IgA肾病患者纤溶酶原激活物的变化及临床意义

目的：探讨IgA肾病患者纤溶酶原激活物（PA）的变化及临床意义。方法：以纤维蛋白平板法检测108例IgA肾病及34例健康自愿者尿PA活性，同时以免疫组化方法观察了27例IgA肾病及6例正常人肾组织t-PA、u-PA抗原表达，分析其与临床病理资料的关系。结果：正常人肾组织t-PA偶见少量表达于肾小球毛细血管袢，u-PA则表达于所有节段的肾小管上皮细胞。IgA肾病肾组织t-PA阳性率及单个肾小球t-PA平均积分明显高于正常人。轻度增生的肾小球其t-PA阳性率明显增高，中度增生的肾小球t-PA阳性率明显高于轻度增生者，硬化的肾小球不表达t-PA。u-PA表达明显下调，尿PA活性下降。伴血肌酐升高、肾小管间质病变严重、肾小动脉病变较重或大量蛋白管型形成的患者尿PA活性下降更为明显。结论：IgA肾病早期肾组织t-PA表达增加，晚期下降。肾组织u-PA表达减少。蛋白管型的形成可能与尿PA活性下调有关。尿PA活性的检测有助于判断IgA肾病的病情。     

尿激酶型纤溶酶原激活物受体及可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体与炎症相关的研究进展

尿激酶型纤溶酶原激活物受体（urokinase plasminogen activator receptor,uPAR）与尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase plasminogen activator,uPA）同为纤溶酶原激活系统的主要成员,是一种协调多种信号转导途径的多功能分子,可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体（soluble urokinase plasminogen activator receptor,suPAR）是其可溶形式。除凝血-纤溶以外,uPAR参与了肿瘤侵袭及炎症等多种疾病过程,而suPAR可能是一种良好的炎性标志物。本文就uPAR及suPAR在炎症中的作用进行简要综述。     

纤溶酶原激活物抑制剂-1与肥胖

纤 溶系统由纤溶酶原、纤溶酶原激活物 ( plasminogenac tivatorPA)和激活物特异性抑制剂 (plasminogenacti vatorinhibitorPAI)、纤溶酶及纤溶酶抑制物组成 ,其主要功能是通过纤溶酶溶解纤维蛋白而将其从循环系统中清除出去。PAI是纤溶系统活性主要的生理调节物 ,它在体内有多种形式 ,包括内皮细胞型 (PAI 1)、胎盘型 (PAI 2 )、尿型 (PAI 3)和连接蛋白酶 1(proteasenexin 1) ,其中PAI 1在纤溶活性调节中起着重要作用 ,它主要灭活组织型纤溶酶原激活物 (t PA)。PAI 1和t PA之间的平衡对维持纤溶系统正常功能十分重要。临床和流…     

LPS促进HUVECs表达纤溶酶原激活物抑制物1

目的：观察LPS对脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的影响。 方法： 用生长良好的第2、3代HUVECs进行试验。用cell counting kit-8(CCK-8)测定LPS刺激后细胞活性变化；发色底物法测定LPS组和对照组培养液中tPA, PAI-1活性；RT-PCR检测细胞内tPA和PAI-1 mRNA水平。 结果： 与对照组相比，LPS(10 mg/L)对细胞活性没有明显差异。LPS诱导PAI-1活性在24-72 h显著升高(P<0.05),且显著上调PAI-1 mRNA，24 h达到峰值，以后渐降，72 h达到正常水平。而LPS组与对照组tPA活性与tPA mRNA无明显差异(P>0.05)。 结论： LPS(10 mg/L)可显著上调PAI-1 mRNA转录和分泌而不影响tPA mRNA，结果提示LPS可活化内皮细胞，诱发PAI-1 mRNA表达和蛋白分泌而抑制纤溶系统，这有利于微血栓的形成、血栓稳定,血液凝固和DIC发生。     

人,牛内皮细胞组织型纤溶酶原激活物活性的比较

体外培养人脐静脉及胎牛主动脉内皮细胞,分别从其条件培养液中提取t-PA。实验主要分三步:1)胎牛内皮细胞t-PA的纯化;2)兔抗牛内皮细胞t-PA抗血清的制备及纯化其1gG组分;3)免疫亲和层析、纯化人脐静脉及胎牛主动脉内皮细胞t-PA。结果表明,用微量法免疫动物制备的兔抗牛内皮细胞t-PA抗血清具有较高的滴度与特异性。将该抗血清1gG与人、牛内皮细胞CM交联免疫亲和层析,可获得电泳纯的t-PA,其分子量为65000及67000道尔顿。两者活性比较,胎牛主动脉内皮细胞t-PA活性比人脐静脉内皮细胞t-PA明显增高。     

尿激酶型纤溶酶原激活物及其特异受体和抑制物与肺癌的浸润转移

研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其特异受体(uPA-R)和抑制物(PAI-1、PAI-2)在肺癌浸润转移中的作用.应用RIA分别对67例经组织病理确诊的各期肺癌和30例肺部相关炎症患者及30名健康献血者进行了相应的检测.结果显示,小细胞肺癌Ⅱ期和Ⅲ期患者血浆中uPA、uPA-R、PAI-1水平显著升高(P＜0.001),而PAI-2的水平逐渐降低;腺癌、鳞癌伴有浸润主支气管及肺门淋巴结者uPA、uPA-R与PAI-1水平亦显著升高(P＜0.001);周围型肺癌未见淋巴结受侵者uPA、uPA-R、PAI-1与PAI-2水平异常升高.uPA、uPA-R与PAI-1在肺癌中水平明显升高,并与肺癌的浸润转移相关密切,可作为肿瘤患者早期诊断、预后评估的有力指标.     

肝癌组织浸液尿激酶型和组织型纤溶酶原激活物的检测

一些研究表明体液中的尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinasetypeplasminogenactivator,u PA)和尿激酶型纤溶酶原激活物受体 (uokinasetypeplasminogenactivatorreceptor,u PAR )浓度与癌细胞自身分泌和释放的水平及其浸润转移有关 ,而组织型纤溶酶原激活物 (tissueplasminogenactivator,t PA)则与癌组织血管内皮细胞的释放和血管新生有关 ,组织型纤溶酶原激活物抑制剂 (Tissueplasminogenactivatorinhibitor 1,PAI 1)则对t PA和u PA起调控作用 ,同时参与癌细胞的转移等过程[1 ,2 ] 。为探讨癌生长和癌扩散转移及血管新生与上述指标之间的…     

血清中尿激酶型纤溶酶原激活物在女性乳腺癌诊断中的应用

近年来,在我国京津沪地区,乳腺癌发病率已居于妇女恶性肿瘤首位川.研究表明,癌细胞在浸润转移的过程中存在着细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)和基底膜成分被相关蛋白酶溶解的活动,纤溶酶原激活在ECM水解过程中起重要作用.     

组织型纤溶酶原激活物基因的DNA改组

目的：探索利用DNA改组（DNAshuffling)技术，获得更高活性tPA的可能性。方法：以人，恒河猴及大白鼠tPAcDNA为一组基因，进行tPA的DNA改组（DNAfamily shuffling)。以改组后构建的tPA多样性文库转染CHO细胞并进行克隆和筛选。结果：得到了两株有意义的克隆；t9和t17，其中t9克隆表达的tPA活性略高于人tPA，初步的比活性测定结果表明，活性约提高4倍。t17克隆表达的tPA虽然有88个氨基酸的缺失，但仍表现出与人tPA相同的活性，两株克隆经测序证明，为改组后的基因，其序列以人和恒河猴的tPAcDNA序列为主，少数序列来源于大白鼠tPAcDNA。结论：这一探索性结果将为后续几轮的tPADNA改组探明道路，为最终从改组后tPA多样性基因库中筛选到比较理想的重组体打下基础。     

组织型纤溶酶原激活因子及其抑制因子在孕鼠子宫中的表达

本实验用原位杂交和免疫组织化学定位方法从ｍＲＮＡ和蛋白质水平研究组织型纤维溶酶原激活因子（ｔＰＡ）及其Ｉ型抑制因子（ＰＡＩ－１）在受孕第七天大鼠子宫中的表达，结果表明，在非着床点子宫腔上皮细胞，腔上皮附近的基质细胞和腺上皮细胞中ｔＰＡ和ＰＡＩ－ｍＲＮＡ都有表达，但ＰＡＩ－１ｍＲＮＡ的量很低，ｔＰＡ抗原分布于了宫腔上皮和腺上皮，ＰＡＩ－１抗原只能在腺上皮和表层基质中微弱地检测到，在着床点，ｔＰＡ和Ｐ     

乳腺癌组织中VEGF-C和uPA的表达及意义

目的研究血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)和尿激酶型纤维蛋白酶原激活剂(uroki-nase-type plasminogen activator,uPA)表达与乳腺癌生物学行为的关系,并分析VEGF-C和uPA表达的相关性,探讨其表达与乳腺癌患者预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测VEGF-C和uPA在80例乳腺浸润性导管癌及25例癌旁正常组织中的表达。结果 VEGF-C和uPA在乳腺癌组织中的表达明显高于正常组织(P0.05),两者表达存在正相关(r=0.287,P0.05),并与乳腺癌的TNM分期及淋巴结转移状况有关(P0.05),而与其他临床病理参数无相关性(P0.05)。VEGF-C和uPA高表达者术后无复发生存期低于低表达者的生存期。结论 VEGF-C和uPA在乳腺癌的发生发展及侵袭转移过程中起重要作用,VEGF-C和uPA的表达可辅助用于乳腺癌的预后评估。     

慢性肾脏疾病血清和尿液纤溶活性物质的改变及临床意义

目的探讨慢性肾脏疾病血清和尿液纤溶活性物质的改变及其临床意义。方法选择38例慢性肾小球肾炎(CGN),28例肾病综合征(NS),36例非透析治疗的慢性肾功能不全(CRF)和20例正常对照作为研究对象,应用ELISA法检测血清和尿液中组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的浓度,同时分析尿中t-PA和PAI-1的水平与血t-PA、PAI-1、血肌酐和24h尿蛋白总量之间相关性。结果慢性肾脏疾病出现血清t-PA、PAI-1升高,尿液t-PA、PAI-1降低,其中尿液t-PA、PAI-1的改变独立于血清,不受血肌酐和24h尿蛋白定量的影响。结论慢性肾脏疾病患者存在纤溶活性物质的异常,其中尿液纤溶活性物质的改变可反应肾脏内皮细胞损伤。     

切应力和溶血磷脂酰胆碱对内皮细胞表面黏附分子表达的影响

在体内 ,内皮细胞的功能不仅受化学因子的调节 ,而且还受力学因素的影响。为探讨流体切应力和溶血磷脂酰胆碱 ( L ysophosphatidylcholine,L yso- PC)的双重作用对培养的人脐静脉内皮细胞 ( Hum an um bilical veinendothelial cells,HU VECs)表面黏附分子 ICAM- 1、VCAM- 1、E- selectin表达的影响 ,采用流式细胞仪技术检测了L yso- PC( 3 0 μg/m l)和流体切应力 ( 2 .2 3、4.2 0 dyne/cm2 )的协同作用下内皮细胞黏附分子表达的变化。结果显示 :在受剪切作用之前 ,用 L yso- PC孵育激活内皮细胞 ,或预先剪切后再用 L yso- PC孵育 ,内皮细胞的 ICAM- 1和VCAM- 1表达与两种刺激同时作用相比 ,显著增加 ( P<0 .0 5 ) ;切应力或 L yso- PC的单独作用 ,以及两种刺激同时存在对 HU VEC的 E- selectin表达无显著影响。而在受剪切作用之前 ,用 L yso- PC孵育激活内皮细胞 ,或预先剪切后再用 L yso- PC孵育 ,内皮细胞的 E- selectin表达与两种刺激同时作用相比 ,显著增加 ( P<0 .0 5 )。结论认为 :即使在不利于细胞黏附的力学环境中 ,流体切应力与 L yso- PC的协同作用 ,也可能是在炎症部位单核细胞对内皮细胞募集增加的重要原因之一     

The Anti-Leu4 (CD3) Monoclonal Antibody Reacts with Proximal Tubular Cells of the Human Kidney

A recent observation that certain kidney tubular cells, especially those in the normal kidney, were positively stained with the anti-Leu4 monoclonal antibody (MoAb) led us to investigate systematically the reactivity of three different anti-CD3 MoAb with a panel of normal human kidneys. Using immunohistochemical and immunofluorescence staining techniques, the anti-Leu4 MoAb was found to react with proximal tubular cells in all eight examined kidneys, while no tubular-cell reactivity was observed with the OKT3 or DAKO-T3 MoAb. In each kidney, however, all three antibodies reacted with a similar number of occasionally encountered T cells. The G11 MoAb, which has been reported to react with a calcium receptor-associated molecule, and the anti-Leu4 MoAb showed almost identical patterns of tubular-cell reactivity. The observed co-distribution of Leu4-expressing structures with a putative Ca2+ sensor in the kidney and the fact that binding of anti-Leu4 to T cells induces Ca2+-mediated signal transduction, warrant further studies on a potential role of Leu4-expressing structures in Ca2+ regulation of proximal tubular cells.     

流体低切应力对内皮细胞IL—8mRNA表达的影响

为证实内皮细胞IL-8表达不仅受化学因子的调节,而且还受力学因素的影响。我们用低层流切应力（4.2dyne/cm^2）处理培养的人脐静脉内皮细胞后采用RT-PCR法检测内皮细胞IL-8基因表达,并用免疫细胞化学染色法检测内皮细胞内NF-kB激活的影响,结果发现：①未用切应力处理和切应力作用0.5h后内皮细胞IL-8mRNA表达量很少,切应力作用1h后内皮细胞IL-8 mRNA表达增加,2h进一步增加。②未用切应力处理和切应力作用0.5h内皮细胞核内NF-kBp65染色阴性,切应力作用1h呈弱阳性,2h呈阳性。提示低层流切应力可诱导内皮细胞表达增加,IL-8表达量与切应力作用时间有关。流体切应力可诱导内皮细胞内NF-kB的激活,激活程度与作用时间有关。低切应力诱导内皮细胞表达IL-8,可能在急性炎症和动脉粥样硬化发生、发展过程中具有重要作用。     

雷公藤甲素对血管生成的抑制作用

利用体外培养人脐静脉内皮细胞,经不同浓度的雷公藤甲素(0、5、10、20、30μg/L)处理后,MTT法显示雷公藤甲素可抑制内皮细胞的增殖,5μg/L雷公藤甲素的抑制率达29.15%;琼脂凝胶立体细胞培养系统检测发现内皮细胞经雷公藤甲素作用后,其游走能力降低;鸡胚尿囊膜试验观察到雷公藤甲素可有效抑制血管的生成;荧光定量RT-PCR检测发现雷公藤甲素可下调内皮细胞u-PAmRNA的表达。因此认为,雷公藤甲素可能在基因水平上干扰内皮细胞u-PAmRNA的表达,减少u-PA蛋白的生成,从而有效地抑制血管内皮细胞的增殖和移行,这可能是雷公藤甲素抑制血管生成的主要机制之一。     

存活素和尿激酶型纤溶酶原激活剂在人胰腺癌组织中的表达意义及相关性分析

目的分析存活素(Survivin)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(u PA)在人胰腺癌中的表达及两者之间的相关性。方法采用免疫组化PV法检测原发性胰腺癌组织(63例)及癌旁非肿瘤胰腺组织(11例)中Survivin和u PA的表达,分析两者间表达的相关性及与胰腺癌临床病理特征的关系。结果 63例胰腺癌组织中Survivin和u PA阳性率分别为69.8%(44/63)、65.1%(41/63),11例癌旁非肿瘤胰腺组织中均无表达,Survivin和u PA表达呈正相关(r=0.389,P0.050),两者与胰腺癌TNM分期、分化程度及淋巴结转移均有关(P均0.05)。结论 Survivin和u PA在胰腺癌组织中的表达呈正相关,两者表达上调在胰腺癌的发生、发展、侵袭和转移中起重要作用。