还原型谷胱甘肽下调亚胺培南对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的抗菌活性

目的探讨还原型谷胱甘肽对亚胺培南抗耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌活性的影响及其机制。方法采用PCR方法检测6株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶（OXA-23、IMP、VIM、OXA-24）的基因携带情况。采用微量肉汤稀释法检测亚胺培南对6株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度（MIC）值及不同浓度还原型谷胱甘肽（15 mg/ml、7.5 mg/ml、1.5 mg/ml、0.75 mg/ml）干预后亚胺培南MIC值的变化。采用四唑氮蓝检测还原型谷胱甘肽干预后细菌细胞内外活性氧的变化。结果6株细菌均携带OXA-23碳青霉烯酶基因,不同浓度的还原型谷胱甘肽（15 mg/ml、7.5 mg/ml、1.5 mg/ml、0.75 mg/ml）干预后,亚胺培南的MIC值分别为4096 mg/L、1024 mg/L、512 mg/L和128 mg/L,较未干预组（64 mg/L）显著提高;经1.5 mg/ml还原型谷胱甘肽干预后,细菌细胞内外活性氧均增加。结论还原型谷胱甘肽可降低亚胺培南对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的杀菌活性,与活性氧引起的抗菌效应无关。     

产KPC酶肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性分析

目的 评价临床常用的5种药物敏感性（药敏）试验方法对KPC酶介导碳青霉烯类抗菌药物耐药性的检出率.方法 收集2007年10月-2008年9月浙江大学医学院附属第一医院36株经PCR证实产KPC酶的肠杆菌科细菌,包括32株肺炎克雷伯菌、1株大肠埃希菌、1株弗氏枸橼酸杆菌、1株产酸克雷伯菌和1株黏质沙雷菌,用琼脂稀释法、纸片扩散法检测菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的耐药性,ATB G-5药敏卡检测亚胺培南、美罗培南的耐药性,BD Phoenix 100NMIC-109药敏卡检测亚胺培南的耐药性,VITEK 2 Compact AST-GN13药敏卡检测亚胺培南、厄他培南的耐药性.结果 ATB、BD Phoenix100、VITEK 2 Compact、琼脂稀释法和纸片扩散法检测亚胺培南耐药率分别为13.9%（5株）、11.1%（4株）、13.9%（5株）、22.2%（8株）和69.4%（25株）;ATB、琼脂稀释法和纸片扩散法检测美罗培南耐药率分别为22.2%（8株）、55.6%（20株）和47.2%（17株）;VITEK 2 Compact、琼脂稀释法和纸片扩散法检测厄他培南耐药率分别为69.4%（25株）、77.8%（28株）和88.9%（32株）.VITEK 2 Compact和琼脂稀释法检测结果显示,厄他培南对所有产KPC酶菌株的MIC均≥2 μg/mL.结论 纸片扩散法和琼脂稀释法能更好地检出KPC酶介导的碳青霉烯类抗菌药物的耐药性,厄他培南可作为筛选产KPC酶菌株的指示药物.     

烧伤创面多重耐药鲍氏不动杆菌同源性和碳青霉烯酶基因型及整合子研究

目的 明确甘肃省人民医院烧伤病房多重耐药鲍氏不动杆菌的耐药性、同源性及与整合子的关系. 方法 31株多重耐药鲍氏不动杆菌分离自该院烧伤住院患者创面分泌物标本.采用琼脂稀释法测定鲍氏不动杆菌对11种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性:PCR扩增I、Ⅱ、Ⅲ类整合酶及整合酶阳性菌株的整合子基因盒,进行序列分析;分析亚胺培南耐药菌株的碳青霉烯酶基因型. 结果 鲍氏不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为45.2%、48.4%、48.4%、41.0%,对头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、阿米卡星、庆大霉素、氨曲南和哌拉西林的耐药率均在80.0%以上.所有菌株PFGE分型共分为A、B、C 3型,A克隆18株、B克隆7株、C克隆6株.20株细菌整合子扩增阳性,携带有aadA1、aadA5、aacA4、aac3、aacC1、aac(6')-Ib、catB8、drfA17和drf8基因,介导对氨基糖苷类抗生素、氯霉素、甲氧苄啶的耐药.14株亚胺培南耐药的菌株均产OXA-23型碳青霉烯酶. 结论 多重耐药鲍氏不动杆菌在该院烧伤病房播散,以A克隆为主;鲍氏不动杆菌整合子主要介导对氨基糖苷类抗生素及氯霉素的耐药性,碳青霉烯类抗生素耐药鲍氏不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶.     

抗菌药物用药频度与铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌耐药率的相关性

目的分析抗菌药物用药频度与铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌耐药率的相关性,为临床合理使用抗菌药物,降低细菌耐药率提供依据。 方法对云南省第三人民医院2013年1月至2017年12月年常用抗菌药物用药频度以及同期分离的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌耐药情况进行回顾性调查分析。 结果本院抗菌药物2014年用药频度（28 809）较2013年（16 259）显著上升,铜绿假单胞菌对头孢曲松、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率,鲍曼不动杆菌对头孢曲松、头孢吡肟、庆大霉素、亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦抗菌药物的耐药率亦有所上升。鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦较敏感,但对其他常用抗菌药物的耐药率,特别是对头孢类（平均耐药率为78.23%）和碳青霉烯类药物（平均耐药率为72.69%）的耐药率仍居高不下。抗菌药物年用药频度分析结果显示,2013年至2017年铜绿假单胞菌耐药率与左氧氟沙星用药频度呈高度正相关（r = 0.70、P = 0.20）;鲍曼不动杆菌耐药率与美洛培南用药频度呈显著正相关（r = 0.94、P = 0.02）。 结论本院所分离铜绿假单胞菌耐药率与左氧氟沙星用药频度,鲍曼不动杆菌耐药率与美洛培南用药频度均呈显著正相关,为避免常见的感染菌和定植菌耐药的发生,应加强抗菌药物的监管。     

肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗菌药物的基因型研究

目的：探讨肺炎克雷伯菌（Kpn）耐碳青霉烯类药物的耐药基因型。方法收集2011年1月至12月本院分离到的肺炎克雷伯菌,用K-B法进行药敏实验,筛选出6株耐碳青霉烯类抗菌药物的肺炎克雷伯菌（CRKP）,采用改良Hodge试验检测菌株产碳青霉烯酶,用乙二胺四乙酸（EDTA）纸片法检测金属酶表型,聚合酶链式反应（PCR）鉴定肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯酶（KPC）基因及其他β-内酰胺酶基因。结果6株CRKP对头孢噻肟、头孢他啶、头孢呋辛、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、复方新诺明、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、美罗培南、亚胺培南均耐药,对多黏菌素、米诺环素、磷霉素、阿米卡星等敏感,改良Hodge试验提示6株CRKP均产碳青霉烯酶,EDTA纸片法检测显示不产金属酶;PCR鉴定出该6株CRKP均携带blaKPC-2型基因,部分菌株携带blaSHV及blaTEM型广谱β-内酰胺酶耐药基因。结论 BlaKPC-2耐药基因为Kpn对碳青霉烯类药物耐药的主要原因。     

检测产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌常用药物敏感试验方法的比较

目的 比较几种常用的检测产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌药物敏感试验方法 的检出率.方法 采用PCR技术及序列分析判定产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌;采用纸片扩散法、VTKTU 2 Compact AST-GN13药敏板、ATB G-5药敏板和WalkAway 96 PLUS NC31药敏板分别检测菌株对碳青霉烯酶类抗菌药物的耐药性.结果 纸片扩散法检出8株(72.7%)产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药,AST-GN13药敏板、ATB G-5药敏板和NC31药敏板均检出3株(27.7%)对亚胺培南耐药;纸片扩散法检出11株(100%),G-5药敏板检出7株(63.6%)对美罗培南耐药;纸片扩散法和AST-GN13药敏板均检出11株(100%)对厄他培南耐药.KPC阳性基因测序结果 为KPC-2型碳青霉烯酶.结论 纸片扩散法经济、方便,对碳青霉烯类抗菌药物耐药性检出率高,是筛查产KPC型碳青霉烯酶菌株的最佳方法.     

碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因的检测

目的 研究碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肺炎克雷伯菌β-内酰胺类耐药基因的存在情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集本院临床分离的6株对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的Kp,采用特异性PCR扩增和序列分析检测β-内酰胺类耐药基因在碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的Kp中的存在情况,用E-test方法测定菌株的药敏情况.结果 经PCR扩增和DNA序列分析证实菌株Kp1、Kp2 、Kp3、Kp4、Kp5和Kp6均含DHA-1、CTX-M-14和KPC-2基因.Kp1同时含SHV-12基因,Kp2和Kp3同时含SHV-11基因,Kp4同时含CMY-2和SHV-12基因.Kp5和Kp6同时含SHV-2基因.6株Kp对厄他培南、美罗培南、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和头孢西丁均耐药,仅1株Kp对亚胺培南中介,其余菌株均耐药;2株Kp对氨曲南敏感,其余菌株均耐药;3株Kp对哌拉西林/他唑巴坦耐药,1株中介,2株敏感;4株Kp对左氧氟沙星敏感,2株耐药;3株Kp对阿米卡星和庆大霉素敏感,3株耐药.结论 碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的Kp均携带多种β-内酰胺类耐药基因,其菌株对临床常用抗菌药物的耐药性有很大差异,临床应根据药敏结果选用抗菌药物,以防治疗失败.     

肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶基因型研究

目的探讨对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肠杆菌科细菌携带碳青霉烯酶基因的类型。 方法收集2016年2月至2017年2月武汉大学人民医院分离自临床的87株对碳青霉烯类抗菌药物敏感性降低的肠杆菌科细菌。运用改良Hodge试验进行碳青霉烯酶的表型确证。PCR检测碳青霉烯酶基因：blaKPC、blaNDM、blaIMP、blaVIM。将PCR产物纯化后进行测序,运用SeqMan软件对测序结果进行拼接后在NCBI网站BLAST比对,得到碳青霉烯酶基因亚型。 结果87株碳青霉烯类抗菌药物不敏感肠杆菌科细菌中,产碳青霉烯酶菌株检出率为70.1%,携带blaKPC-2、blaNDM-1、blaNDM-5、blaIMP-4和blaVIM-1的菌株分别为29、16、11、7和1株。产碳青霉烯酶最多的肠杆菌科细菌为肺炎克雷伯菌（33株）,其次为大肠埃希菌（15株）,肺炎克雷伯菌以产KPC型碳青霉烯酶为主,而大肠埃希菌仅产NDM型碳青霉烯酶。改良Hodge试验检测碳青霉烯酶的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.4%、96.2%、98.3%和86.2%,可准确检测KPC-2和NDM-5型碳青霉烯酶。碳青霉烯类抗菌药物不敏感肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的不敏感率分别为93.1%和79.3%,产KPC和NDM肠杆菌科细菌对青霉素类、除第四代头孢菌素以外的头孢菌素类、碳青霉烯类及加酶抑制剂的复合制剂耐药率均为100%,对其他临床常用抗菌药物的耐药率均保持在较高水平。 结论本院碳青霉烯类抗菌药物不敏感肠杆菌科细菌株主要产KPC-2、NDM-1和NDM-5型碳青霉烯酶。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因型研究

目的 研究碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及碳青霉烯酶基因的携带情况.方法 连续收集2011年1月至2012年4月浙江省台州医院临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌75株.应用Vitek 2 Compact微生物鉴定仪进行细菌鉴定和药敏分析,并通过Hodge试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型.结果 75株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌均为多重耐药菌株,只对阿米卡星保持较高的敏感性,耐药率仅为13.3％ (10/75).其中,69株(92.0％)检测出OXA-23基因,67株(89.3％)检出OXA-51基因,未检出IMP、VIM和SIM酶基因.结论 产OXA酶是本组碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要耐药机制,其中OXA-23和OXA-51是主要基因型.     

2006至2011年某院革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药物耐药性的变迁

目的分析2006至2011年革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药物的耐药及其变迁特点,为临床合理用药提供依据。方法收集2006至2011年分离的革兰阴性杆菌,采用法国生物梅里埃公司的VITEK-2全自动微生物分析系统或API细菌鉴定板条进行细菌鉴定到种;用纸片琼脂扩散法（KirbyBauer法）进行药物敏感试验;采用WHONET 5.6软件进行统计分析。结果 2006至2011年本院所分离细菌居前7位的是大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌和白假丝酵母菌。鲍曼不动杆菌由2006年的第3位（7.7%）上升至2011年的第1位（17.9%）;大肠埃希菌由2006年的第1位（18.7%）下降至2011年的第3位（11.1%）。鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率由16.0%上升至90.8%,对美洛培南的耐药率由21.0%上升至91.1%;铜绿假单胞菌对亚胺培南和美洛培南的耐药率略有上升,分别为46.0%～62.5%和45.0%～63.7%;大肠埃希菌对亚胺培南的耐药率由2006年的0.7%上升至2010年的3.5%,而2011年下降至1.2%,对美洛培南的耐药率由2006年的1.3%上升至2010年的3.8%,而2011年下降至1.4%;肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率由2006年的2.6%上升至2011年的11.1%,对美洛培南的耐药率由2006年的0.9%上升至2011年的30.7%。结论鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类药物的耐药性上升迅速,应引起高度重视。     

不同时间段临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性及分布

目的分析院内不同时间段临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性及标本来源,以指导临床合理使用抗菌药物。方法对2012年10月至2012年12月（2012年第4季度）分离的157株鲍曼不动杆菌、2013年1月至2013年3月（2013年第1季度）分离的184株鲍曼不动杆菌、2013年4月至2013年6月（2013年第2季度）分离的127株鲍曼不动杆菌、2013年7月至2013年9月（2013年第3季度）分离的154株鲍曼不动杆菌,用Walk Away 96 PLUS NC50药敏板检测菌株对亚胺培南等13种抗菌药物的耐药性,并对检测结果分别进行分析。结果 2012年第4季度和2013年第1季度分离的鲍曼不动杆菌对阿米卡星的耐药率分别为33.8%（53/157）和39.1%（72/184）,对妥布霉素的耐药率分别为43.9%（69/157）和46.7%（86/184）,对复方新诺明、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢吡肟、庆大霉素、头孢他啶、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟、亚胺培南和美罗培南耐药率为50.3%～93.5%,2013年第2季度和2013年第3季度对亚胺培南等13种抗菌药物的耐药率为44.8%～66.1%。不同阶段分离的鲍曼不动杆菌90.91%～95.54%的标本来源于痰液。结论连续4个季度监测本院院内分离的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物耐药率均很高,临床医师应根据药敏试验治疗鲍曼不动杆菌引起的感染。     

泛耐药鲍曼不动杆菌1株遗传学特征分析

目的研究1株泛耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制及遗传学特征。方法采用K—B法测定临床分离的鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的敏感性,筛选出1株泛耐药株,用PCR法对相关耐药基因进行检测,包括对15种超广谱β-内酰胺酶基因、3种金属β-内酰胺酶基因、2种AmpC酶基因、7种氨基糖苷类修饰酶基因、I类整合子及转座子遗传标志物。结果该株鲍曼不动杆菌除对头孢哌N／舒巴坦表现为中度敏感外,对其余14种抗菌药物皆表现为耐药;t3-内酰胺酶基因TEM、OXA-23群、染色体AmpC酶（ADC）基因阳性,氨基糖苷类修饰酶基因aac（3）-I、aac（6’）-Ib、ant（3”）-I阳性、I类整合子qacE△1-sull、转座子tnpU基因扩增阳性。该株AmpC酶（ADC酶）DNA序列为新亚型。结论鲍曼不动杆菌耐药严重,存在多种耐药机制,临床上需引起重视。     

鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力与被膜相关基因及耐药性的关系

目的 探讨临床分离的鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力与相关基因及耐药性的关系.方法 收集南充市中心医院嘉陵院区2018年1月至6月的临床分离鲍曼不动杆菌共40株,采用Vitek-2全自动微生物分析系统测定临床菌株对13种常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);采用结晶紫染色法测定临床菌株生物被膜形成能力;采用PCR法检测生物...     

149例革兰阴性杆菌血流感染患儿病原菌耐药分析

目的：了解我院住院患儿革兰阴性杆菌血流感染的病源菌构成及其耐药性,为临床治疗用药提供参考。方法：采用VITEK-2全自动微生物分析鉴定系统和NCCLS（2010年）的判断标准,对2011年儿科149例患儿血标本分离的革兰阴性杆菌进行鉴定和药敏试验。结果：149例患儿的血标本中分离出肺炎克雷伯菌69株,其中产超广谱8内酰胺酶（ESBLs）59株（85．51％）,非产ESBLs 10株（14．49％）;大肠埃希菌30株,其中产ES—BLs 12株（40．00％）,非产ESBLs菌株18株（60．00％）;鲍曼不动杆菌感染26株,其他菌24株。所有产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美洛培南、左旋氧氟沙星、环丙沙星耐药率均为0;对β内酰胺类药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株;对哌拉西林、氨苄西林耐药率高达100．00％。他唑巴坦对产ESBLs肺炎克雷伯菌有明显的抑制作用,哌拉西林／他唑巴坦（耐药率为18．64％）对其抑菌作用强于氨苄西林／舒巴坦（耐药率为89．83％）。碳青霉烯类（亚胺培南、美洛培南）是治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的满意选择。大肠埃希菌的耐药率低于肺炎克雷伯菌。结论：儿科革兰阴性杆菌血流感染中肺炎克雷伯菌是主要致病菌,产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率较高。亚胺培南和美洛培南是治疗儿科产ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌血流感染的较好选择。     

美罗培南联合头孢哌／／舒巴坦与米诺环素联合治疗泛耐药鲍曼不动杆菌性呼吸机相关肺炎临床观察

目的：观察美罗培南、头孢哌酮／舒巴坦、米诺环素联合治疗泛耐药鲍曼不动杆菌性呼吸机相关肺炎患者临床疗效。方法：选择泛耐药鲍曼不动杆菌性呼吸机相关肺炎患者48例,应用5％GS（NS）100ml＋美罗培南2g、静脉滴注、1次／8小时、60分钟滴入,5％GS（NS）100ml＋头孢哌酮／舒巴坦3g、静脉滴注、1次／8小时、60分钟滴入,米诺环素0．1g、鼻饲、3次／日,联合治疗10～14天,观察其临床疗效、细菌清除率、肝肾功能、C反应蛋白、降钙素原、血常规和不良反应。结果：联合抗菌治疗泛耐药鲍曼不动杆菌性呼吸机相关肺炎临床治愈率62．50％,有效率81．25％,细菌清除率62．50％：治疗过程中对肝肾功能无明显影响,无明显不良反应。结论：美罗培南、头孢哌酮／舒巴坦、米诺环素联合治疗泛耐药鲍曼不动杆菌性呼吸机相关肺炎患者效果较好。     

基层医院院内下呼吸道感染铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌耐药分析

目的：了解基层医院院内下呼吸道感染铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药情况,为合理使用抗生素提供依据。方法 BACT/ALERT 3D select抗菌药物敏感测定箱法检测淮南新华医院2007年1月至2011年12月痰标本分离获得的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南等16种抗菌药物的药敏结果,并按美国国家临床实验室标准委员会2009年标准进行判断,用WHONET 5.0软件分析数据。结果本院近5年共分离出铜绿假单胞菌796株、鲍曼不动杆菌101株。耐药性分析显示铜绿假单胞菌对亚胺培南的敏感率最高（3.85%～14%）、其次为阿米卡星（12.7%～27.5%）;鲍曼不动杆菌对所有抗菌药物的敏感率均较低（＜40%）。结论铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药在基层医院很严重,需要严格掌握抗菌药物使用。