人类染色体端粒酶基因在宫颈病变中的表达及临床意义

目的探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术检测人类染色体端粒酶(hTERC)基因异常扩增在子宫颈病变中的临床意义。方法用FISH技术检测118例宫颈脱落细胞中hTERC基因异常扩增情况。结果118例患者病理学诊断为炎症12例,宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ46例,CINⅡ31例,CINⅢ18例,浸润癌11例。FISH检测hTERC基因异常扩增阳性率在炎症组为0,CINⅠ组19.6%(9/46),CINⅡ组51.6%(16/31),CINⅢ组77.8%(14/18),浸润癌组90.9%(10/11),各组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。通过对未治疗的CINⅠ和CINⅡ患者共26例进行随访,发现hTERC基因扩增预测CINⅠ、CINⅡ病变进展的敏感性83.3%,预测病变维持或消退的特异性90.0%。结论 hTERC基因的异常扩增随宫颈病变级别增高而增加,对宫颈病变的筛查有一定临床意义,检测hTERC基因的异常扩增对宫颈早期病变进展有预测意义,可作为监测宫颈病变进展的生物遗传学指标。     

宫颈脱落细胞中端粒酶RNA基因和C-myc基因的表达及临床意义

目的研究宫颈脱落细胞中端粒酶RNA(hTERC)和C-myc基因的表达及其临床意义。方法对249例宫颈脱落细胞标本,应用荧光原位杂交(FISH)技术进行hTERC和C-myc基因检测,同时行阴道镜下多点活检和病理检查组织学制片。细胞标本分为正常组、宫颈上皮内瘤变(CIN)1组、CIN2组、CIN3组和鳞状细胞癌(SCC)组,比较液基细胞学、hTERC和C-myc基因扩增检测诊断SCC及CIN的敏感性和特异性。结果 hTERC和C-myc基因异常扩增率在正常组、CIN1组、CIN2组、CIN3组和SCC组分别为3.1%和2.3%、39.1%和26.1%、79.4%和50%、81.8%和54.5%、100%和80.0%。以阳性细胞>5.12%为界点,hTERC和C-myc基因联合检测CIN2组、CIN3组和SCC组的灵敏度为91.7%,特异度为83.6%,Youden指数为0.753。结论 hTERC基因联合C-myc基因检测对SCC及CIN诊断准确度高于任一个基因单独检测。     

荧光原位杂交检测宫颈细胞hTERC基因扩增及其临床意义

目的探讨端粒酶基因(hTERC)扩增与宫颈上皮内肿瘤(CIN)和宫颈癌发生发展的关系及临床意义。方法应用荧光原位杂交技术检测100例存在宫颈病变患者的宫颈脱落细胞中hTERC基因的扩增情况。结果 100例各类宫颈细胞病变中,hTERC基因扩增比例分别为:CIN1组13.3%(4/30),CIN2组71.0%(22/31),CIN3组和宫颈癌组均为100%(19/19,20/20),各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论宫颈CIN和宫颈癌细胞hTERC基因均有扩增,且扩增率随病变的进展而增加;高级别CIN和癌的扩增率明显高于低级别CIN;检测hTERC基因扩增可以作为宫颈CIN和宫颈癌筛查及预后评估的重要指标。     

应用荧光原位杂交法检测宫颈脱落细胞中hTERC基因的扩增

目的:研究荧光原位杂交技术(FISH)在检测宫颈脱落细胞hTERC基因扩增中的应用,探讨其用于辅助诊断宫颈上皮内瘤变(CIN)的可行性.方法:分别对80例CIN妇女和20例正常妇女的宫颈脱落细胞标本,应用FISH技术(TERC/CSP3DNA探针)检测人类端粒酶(TERC)基因,分析CIN中hTERC基因的扩增状况;并将FISH检测结果与人乳头瘤病毒(HPV)16/18型DNAPCR检测结果比较,观察其检测效果.结果:CIN1级组、CIN2级组、CIN3级组和正常对照组发生hTERC基因扩增的细胞所占百分比分别为(7.41±1.96)%、(10.46±1.58)%、(16.85±2.09)%和(4.10±1.71)%,差别有统计学意义(P<0.05);FISH技术和HPV16/18型DNA PCR检测CIN的敏感性、特异性、约登指数及粗一致性分别为66.3%、100%、0.663、73%和50.0%、85%、0.350、57%.结论:FISH技术检测有助于探索hTERC基因扩增,CIN组中,hTERC基因的拷贝数明显增加,且hTERC基因扩增随细胞学病变的严重程度加重而增加;FISH技术可用于CIN的辅助诊断,且其检测效果优于HPV检测.     

宫颈上皮内瘤变治疗前后hTERC基因表达结果分析

目的:探讨hTERC基因在宫颈上皮内瘤变(CIN)中治疗前后的表达情况及其在宫颈CIN治疗中的价值.方法:经阴道镜下多点活检CIN Ⅰ和Ⅱ级患者共30例行宫颈环形电切除术(LEEP)治疗,CIN Ⅲ级患者4例行子宫颈锥切术.于手术治疗前及治疗后6个月应用荧光原位杂交(FISH)技术检测宫颈脱落细胞hTERC基因的表达并行薄层液基细胞学检测(TCT)、人乳头瘤病毒(HPV)检测,应用FISH技术评估LEEP 在手术治疗CIN中的价值.结果:(1)CIN 随组织学病变程度的加重,hTERC基因表达百分比逐渐升高(均P<0.05).治疗后发生 hTERC基因表达的细胞数,平均每例所占百分比较治疗前明显降低(P<0.01).(2)治疗后病变残留者多为hTERC基因表达强阳性者,而弱阳性及中等阳性表达者均无病变残留,差异有统计学意义(P<0.05).结论:hTERC基因异常扩增可能是宫颈癌形成的早期事件,检测hTERC基因的表达有助于判断CIN的治疗效果,且对预测病变残留有重要价值.     

人类染色体端粒酶RNA基因在高危型人乳头瘤病毒阳性宫颈脱落细胞中的应用

目的探讨宫颈脱落细胞中人类染色体端粒酶RNA基因（hTERC）在高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染的宫颈病变中的表达。方法对210例HR-HPV阳性者中细胞学检查正常组30例、宫颈不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）50例、低度鳞状上皮内病变（LISL）50例、高度鳞状上皮内病变（HISL）50例、鳞状细胞癌（SCC）30例患者的宫颈脱落细胞中的hTERC行荧光原位杂交技术检测,应用受试者工作特征曲线（ROC曲线）确立宫颈HISL（CINⅡ、CINⅢ、SCC）的最佳界值。结果①在正常组、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC组hTERC的阳性表达率分别是2.7%、11.3%、81.0%、96.0%、100%,其中CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC组与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;CINⅠ与CINⅡ、Ⅲ组及SCC组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。随着宫颈病变程度的增加,各组中hTERC基因的扩增阳性率有增加的趋势（P〈0.05）,且个体阳性细胞核的计数增加,分别为正常组2.0%,CINⅠ组6.4%、CINⅡ组9.6%、CINⅢ组11.0%、SCC组20.0%,各组间的差异均有统计学意义（P〈0.05）。②hTERC检测HR-HPV阳性中高（度）鳞状上皮内病变及宫颈的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别94.01%、89.25%、91.67%、92.22%、91.90%。③多种复合类型的信号模式在HISL中的表达较高。结论 hTERC在预测HR-HPV阳性且宫颈细胞学检查为异常的宫颈病变的病理结果中具有重要的意义。个体hTERC阳性细胞个数及信号模式构成有望成为辅助宫颈病变筛查及监测病变进展的重要分子生物学指标之一。     

应用FISH技术检测宫颈脱落细胞中hTERC基医扩增的临床意义

目的：研究荧光原位杂交技术在检测宫颈脱落细胞中hTERC基因扩增情况,为女性子宫颈病变的筛查、早期诊断及预后提供新途径。方法：收集60例妇女患者进行宫颈脱落细胞的液基细胞学检查（TCT）、第2代杂交捕获法（HC2）高危型人乳头瘤病毒（HPV）检测（HPV—DNA）、FISH法hTERC基因检测及经阴道镜下宫颈活检病理证实,做出宫颈病变的最后诊断。结果：随着细胞学病变程度的加重及宫颈上皮内瘤变（CIN）级别增加,hTERC基因扩增阳性率增加（χ^2=11．111,χ^2=10．824,P〈0．05）;HPV感染率随着细胞学病变程度的加重而升高（χ^2=6．570,P〈0．05）;HPV阳性患者中hTERC扩增明显高于HPV阴性患者（χ^2=38．723,P〈0．05）。结论：hTERC基因扩增与宫颈细胞学和组织学密切相关,通过hTERC基因是否扩增可以很好区分低度与高度病变,hTERC基因的扩增可能是HPV感染致端粒酶活性增加的早期事件。     

TCT联合阴道镜检查对宫颈疾病早期筛查的临床应用

目的探讨TCT(液基细胞学)联合阴道镜检查在宫颈疾病早期筛查中的临床应用。方法2007年5月至2008年7月安徽淮南市朝阳医院对妇科门诊526例宫颈病变患者进行TCT以及阴道镜检查,采用TBS分级诊断系统,对TCT细胞学阳性者于阴道镜下取多点活组织病理细胞学检查。结果在526例TCT中,TCT检查异常者95例,占18.06%(95/526);未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)67例,占12.47%(67/526);低度鳞状上皮内病变(LSIL)21例,占3.99%(21/526);高度鳞状上皮(HSIL)内病变5例,占0.95%(5/526);鳞癌(SCC)2例,占0.38%(2/526)。经阴道镜下多点活检病理组织学检查,诊断为炎症59例,占异常细胞学62.11%(59/95);CINⅠ26例,占27.37%(26/95);宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅱ和Ⅲ8例,占8.42%(8/95);SCC 2例,占2.11%(2/95)。细胞学检查提示AS- CUS的67例患者中、经阴道镜下活检病理诊断为:CINⅠ为6例;CINⅡ为5例;CINⅢ为1例。细胞学与阴道镜下定位活检符合率为:LSIL为80.77%(21/26);HSIL为71.43%(5/7);SCC为100%(2/2)。结论TCT技术能明显提高异常细胞的检出率,因取材方便及无创,可作为宫颈癌前病变的常规筛查;阴道镜可确定宫颈病变的部位,提高宫颈活检的阳性率。故TCT配合阴道镜检查能显著提高宫颈病变的阳性检出率,可作为宫颈癌及、宫颈上皮内瘤样病变的筛查的可靠早期诊断方法,具有重要临床应用价值。     

hTERC基因在宫颈腺癌中的表达及临床意义

目的检测人类染色体端粒酶基因（hTERC）在宫颈腺癌组织中的表达情况,并进一步探讨hTERC基因在宫颈腺癌中异常扩增的临床意义。方法回顾性分析2000—2010年我院收治的15例宫颈腺癌患者的临床资料。应用荧光原位杂交技术（FISH）检测15例患者存档的病理石蜡切片标本中hTERC基因的扩增情况。同时取15例慢性宫颈炎组织作为正常对照,FISH检测其病理石蜡切片标本中hTERC基因的扩增情况。结果15例腺癌患者中有4例高危HPV病毒检测阴性。FISH检测15例宫颈腺癌的石蜡标本中的3号染色体hTERC基因15例均呈阳性表达,异常扩增阳性率为100％。宫颈炎对照组中未检测到hTERC基因异常扩增,异常扩增阳性率为0％。两组hTERC基因异常扩增阳性率相比差异有极显著性（尸〈0．01）。结论hTERC基因在宫颈腺癌组织中异常扩增,应用FISH技术检测宫颈腺癌中hTERC基因的表达,有助于临床早期诊断宫颈腺癌。     

宫颈液基薄层细胞检测在宫颈癌筛查中的应用

目的 对宫颈液基薄层细胞检测（TCT）在宫颈癌筛查中的应用价值进行分析.方法 选取846例接受子宫颈病变筛查的成年女性作为研究对象.采用TCT、人乳头瘤病毒（HPV）检查及阴道镜检查,然后对TCT检查在宫颈癌筛查中的应用价值进行分析.结果 （1）本研究对846例接受子宫颈病变筛查的妇女进行检查发现,正常范围（WNL）组有144例HPV阳性,阳性率为20.1%（144/689）;意义不明确的非典型鳞状细胞（ASCUS）组有29例HPV阳性,阳性率为39.2%（29/74）;低度鳞状上皮内病变（LSIL）组有31例HPV阳性,阳性率为72.1%（31/43）;高度鳞状上皮内病变（HSIL）组有30例HPV阳性,阳性率为85.7%（30/35）;鳞状细胞癌（SCC）组有5例HPV阳性,阳性率为100.0%（5/5）.HPV感染率随着TCT检查结果诊断级别的升高而增高（χ^2=3.483 5,P＜0.05）.（2）对组织病理学及TCT、HPV检测结果进行比较发现,病理结果为宫颈上皮内瘤样变（CIN）Ⅰ级及以下患者有154例为HPV及TCT双阳性,病理结果为CINⅡ级患者有25例为HPV及TCT双阳性,病理结果为CINⅢ级患者有16例为HPV及TCT双阳性,病理结果为SCC患者有5例为HPV及TCT双阳性,病理结果为CINⅢ级及以上患者中,其多为HPV及TCT双阳性,无1例患者为HPV及TCT双阴性,CIN三组间比较差异具有统计学意义（χ2=3.647 4,P＜0.05）.结论 TCT检查联合HPV检查可以作为宫颈癌筛查的常规筛查方法,在临床上具有极大的应用价值.     

P53、MDM2蛋白在宫颈癌中的表达及相关性研究

目的 探讨MDM2及p53蛋白在宫颈癌中表达及两者的相关性.方法 用免疫组织化学EnVision法,检测37例宫颈鳞癌(SCC)、16例宫颈腺癌(AUC)、45例宫颈上皮内瘤样变(CIN)及20例正常宫颈(NC)组织中MDM2及p53蛋白的表达.结果 p53蛋白在NC、CIN、AUC、SCC中的阳性率分别为0、26.67%(12/45)、68.75%(11/16)及59.46%(22/37),在AUC、SCC中的阳性率均明显高于NC及CIN组(P＜0.01、P＜0.01;P＜0.01、P＜0.01),在CIN组的阳性率明显高于NC组(P＜0.05);MDM2蛋白在NC、CIN、AUC、SCC中的阳性率分别为0、13.33%(6/45)、43.75%(7/16)及43.24%(16/37),在AUC、SCC组中的阳性率均明显高于NC及CIN组,差异有显著性(P＜0.01、P＜0.01;P＜0.05、P＜0.01);在CIN和SCC的p53 组中,MDM2 阳性率(41.67%、54.54%)明显高于p53组(3.03%、6.67%)(P＜0.01、P＜0.01),列联系数分别为0.503、0.610.结论 p53、MDM2蛋白的异常表达可能是宫颈癌中的基因事件,与宫颈癌的发生、发展密切相关;宫颈癌中p53和MDM2蛋白表达呈明显的正相关性.     

MDM2蛋白在宫颈癌中的表达及意义

目的 探讨MDM2蛋白在宫颈癌中的表达及意义.方法 用免疫组织化学EnVision法,检测37例宫颈鳞癌(SCC),16例宫颈腺癌(AUC),45例宫颈上皮内瘤样变 (CIN)及20例正常宫颈(NC)组织中MDM2蛋白的表达. 结果 MDM2蛋白在NC、CIN、AUC、SCC中的阳性率分别为0、13.33%(6/45)、43.75%(7/16)及43.24%(16/37).与正常宫颈及CIN组相比,MDM2蛋白在AUC、SCC组中的阳性率比较差异均有显著性(P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01);在不同分级的CIN、鳞癌及腺癌中MDM2蛋白阳性率比较差异无显著性(均P＞0.05). 结论 MDM2的表达可能与宫颈癌的发生、发展有关;MDM2蛋白表达可能与细胞分化程度无明显关系.     

凋亡异常与人乳头瘤病毒感染在宫颈癌发生中的意义

目的探讨宫颈鳞癌发生过程中端粒酶活性异常和高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的意义,同时分析与细胞周期蛋白异常表达的关系。方法应用荧光原位杂交(FISH)、显色原位杂交(CISH)及免疫组织化学检测鳞癌及上皮内瘤变组织中人端粒酶逆转录酶(hTERC)基因、高危型HPV 16/18、31/33和细胞周期蛋白Rb、P16ink4a、CDK4和Ki67的表达,正常宫颈组织作为对照检测。结果鳞癌和上皮内瘤变中hTERC基因的扩增率和高危型HPV及Rb、P16ink4a、CDK4和Ki67的阳性表达明显高于正常宫颈,鳞癌中高危型HPV的感染与hTERC基因的扩增呈正相关;高级别上皮内瘤变hTERC基因的扩增率显著高于低级别;Rb与Ki-67的阳性表达呈正相关;CDK4阳性表达与鳞癌组织学分级呈正相关;HPV16/18的感染与脉管内瘤栓的形成有相关关系。结论宫颈鳞癌的发生与高危HPV的感染密切相关,且其感染可能导致hTERC基因的异常扩增,二者协同作用导致癌变;hTERC基因的扩增可作为预测癌前病变进展的因子之一;P16ink4a、CDK4、Ki67可作为辅助诊断宫颈癌前病变严重程度的参考指标。     

液基薄层细胞学和HPV原位杂交在宫颈疾病诊断中的应用

目的探讨液基薄层细胞学(Thin liquid-based cytology test,TCT)、宫颈活检组织学和人乳头状瘤病毒(HPV)原位杂交三种方法在宫颈疾病筛查中的应用价值,指导临床正确应用。方法对403例宫颈疾病患者行TCT检查,对细胞学检查为炎症反应性改变的72例和ASCUS以上病变的227例行阴道镜下宫颈活检组织学检查,根据TCT结果和组织学结果对171例行HPV原位杂交检测。结果TCT与组织学结果的阳性符合率在炎症反应性改变、ASCUS、ASCUS-H、LSIL、HSIL和SCC分别为95.83%(69/72)、14.84%(23/155)、22.73%(5/22)、78.57%(33/42)、100%(3/3)和100%(5/5)。细胞学诊断的级别越高,指导意义越大。将LSIL以上病变作为细胞学阳性诊断,其阳性率为12.41%(72/403);组织学将CINⅠ以上病变作为阳性诊断,阳性率为17.39%(52/299),两者比较无显著性差异(P>0.05)。HPV原位杂交检测171例,阳性率为29.82%(51/171),其慢性炎症伴增生、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ和SCC的HPV感染率分别为14.27%(14/98)、37.93%(22/58)、100%(10/10)和100%(5/5)。高危型16/18亚型的感染在宫颈癌及癌前病变的发生上起着重要的作用。结论无论是TCT检查、组织学检查还是HPV原位杂交检测都各具有优缺点,因此在临床工作中应结合患者的病情及经济承受能力,合理选择、有效结合,以降低漏诊率和过度诊断率。     

HER3表达与宫颈鳞状细胞癌局部血管生成和浸润转移及预后的关系

目的 探讨HER3在宫颈鳞状细胞癌组织的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测HER3在28例宫颈正常上皮(NCE)、36例宫颈上皮内瘤变(CIN)和68例宫颈鳞状细胞癌(SCC)组织的表达,并检测其中Ki-67标记的增殖指数(PI)和CD34标记的微血管密度(MVD).结果 HER3在NCE、CIN及SCC组的阳性表达率分别为10.7%(3/28)、22.2%(8/36)及54.4%(37/68).HER3在SCC组的阳性表达率均高于CIN和NCE组(P＜0.05).HER3在SCC组表达分别与PI及MVD显著正相关(PI:r=0.375,P=0.002;MVD:r=0.273,P=0.024).HER3在SCC组表达分别与FIGO分期及组织学分级有关(P＜0.05),而与患者年龄、有否盆腔淋巴结转移、脉管浸润、间质浸润深度及生存率无关(P＞0.05).FIGO分期为Ⅱ期及组织学分级为Ⅲ级者,其HER3的阳性表达率分别显著高于FIGO分期为Ⅰ期及组织学分级在Ⅱ级以内者(P＜0.05).结论 HER3过度表达可能上调宫颈鳞癌细胞增殖及间质血管新生,可能促进宫颈鳞癌病程进展.