通冠胶囊对大鼠颈动脉球囊损伤术后血管内膜VEGF表达的影响

目的 探讨通冠胶囊对血管损伤后内膜增生及VEGF表达的影响.方法 制备大鼠左颈总动脉球囊损伤模型,将54只SD大鼠随机分为通冠胶囊组、盐水对照组和辛伐他汀对照组,于术后第4周、第8周和第12周处死动物.分别进行取材检测指标:HE染色及弹力纤维染色后光镜下观察管壁增生情况,计算机图像分析内、中膜面积及其比值观察通冠胶囊对新生内膜形成的影响.血管内皮生长因子(VEGF)免疫组织化学法检测明确损伤后血管内皮修复情况.结果 通冠胶囊组在4周、8周和12周时免疫组化VEGF表达较盐水对照组明显升高(均P<0.01),辛伐他汀组的变化趋势与通冠胶囊组相似.通冠胶囊组4周、8周与同时段辛伐他汀组比较无统计学差异(均P>0.05),12周较辛伐他汀组明显升高(P<0.05).球囊损伤后4周各组内膜增生明显,8周时形成的增生内膜减少,12周时形成的增生内膜明显减少.通冠胶囊组在损伤后4周、8周、12周形成的增生内膜较盐水对照组显著减少(均P<0.01),内膜面积与中膜面积的比值较盐水对照组明显降低(均P<0.01).结论 通冠胶囊可以促进大鼠颈总动脉球囊损伤处的VEGF的表达,并减少新生内膜的形成.     

黄柏提取物小檗碱对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生及炎性因子的影响

目的探讨黄柏提取物小檗碱对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生及炎性因子的影响。方法采用体质量350~400 g雄性Wistar大鼠制备颈动脉球囊损伤模型,将40只成模大鼠随机分为模型组和小檗碱组各20只,其中小檗碱组给予小檗碱2.5 mg/kg腹腔注射,每天1次,连续14 d。另取20只雄性Wistar大鼠仅行颈部切开作为假手术组。实验结束后处死各组大鼠并取左侧颈动脉,经石蜡包埋后进行HE染色,观察病理形态并比较各组血管内膜面积、中膜面积及内膜与中膜面积的比值(I/M),采用酶联免疫吸附法检测各组血清炎症因子[单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、C反应蛋白(CRP)、转化生长因子-β(TGF-β)和前列腺素E2(PGE2)]水平,同时采用实时定量PCR法检测左侧颈动脉标本中炎症反应限速酶环氧化酶-2(COX-2)mRNA和磷脂酶A2mRNA水平。结果假手术组血管无内膜增生,且光滑完整;模型组出现严重血管内膜增生,且发生严重管腔狭窄;小檗碱组血管内膜增生受抑制,管腔狭窄获显著缓解。模型组新生血管内膜面积、I/M及血清MCP-1、CRP、TGF-β、PGE2水平和左侧颈动脉COX-2 mRNA和磷脂酶A2mRNA水平均明显高于假手术组(P均0.05);小檗碱组上述指标均明显低于模型组(P均0.05),但除CRP与假手术组比较差异无统计学意义外(P0.05),其余指标水平均明显高于假手术组(P均0.05)。结论黄柏提取物小檗碱可抑制大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜增生及炎性反应,可能与其抑制炎症反应限速酶的表达水平有关。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预

观察益气活血方对球囊损伤大鼠颈动脉狭窄的干预作用,初步探讨其作用机理。方法:SD大鼠48只,用2.0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈动脉球囊损伤模型,中药各组自手术前一天灌胃给药。每组动物于相应时相点麻醉心脏放血处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和Masson染色。然后输入HMIAS-2000型全自动彩色图像分析系统,观察动脉球囊损伤后相关指标的变化,统计分析益气活血方对其的影响。结果:益气活血方各组大鼠术后28天内膜增生面积、内膜增生平均厚度、残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比差别有极其显著的意义(P<0.01);益气活血方各组大鼠术后28天胶原增生情况与模型组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:益气活血方可显著防止或减轻球囊扩张大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄,而且大剂量益气活血方作用更明显。     

冠心合剂对家兔颈动脉球囊损伤后血管形态学的影响

目的:观察冠心合剂对兔颈动脉经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)损伤后血管内膜增生的影响。方法:运用球囊原位扩张、拉伤致兔颈总动脉损伤建立PTCA术后内皮损伤模型。从术前3天开始各治疗组予相应剂量冠心合剂灌胃给药,分别于2、4、6周处死动物,取手术侧颈动脉标本观察血管形态并计算内膜和中膜厚度比(I/M)、内膜和中膜面积比(SI/SM)。结果:中药各剂量组内膜增生、管腔狭窄较模型组减轻,I/M、SI/SM较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.05);冠心合剂大剂量组6周的I/M、SI/SM值最低。结论:冠心合剂具有抑制PTCA术后损伤血管内膜增生的作用。     

丹参酮抑制大鼠颈动脉损伤后再狭窄的实验研究

目的:观察丹参酮对大鼠颈动脉损伤后再狭窄的防治作用,并探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为模型组、丹参酮高、中及低剂量组,每组10只。用自制2F球囊对大鼠右侧颈总动脉进行损伤造成颈动脉狭窄模型。术前2 d开始给药,高、中、低剂量组分别灌胃给予丹参酮120,40,13.3 mg.kg^-1.d^-1,给药体积为10 mL.kg^-1,模型组给予等体积的溶媒。给药2周后,取伤侧及对侧颈总动脉做HE染色,光镜下观察动脉形态并用计算机图像分析系统分析动脉内膜面积、中膜面积及内膜/中膜面积,用免疫组化测定增殖细胞核抗原(PCNA)、核因子(NF)-κB及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平并计算阳性率。结果:损伤动脉内膜面积和内膜/中膜面积显著增加,提示造模成功。与模型组比较,丹参酮低剂组内膜面积、内膜/中膜面积、PCNA阳性指数、NF-КB及iNOS阳性率有所降低,但差异不显著,中剂组和高剂组则效果明显,差异具有显著性(P<0.05)。结论:丹参酮可抑制大鼠颈动脉损伤后再狭窄,这种作用与其抑制平滑肌增殖和炎症作用有关。     

益气活血解毒方对球囊损伤后大鼠颈动脉早期血管重构和炎性因子的影响

目的:观察益气活血解毒方对血管损伤后血管重构指标及炎性因子的干预作用。方法:采用球囊导管损伤大鼠左侧颈总动脉模型,动物随机分为假手术组、模型组、他汀组和益气活血解毒组。用药后7天行HE染色,观察血管壁各层面积和管腔内径,放免法检测血清单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、C反应蛋白(CRP)以及转化生长因子-β(TGF-β)的浓度。结果:与假手术组比,模型组内膜轻度增生(P<0.01),外膜明显增厚,面积变大(P<0.05),MCP-1、CRP、TGF-β含量显著升高(P<0.01);与模型组比,益气活血解毒方明显减少内膜面积(P<0.05),降低CRP、TGF-β的含量(P<0.01);阿托伐他汀显著降低TGF-β的含量(P<0.05)。结论:球囊损伤大鼠颈总动脉早期,外膜增生明显,内膜有轻度增生,但管腔内径无显著变化,血管重构主要表现为正性重构,并伴随MCP-1、CRP、TGF-β含量的显著上升。益气活血解毒方抑制新生内膜生成,可能与降低CRP、TGF-β的含量有关。     

赤芍对兔颈动脉球囊损伤后血管紧张素Ⅱ激活的影响

目的：观察赤芍对高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后内膜增殖及血管紧张素Ⅱ(AgⅡ)激活的影响。方法：家兔饲喂高脂饲料，赤芍组服用赤芍提取物，相当于生药3g/kg、2g/kg或1g／kg。于6周末球囊损伤颈总动脉内膜建立再狭窄(RS)模型，于8周末取血放射免疫测定血浆AgⅡ，取血管作血管张力测试，血管切片后形态学测定增生内膜面积，免疫组组织化学染色计算增殖细胞核指数。结果：赤芍组血浆AgⅡ水平降低，血管对AgⅡ的收缩反应减弱，增生内膜面积、增生内膜面积／中膜面积显减少。结论：赤芍降低内膜增殖程度与抑制肾素．血管紧张素系统(RAS)激活有关。     

冠心合剂对家兔颈动脉球囊损伤后Ⅰ型胶原表达的影响

目的:观察冠心合剂对兔颈动脉经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)损伤后细胞外基质Ⅰ型胶原蛋白表达的影响。方法:运用球囊原位扩张、拉伤致兔颈总动脉损伤建立PTCA术后内皮损伤模型。从术前3天开始各治疗组予相应剂量冠心合剂灌胃给药,分别于2、4、6周处死动物,免疫组织化学法检测Ⅰ型胶原的表达。结果:各中药治疗组内膜胶原密度较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.05);冠心合剂大剂量组6周的内膜胶原密度表达最少。结论:冠心合剂可保护兔颈动脉球囊损伤后内膜,其机制可能与减少血管壁胶原含量有关。     

针刺调节Ghrelin对高血压大鼠血管内皮损伤保护机制研究

摘要：目的:观察针刺"足三里"对自发性高血压大鼠（SHR）主动脉胃促生长素（Ghrelin）、内皮素-1（ET-1）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响,探讨针刺保护自发性高血压大鼠血管内皮损伤作用机制。方法:选用雄性SHR大鼠30只,随机数字表法分为模型组（10只）、针刺组（10只）和非经非穴组（10只）,Wistar-kyoto（WKY）大鼠（10只）作为空白组。针刺组针刺双侧"足三里"穴治疗,非经非穴组针刺鼠尾作为对照,空白组与模型组捆绑不做任何处理。治疗结束后,取血清及主动脉;ELISA检测血清Ghrelin和ET-1含量变化,荧光定量PCR检测大鼠胸主动脉Ghrelin受体（GHSR）和eNOS mRNA表达,用Western blot检测大鼠胸主动脉eNOS、GHSR蛋白含量表达。结果:与空白组相比,模型组、非经非穴组大鼠血清Ghrelin含量显著降低,大鼠胸主动脉GHSR、eNOS蛋白含量显著降低,大鼠胸主动脉GHSR、eNOS mRNA表达显著降低,血清ET-1含量升高（P <0.05）;与模型组相比,针刺组血清Ghrelin、eNOS含量表达升高、胸主动脉GHSR、eNOS蛋白表达升高,胸主动脉GHSR、eNOS mRNA表达升高,血清ET-1含量降低（P <0.05）。结论:针刺足三里可通过改善血清及主动脉Ghrelin、eNOS及ET-1表达,改善血管内皮损伤,起到血管保护作用。     

冠心合剂对兔颈动脉球囊损伤后MCP-1、C-myc基因表达的影响

目的:观察冠心合剂对兔颈动脉经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)损伤后对MCP-1、C-myc基因表达的影响。方法:运用球囊原位扩张、拉伤致兔颈总动脉损伤建立PTCA术后内皮损伤模型。从术前3天开始冠心合剂各剂量组予相应剂量冠心合剂每日灌胃给药,分别于第2、4、6周处死动物,取手术侧颈动脉做标本,用RT-PCR法检测兔颈动脉MCP-1、C-myc mRNA的表达。结果:冠心合剂各剂量组MCP-1、C-myc mRNA的表达较模型组降低(P<0.05);冠心合剂各剂量组MCP-1、C-myc mRNA的表达较假手术组升高(P<0.05);大、中、小剂量组组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:冠心合剂可抑制MCP-1、C-myc mRNA的表达,其表达呈剂量依赖性,冠心合剂对PTCA损伤后再狭窄的保护机制可能与抑制MCP-1、C-myc mRNA的表达有关。     

化瘀通脉注射液对大鼠主动脉球囊损伤后内膜增殖的影响

目的:观察化瘀通脉注射液对大鼠主动脉球囊损伤后内膜增殖的影响。方法:72只体重300~350g的雄性Wistar大鼠随机分为3组:即化瘀通脉组、丹参组和生理盐水组。采用球囊剥脱大鼠主动脉内膜的方法复制内膜增殖动物模型。自造模前1天开始,各组动物经尾静脉分别注射化瘀通脉注射液、或丹参注射液、或生理盐水,1mL次/,1次/d。每组按造模后1、5、10、15、20、25天6个时点随机选取4只动物处死,留取标本。制作病理切片,观察各组动物内膜损伤后内膜面积、内膜/中膜面积比值的动态变化,比较化瘀通脉注射液、丹参注射液及生理盐水对内膜增殖的影响。结果:光镜下(40×)观察病理切片可见,在行球囊内膜剥脱术后,3组动物主动脉内膜出现不同程度的增殖,内膜增殖随时间延长而加重,在术后25天最为明显,化瘀通脉组内膜面积增长缓慢,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05),和丹参组比较虽无显著性差异(P>0.05),但增长有减缓趋势;3组动物内膜/中膜面积比值均随时间延长而增大,在术后25天最为明显,化瘀通脉组比值增大缓慢,与生理盐水组和丹参组比较虽无显著性差异(P>0.05),但增大有减缓趋势。结论:化瘀通脉注射液可抑制大鼠主动脉球囊损伤后的内膜增殖,作用有优于丹参注射液的趋势。     

益气活血方对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁的影响

目的：观察益气活血方对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁的影响。方法：SD大鼠48只。随机分成4组。用2．0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈总动脉球囊损伤模型，治疗结束，麻醉，心脏放血处死大鼠，取损伤大鼠左颈总动脉，常规固定、包埋、切片，做HE染色和Masson染色。用HMIAS-2000型全自动彩色图象分析系统，观察动脉球囊损伤后不同时相点血管壁病理改变，进行比较分析。结论：成功复制球囊损伤术后颈总动脉再狭窄动物模型；益气活血方可显著防止或减轻大鼠颈总动脉球囊扩张后所致的血管狭窄，益气活血方大剂量作用更明显。     

绿茶多酚对大鼠颈动脉损伤后血管新生内膜增殖的影响

目的:本研究观察了绿茶多酚对SD大鼠颈动脉损伤后血管新生内膜的影响.方法:建立SD大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增殖模型,连续饮服绿茶多酚(1 mg/ml)14天后观察其对血管新生内膜增殖的影响.结果:与对照组相比,绿茶多酚治疗组14天后大鼠颈动脉损伤血管新生内膜/中层面积比降低了34.1%(P＜0.05).结论:绿茶多酚对大鼠颈动脉损伤后血管新生内膜增殖有一定的抑制作用.     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后VEGF动态变化的影响及意义

目的:观察损伤血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后再狭窄的干预机制。方法:随机将160只雄性SD大鼠分为假手术组,阴性对照组,益气活血方大、中、小剂量组。首先自左颈外动脉球囊损伤大鼠左颈总动脉,后给予高脂饲料喂养30 d,造成动脉硬化,然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉再狭窄。手术前1 d开始给药,每组动物于术后(3 d、7 d、14d、28 d)处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测VEGF的表达。结果:用药组VEGF表达明显增多,3 d、7 d和14 d益气活血方大剂量组VEGF表达量与阴性对照组、假手术组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:益气活血方对球囊损伤后大鼠颈动脉再狭窄有明显的防治作用,其机制可能与上调VEGF的表达,促进血管内皮细胞修复与新生有关。     

益气活血方及其拆方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预

目的:观察益气活血方及其拆方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预,初步探讨其作用机理。方法:SD大鼠60只,随机分成5组,用2.0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈总动脉球囊损伤模型,治疗结束,每组动物于相应时相点(5d、28d)处死后,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和Masson染色。然后将染色图片输入HMIAS-2000型全自动彩色图象分析系统,观察动脉球囊损伤后相关指标的变化,统计分析益气活血方及其拆方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的影响。结果:益气活血方及其拆方各组大鼠术后28天损伤血管内膜增生面积、内膜增生平均厚度、残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比差别有极其显著的意义(P<0.01);益气活血方及其拆方各组大鼠术后28天胶原增生情况与模型组相比差异有显著性(P<0.05);结论:益气活血方及其拆方可显著防止或减轻球囊扩张大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄,并且,以益气活血方组和黄芪组疗效较好。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后PCNA表达的影响

目的观察损伤血管细胞核增殖抗原（PCNA）的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜平滑肌细胞（VSMCs）增殖的干预机制。方法随机将108只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、阿司匹林组及益气活血方大、中、小剂量组。球囊损伤大鼠颈总动脉前给予高脂饲料喂养30d,造成高脂血症;然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉管腔的狭窄。手术前1d开始给药,每组动物于术后（5d、14d、28d）处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测PCNA的表达。结果各组PCNA均表达阳性,模型组明显增多,用益气活血方干预后14d和28dPCNA表达量与模型组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论益气活血方对球囊损伤后动脉血管内膜VSMCs增生有明显的抑制作用,其机制可能与下调细胞核增殖抗原的表达,抑制血管内膜VSMCs的细胞分裂周期进程有关。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后bFGF表达的影响

目的:观察损伤血管后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后再狭窄的干预机制。方法:随机将160只雄性SD大鼠分为假手术组,阴性对照组,益气活血方大、中、小剂量组。首先自左颈外动脉球囊损伤大鼠左颈总动脉,后给予高脂饲料喂养30天,造成动脉硬化,然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉再狭窄。手术前1天开始给药,每组动物于术后(3天、7天、14天、28天)处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测bFGF的表达。结果:血管损伤后第14天、28天用药组bFGF表达量与阴性对照组比较有显著性差异(P0.05)。结论:益气活血方对球囊损伤后大鼠颈动脉再狭窄有明显的防治作用,其机制可能与下调bFGF的表达,抑制血管平滑肌细胞增殖有关。     

三七总皂苷对大鼠主动脉球囊损伤后血管内膜增生及PCNA表达的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对大鼠主动脉球囊损伤后血管内膜增生及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,阐明其作用机制.方法:以2.0 F球囊导管建立大鼠主动脉内膜剥脱模型,随机分为假手术组、模型组、三七总皂苷(100 mg·kg~(-1)组、阳性药阿托伐他汀(10 mg·kg~(-1))组.造模后第2天开始给药,连续给药14 d后取胸主动脉损伤段,以组织形态学和免疫组织化学方法测定血管形态计量指标及PCNA表达.结果:模型组的内膜面积、内膜厚度、内膜面积增生比率、内膜厚度增生比率、内膜/中膜面积比、内膜/中膜厚度比均显著大于假手术组(P＜0.01).PNS组和阿托伐他汀组上述各指标均低于模型组(P＜0.05).模型组增生内膜中PCNA表达较假手术组显著增强(P＜0.01).PNS组、阿托伐他汀组PCNA表达均显著低于模型组(P＜0.01).结论:PNS可抑制血管内膜损伤后引起的血管内膜增生,其作用可能是通过抑制血管内膜损伤后血管平滑肌细胞增殖而实现的.     

冠心合剂对兔颈动脉球囊损伤后MCP-1、C—myc基因表达的影响

目的：观察冠心合剂对兔颈动脉经皮冠状动脉腔内成形术（PTCA）损伤后对MCP-1、C-myc基因表达的影响。方法：运用球囊原位扩张、拉伤致兔颈总动脉损伤建立PTCA术后内皮损伤模型。从术前3天开始冠心合剂各剂量组予相应剂量冠心合剂每日灌胃给药,分别于第2、4、6周处死动物,取手术侧颈动脉做标本,用RT-PCR法检测兔颈动脉MCP-1、C-myc mRNA的表达。结果：冠心合剂各剂量组MCP-1、C-myc mRNA的表达较模型组降低（P〈0.05）;冠心合剂各剂量组MCP-1、C-myc mRNA的表达较假手术组升高（P〈0.05）;大、中、小剂量组组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：冠心合剂可抑制MCP-1、C-myc mRNA的表达,其表达呈剂量依赖性,冠心合剂对PTCA损伤后再狭窄的保护机制可能与抑制MCP-1、C-myc mRNA的表达有关。