前列腺素介导部分生长因子的促肝细胞分裂与细胞保护作用

肝细胞生长因子 (ＨＧＦ)、表皮生长因子(ＥＧＦ)、转化生长因子α (ＴＧＦα)以及肝刺激因子(ＨＳＳ)等作为有丝分裂剂 ,在肝细胞增殖和肝再生过程中起着重要的作用[1] 。近年来又有较多的研究证实 ,ＨＧＦ、ＨＳＳ等生长因子对肝毒剂 (ＣＣ14 、半乳糖胺等 )损伤肝细胞具有细胞保护作用[2 ,3] 。另外 ,再生肝本身也具有很强的抗损伤能力 ,其机制之一就是再生肝中含有ＨＳＳ等生长因子[4 ] 。上述资料表明 ,部分生长因子对肝细胞有促分裂增殖和细胞保护双重作用。生长因子刺激细胞分裂增殖及其作用途径已较为清楚 ,但其细胞保护作用及其途…     

不同浓度EGF对人脐血间充质干细胞增殖的研究

目的探索不同浓度表皮生长因子（EGF）对人脐血间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）增殖的影响。方法无菌条件下来集正常人脐血，密度梯度离心法分离脐血单个核细胞，用Mesencult培养基进行纯化和扩增培养，通过MTT法检测不同浓度的EGF的促人脐血MSCs增殖作用。结果EGF的5—100ng／ml各浓度组增殖效应均明显大于对照组（P〈0．05），10ng／ml组明显大于其它各浓度组（P〈0．01）。结论EGF对体外培养的人脐血MSCs有促进增殖的作用，此作用呈剂量依赖性。     

表皮生长因子与碱性成纤维生长因子对人牙髓干细胞增殖的影响

目的：探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)增殖能力的影响。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法分别测定不同浓度EGF和bFGF在不同时间,单独或联合应用对hDPSCs增殖能力的影响。结果：50 ng/ml EGF和20 ng/ml bFGF促hDPSCs增殖能力最强。以50ng/ml EGF、20ng/ml bFGF单独或联合作用,其促hDPSCs增殖能力均具有时间依赖性,第3 d、5 d、7 d, EGF、bFGF促hDPSCs增殖作用显著增强,二种生长因子联合作用,促增殖作用显著高于其单独作用效果,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：生长因子EGF和bFGF最大效应浓度分别为：50 ng/ml、20 ng/ml。EGF和bFGF单独作用均能显著促进hDPSCs的增殖,二者联合作用对hDPSCs的增殖有一定的协同作用。     

表皮生长因子受体在AngⅡ促心肌血管平滑肌细胞增殖中的作用

表皮生长因子受体是受体酪氨酸激酶超家族中的一员,是细胞生长、分化和存活的重要调节因子,其作为中心点将AngⅡ与酪氨酸激酶通路连接起来,促使了心肌、血管平滑肌细胞的增殖重构,导致了某些心血管疾病的发生、发展。     

高浓度葡萄糖对小鼠表皮干细胞增殖的影响

目的 探讨高浓度葡萄糖对小鼠表皮干细胞增殖的影响.方法 利用Ⅳ型胶原的快速黏附法分离培养小鼠表皮干细胞,观察其形态学;通过免疫荧光法检测表皮干细胞标志物β1整合素和K19来鉴定表皮干细胞;将小鼠表皮干细胞分别放在葡萄糖浓度为5.6、15和30mmol/L的培养基里培养;MTT法检测细胞增殖情况,免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平.结果 体外培养的小鼠表皮干细胞呈克隆样生长,增殖速度较快,细胞形态呈铺路石样,边缘细胞呈梭形,细胞核质比较大;免疫荧光法检测到培养的小鼠表皮干细胞β1整合素和K19呈阳性表达且阳性表达率均为100％;MTT法检测到与对照组（5.6mmol/L浓度葡萄糖）相比,15mmol/L浓度葡萄糖刺激72h后检测到细胞增殖速度无明显改变,而30mmol/L浓度葡萄糖刺激24、48和72h后检测到细胞增殖速度降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot法检测到与对照组相比,30mmol/L浓度葡萄糖刺激48h后凋亡蛋白Bax的蛋白表达量明显增加而抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）.结论 本研究结果表明较高浓度（30mmol/L）葡萄糖可以明显抑制小鼠表皮干细胞的增殖,从干细胞角度进一步为糖尿病创面难愈的原因提供了实验室依据.     

KGF在成纤维细胞促进表皮细胞增殖中的作用

目的  研究成纤维细胞产生的角质细胞生长因子（KGF）对表皮细胞增殖的影响。方法  自包皮分离培养成纤维细胞和表皮细胞,采用逆转录-聚合酶链反应法(RT PCR)、酶联免疫吸附法(ELISA)、MTT法和免疫荧光等方法分别检测成纤维细胞KGF基因的转录水平、培养液中KGF的浓度、成纤维细胞培养液对表皮细胞增殖的促进作用。结果  RT-PCR结果显示,成纤维细胞中KGF转录水平显著,ELISA法可检测到成纤维细胞培养液中存在较高水平的KGF,细胞计数结果和MTT结果表明,含有KGF的成纤维细胞培养液能够促进表皮细胞增殖,保持表皮细胞的活性,免疫荧光观察到KGF与表皮细胞表面的特异性受体结合。结论  成纤维细胞能够合成和分泌较高水平的KGF,成为其促进表皮细胞增殖的重要因素。     

表皮生长因子对体外建株瘤细胞的促增殖作用及其对瘤细胞顺铂敏感…

本文采用３，４，５－二甲基噻唑－２，５－二苯基－国唑溴化的比色法及乳酸脱氢酶释放法，研究了表皮生长因对人骨髓红白血病细胞系，人Ｂ淋巴细胞白血病细胞系膜静脉血栓人宫颈癌细胞系的促增殖作用及其对３种瘤细胞顺铂敏感性的影响。结果显示，ＥＧＦ能够促进Ｒａｊｉ，Ｈｅｌａ细胞增殖，对Ｋ５６２细胞的生长没有促进作用。     

肝细胞生长因子对冠状动脉平滑肌细胞增殖迁移的影响

为观察肝细胞生长因子(HGF)对牛冠状动脉平滑肌细胞(BCASMC)增殖、迁移的影响,分离和培养BCASMC,采用四甲基偶氮唑蓝法观察HGF对BCASMC增殖的作用,倒置显微镜观察BCASMC的迁移。结果显示,对照组、HGF组BCASMC的D值相差显著(P<0.05),HGF组的BCASMC增殖率为45.2％,且迁移明显。提示HGF能促进BCASMC的增殖和迁移。     

HGF对大鼠移植小肠粘膜细胞增殖及凋亡的作用研究

目的：了解肝细胞生长因子(HGF)对大鼠移植小肠粘膜细胞增殖及凋亡状态的影响。方法：Wistar(RT1k )大鼠行异位全小肠移植后第2天开始给予肠外营养至第10天，对照组(n=10)行常规TPN支持，HGF组(n=10)行常规TPN支持并加HGF，采用流式细胞技术及原位末端标记技术观察各组实验前后移植肠粘膜细胞增殖指数的变化。结果：两组移植前基准增殖指数及凋亡指数无显著差异(P>0.05)，实验后对照组移植肠粘膜细胞增殖指数较移植前明显下降，HGF组增殖指数较移植前明显升高，对照组凋亡指数较移植前明显升高，HGF组凋亡指数增加不明显。结论：HGF能明显促进大鼠移植小肠粘膜细胞增殖，并减轻其凋亡，构成了其对移植肠形态及功能维护作用的物质基础。     

Go6976阻断EGF的促ER阴性乳腺癌细胞增殖作用

目的:研究表皮生长因子(EGF)在体外和裸鼠模型体内促进雌激素受体(ER)阴性乳腺癌细胞株增殖作用,以及应用蛋白激酶C(PKC)抑制剂Go6976对该作用的影响。方法:以流式细胞技术研究EGF和Go6976对ER阴性乳腺癌细胞株细胞周期的影响,连续观察二者干预下的裸鼠乳腺癌模型的种植瘤生长情况7周。结果:流式细胞检测显示EGF组与对照组相比G2/M和S期细胞百分比增加,增殖指数(PI)达到0.31,EGF有促进肿瘤细胞增殖作用,EGF Go6976组G0/G1期细胞占91.54%,PI为0.09(P<0.01),显示Go6976有抑制EGF的促增殖作用。对裸鼠种植瘤的生长观测显示EGF组肿瘤体积增长最快,而Go6976组肿瘤体积增长最慢。在肿瘤重量观察中,EGF组肿瘤较对照组增加约78%(P<0.01),显示EGF可以促进ER阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-435S在裸鼠体内生长,而Go6976 EGF组与EGF组比较,种植瘤重量减少(P<0.01),显示Go6976可以抑制EGF的促肿瘤增殖作用。结论:EGF家族的生长信号无论在体外试验还是在裸鼠模型体内实验中都显示有促进ER阴性乳腺癌细胞的增殖的作用。PKC作为EGF家族信号传递过程的重要参与者,抑制其活性可以对EGF信号起到反向调节作用。     

肉苁蓉种子的活力研究

目的为了改进TTC法测定肉苁蓉种子活力的方法和调查肉苁蓉种子于5℃贮藏时种子活力的变化。方法研究了TTC法中种皮、TTC溶液、次氯酸钠(NaClO)溶液和染色时间对肉苁蓉种子活力的影响,并用改进的方法测定了于5℃贮藏了不同年限种子活力。结果肉苁蓉种子于40℃下用0.5%TTC溶液染色48h后,再用0.2%NaClO溶液漂白2h后镜检;采收后贮藏于5℃保存1～2年的种子,其活力没有明显变化,但高活力种子的百分比随着贮藏年限的增加而增加。结论提供了一套方便快捷的测定肉苁蓉种子活力的方法;肉苁蓉种子于5℃贮藏有利于提高种子活力。     

肉苁蓉多糖的纯化及其对T细胞功能调节的研究

研究肉苁蓉主要成分之—─—多糖对小鼠胸腺T细胞的功能调节。方法：采用沉淀法获肉苁蓉粗多糖，以DEAE－SephadexA－50和SephacrylS－200柱层析，获得肉苁蓉多糖（CDPS）。再采用噻唑蓝比色法（MTT）观察CDPS对小鼠脾、胸腺淋巴细胞增殖反应的影响及对正常小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的影响。结果：CDPS纯化后经SephacrylS－200鉴定为单一对称峰。CDPS体外实验，在12．5～200μg／ml浓度范围内，有单独和协同ConA、PHA促进小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用（P＜0．01）。CDPS在100μg／ml浓度时，能显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的能力．其IL－2活性明显高于对照组（P＜0．01）。结论：肉苁蓉多糖能增加小鼠脾、胸腺淋巴细胞的增殖反应，且与ConA、PHA有协同刺激小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用；并能显著提高小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL－2。     

肉苁蓉多糖对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究肉苁蓉多糖对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：采用CCl4急性肝损伤模型,通过小鼠灌胃给予高、低剂量的肉苁蓉多糖（400 mg／kg、100 mg／kg ）,并以联苯双酯（150 mg／kg ）为阳性对照药,检测小鼠血清的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及肝脏中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量。结果：肉苁蓉多糖高剂量组小鼠的血清ALT、AST与CCl4模型组相比显著降低（ P＜0．05）,低剂量组ALT、AST与CCl4模型组相比差异无统计学意义,各剂量组MDA含量与模型组相比显著降低（ P ＜0．05）、SOD的活性显著增高（ P ＜0．05）。结论：肉苁蓉多糖对小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。     

肉苁蓉多糖对衰老小鼠脂质过氧化的影响

目的:研究肉苁蓉多糖(polysacchridesofcistanchedeserticolaY.C.Ma,PCD)对亚急性衰老小鼠的抗 脂质过氧化作用。方法:使用D 半乳糖造成小鼠亚急性衰老模型,观察PCD对亚急性衰老小鼠血液和肝脏组 织中超氧化物岐酶(SOD)、脂质过氧化物(LPO)的含量的影响。结果:灌服肉苁蓉多糖衰老小鼠的血液和肝脏 组织中SOD明显高于模型组(P<0.05);LPO的含量明显低于模型组(P<0.05)。结论:肉苁蓉多糖具有明显 的抗脂质过氧化功能,防止亚急性衰老小鼠的组织脂质过氧化损伤。     

IL-19对哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨IL-19对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的作用。方法通过对大鼠进行雾化卵清蛋白,制备哮喘模型大鼠。提取哮喘大鼠ASMCs进行培养,分别以1μg/L、10μg/L、100μg/L IL-19干预ASMCs生长。采用流式细胞仪、MTT法检测ASMCs增殖情况,观察不同浓度IL-19对ASMCs增殖的影响。结果与正常鼠相比,慢性哮喘大鼠ASMCs增殖明显,处于S期的细胞比例明显增高。经10μg/L、100μg/L IL-19干预后,慢性哮喘大鼠ASMCs处于S期的细胞比例减少,增殖亦减弱。且两组间比较有明显差异。而经1μg/L IL-19干预后,慢性哮喘大鼠ASMCs处于S期的细胞比例及增殖均无明显变化。结论一定浓度的IL-19可能抑制慢性哮喘大鼠ASMCs的增殖。     

艾灸对正常大鼠脾细胞IL－2生成的影响

通过艾灸“神阙”穴，观察其对正常大鼠脾细胞ＩＬ－２生成的影响。结果显示艾灸能显著提高正常大鼠脾细胞ＩＬ－２诱生水平。提示：艾灸作为一种有效的促进ＩＬ－２生成的方法，在增强机体免疫功能及抗肿瘤作用方面具有一定的临床应用前景。     

PGE1对成人心脏手术中心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨成人心脏手术后白介素—6(IL—6)、白介素—8(IL—8)的变化及前列腺素E1(PGE1)对其的影响。方法:2002年1月～2002年12月,16例成人心脏手术中,男10例,女6例。随机分成两组,PGE1组8人和对照组8人,PGE1从手术开始应用到研究结束,剂量每分钟0.02～0.05μg/kg。分别在术前、体外循环(CPB)开始前、阻升主后60min、开升主后60min、开升主后120min、开升主后180min取颈静脉血,检测IL—6、IL—8的变化。结果:两组中IL—6、IL—8的水平在术前、CPB前、阻升主后60min三者之间无明显差异。但在开放循环后60min,120min,180min,IL—6、IL—8的水平明显高于术前(P<0.01)。然而接受PGE1组病人在开放循环后60min、120min、180min,IL—6、IL—8增高的程度明显低于对照组病人(P<0.01)。结论:IL—6和IL—8参与心肌缺血再灌注损伤。PGE1能减少IL—6和IL—8的产生,因此,PGE1对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,在临床上具有实际意义。     

哮喘急性发病与IL-5、sIL-2R及NO关系的研究

目的;探讨白介素－５（ＩＬ－５）、可溶性白介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）、一氧化氮（ＮＯ）及嗜酸粒细胞（ＥＯＳ）计数在哮喘急性发病中的意义。方法：对急性发作期哮喘患者及正常对照者血清ＩＬ－５,ｓＩＬ－２Ｒ和ＮＯ水平及ＥＯＳ计数进行了研究。使用ＩＬＩＳＡ法检测血清ＩＬ－５、ｓＩＬ－２Ｒ水平,硝酸还原酶法检测ＮＯ,伊红粉法计数ＥＯＳ。结果：哮喘急性发作组血清ＩＬ－５,ｓＩＬ－２Ｒ,ＮＯ及ＥＯＳ水平均明显     

肝癌术后应用白介素12及白介素2诱导的自体肿瘤浸润淋巴细胞的临床观察

目的 观察肝癌患者术后单用白细胞介素2(IL-2)培养和IL-12+IL-2培养的自体肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)输注后,其特异性杀伤力、增殖能力、细胞因子的改变以及细胞免疫功能和临床症状的变化.方法 将手术切除的原发性肝癌组织进行体外分离,分别用含IL-2的培养液和含IL-12+IL-2的培养液培养,诱导TIL的生长.培养10-14 d测定细胞杀伤率、细胞因子和增殖能力,待细胞扩增达108-9/ml时进行输注,随访观察临床疗效.结果 ①输注IL-12+IL-2组TIL对自体肝癌细胞的细胞杀伤率、细胞扩增能力、细胞因子IFN-γ和TNF-α水平均比IL-2组明显增高;②输注IL-12+IL-2诱导的TIL组与IL-2诱导的TIL组输注后CD3+、CIM+、CD8+均升高,以CD3+、CD8+升高为主.与输注前比较,差异均有统计学意义;IL-12+IL-2组与IL-2组间比较,前者CD3+、CD8+、CD 56+上明显高于后者,差异均有统计学意义.③输注后两组患者的临床症状均比输注前改善明显,但两组间比较无明显差异.④接受TIL自体输注治疗的患者,其1年、3年、5年生存率均有所提高,IL-12+IL-2组与IL-2组与同期非TIL治疗组相比较(P＜0.05).结论 白介素12诱导肝癌TIL可明显增强TIL细胞的特异性细胞毒作用且增殖能力明显增强.肝癌患者术后输注IL-12+IL-2诱导的自体肝癌肿瘤浸润淋巴细胞比输注IL-2诱导的肝癌肿瘤浸润淋巴细胞能更有效地提高肝癌患者机体免疫机能,延长1年生存期,减少复发.     

蛋白激酶C抑制剂对念珠菌性阴道炎患者Th1/Th2免疫偏移的作用

目的 观察蛋白激酶C抑制剂对念珠菌性阴道炎患者Th1/Th2免疫偏移的作用.方法 选择2014年1月1日至2015年1月1日达州市中西医结合医院收治的念珠菌性阴道炎患者共134例,按随机分组原则分为观察组65例和对照组69例.对照组进行单纯抗真菌治疗,观察组进行蛋白激酶C抑制剂联合抗真菌治疗.治疗前测定患者血清白介素12(IL-12)及干扰素γ(IFN-γ)水平.治疗结束后7 d、14 d、1个月和3个月各随访一次,3个月后再次测定血清IL-12及IFN-γ水平,以及取阴道分泌物,采用10％氢氧化钾溶液湿片检查是否还存在假菌丝或孢子.结果 两组患者治疗前IL-12及IFN-γ水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组患者的IL-12及IFN-γ水平比对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);经过3个月的治疗与随访结束后,观察组治愈53例,好转8例,总有效率为93.85％,对照组治愈35例,好转16例,总有效率为73.91％,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 蛋白激酶C抑制剂可明显降低念珠菌性阴道炎患者IL-12及IFN-γ水平,纠正Th1/Th2免疫偏移,可提高治愈率.