复发性自然流产育龄期妇女外周血弓形虫特异性抗体检测分析

目的 分析复发性自然流产(RSA)育龄期妇女外周血弓形虫特异性抗体检测情况.方法 连续选择近期就诊的RSA育龄期妇女56例,采用酶联免疫法(ELISA)检测外周血弓形虫特异性抗体IgG和IgM,并与同期早期妊娠妇女(对照组,39例)相同测试结果比较.结果 RSA组的IgG阳性例数、IgG阳性率和IgM阳性例数、IgM阳性率均明显多于对照组(P均＜0.05).结论 弓形虫感染是育龄期妇女发生RSA的可能原因.     

外周血Th17及CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞失衡与不明原因反复自然流产的相关性研究

目的观察不明原因反复自然流产(URSA)孕妇外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例的变化,探讨Th17/T细胞比例失衡在URSA孕妇发病机制中的作用。方法选择36例URSA孕妇为实验组,健康早孕妇女40例为对照组,应用流式细胞仪检测Th17与CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比例,应用ELISA法检测IL-6、TGFβ-和IL-17的水平。结果 URSA孕妇外周血中,CD3+CD8-IL-17+T细胞占CD3+T淋巴细胞的百分比高于对照组,P<0.05;CD4+CD25+FoxP3+T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显低于对照组,P<0.05。相关细胞因子测定结果显示,IL-6、IL-17水平在URSA孕妇血清中均明显升高,TGF-β水平在2组间比较,差异无统计学意义。结论外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的比例及相关细胞因子数量的异常可能下调母胎免疫耐受功能,参与URSA的发生。     

复发性自然流产患者外周血中γδT细胞检测的临床意义

目的:探讨复发性自然流产(RSA)患者外周血中γδT细胞的变化及其临床意义.方法:根据临床明确诊断,收集RSA首诊非妊娠怠者(RSA非妊娠组)256例、RSA免疫治疗前和免疫治疗后97例、RSA妊娠成功分娩(RSA成功分娩组)85例,健康育龄非妊娠妇女(非妊娠对照组)53例和正常妊妇女(妊娠对照组)62例空腹静脉血标本,应用流式细胞仪检测各组外周血中γδT细胞的百分含量,并进行分析比较.结果:RSA非妊娠组外周血中γδT细胞百分含量(12.24±5.11)%明显高于非妊娠对照组(9.47±3.19)%,差异有统计学意义(P＜0.01);RSA免疫治疗后为(10.57 ±4.29)%,明显低于免疫治疗前(13.42±5.83)%,差异有统计学意义(P＜0.01);RSA成功分娩组(9.45±2.83)%与妊娠对照组(9.92±2.99)%的差异无统计学意义(P＞0.05).结论:RSA的发生可能与外周血γδT细胞的高表达有关,γδT细胞检测对临床免疫治疗有指导意义,可作为RSA免疫治疗的一项监测指标.     

外周血雌二醇水平和CD4~+CD25~+Treg细胞与反复自然流产相关性研究

目的探讨外周血雌二醇水平和CD4^＋CD25^＋Treg细胞在反复自然流产发病机制中的作用。方法采用电化学发光法检测30例反复自然流产患者,90例正常妊娠女性（早、中、晚孕女性各30例）以及30例正常非孕女性外周血雌二醇水平;三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量。结果早、中、晚孕组外周血雌二醇水平均明显高于非妊娠对照组（t值分别为7．42,13．66,14．69;均P〈0．05）,并且孕周越长雌二醇水平越高;反复自然流产组明显低于正常非妊娠组（t=4．11,P〈0．05）。早、中、晚孕组外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数均明显高于正常非妊娠组（t值分别为2．22、8．9、5．91,均P〈0．05）,中孕组明显高于早孕组（t=6．31,P〈0．05）,晚孕组略低于中孕组,但差异无统计学意义;反复自然流产组明显低于正常非妊娠组（t=8．07,P〈0．05）。结论外周血雌二醇水平和CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量减低可能下调母胎免疫耐受功能,参与介导反复自然流产的发生。     

外周血雌二醇水平和CD4^＋CD25^＋Treg细胞与反复自然流产相关性研究

目的探讨外周血雌二醇水平和CD4^＋CD25^＋Treg细胞在反复自然流产发病机制中的作用。方法采用电化学发光法检测30例反复自然流产患者,90例正常妊娠女性（早、中、晚孕女性各30例）以及30例正常非孕女性外周血雌二醇水平;三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量。结果早、中、晚孕组外周血雌二醇水平均明显高于非妊娠对照组（t值分别为7．42,13．66,14．69;均P〈0．05）,并且孕周越长雌二醇水平越高;反复自然流产组明显低于正常非妊娠组（t=4．11,P〈0．05）。早、中、晚孕组外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数均明显高于正常非妊娠组（t值分别为2．22、8．9、5．91,均P〈0．05）,中孕组明显高于早孕组（t=6．31,P〈0．05）,晚孕组略低于中孕组,但差异无统计学意义;反复自然流产组明显低于正常非妊娠组（t=8．07,P〈0．05）。结论外周血雌二醇水平和CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量减低可能下调母胎免疫耐受功能,参与介导反复自然流产的发生。     

调节性T细胞的免疫抑制机制及其与肿瘤的关系

"免疫"是机体识别和清除抗原性异物的一种生理功能。肿瘤细胞能够通过多种机制逃避机体免疫系统的识别和攻击,得以在体内生存和增殖。近年研究发现CD4+CD25+Fox P3+调节性T细胞具有免疫抑制功能,可能在肿瘤免疫逃逸中发挥关键作用,与肿瘤的发生、发展关系密切,且与患者病情及预后存在一定的相关性。这些细胞通过不同的作用机制发挥抑制功能,包括细胞-靶细胞的直接接触、细胞因子的分泌、诱导抗原提呈细胞失能等。     

不明原因复发性自然流产患者外周血淋巴细胞亚群特征的研究

目的 探讨不明原因复发性自然流产患者外周血免疫细胞亚群的特征.方法 将34例早孕难免流产患者分为不明原因复发性自然流产(URSA)和偶发性自然流产(SA)两组,采用流式细胞术检测患者外周血免疫细胞的特征,将两组的检测结果进行比对研究.结果 Th/Ts两组均见异常升高,URSA组为(2.77±5.16),SA组为(3.67±6.12);NK细胞比例URSA组为(15.57±6.45)%明显升高,而SA组仅为(11.38±3.66)%,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论 URSA组与SA组均存在一定的免疫紊乱,共同的表现是特异性免疫方面均有Th/Ts异常升高,不同的表现是URSA组在非特异性免疫方面NK细胞比例增高较SA组更为明显.     

特异性细胞因子对T辅助17细胞和T调节性细胞表达的调节作用

目的 探讨多种细胞因子包括转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素2(IL-2)对CD+4T淋巴细胞的分化调节作用.方法 将人外周血T淋巴细胞、鼠脾脏T淋巴细胞在不同的刺激条件下进行体外培养,采用流式细胞仪分析活化T淋巴细胞中CD+4IL-17+T辅助17细胞(Th17细胞)、C+4IL-17+T淋巴细胞、CD+4CD+25FOXP+3T调节性细胞(Treg细胞)的表达情况.结果 鼠脾脏T淋巴细胞培养液中有TGF-β存在时可促进Treg细胞、rh17细胞和CD+8;IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(7.8±2.2)%、(12.6±3.1)%、(10.1±2.6)%.无细胞因子培养的同类细胞为实验对照组,表达水平分别为(4.8±0.6)%、(1.7±0.5)%、(1.0±0.4)%,差异均有统计学意义(q=4.09、8.80、9.61,P<0.05或P<0.01).TGF-β与IL-6细胞因子共同存在时可促进Th17和CD+8IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(17.8±5.3)%、(15.0±4.2)%,而分化受抑制的Treg细胞的表达水平为(4.I±1.2)%,与TGF-β组同类细胞表达水平比较差异均有统计学意义(q=5.03、5.17、5.04,P均<0.01).在TGF-β刺激的T淋巴细胞中加入IL-2细胞因子可使Th17细胞、CD+8;IL-17+T淋巴细胞表达减少,同时伴有Treg细胞表达量的增加;在加入抗IL-2后结果相反,即Th17细胞、CD+8IL-17+T淋巴细胞表达水平增加,Treg细胞表达水平减少.人外周血T淋巴细胞上Th17、CD+8IL-17+、Treg细胞表达水平变化趋势与鼠脾脏淋巴细胞相似.结论 不同细胞因子对于调控Th17细胞和Treg细胞之间的平衡起着十分重要的作用.     

三阴性乳腺癌外周血及病灶微环境辅助性和调节性T细胞表达

目的分析三阴性乳腺癌(trip nenegative breast cancer,TNBC)患者外周血及病灶微环境辅助性T细胞和调节性T细胞的表达水平。方法选择2012年1—4月经临床及病理确诊的女性TNBC 34例(TNBC组)、非三阴性乳腺癌(NTNBC)39例(NTNBC组)及同期确诊为乳腺良性疾病女性患者27例(对照组),均检测外周血及病灶微环境辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)和调节性T细胞(CD4CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg),并进行比较。结果 TNBC组外周血及病灶微环境CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明显低于NTNBC及对照组,而CD8+水平则明显高于其他两组(P0.05);TNBC组外周血及病灶微环境CD4CD25+Treg及CD4+CD25+Foxp3+Treg表达水平均明显高于NTNBC组及对照组(P0.05)。结论 TNBC患者存在明确的外周血及病灶微环境调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达,其可作为本病免疫学病因诊断及评估疗效的特征性标识,并为今后寻找TNBC免疫治疗途径提供试验数据。     

复发性口腔溃疡患者外周血调节性T细胞和白细胞介素2水平的表达

目的研究复发性口腔溃疡(RAU)患者溃疡期外周血调节性T细胞和白细胞介素2(IL-2)的水平变化。方法收集RAU患者溃疡期和健康人外周血,采用流式细胞术分析其CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞比例的变化,ELISA检测IL-2的水平。结果 RAU患者外周血中调节性T细胞[(3.29±0.86)%vs.(5.67±0.99)%]和IL-2的水平[(31.12±4.71)pg/mlvs.(36.11±4.99)pg/ml]低于正常对照组(P<0.05)。结论调节性T细胞和IL-2在RAU患者外周血中表达下降,提示在RAU免疫发病机制中两者起到了重要作用。     

外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与肝癌切除术后肿瘤复发的关系

目的:探讨术前外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+T细胞)水平与肝癌切除术后肿瘤复发的关系.方法:收集2005年1月至2007年11月实施手术的35例肝癌患者的术前外周血,采用流式细胞技术检测外周血CD4+CD25+T细胞比例,以27例肝硬化患者的外周血作对照.对35例肝癌患者随访14～24个月,观察肿瘤复发情况.分析术前CD4+CD25+T细胞水平与肝癌切除术后肿瘤复发的相关性,判断术前CD4+CD25+T细胞水平对肿瘤复发的影响.结果:肝癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞水平显著高于肝硬化患者(P<0.01);术前外周血CD4+CD25+T细胞水平与肝癌患者术后肿瘤复发率呈负相关(r=-0.83,P<0.05);术前CD4+CD25+T细胞水平是影响术后肿瘤复发的独立危险因素(P<0.01);高CD4+CD25+T细胞组患者术后肿瘤复发率高于低CD4+CD25+T细胞组患者(P<0.05).结论:外周血CD4+CD25+T细胞水平可作为肝癌切除术后肿瘤复发的预测指标之一.     

非小细胞肺癌患者外周血调节性T细胞表达及意义

目的探讨CD4+CD25+,CD8+CD28-调节性T细胞及其亚群表型CD45RO在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血中表达及其与NSCLC临床病理及手术的关系。方法采用流式细胞仪检测40例NSCLC患者和20例对照外周血中CD4+CD25+,CD8+CD28-,CD8+CD28+T细胞亚群比率,并对其亚群表型CD45RO进行检测。结果 NSCLC组CD4+CD25+,CD4+CD25+CD45RO+,CD8+CD28-细胞亚群比率较对照组明显升高(P<0.05);CD8+CD28+细胞亚群比率较对照组明显降低(P<0.01);NSCLC组手术后CD4+CD25+细胞亚群比率较术前明显降低(P<0.01),CD8+CD28+细胞亚群比率较术前明显升高(P<0.01);外周血调节性T细胞水平与NSCLC临床病理无相关性(P>0.05)。结论 CD4+CD25+,CD8+CD28-和CD8+CD28+T细胞亚群比率的改变可能与肺癌免疫耐受和抗肿瘤能力下降有关;手术治疗可下调患者机体的肿瘤免疫耐受,改善患者抗肿瘤免疫功能。     

重症肌无力患者外周血中调节性T细胞的变化及免疫抑制剂对调节性T细胞的影响

目的评估重症肌无力（MG）患者体内的免疫紊乱,并探讨免疫抑制剂治疗MG患者的机制。方法将57例患者分为未治疗组、糖皮质激素（GC）治疗组和静脉注射免疫球蛋白（IVIg）治疗组,采用流式细胞仪的六色荧光分析技术。分析GC、免疫球蛋白（Ig）等免疫抑制剂对调节性T细胞（Tregs）的影响。结果（1）外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋T细胞百分比在未治疗组患者外周循环中显著减少,GC治疗组有所升高,但差异无统计学意义,两者与健康对照组比较差异显著,P〈0．05;IVIg治疗组Treg比例显著升高,与健康对照组比较,P〈0．05,与其他各组比较,P〈0．01。（2）GC和Ig不同程度提升了患者外周血Tregs比例,后者更加显著。结论（1）CD4＋CD25＋FOXI＋T细胞百分比在MG患者外周循环中显著减少,可能是MG发病的原因。（2）GC和Ig的治疗作用与其提升Tregs比例有关。     

不同宫颈病变患者外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞的表达

目的研究不同宫颈病变患者外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞的表达。方法以2017年5月至2018年7月在该院接受阴道镜检查与液基薄层细胞学检查的健康女性50例为对照组。另取同期于该院接受阴道镜检查与液基薄层细胞学检查的宫颈病变患者90例为观察组,将其按照宫颈活检病理结果分为慢性宫颈炎+CIN1组30例,CIN2～3组30例,宫颈癌组30例。分别比较各组年龄、人乳头瘤病毒(HPV)感染情况,外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞表达水平。结果对照组、慢性宫颈炎+CIN1组、CIN2～3组、宫颈癌组年龄、HPV感染率均呈逐渐升高趋势,差异均有统计学意义(P0.05)。对照组、慢性宫颈炎+CIN1组、CIN2～3组、宫颈癌组外周血CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平呈逐渐降低趋势,而CD8~+水平呈逐渐升高趋势。对照组、慢性宫颈炎+CIN1组、CIN2～3组、宫颈癌组外周血CD4~+CD25~+CD127~-水平呈逐渐升高趋势。经Pearson相关性分析可得:宫颈病变严重程度与CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+呈负相关关系(P0.05),而与CD8~+、CD4~+CD25~+CD127~-呈正相关关系(P0.05)。结论随着宫颈病变程度的逐渐加重,外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞异常表达越明显。可通过联合检测外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞表达情况,从而有效判断宫颈病变情况。     

肺癌患者外周血调节性T细胞的检测及意义

目的探讨肺癌患者外周血CD4 CD25 调节T细胞水平的变化及其意义。方法采用流式细胞术检测68例肺癌患者外周血CD4 CD25 调节T细胞水平,并进行分层分析。结果肺癌组外周血CD4 CD25 调节T细胞水平(28.6±9.24)%,明显高于30例健康对照组CD4 CD25 T细胞水平(11.12±3.32)%(P<0.01)。进一步分层分析显示:随肺癌进展,外周血CD4 CD25 T细胞水平显著升高,进展期尤其明显[Ⅰ Ⅱ期:(19.52±3.32),n=22;Ⅲ期:(27.28±8.26)☆%,n=25,P<0.01;Ⅳ期:(32.31±15.63)%,n=21,P<0.01]。结论肺癌患者外周血CD4 CD25 调节T细胞水平明显高于正常,且与肿瘤的发生发展密切相关。去除这群细胞可能有效诱导肿瘤免疫,为肿瘤治疗提供一种新的方法。     

复发性流产主动免疫治疗及与调节性T淋巴细胞相关性的研究

目的通过研究原因不明性复发性流产（URSA）主动免疫治疗前后外周血中CD4^＋、CD25^＋、Tr的表达率和治疗后的妊娠结局，来探讨Tr与URSA发病的相关性，评价主动免疫治疗对于URSA的疗效及安全性。方法对2006年1月至2008年6月在我院门诊就诊的60例URSA患者，采用淋巴细胞毒实验检测封闭抗体，应用丈夫或无关健康第三人外周血淋巴细胞行皮下免疫治疗，并随访妊娠结局；用双荧光标记流式细胞分析技术检测URSA患者主动免疫治疗前后外周血CD4^＋、CD25^＋、Tr表达率。结果流产组妇女外周血中CD4^＋、CD25^＋、Tr表达率（1．19±0．25）％，明显低于正常妊娠组妇女外周血中CD4^＋、CD25^＋、Tr的表达率（1．57±0．45）％。主动免疫治疗后，URSA患者外周血CD4^＋、CD25^＋、Tr的表达率较治疗前明显增加。主动免疫治疗组妊娠成功率（83．3％）明显高于非治疗组妊娠成功率（46．7％）结论URSA的发生，可能与患者外周血中CD4^＋CD25^＋Tr数量减少有关，主动免疫治疗可以上调CD4^＋、CD25^＋、Tr，是治疗URSA的一种有效方法。主动免疫治疗后妊娠成功率明显上升，且无严重的母儿不良反应，主动免疫治疗是安全有效的。     

复发性自然流产患者外周血辅助性T细胞和自然杀伤细胞的表达水平分析

目的分析复发性自然流产（RSA）患者外周血辅助性T细胞和自然杀伤细胞表达水平。方法连续选择近期就诊的RSA育龄期妇女21例,入选对象均接受了辅助性T细胞和自然杀伤细胞（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋和NK细胞）检测,并与正常怀孕组（20例）和未孕同龄妇女（20例,对照组）同期测试结果比较。结果 RSA组的外周血CD4＋、CD4＋/CD8＋和外周血NK细胞表达水平均明显高于正常怀孕组和对照组,而CD＋8表达水平则显著低于后两者（P均〈0.05～0.01）。结论 RSA育龄期妇女外周血辅助性T细胞和自然杀伤细胞变化明显,异常表达。     

复发性自然流产患者外周血辅助性T细胞和自然杀伤细胞的表达水平分析

目的分析复发性自然流产(RSA)患者外周血辅助性T细胞和自然杀伤细胞表达水平。方法连续选择近期就诊的RSA育龄期妇女21例,入选对象均接受了辅助性T细胞和自然杀伤细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和NK细胞)检测,并与正常怀孕组(20例)和未孕同龄妇女(20例,对照组)同期测试结果比较。结果 RSA组的外周血CD4+、CD4+/CD8+和外周血NK细胞表达水平均明显高于正常怀孕组和对照组,而CD+8表达水平则显著低于后两者(P均0.05～0.01)。结论 RSA育龄期妇女外周血辅助性T细胞和自然杀伤细胞变化明显,异常表达。     

桥本甲状腺炎患者外周血调节性T细胞/Th17细胞平衡动态变化的研究

目的 探讨桥本甲状腺炎(HT)患者外周血调节性T细胞(Treg)与Th17细胞的动态变化及其意义.方法 流式细胞术检测36例HT患者和30例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Treg和Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR检测Treg和Th17细胞特异性转录因子Foxp3、RORγt mRNA的表达水平,ELISA检测血清中相关细胞因子TGF-β和IL-17A的含量.结果 HT患者PBMC中Treg细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显低于健康对照者(t=-10.62、-7.624,P均<0.01),HT亚组间差异具有统计学意义(F=4.414、4.512,P均<0.05);Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平及Th17/Treg比值均明显高于健康对照者(t=11.32、19.25、8.386,P均<0.01),HT亚组间差异均具有统计学意义(F分别为34.947、14.551、24.338,P均<0.01),亚组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05).HT患者血清TGF-β的含量较健康对照者略低,但差异无统计学意义(P>0.05);IL-17A的含量均较健康对照者显著升高(P<0.01),HT患者组内各亚组间血清IL-17A的含量差异具有统计学意义(F=11.077,P<0.01),两两比较差异亦具有统计学意义(P均<0.05).HT患者Th17/Treg比值与血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)滴度均呈显著正相关(r=0.349、0.502,P=0.037、0.002).结论 在HT发病过程中,Th17/Treg细胞轴呈动态改变,并且与甲状腺自身抗体滴度正相关,说明Th17/Treg细胞亚群的免疫失平衡可能参与了HT的发生发展.     

CD4+CD25+调节性T细胞与移植免疫耐受研究进展

CD4^＋CD25^＋T细胞是调节性T细胞（regulatory Tcells,Tr）的亚群之一,主要来源于胸腺,表达IL-10 mRNA,细胞表面表达白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）受体α链（CD25）,本身不产生IL-2,在体外为无能细胞（anergy cell）,在体内、外增殖需要外源性IL-2。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞具有免疫无能性和免疫抑制性两大功能特性。它能通过细胞间接触方式有效抑制免疫系统对外来器官产生排异反应的部位,使免疫系统的其他部位保持稳定,发挥正常的免疫功能,克服了机体在接受器官移植后出现的免疫排斥反应,从而在移植免疫耐受中发挥重要的作用。