互作用致迟发性阿尔茨海默病风险增高（χ2=6.34,P〈0.05）;研究组脂蛋白E-4等位基因非携带者中,AA、AG基因型频率,A-等位基因频率显著高于对照组（χ2=5.26、4.58,P〈0.05）. 结论 肿瘤坏死因子-α G-308A基因多态性可能增加迟发性阿尔茨海默病发病风险,同时这种多态性与脂蛋白E-4等位基因状态有关.     

精神分裂症IL-1βTNF-α基因多态性研究

【摘要】目的探讨白细胞介素-1β—511位点、＋3953位点和肿瘤坏死因子-α-308位点基因多态性与精神分裂症的关系及不同基因型对细胞因子分泌的影响。方法将161例精神分裂症患者设为精神分裂症组（患者组）,135名健康志愿者设为对照组。采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术检测白细胞介素1β在-511位点、＋3953位点及肿瘤坏死因子-α在-308位点的基因多态性;抽取患者组83例首发精神分裂症患者进行不同基因型细胞因子水平检测分析。结果在白细胞介素-1β-511位点,患者组基因GG型较对照组增高,但差异无显著性（P〉0．05）,等位基因G频率显著高于对照组（P〈0．05）;在白细胞介素-1β＋3953位点、肿瘤坏死因子-α-308位点,患者组基因型及等位基因频率与对照组比较差异均无显著性（P〉0．05）。在白细胞介素-1β-511位点和白细胞介素-1β＋3953位点,基因型G／A和AA的精神分裂症患者较GG型患者白细胞介素-1β水平明显增高（P〈0．05）;肿瘤坏死因子-α-308位点基因型G／A和AA的患者较GG型TNF-α水平明显增高（P〈0．05）。结论白细胞介素-1β-511位点、＋3953位点和肿瘤坏死因子-α-308位点基因多态性可能与精神分裂症无直接关联;白细胞介素-1β—511位点等位基因G可作为精神分裂症易感性的遗传标志之一;白细胞介素-1β—511位点和＋3953位点基因型G／A和AA为高分泌型,GG为低分泌型;肿瘤坏死因子-α-308位点基因型G／A和AA为高分泌型,GG为低分泌型。基因多态性影响细胞因子分泌。