铅对大鼠肠道神经元和血管平滑肌细胞NOS活性的影响

用 β NADPH组织化学方法研究铅对大鼠肠壁肌间神经丛内神经元和血管平滑肌一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响。结果发现 :腹腔注射醋酸铅 ( 4 0mg·kg- 1 ) 1 5d后 ,大鼠肠道NOS阳性神经元和阳性纤维数量减少 ,且阳性神经元的形态也有不同程度的改变 ,肠壁内血管平滑肌NOS活性下降。上述变化提示NO的生成减少可能是铅中毒时腹绞痛的机制之一     

NO、NOS与血管平滑肌细胞周期调控

血管平滑肌细胞 (Ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ,ＶＳＭＣ)存在于血管壁中膜 ,它是决定血管活性、血管构型及维持血管张力的重要因素。根据其结构和功能的不同 ,ＶＳＭＣ可分为收缩型和合成型两种表型。收缩型ＶＳＭＣ呈分化状态 ,不能增殖 ;合成型ＶＳＭＣ呈去分化状态 ,对外界各种有丝分裂原起反应而活跃增生。但在胚胎时期或病理因素下 ,ＶＳＭＣ可由收缩型转化为合成型 ,即发生表型转化。ＶＳＭＣ向合成型转化是ＶＳＭＣ增生的先决条件。合成型细胞从中膜向内膜迁移并大量增殖是冠脉成形术后发生再狭窄的前提 ,也是…     

牛磺酸拮抗铅对大鼠海马NOS阳性神经元数目的影响

Objective: To study taurine resist lead impact ability of learning and memory. Methods: Using NADPH-d histochemistry method to study the quantity change of the rat's NOS positive neuron in hippocampus , the rat in experiment sections which are feeded with distinct dosage lead acetate in drinking (0.02, 0.2g/L) and feed contain distinct dosage taurine (5, 10g/kg). Results: Taurine could increase NOS positive neuron quantity obviously in hippocampus of rat induced lead lesion. Conclusion: Taurine could resist lead impact ability of learning and memory obviously.     

大鼠血管平滑肌细胞分离培养的探讨

目的：培养大鼠血管平滑肌细胞。方法：手术显微镜下分离主动脉和肺动脉，再用翻转干涸法进行操作。结果：显微镜下分离组织，岢基本除净动脉纤维脂肪层和外膜，再用刀片轻刮内膜，可保证所贴组织块为地动脉中膜。传至第三代时，用台盼蓝检查细胞传代成活率９５％，光镜、电镜和免疫组化鉴定培养细胞，培养细胞纯度９６％。结论：贴块片简便易行、经济、又可以防止膜损伤，可为血管病理变化研究提供适宜的细胞。     

流体切应力对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的探讨流体切应力（SS）对体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）形态学影响。方法运用倒置相差显微镜和免疫组化ABC方法对VSMC进行鉴定，采用荧光显微镜和TuNEL—AP方法观察其变化。结果组织块贴壁法培养的VSMC呈典型的长梭形，α—actin染色显示95％以上VSMC呈阳性；SS强度分别为1．041、4．767和10．389dyne／cm^2冲击VSMC12h其凋亡百分率分别为（1．56±0．28）％、（1、95±0．23）％和（2、62±0．49）％，而对照组分别为（0、61±0．12）％、（0．55±0．16）％和（0、64±0．24）％，两组比较差异有统计学意义（P〈0.01），随着冲击时间的延长凋亡细胞有进一步增多的趋势。结论VSMC大量凋亡可由SS所诱导，颅内动脉瘤组织内VSMC过度凋亡可能与局部升高的SS密切相关。     

川芎嗪对高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙的影响

目的研究川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响。方法以体外培养的自发性高血压大鼠和正常血压对照大鼠的心肌细胞及动脉平滑肌细胞为实验模型，用Fura-2荧光法检测细胞内游离钙浓度。结果自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度显著高于正常血压对照大鼠。川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度具有显著抑制作用，并呈现量效关系。较高剂量的川芎嗪对正常血压对照大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度也有抑制作用；而较低剂量的川芎嗪不仅无抑制作用，还使正常血压对照大鼠心肌细胞游离钙浓度显著升高。结论川芎嗪具有钙离子拮抗剂的特性，其在高血压防治中的作用，值得进一步探讨。     

大鼠血管平滑肌细胞的培养和鉴定

目的:建立一种方便快捷的培养大量大鼠血管平滑肌细胞的方法,为心血管疾病的体外实验研究提供实验材料。方法:采用改良的组织块贴壁法进行原代培养,差异贴壁法纯化细胞,常规胰酶消化法传代,使用倒置相差显微镜进行形态学观察,通过检测平滑肌肌动蛋白对细胞进行免疫组化鉴定。结果:培养4代的平滑肌细胞纯度达96%以上。镜下可见培养细胞呈典型的"峰-谷"样生长,免疫组化染色显示胞质内平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论:本研究所介绍的组织贴块培养法较为成熟,可为心血管疾病病因、机制的研究和防治提供一个理想的实验材料。     

血管舒缓素对PDGF诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨了血管舒缓素对血小板趋化生长因子（ＰＤＧＦ）诱导培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法 取ＳＤ大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行培养,传至５代后,分组观察ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素组、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素＋缓激肽受体拮抗剂组等。干预因素作用于血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）,对＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）的掺入及原癌基因ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ的表达的影响。结果 １．ＰＤＧＦ可促进ＶＳＭＣ     

TNP—470对大鼠血管平滑肌细胞生长的抑制作用及细胞周期的影响

OBJECTIVE: To study the effect of TNP-470 on the growth and cell cycle of vascular smooth muscle cells (VSMCs) in rats. METHODS: MTT assay was employed to observe the growth inhibition of the VSMCs from rat thoracic aorta cultured in vitro by TNP-470, and the effect of TNP-470 on the cell cycle and expressions of cyclin D1, CDK4 and p27 in the VSMCs were examined by flow cytometry. RESULTS: TNP-470 exhibited inhibiting effect on the growth of VSMCs in vitro, with the IC(50) value of 23.3 g/L. The cell ratios of the VSMCs at S phase and G(2)/M phase were significantly decreased to (15.43+/-5.16)% and (9.49+/-2.70)% respectively in response to TNP-470 treatment from the control levels of (22.29+/-6.80)% (P<0.05) and (16.51+/-8.61)% (P<0.05), and G(0)/G(1)-phase cell ratio significantly increased to (75.14+/-6.62)% from (60.38+/-7.23)% (P<0.001). TNP-470 had resulted in significantly lowered proliferation indexes of the VSMCs, from 39.62+/-7.23 down to 23.76+/-7.92 (P<0.001). After TNP-470 treatment, the expression of cyclin D1 and CDK4 in the VSMCs were both significantly decreased (P<0.05) while p27 underwent contrary changes (P<0.001). CONCLUSION: TNP-470 executes its inhibiting effect on VSMC growth by way of halting the cell cycles, the mechanism of which may involve the expressions of cyclin D1, CDK4 and p27.     

烧伤大鼠肠道一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

研究烧伤后肠道一氧化氮有一氧化氮合酶的变化规律。方法：采用３０％总体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型，分别检测了肠组织中ＮＯ含量及原生型ＮＯＳ和诱导型ＮＯＳ的活性，并分析了ＮＯ的变化规律及其同两型ＮＯＳ之间的关系。结果：烧伤后肠组织中ｉＮＯＳ活性大幅上升，与ＮＯ的变化趋势一致，二者呈显著正相关而ｃＮＯＳ活性呈下降趋势，与ＮＯ相关不显著。     

肠缺血再灌注对大鼠肺组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的：观察大鼠肠缺血再灌注后肺泡巨噬细胞活化分泌ＮＯ及肺组织内ＮＯＳ的变化。方法：建立实验大鼠肠缺血再灌注模型,采用Ｇｒｉｅｓｓ法和分光光度法分别测定肺组织内ＮＯ及ＮＯＳ的活性。结果：肠血再灌注组肺泡巨噬细胞分泌ＮＯ的水平及肺内ＮＯＳ的水平均显著高于假手术对照组。结论：肠缺血再灌注后肺内巨噬细胞的ｉＮＯＳ被激活,大量合成并释放ＮＯ,其作用一方面可增强杀菌功能,另一方面导致肺组织损伤。     

铅对大鼠海马一氧化氮合酶活性的影响

目的：探讨铅对海马LTP的影响与海马不同亚区NOS活性变化的关系。方法：采用NADPH—d组化法对铅暴露大鼠海马不同亚区内一氧化氮合酶活性的变化进行研究。结果：染铅大鼠海马CAI区和齿状回NOS阳性细胞数均明显少于对照组（P＜0．05）;在CA3区染铅组NOS阳性细胞数目与对照组无明显差别。结论：推测铅对海马LTP的影响可能与染铅后海马各区NOS活性的不同变化有关。     

延胡索炮制前后在金铃子散中对大鼠肠管平滑肌的影响

[目的]观察延胡索和醋延胡索分别与川楝子配伍后对大鼠离体肠管平滑肌收缩活动的影响。[方法]制备Wistar大鼠离体小肠平滑肌,观察延胡索炮制前后配伍川楝子对离体肠管平滑肌自发活动、乙酰胆碱(Ach)所致平滑肌收缩、阿托品所致平滑肌舒张的影响。[结果]以张力变化为指标,延胡索和醋延胡索分别与川楝子配伍后的低、中、高剂量组对大鼠离体肠管平滑肌自发舒缩活动均有抑制作用,且延胡索醋制后配伍川楝子其解痉作用更显著。此外,延胡索及其炮制品配伍川楝子后对乙酰胆碱引起的肠平滑肌兴奋有显著拮抗作用且延胡索炮制品入复方后其拮抗作用更为显著。此外,两者均可协同阿托品的松弛作用。[结论]延胡索及其炮制品配伍川楝子后对大鼠肠管平滑肌活动均有抑制作用,在高剂量下醋延胡索入药对肠痉挛的改善优于生延胡索入药。     

一氧化氮合酶阳性神经元在大鼠下丘脑的分布

采用ＮＡＤＰＨ－Ｄ组织化学方法研究了一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元在大鼠下丘脑的分布。结果：ＮＡＤＰＨ－Ｄ阳性神经元在室旁核、视上核、室周核和下丘脑外侧区活性较高，在穹隆周核、乳头复合体和正中隆起外侧带也有阳性细胞。提示：ＮＯ可能参与下丘脑激素的调节。     

一氧化氮合酶抑制剂L-NAME抗大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

许多血管性疾病的产生与一氧化氮(NO)生成不足有关,如:高血压、动脉硬化、PTCA术后再狭窄及与感染性休克相关的血管反应性降低等。NO是由细胞内的左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg)经一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)作用而生成的。NO的合成可以被酶抑制剂NG-硝基L-精氨酸甲酯(L-NG-nitro-arginine methyl ester,L-NAME)、氨基胍(aminoguanidine)等抑制。 研究[1,2]发现,L-NAME可以升高大鼠的血压,但不伴心室肥大。因而推测L-NAME可能具有抑制细胞增殖的作用。Mabrouk等[3]在体外试验中证明,L-NAME可以抑制肠动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的     

NO含量和NOS活性在兔软骨终板退变过程中的变化

OBJECTIVE: To study the role of nitric oxide (NO) and nitric oxide synthase (NOS) in the degeneration of rabbit cartilage endplate (CEP). METHODS: Twenty-four New Zealand rabbits were divided into experiment (n=12) and control (n=12) groups, and in the former group rabbit models of lumbar CEP degeneration was established by resection of all the lumbar supraspinous and interspinous ligaments and excision of part of the zygapophyseal joints followed by detachment of the posterior paravertebral muscles from the lumbar vertebrae. Lumbar X-ray was performed in both groups 12, 24 and 36 weeks after operation, respectively. The content of NO and NOS activity in the CEP were also measured. RESULTS: X-ray of the CEP reveal gradual calcification of the cartilage endplate with the elapse of time, which was more obvious in the experiment group. The content of NO and NOS activity was significantly increased in the experiment group after the operation (P<0.05), but their difference between the measurements at 24 and 36 weeks postoperatively was not obvious (P>0.05). CONCLUSION: NO may play an important role in the development and progression of rabbit cartilage endplate degeneration.     

葛根素对酒精中毒后家兔离体小肠平滑肌活动的影响

目的观察葛根素对酒精中毒后家兔离体小肠平滑肌活动的影响,探讨其解酒机制。方法制备家兔十二指肠离体肠段标本,采用常规离体灌注小肠平滑肌标本活动的实验方法,记录用药前后肠段平滑肌自发收缩性活动变化。结果乙醇使家兔小肠平滑肌收缩活动的幅度、频率明显减小,与乙醇单用相比,葛根素使以上两项指标进一步降低,并呈剂量依赖关系。结论葛根素加强了乙醇对小肠活动的抑制作用,可能并非通过其对小肠作用达到解酒之功效。     

腺病毒介导的eNOS基因转移时血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨腺病毒载体介导的内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因转染血管平滑肌细胞（VSMC）的效率及其对冠状动脉旁路移植术后再狭窄基因治疗的可行性。方法：构建带有eNOS基因的复制缺陷型重组腺病毒转染体外培养的VSMC，应用聚合酶（PCR），逆转录PCR（RT－PCR）技术和免疫组化法检测外源基因转染及表达效率；应用MTT法和流式细胞仪检测eNOS基因对VSMC的抑制作用。结果：外源性eNOS基因成功导入了VSMC；VSMC中有eNOS基因mRNA的表达；外源性eNOS蛋白呈高效表达。eNOS基因重组腺病毒载体转染细胞后，可显著抑制VSMC的生长，DNA合成减少。结论：腺病毒介导的eNOS基因可高效地转染VSMC，并可有抑制细胞生长。