孕妇外周血中胎儿有核红细胞在性连锁遗传病产前诊断中的初？…

目的：探讨利用母血胎儿有核红细胞进行性连锁遗传病产前诊断的可行性;方法：通过密度梯度离心富集母血胎儿有核红细胞,并经流式细胞你鉴定,对富集后胎儿有核红细胞进行了ＳＲＹ基因的套式ＰＣＲ检测;结果：５例有性连锁遗传病家族史的孕妇中血中经扩增我阳性、２例阴性,所得结果均得到相应羊水、胎盘ＤＮＡＳＲＹ／ＰＣＲ检测或出生胎儿生殖器检查结果的证实;结论：母血中胎儿有核红细胞可用于性连锁遗传病的早期产前诊断。     

孕妇外周血中的胎儿有核红细胞在非损伤性产前诊断中的研究进展

20世纪70年代以来，研究人员开始探索分离孕妇外周血中胎儿细胞的方法来进行非损伤性产前诊断。本文对用于非损伤性产前诊断的最佳候选细胞-胎儿有核红细胞的特点、分离方法、培养、临床应用等方面的研究进展作一综述。     

孕妇外周血中的胎儿有核红细胞在非损伤性产前诊断中的研究进展

20世纪70年代以来,研究人员开始探索分离孕妇外周血中胎儿细胞的方法来进行非损伤性产前诊断。本文对用于非损伤性产前诊断的最佳候选细胞-胎儿有核红细胞的特点、分离方法、培养、临床应用等方面的研究进展作一综述。     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞用于产前诊断的研究进展

本文概述孕妇外周血中胎儿有核红细胞的分离与检测用于产前诊断的研究状况,描述母体外周血中的胎儿细胞的特点,胎儿有核红细胞的富集和分离方法,并对各方法的优点、缺点、病理性妊娠的意义、临床应用、存在的问题及研究进展作一综述。     

磁激活细胞富集孕妇外周血中胎儿有核红细胞行产前诊断

目的：研究磁激活细胞分离富集孕妇外周血胎儿有核红细胞进行产前诊断的可行性。方法：２１名孕１３－２９周孕妇及５名未妊娠妇女外周血４－６ｍｌ,经单密度梯度离心和激活细胞分离,收集阳性组分抽提ＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增预测胎儿性别,并以出生后婴儿性别验证预测性别的准确性。     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞的富集与纯化及其在非侵入性产前诊断中的应用

分子生物学技术已证实孕妇外周血中主要存在 4种胎儿细胞 ,即 :滋养层细胞、粒细胞、淋巴细胞和有核红细胞。最适于富集纯化的是胎儿有核红细胞 (NRBCs)。应用密度梯度离心和流式细胞技术已能分选出该类细胞 ,并成功地应用于产前诊断胎儿性别及非整倍体疾病     

孕妇外周血中胎儿有核红细胞的富集与纯化及其在非侵入性产前诊断中的应用

分子生物学技术已证实孕妇外周血中主要存在4种胎儿细胞,即：滋养层细胞、粒细胞、淋巴细胞和有核红细胞。最适于富集纯化的是胎儿有核红细胞（NRBCs)。应用密度梯度离心和流式细胞技术已能分选出该类细胞,并成功地应用于产前诊断胎儿性别及非整倍体疾病。     

产前胎儿性别PCR鉴定方法及其在X连锁遗传病诊断中的应用

作者采用ＰＣＲ技术扩增Ｙ染色体长臂上的ＤＹＺ－１基因，对２２８例羊水进行了产前胎儿性别鉴定，其中４例为ＤＭＤ／ＢＭＤ的高危患儿，１例为甲型血友病的高危患儿。同时用常规细胞遗传学检查作比较，结果表明ＰＣＲ技术用于产前胎儿性别鉴定具有快速、简便、灵敏、特异性强、方法稳定可靠等优点，对Ｘ连锁遗传病的产前诊断具有重要作用。     

应用荧光原位杂交技术早期诊断胎儿连锁遗传病和染色体异常

目的 建立一种无损伤性、安全、可靠的孕早期产前诊断胎儿性别和染色体异常的新途径。方法 用双色X／Y探针（CEP X／Y）和21号染色本探针（LSI21）荧光原位杂交经宫颈冲洗宫腔收集的滋养细胞。结果 荧光原位杂交诊断胎儿性别正确率为95．2％。灵敏度为93．1％, 假阴性率为6．8％。21号染色体基因定位探针荧光原位杂交在平均92％的细胞核中出现2个杂交信号。结论 冲洗宫腔收集的细胞确实存在胎儿滋养层细胞,与探针荧光原位杂交,可以快速,安全,早期用于性连锁遗传病的产前性别和染色体非整倍体异常的诊断。     

孕妇血中胎儿细胞在产前诊断中的初步应用──胎儿SRY基因的鉴定

以Ｎｙｃｏｄｅｎｚ和Ｐｒｅｃｏｌｌ作为分离介质，对２３名孕龄为６～４１周，年龄为２１～２８岁的孕妇外周血中胎儿细胞进行了密度梯度离心富集。其中１５名怀男胎孕妇外周血富集前后各类细胞ＳＲＹ基因的ＰＣＲ扩增检查表明，大部分孕妇外周血多核细胞及低密度单个核细胞扩增结果为阳性，与胎儿实际性别符合率分别为８０．０％和９３．３％．这一结果提示：（１）ＰＣＲ分析母血中胎儿细胞单拷贝基因应采用低密度细胞多核细胞，且以前者为优；（２）密度梯度离心法已在一定程度上从母血中富集胎儿细胞，且所获得的细胞已基本上满足了ＰＣＲ扩增单拷贝基因所需的模板量；（３）富集实验证实母血中胎儿细胞大致由多核细胞及低密度单个核细胞两部分组成，而未经富集的孕妇血单个核细胞及高密度细胞中仅有少数几例呈ＳＲＹ阳性，符合率分别为１３．３％和６．７％；提示从未富集的孕妇外周血中按常规方法难以扩增出含量极微的胎儿单拷贝基因。在对３名怀女胎的孕妇外周血富集前后各类细胞共３２份标本进行ＳＲＹ基因的检测时，出现３例假阳性结果，其原因不明，不能排除外源男性ＤＮＡ的污染或前次妊娠的残留胎儿细胞的干扰所致。     

孕妇外周血胎儿细胞应用于非侵入性产前诊断研究进展

孕妇外周血胎儿细胞可以通过非侵入性方法获得，其内含有胎儿的遗传物质，可用于产前诊断。通过胎儿细胞筛查胎儿染色体异常和基因异常，可达到优生的目的。目前，胎儿细胞应用于产前诊断时还存在一定的问题。本文从胎儿细胞种类、分离时间、细胞源性、分离方法、筛选富集、DNA分析等方面对胎儿细胞应用于产前诊断存在的问题及研究进展进行综述。     

孕中晚期胎儿血细胞各项参数变化的研究

目的探讨孕中晚期胎儿血细胞各项参数变化规律,了解胎儿血细胞的生成情况,为产前胎儿宫内疾病诊断提供依据。方法采用Bayer ADVIA120全自动五分类血细胞分析仪对249例孕18～39周胎儿脐血血细胞进行以下各项参数的检测:白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(NEU%)、淋巴细胞百分比(LYM%)、单核细胞百分比(MON%)、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)、嗜碱性粒细胞百分比(BASO%)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)、红细胞比容(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血小板PLT等。结果孕中晚期胎儿脐血细胞各项参数中有5项(WBC、NEU%、RBC、HGB、HCT)随着孕周增加而逐渐增大;有2项(MCV、LYM%)随着孕周增加而逐渐减小;还有7项(EOS%、MON%、BASO%、MCH、MCHC、RDW、PLT)在各孕周中变化不大。脐血血细胞各项参数与出生后水平存在显著差异。结论胎儿脐血血细胞成分处在一个动态变化的过程中,不同妊娠阶段胎血中各系血细胞的构成比有较大的差异。因此探讨孕中晚期胎儿血细胞各项参数变化规律有重要意义,在诊断胎儿期贫血,炎症等宫内疾病有重要参考价值。     

PCR扩增孕妇外周血DNA进行胎儿性别诊断

采用密度梯度离心技术对40例孕妇外用血中胎儿细胞进行富集,并用PCR技术扩增了Y染色体特异重复序列,以产前基因诊断胎儿性别,结果38例胎儿性别诊断准确,证明此技术可作为无创伤性方法用于X连锁遗传病的产前诊断.     

两种遗传标记系统鉴定母血中有核红细胞来源

目的探讨母血中胎儿有核红细胞的鉴定方法及其对无创性产前诊断的意义。方法86例孕妇外周血,以血红蛋白γ链染色结合显微操作分离获取胎儿有核红细胞。经PEP扩增胎儿细胞基因组后,共70例进行SRY基因检测;32例进行X-STR位点DXS101、DXS6797分析并与双亲基因型对比,判断模板细胞来源及胎儿性别。结果所有孕妇血样均检出胎儿有核红细胞。SRY基因判断胎儿性别的准确率为97.14%(68/70)。联用DXS101、DXS6797对胎儿细胞鉴定及性别判断的准确率达100%(32/32)。16例同时接受2种方法,检测结果均一致。结论采用SRY基因或多X-STR位点作为母血中胎源细胞鉴定系统,两种方法均能有效判断细胞来源,且各有优缺点,两者结合将有更广阔的应用前景。     

X-连锁肾上腺脑白质营养不良产前诊断探讨

目的探讨X-连锁肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy,ALD)产前诊断的方法。方法应用气相色谱-质谱联用法对17例ALD高危孕妇进行了18次羊水细胞中极长链脂肪酸(very long chain fatty acids,VLCFAs)水平测定,其中8例胎儿出生后或引产后进行了血浆VLCFAs水平检测。应用PCR和测序方法对8例胎儿羊水细胞或生后外周血细胞DNA进行了基因突变分析(其中4例羊水细胞VLCFAs水平增高,4例VLCFAs正常)。应用Western杂交对同一家系的两例胎儿羊水细胞进行了ALD蛋白(ALD protein,ALDP)的检测(两例胎儿VLCFAs均增高,1例女性,1例男性)。结果18例胎儿中,11例羊水细胞VLCFAs水平正常,7例增高(3例男性,4例女性)。8例胎儿出生后或引产后血浆VLCFAs水平检测,3例增高,5例正常,与产前诊断结果相一致。其中4例羊水细胞VLCFAs水平增高的胎儿,均有ABCD1基因突变,4例羊水细胞VLCFAs水平正常者,均未发现突变。VLCFAs增高的男性胎儿,未检测到ALDP,VLCFAs增高的女性胎儿,可检测到ALDP。结论羊水细胞中VLCFAs水平检测可以准确地进行X-ALD产前诊断,结合基因突变分析及ALDP的测定,可进一步保证产前诊断的准确性。     

胎儿肠梗阻的产前诊断和临床预后

目的探讨胎儿肠梗阻产前诊断的临床意义.方法本文应用超声产前诊断89例胎儿肠梗阻患者,向其交代可能的预后,如患者选择引产放弃胎儿,则对患儿尸体进行解剖验证;如选择继续妊娠患者,定期随访,严密监测,必要时行新生儿腹部X线平片拍摄和钡灌肠造影,检查是否存在梗阻部位和梗阻类型,诊断明确后行手术或保守治疗.分娩后取胎儿脐带血进行胎儿染色体分析.结果 1.89例产前发现胎儿肠梗阻患者,产后证实为消化系统畸形66例(74.16%),伴羊水增多47例.具体表现为:十二指肠病变为17例,16例合并羊水增多(94.12%);小肠病变41例,30例合并羊水增多 (73.17%);大肠病变8例,1例并发羊水增多 (12.5%).2.23例 (25.84%) 新生儿未发现异常表现.3.6例为多发畸形(9.09%),5例合并染色体异常(9.26%).结论产前诊断胎儿肠梗阻,并给予严密监护和正确的临床管理,对优生优育及出生后早期、及时治疗具有重要临床指导意义.     

胎儿多囊性肾病变的产前诊断和临床分析

目的探讨胎儿肾脏多囊性病变的原因和临床意义。方法本文对59例产前超声发现胎儿肾脏多发囊性病变患者进行临床管理,向患者交代可能的预后,让其知情选择,如患者选择终止妊娠放弃胎儿,则对患儿尸体进行解剖验证,并引产后取脐血进行染色体分析;如选择继续妊娠患者,定期随访,严密监测。结果1.59例患者产前诊断为多囊性肾病变,其中多囊性肾发育不良40例（27例选择了终止妊娠放弃胎儿,其中1例合并染色体异常,2例伴其他部位畸形;13例患者选择了继续妊娠,分别于出生后3个月至2.5岁时因并发症出现而选择患侧肾脏切除）;婴儿型多囊肾6例（2例合并多囊肝,1例染色体为21三体。4例选择终止妊娠放弃胎儿,病理证实为婴儿型多囊肾。另2例患者选择继续妊娠,其中1例患儿于新生儿期死亡,另1例患儿于出生后13个月死亡）;成人型多囊肾10例（染色体均正常。3例选择终止妊娠放弃胎儿,1例于新生儿期死亡;1例于出生后7个月死亡,其余5例目前临床无不适症状,正严密观察中）。2.3例胎儿肾多发囊肿患者,均为单侧肾脏发病,其中1例选择终止妊娠放弃胎儿,另1例患儿出生后1岁时行患侧肾切除术,另1例现已经生后11个月,没有任何临床症状,复查肾脏囊肿与出生前没有明显改变。结论胎儿肾脏多囊性病变类型多样,病因不尽相同,临床结局也不相同,建议产前仔细鉴别胎儿肾脏囊肿类型,根据囊肿类型对胎儿可能的预后给予产前合理评价及咨询意见。     

一例Krabbe病患者家系的产前诊断和基因突变分析

目的探讨一例Krabbe病患者的遗传病因,并对家系成员进行基因突变分析及产前诊断。方法应用全外显子测序技术对Krabbe病患者进行致病突变筛查,结合临床表型,确定候选基因的致病位点,Sanger测序验证夫妻双方GALC基因,孕妇进行绒毛穿刺和羊水穿刺,对GALC基因测序并进行产前诊断。结果全外显子测序结果显示家系中Krabbe病患者存在GALC基因c.599C>A(p.Ser200*)和c.461C>A(p.Pro154His)位点复合杂合变异,其父亲为c.461C>A(p.Pro154His)位点杂合变异携带者,母亲为c.599C>A(p.Ser200*)杂合变异携带者。绒毛和羊水检测GALC基因为c.461C>A(p.Pro154His)位点杂合变异。结论 GALC基因c.599C>A(p.Ser200*)和c.461C>A(p.Pro154His)位点复合杂合变异是该家系中Krabbe病患者的发病原因,胎儿绒毛和羊水检测结果与先证者不同,为该家系遗传咨询和产前诊断提供有力证据,有效预防出生缺陷。