三种化合物对石棉致HEL细胞增殖周期及C—fos癌基因转录活性 …

目的 寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法 利用流式细胞技术测定细胞周期以及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测定ｃ－ｆｏｓ癌基因转录活性,观察几种化合物对温石棉人胚肺（ＨＥＬ）细胞增殖作用的影响。结果 将ＨＥＬ细胞与温石棉共同孵育后,其Ｓ期细胞所占比例增加,ｃ－ｆｏｓ癌基因的转录活性也明显增强,用３种化合物预处理的石棉组,其Ｓ期细胞所占比例以及ｃ－ｆｏｓ癌基因的转录生均优于未处理石棉组,结论 用上述３种化合     

三种化合物对温石棉促人胚肺细胞增殖作用的影响

为了探讨几种化合物对温石棉促人胚肺（ＨＥＬ）细胞增殖作用的影响,用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后,再将其与人胚肺细胞共同孵育,通过测定［３Ｈ］ＴｄＲ掺入量,来了解人胚肺细胞的增殖状况。结果显示,２．５～１０μｇ／ｍｌ的温石棉、时间作用在２４小时之内,或２０～８０μｇ／ｍｌ温石棉、时间作用在６小时之内均可促使人胚肺细胞增殖。与未处理温石棉组相比,经三种化合物处理的温石棉其促细胞增殖作用明显下降。提示,采用三种化合物溶液浸泡温石棉,有可能减轻温石棉的致癌危害性     

温石棉表面改性对人胚肺细胞转化过程中c-myc癌基因转录的影响

目的观察３种表面改性剂（柠檬酸铝、混合稀土和亚硒酸钠）对温石棉致人胚肺（ＨＥＬ）细胞转化过程中ｃｍｙｃ癌基因的影响。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析技术。结果ｃｍｙｃ癌基因转录水平随石棉染毒剂量的增高而增加,但经３种化合物预处理的石棉组的ｃｍｙｃ癌基因转录水平均明显低于未处理石棉组,用等量柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠处理过的石棉组的ｃｍｙｃ癌基因转录水平分别降低了８１．６％、６９．５％、８９．９％。结论用上述３种化合物预处理温石棉,有可能减轻温石棉对人类的致癌危害性。     

温石棉改性前后对人胚肺细胞癌基因改变的比较

目的寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法利用斑点杂交和流式细胞技术观察柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠等３种化合物对温石棉致人胚肺（ＨＥＬ）细胞转化过程中ｃＨａｒａｓ癌基因和Ｐａｎｒａｓ小鼠抗体（Ｐ２１ｒａｓ）蛋白的影响。结果在温石棉染毒组，ｃＨａｒａｓ癌基因的转录水平及Ｐ２１ｒａｓ蛋白含量明显高于对照组。在上述３种化合物预处理的温石棉组，ＨＥＬ细胞ｃＨａｒａｓ癌基因的转录水平及Ｐ２１ｒａｓ蛋白含量均明显低于未处理温石棉组。结论用上述３种化合物预处理温石棉，有可能减轻温石棉对人类的致癌危害性。     

混合稀土和柠檬酸铝对温石棉致人胚肺细胞谷胱甘肽含量改变的影响

目的寻求一种适宜的石棉表面改性剂。方法用不同浓度的混合稀土或柠檬酸铝溶液浸泡温石棉１小时后,再将其与人胚肺（ＨＥＬ）细胞共同孵育,测定ＨＥＬ细胞的谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量。结果随着石棉剂量的增加或染毒时间的延长,ＨＥＬ细胞的ＧＳＨ含量明显降低。经混合稀土或柠檬酸铝预处理的石棉,其所诱导的ＨＥＬ细胞ＧＳＨ下降的程度明显减弱。结论用混合稀土或柠檬酸铝预处理温石棉,均可降低温石棉对ＨＥＬ细胞的毒性作用。     

三种化合物对石棉诱导人胚肺细胞产生过氧化氢抑制作用的 …

用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土及亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与人胚肺（ＨＥＬ）细胞共同孵育，测定培养液中的过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）含量。结果显示，未经处理的温石棉可诱导ＨＥＬ细胞产生Ｈ２Ｏ２，并呈明显的剂量－反应关系。与未处理温石棉组相比，经３种化合物预处理的温石棉所致ＨＥＬ细胞产生的Ｈ２Ｏ２量明显降低，其抑制率随化合物浓度的增加而增高，呈一定的剂量依赖性。结果表明，用３种化合物预处理温石棉     

三种化合物对石棉诱导人胚肺细胞产生过氧化氢抑制作用的比较研究

用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土及亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与人胚肺（ＨＥＬ）细胞共同孵育，测定培养液中的过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）含量。结果显示，未经处理的温石棉可诱导ＨＥＬ细胞产生Ｈ２Ｏ２，并呈明显的剂量反应关系。与未处理温石棉组相比，经３种化合物预处理的温石棉所致ＨＥＬ细胞产生的Ｈ２Ｏ２量明显降低，其抑制率随化合物浓度的增加而增高，呈一定的剂量依赖性。结果表明，用３种化合物预处理温石棉，均可抑制其诱导ＨＥＬ细胞产生Ｈ２Ｏ２。     

石棉表面改性对石棉所致人胚肺细胞毒性及超微结构改变的影响

目的研究温石棉及用柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠预处理的温石棉对人胚肺（HEL）细胞存活率及超微结构的影响。方法用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉1h后，再将其与HEL细胞共同孵育，测定细胞存活率及观察细胞超微结构。结果不同浓度的温石棉染毒4h或24h，均可使人胚肺细胞的存活率降低，而且其降低程度随石棉浓度的增加而增大，呈一定的剂量-效应关系。经三种化合物预处理的温石棉组HEL细胞存活率高于未处理温石棉组，但差异无统计学意义。从细胞超微结构的改变看，经三种化合物处理的石棉组均轻于单纯的石棉染毒组。结论温石棉染毒可使人胚肺细胞的存活率降低，致使细胞超微结构发生改变，但用三种化合物预处理温石棉，均可减轻温石棉的细胞毒性。     

几种化合物对石棉诱发人胚肺细胞非程序DNA合成的影响

目的探讨几种化合物对温石棉诱发人胚肺（ＨＥＬ）细胞非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）的影响。方法用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与ＨＥＬ细胞共同孵育，通过３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定了ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ。结果温石棉可使ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ显著增高，并呈明显的剂量－反应关系。与未处理温石棉组相比，经三种化合物处理的温石棉所致ＵＤＳ量均明显下降。结论采用适当化合物溶液浸泡温石棉，有可能减轻温石棉对人类的致癌危害性。     

几种化合物对石棉诱导人胚肺细胞产生超氧阴离子的抑制作用

用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或硒酸钠溶液浸泡温石棉1小时后,再将其与人胚肺(HEL)细胞共同孵育,测定培养液中超氧阴离子(O₂^-)含量.结果显示,温石棉可诱导HEL细胞产生O₂^-.但与未处理温石棉组相比,经3种化合物预处理的温石棉所致HEL细胞产生的O₂^-量明显降低,其抑制率随化合物浓度的增加而增高,呈一定的剂量依赖性.表明用上述3种化合物预处理温石棉,均可抑制其诱导HEL细胞产生O₂^-.     

氢醌对人支气管上皮细胞DNA损伤及细胞周期的影响

目的探讨氢醌(HQ)对体外培养人支气管上皮细胞DNA损伤及细胞周期的影响。方法将HBE细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80、160、320μmo/lL)的氢醌作用24 h,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定16HBE细胞的相对存活率,用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞DNA的损伤情况,流式细胞术检测细胞周期分布。结果在0～40μmo/lL范围内HQ作用24 h后,16HBE细胞的存活率未见明显变化(P>0.05);当染毒剂量超过80μmo/lL时,细胞存活率明显下降(P<0.01)。SCGE显示随着HQ浓度的升高,16HBE细胞的DNA断裂程度加重。HQ作用浓度在10～320μmo/lL范围内,16HBE细胞的细胞周期表现为G2期阻滞,G1期比例下降。结论 HQ会对16HBE细胞的DNA产生损害,并且引起G2期细胞阻滞。     

香烟烟雾对2种肺细胞的DNA损伤与修复

目的探讨经香烟烟雾溶液染毒的人正常肺间质细胞和人肺腺癌细胞的DNA损伤及其修复效应.方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HLF)和人肺腺癌A549细胞,以二甲基亚砜(DMSO)和磷酸缓冲液(PBS)作为吸收液,采集香烟主流烟雾.用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定香烟烟雾-DMSO吸收液和香烟烟雾-PBS吸收液(分别简称DMSO烟液和PBS烟液)的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的毒性(分别以DMSO和PBS为阴性对照),以无明显细胞毒性的浓度进行彗星实验(分别以DMSO和PBS为阴性对照,以重铬酸钾为阳性对照),测定细胞的DNA损伤及修复情况.结果DMSO烟液原液及其1/2稀释液染毒的细胞存活率低于80%,而PBS烟液染毒的细胞存活率均高于80%.DMSO烟液的1/4、1/8、1/16倍稀释液以及PBS烟液的1/2、1/4、1/8和1/16倍稀释液和原液对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤与阴性对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.01),且存在明显的剂量-效应关系.DNA损伤在两种细胞间差异无统计学意义(P＞0.05),但DMSO烟液所致的DNA损伤高于PBS烟液(P＜0.01).细胞在去除受试物后培养30 min时开始修复,随着修复时间的延长,拖尾细胞数减少,DNA迁移长度缩短(P＜0.05),且A549细胞修复得更快(P＜0.05).结论DMSO烟液的细胞毒性和遗传毒性均高于PBS烟液.香烟烟雾对HLF细胞和A549细胞的DNA损伤差异不明显,A549细胞的DNA损伤修复能力较HLF细胞强.     

二甲苯对大鼠记忆功能和c—fos基因表达的影响

目的探讨二甲苯对大鼠学习记忆功能的影响及其机制。方法采用反映学习记忆功能的水迷宫法和步下法测试大鼠神经行为的改变；免疫组化法研究大鼠脑组织ＦＯＳ免疫反应（ＦＯＳＩＲ）阳性胞核的水平。结果二甲苯使大鼠学习记忆能力下降，大脑皮层及海马区内均有较多的ＦＯＳ蛋白阳性细胞。结论二甲苯可损伤大鼠学习记忆能力，且这种改变可能与脑组织内ｃｆｏｓ的表达有关系     

石棉与烟雾溶液对人胚肺细胞DNA的损伤作用

目的探讨石棉与烟雾溶液联合作用对人胚肺细胞ＤＮＡ的损伤作用。方法采用非程序ＤＮＡ合成试验，对石棉与烟雾溶液单独及联合作用时人胚肺细胞ＤＮＡ修复合成情况进行了观察。结果石棉与烟溶液单独作用时，均能诱导人胚肺细胞的非程序ＤＮＡ合成试验，且均有明显的剂量反应关系；当二者联合作用时，其造成的细胞３Ｈ标记的胸腺嘧啶核苷（［３Ｈ］－ＴｄＲ）参入量的增加量明显高于二者单独作用时引起的［３Ｈ］－ＴｄＲ参入量的增加量之和。此外，ＯＨ的清除剂二甲基亚砜可部分阻止石棉引起的［３Ｈ］－ＴｄＲ参入。结论石棉与烟溶液联合对人胚肺细胞ＤＮＡ的损伤具有协同作用，ＯＨ在石棉引起的细胞ＤＮＡ损伤中起一定作用。     

亚硫酸钠对人胚肾293细胞炎性因子表达的影响

目的探讨亚硫酸钠(Na2SO3)对人胚肾293(HEK293)细胞炎性因子表达的影响。方法采用改进的单溶液噻唑兰(MTS)比色法观察0、0.0025、0.01、0.039、0.156、0.625、2.5、10mmol/L亚硫酸钠对人胚肾293细胞株(HEK293)的毒性作用,并观察0、0.039、0.156、0.625、2.5、10mmol/L亚硫酸钠染毒致HEK293细胞的形态学改变,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HEK293细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和白介素8(IL-8)的mRNA水平的改变。结果细胞毒性实验显示,当亚硫酸钠浓度为0.625、2.5、10mmol/L时,OD值分别为(0.35475±0.02124),(0.60050±0.01277),(0.78475±0.00985),均低于对照组(2.5145±0.202265),差异有统计学意义(P<0.05);当亚硫酸钠浓度≤0.156mmol/L时,OD值范围为(2.47375±0.06999)～(2.62500±0.12029),与对照组比较,差异无统计学意义。形态学观察发现,当接触亚硫...     

姜黄素对人喉癌细胞株Hep-2增殖和端粒酶活性的影响

目的研究姜黄素（curcumin）对人喉癌细胞Hep-2增殖和端粒酶活性表达水平的影响。方法CCK-8法检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后24h、48h、72h的细胞增殖活性：集落形成试验检测不同浓度姜黄素作用于Hep-2后的细胞增殖抑制率;StretchPCR-银染法检测细胞端粒酶活性变化。RT—PCR分析端粒酶主要组分hTERT的mRNA表达情况。结果①姜黄素对Hep-2细胞的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性。五种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μol／L、80μmol／L、100μol／L）姜黄素作用12、24、48、72小时后,IC50分别为81．17μmol／L、40．90μmol／L、33．26μmol／L、31．63μmol／L;②四种浓度（20μmol／L、40μmol／L、60μmol／L、80μmol／L）姜黄素作用于Hep-2细胞48h,-周后各组Hep-2细胞集落形成数和细胞增殖抑制率均呈浓度依赖性．其细胞增殖抑制率与对照组相比,分别为36．25％、57．4％、98．48％、100％;③60μmol／L姜黄素作用于Hep-2细胞24、48、72小时后。与对照组相比,端粒酶活性总光密度值（IOD）分别下降23．19％、60．28％和70．15％,各时间组间有显著性差异（P〈0．01）;端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达水平IOD值分别下降2．90％、58．69％和88．35％,各时间组间有显著性差异（P〈o．01）。结论姜黄素可抑制体外培养的Hep-2细胞的增殖活性,下调hTERTmR．NA的转录水平并抑制细胞的端粒酶活性,有较好的临床应用前景。     

百草枯对体外培养小鼠胚胎神经干细胞增殖的影响

[目的]观察百草枯（paraquat,PQ）对体外培养小鼠胚胎神经干细胞增殖活力的影响。[方法]取10．5d小鼠胚胎进行体外神经干细胞原代培养,对培养细胞进行形态学观察、特异性蛋白质免疫细胞化学染色鉴定;用终浓度为0．00、0．10、1．00、10．00、100．00、1000．00μmol／L的PQ处理神经干细胞24h后,采用阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测法（AlamarBlue法）测定细胞相对存活率,分析不同浓度PQ对神经千细胞增殖的影响。用终浓度为0．00、0．10、1．00、10．00、50．00、100．00μmol／L的PQ处理神经干细胞24h后,用活性氧荧光定量法（DCFH—DA法）检测细胞内活性氧（ROS）水平。[结果]免疫细胞化学检测结果显示,培养的细胞可以表达神经干细胞（NSCs）特异性蛋白;经诱导分化后的细胞可以表达神经细胞特异性蛋白;Alamar Blue法检测结果表明,与对照组相比,当PQ≥100．00gmol／L时,细胞存活率明显降低;并伴随染毒浓度的升高而进一步降低（P〈0．05）。ROS检测结果表明,与对照组相比,当PQ≥10．00μmol／L时,细胞内ROS水平明显提高。[结论]培养的神经细胞具备神经干细胞的基本特征;PQ可引起细胞内ROS水平的升高,并抑制神经干细胞的增殖,且存在剂量依赖性。