活体免疫染色评估眼底新生血管实验研究

目的 探寻更好地对视网膜新生血管(RNV)和脉络膜新生血管(CNV)及其渗漏作定性和定量分析的方法 .方法 13只小鼠随机分为RNV评估组(n=7)和CNV评估组(n=6).①RNV评估:取3只小鼠作为正常对照组,其余4只制作成未成熟视网膜病变(ROP)模型,分别于出生后第16天双眼内注射FITC标记的抗体或未经FITC标记的抗体以及空白组,12 h后直接视网膜铺片或用带荧光的二抗孵育后再铺片镜检.②CNV渗漏评估:激光诱导6只小鼠(12眼)制作CNV模型,随机平分为两组,分别于光凝后第7和14天眼内注射非荧光标记的抗体,12 h后腹腔内注射荧光素钠,并定量分析CNV面积及其渗漏面积.结果 FITC标记抗体组的视网膜表现出高荧光、高清晰度的视网膜结构血管和RNV,而非FITC标记抗体组的视网膜只选择性染色RNV,几乎无干扰荧光背景,可观察到细微变化,利于应用图像软件对RNV图片进行定性和定量分析.应用SPOT图像软件把CNV染色的图片与CNV渗漏荧光的图片进行叠加,能够明确区分CNV及其渗漏面积;第14天与第7天CNV面积及其渗漏面积比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 使用活体免疫染色技术可以方便地观察视网膜血管细微结构,并精准地定性和定量分析RNV和CNV渗漏.     

脉络膜新生血管的研究进展

目的:深入研究脉络膜新生血管的形成过程,为临床诊断、治疗及预防提供理论依据。方法:阅读国内外有关文献并进行综述。结果与结论:脉络膜新生血管的形成是一个极其复杂的生物过程,多种细胞和大量的血管生成调节剂参与其中。     

姜黄素抑制视网膜新生血管的实验研究

目的:观察姜黄素对视网膜新生血管的抑制作用.方法:高氧诱导幼鼠建立视网膜新生血管模型.治疗组玻璃体腔注射姜黄素;对照组注射等量生理盐水.组织切片计数突破视网膜内界膜血管内皮细胞核;免疫组化检测视网膜VEGF的表达.结果:治疗组视网膜新生血管数减少,视网膜VEGF表达较对照组明显减少,两者差异显著.结论:姜黄素可以有效抑制视网膜新生血管(CNV)形成.     

氩激光诱发兔视网膜下新生血管的眼底荧光血管造影

探讨视网膜下新生血管的发病机理及发生，发展特点。用高强度氩激光光凝兔视网膜，经眼底镜及眼底荧光血管造影观察２，光斑出血发生率２７％。光凝后１周，ＦＦＡ脉络膜期及动脉早期８％的光斑有点汰荧光素渗漏。光凝后３周，６３％的光斑出现脉络膜新生血管形态。直至２个月，渗漏区逐渐扩大。     

荧光素眼底血管造影与吲哚青绿血管造影诊断脉络膜新生血管的对比分析

目的:对比荧光素眼底血管造影与吲哚青绿血管造影诊断脉络膜新生血管价值.方法:2016年2月至2017年2月医院收治糖尿病合并实视力受损78例,均进行荧光素眼底血管造影与吲哚青绿血管造影检查.结果:荧光素眼底血管造影脉络膜血管充盈时间、视网膜血管充盈时间、视网膜循环时间、动静脉循环时间低于吲哚青绿血管造影,差异有统计学意义(P＜0.05).吲哚青绿血管造影脉络膜新生血管检出率29.5％ (46/156)、检出点率34.6％(54/156),高于荧光素眼底血管造影16.7％(26/156)、检出点率19.2％(30/156),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:吲哚青绿血管造影诊断脉络膜新生血管效果更好.     

实验性兔脉络膜新生血管模型研究

目的:探讨氩激光创建有色家兔脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)模型的可行性,初步探讨CNV的有关发生机制,为其进一步防治研究奠定基础.方法:健康有色家免20只(40只限),每只兔一眼为实验眼,另眼为对照眼.以波长514.5 nm的氩绿激光(光斑直径50um,功率0.7W,时间0.1s),在距视盘2～3个视盘直径的颢侧髓线上下视网膜处密集照射20个点.分别于光凝后3,7,14,21,30天进行眼底荧光造影(fundus fluorescein angiography,FFA)及脉络膜造影(indocyanine green angiography,ICGA).检查后处死动物(4只/次),摘除眼球取眼后段组织制作石蜡切片.常规HE染色及用免疫组化(S-P法)检测血管内皮生长因子(VEGF)在视网膜的表达.结果:光凝后7天出现CNV,兔CNV发生率尚(63.8%),眼底造影和光镜下均有相应改变,FFA表现为视网膜血管无关的荧光素渗漏,ICGA见CNV充盈;光镜下可见到CNV结构;光凝后2周开始VEGF在视网膜神经节细胞以及内核层有表达.结论:氩激光诱导有色家免CNV模型成模时间短,成模率较高;VEGF参与了CNV的形成进程.     

氩激光诱导色素兔脉络膜新生血管的实验研究

目的:研究氩激光诱导色素兔脉络膜新生血管(CNV)的实验条件。方法:分别对3组动物实验眼用不同功率(0.4,0.8,1W)的氩激光光凝视网膜,光凝后3,7,14,28,56及91d行光学相干断层扫描(opticalcoherencetomography,OCT)、荧光素眼底血管造影(fundusfluoresceinangiography,FFA)和吲哚菁绿血管造影(indocyaninegreenangiography,ICGA)后处死动物,取光凝区眼球壁制作标本,进行光镜和透射电镜观察。结果:第1组未见CNV生长,第2,3组光凝后7d出现CNV,28d达高峰,56d后开始减少。结论:高功率(0.8～1W)的氩激光能有效诱导色素兔CNV,是较好的动物模型。     

地塞米松抑制视网膜新生血管及血管内皮生长因子表达的实验研究

目的:研究地塞米松(Dexamethasone)在小鼠血管增生性视网膜病变中不同时期的给药效果,及其与血管内皮生长因子(VEGF)的相互作用。方法:将20只7 d龄C57BL/6J幼鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、早治疗组和晚治疗组。除对照组外,均建立高浓度氧气诱导的C57BL/6J幼鼠增殖性视网膜病变模型。后2组分别于出生后第7d和第12d起连续5d皮下注射地塞米松注射液(0.5mg/kg.d-1)。17d龄时取幼鼠双眼球作普通病理切片及免疫组化检测,分别检测视网膜新生血管芽内皮细胞核数目及VEGF的表达。结果:模型组视网膜新生血管芽内皮细胞核数目及VEGF的表达较正常对照组明显增加(P<0.01);早治疗组与晚治疗组的视网膜新生血管芽内皮细胞核数目和VEGF表达,较模型组均明显减少(P<0.01);早治疗组较晚治疗组也明显减少(P<0.01)。结论:在氧诱导的血管增生性视网膜病变模型中,地塞米松可以抑制视网膜新血管形成和VEGF的表达,而且病变早期应用地塞米松治疗效果明显优于晚期。     

脉络膜新生血管的药物治疗

脉络膜新生血管(CNV)是一种严重影响视力的难治性疾病,目前抗VEGF药物、糖皮质激素及非甾体类抗炎药等已广泛应用于渗出性AMD、病理性近视等脉络膜新生血管性疾病的治疗并取得了一定的临床效果。1抗VEGF类药物1.1黄斑变性的治疗目前,常用的抗VEGF药主要是重组人VEGF单克隆抗体Bevacizumab(倍伐单抗)和Ranibizumab(雷珠单抗),通过抑制VEGF达到抑制新生血管生成的作用。美国国立     

脂质体介导endostatin基因转染抑制脉络膜新生血管的实验研究

目的探讨脂质体介导endostatin基因体内转染对脉络膜新生血管(choroidal neovascularization, CNV)模型的抑制效应.方法激光光凝方式建立brown norway 大鼠CNV模型,随机分为endostatin组,空质粒组,对照组;脂质体介导法分别导入重组endostatin基因真核表达载体pSecTagA-hEndostatin或空载质粒pSecTagA.原位杂交、免疫组化和ELISA法检测endostatin基因mRNA转录及其蛋白表达;脉络膜血管平铺、FFA、CD105免疫组化观察对CNV的抑制效应.结果 Endostatin基因可有效转染视网膜、RPE及脉络膜并得到表达.转基因后7、14 d眼组织匀浆endostatin蛋白表达量为(50.14±3.43)ng /眼和(31.5±2.21)ng/眼;Endostatin组CNV面积、荧光渗漏程度、CD105阳性细胞表达量与空质粒组及对照组差别显著.结论脂质体介导endostatin基因体内转染可以有效抑制CNV的形成.     

Intravitreal ranibizumab therapy versus photodynamic therapy for idiopathic choroidal neovascularization: a comparative study on visual acuity, retinal and choroidal thickness

Background Photodynamic therapy （PDT） has been recommended as a main treatment for idiopathic choroidal neovascularization （I-CNV）.But the visual results of PDT were inconsistent and variable,and PDT may bring severe damage to the retinal pigment epithelium and choriocapillaries.In recent years,intravitreal ranibizumab therapy,showing favorable visual outcomes,has developed as an advanced treatment for choroidal neovascularization （CNV）.Although both methods have been reported to be effective in treating I-CNV,there is no detailed comparative report between the two methods.This study aimed to compare visual outcomes,retinal and choroidal thickness between intravitreal ranibizumab therapy and PDT in the treatment of I-CNV,and investigate the correlation of visual outcomes with retinal and choroidal thickness in each of the two groups.Methods Thirty-seven eyes of 37 patients with I-CNV were involved in this study; 19 eyes were treated with intravitreal ranibizumab therapy and 18 eyes were treated with PDT.The best corrected visual acuity （BCVA） was recorded before and at each follow-up visit after treatments （IogMAR）.Enhanced-depth imaging optical coherence tomography （EDI-OCT） was used to evaluate the retinal structural changes,and to measure central retinal thickness （CRT） and central choroidal thickness （CCT）.Results Mean BCVA was 0.64±0.27 in PDT group and 0.69±0.22 in ranibizumab group at baseline （P=0.55）.When compared with the baseline,mean BCVA in PDT group was improved significantly at 3-month after PDT （0.41±0.16,P=0.002）,then changed little （0.42±0.25 at 12-month,P=0.88）.Whereas mean BCVA in Ranibizumab group was improved significantly at each follow-up visit.It improved much more obviously in the first month and then remained stable.The mean BCVA in the ranibizumab group was significantly better at each follow-up visit than that in PDT （P ＜0.05）.When compared with the baseline,mean CRT in PDT group decreased significantly since 3-month visit,whereas     

半导体激光诱导大鼠脉络膜新生血管模型的建立

目的 探讨应用半导体激光诱导建立BN大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)模型的可行性。方法 雄性棕色挪威(Brown Norway，BN)大鼠30只，9只为对照组，21只为实验组；用半导体激光光凝实验组BN大鼠的视网膜，分别于光凝后1h，3、7及14d行眼底荧光造影(fiundus fluorescein angiography，FFA)检查，3、7和14d行病理组织学检查。结果 光凝后7dFFA及光镜检查均证实CNV开始形成。14dCNV大量形成。结论 半导体激光损伤可以成功地诱导BN大鼠形成CNV模型，成模时间短，成模率高，是一种较为理想的CNV动物模型。     

病理性近视脉络膜新生血管的治疗

病理性近视早期即可出现眼底病变且进行性加重,可导致视功能明显受损,其中脉络膜新生血管的发生是视力丧失的主要原因。文章对病理性近视的患病率、危害、自然转归、影响因素和治疗方法进行综述,着重探讨抗血管内皮生长因子药物治疗的进展。     

核蛋白NSA2在脉络膜新生血管动物模型眼组织的表达研究

目的:NSA2是1种新发现的与细胞增殖相关的核蛋白,本实验旨在初步探讨NSA2是否参与了脉络膜新生血管(Chor-oidal neovascularization,CNV)病变过程.方法:采用532 nm波长的眼底激光对16只小鼠光凝处理,诱导CNV动物模型;小鼠眼底激光光凝处理5d后,去除眼前段,定量PCR检测NSA...     

病理性近视伴脉络膜新生血管的特点及其抗VEGF药物治疗

脉络膜新生血管是病理性近视患者常见的视力下降的重要原因之一,常引起不可逆的中心视力丧失.该文主要对病理性近视的流行病学、继发于病理性近视的脉络膜新生血管的病理机制、临床表现及其抗VEGF药物的治疗进行综述.     

氩激光诱导的大鼠脉络膜新生血管模型研究

目的 探讨应用氩激光诱导棕色挪威(Brown Norway,BN)大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovaseularization,CNV)模型建立的可行性,为明确CNV的发生机制及防治研究奠定基础.方法 雄性BN大鼠20只(40只眼)随机分为4组,每组5只,每只鼠一只眼作为实验眼,另一只眼作为对照眼(空白对照,不进行激光光凝).用氩激光(波长为647 nm)对大鼠实验眼视网膜进行光凝,激光功率、光凝斑直径和曝光时间分别为200 mW、100 μm及0.04 s,每只眼10个光凝斑点.光凝后7,14,21,56 d分别随机抽取1组大鼠,实验眼行荧光素眼底血管造影(fundus fluorescein angiography, FFA)检查后处死动物,摘除眼球制作标本,进行光学显微镜检查(LM)和免疫组织化学染色观察.结果 FFA、LM和免疫组织化学染色观察均证实,光凝后7 d见CNV开始形成,14 d逐渐增多,21 d达到高峰并能保持稳定,56 d CNV有所减少. 结论 氩激光损伤可以创建BN大鼠脉络膜新生血管模型,成模时间短,成模率高,是一种较为理想的CNV动物模型.     

病理性近视伴脉络膜新生血管的特点及其抗VEGF药物治疗

脉络膜新生血管是病理性近视患者常见的视力下降的重要原因之一,常引起不可逆的中心视力丧失。该文主要对病理性近视的流行病学、继发于病理性近视的脉络膜新生血管的病理机制、临床表现及其抗VEGF药物的治疗进行综述。     

抗血管内皮细胞生长因子抗体抑制视网膜新生血管化

目的：研究抗血管内皮细胞生长因子抗体对视网膜新生血管化的抑制作用。方法：以75%氧气和25%氮气的高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立缺血性视网膜病变模型,应用不同浓度抗血管内皮细胞生长因子抗体进行玻璃体腔内注射,在组织切片上计数和比较正常和实验条件下以及不同浓度药物注射后视网膜新生血管芽细胞核数。结果：缺血性视网膜病变小鼠模型有较多的视网膜新生血管芽细胞核数,而玻璃体内注射抗血管内皮细胞生长因子抗体的小鼠视网膜新生血管芽细胞核数明显减少（两组用药组与高氧对照组间P均〈0.01）,特别是大剂量用药组减少54.61%。结论：抗血管内皮细胞生长因子抗体能有效抑制视网膜的新生血管化。     

Intravitreal ranibizumab for the treatment of pathological myopia associated with choroidal neovascularization in Chinese patients

Background Pathological myopia （PM） is the leading cause for choroidal neovascularization （CNV） in people below 50 years of age,the anti-vascular endothlial growth factor （VEGF） medicine is now available to treat CNV secondary to PM.This study aimed to observe the efficacy of intravitreal ranibizumab for PM associated with subfoveal or juxtafoveal CNV in Chinese patients.Methods Fifty-four eyes of 52 consecutive patients were included,they treated with intravitreal ranibizumab 0.5 mg for PM associated with CNV.The best corrected visual acuity （BCVA） of Snellen chart,letters of ETDRS chart,retinal thickness,leakage of CNV lesion,and complications with surgery were analyzed pre-and post-treatment.Eligibility criteria included diopter ≥-8.0 D or eye axis ≥28 mm with fundus changes of PM （lacquer crack,optic disc atrophy,chorioretinal atrophy,posterior scleral staphyloma）; CNV secondary to PM; subfoveal or juxtafoveal CNV.Results For 54 affected eyes of 52 consecutive patients,the average BCVA of Snellen chart and letters of ETDRS chart were 0.29 and 30.4,respectively; fundus fluorescein angiography （FFA）/indocyanine green angiography （ICGA） showed CNV leakage,and average retinal thickness on optical coherence tomography （OCT） was 267.2 μm before treatment.Injections of ranibizumab ranged from 1 to 4 （mean 2.2）.Follow-up time varied from 12 to 36 months （mean 31.9 months）.At the last visit,the BCVA of Snellen chart was increased by three lines （mean 0.65） （P 〈0.01）; the letters of ETDRS chart were increased to 17.0 letters （mean 47.4,P 〈0.01）; the visual acuity increased more than 15 letters in 30 eyes （55.5%）,decreased in 1 eye （1.9%）; the retinal thickness on OCT images was decreased by 17.0 μm （mean 250.2 μm） （P=0.082）; no active leakage from the CNV lesion occurred in 18 eyes （33.3%）,reduced leakage in 30 eyes （55.6%）,and no change in 6 eyes （11.1%） as shown by FFA/ICGA.Increased retinoschisis was observed in one eye after