MicroScan WA-96与纸片扩散法药敏结果比较

一、材料和方法 1．材料（1）菌株：125株菌株均为我院临床标本分离培养所得,革兰阳性球菌50株,其中金黄色葡萄球菌23株,其他葡萄球菌27株。革兰阴性杆菌75株,其中大肠埃希菌24株,肺炎克雷伯菌18株,非发酵菌33株。质控标准菌株为金黄色葡萄球菌（ATCC25923）、大肠杆菌（ATCC25922）、铜绿假单胞菌（ATCC27853）;（2）仪器：MicroScan WA-96由美国DADEBEHRING公司生产;（3）M-H培养基和药敏纸片：M-H药敏琼脂购自杭州天和生物有限公司,16种抗生素药敏纸片购自北京天坛药品生物技术开发公司。     

采集血标本的注意事项有哪些？

答：（1）事先告知病人应做哪些配合，然后护士根据检验的项目，计算采血量，并准备适当的容器；（2）严格无菌操作，不得在输血、输液的针头处采血，血液抽出后去掉针头，将血液沿试管壁徐徐注入瓶中；（3）采血标本严防溶血，针头注射器均应干燥，全血标本应抗凝；（4）采集血液作血培养时应严防污染。     

自制ASO抗体质控品在生化分析仪上的应用

我们经过近2a的体会，摸索出一种适合免疫比浊定量测定方法的自制抗链球菌溶血素O（ASO）抗体高低值质控血清的方法，现报道如下。1材料和方法1．1材料（1）试剂：ASO试剂盒和质控品均购于上海申能德赛诊断系统有限公司，使用日立7600全自动生化分析仪分析。（2）质控品的制备：①分别收集ASO测定值小于150IU／ml和大于400Iu／ml的我院住院及门诊链球菌感染疾病的患者混合血清各约300ml，要求标本无溶血、无黄疸、无脂浊，     

非O1群霍乱弧菌感染腹泻的分布及耐药性分析

为了解本地区非Ｏ１群Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ（霍乱弧菌）感染腹泻的流行状况，对我院肠道门诊腹泻病患者的粪便标本，进行了连续两年致病性弧菌的监测，并对非Ｏ１群霍乱弧菌感染的流行病学因素，进行了综合分析，结果报告如下。１材料和方法１．１标本来源１９９８年至１９９９年急性腹泻病患者的粪便标本３１６５份；患者全部为１４岁以上的成年人，年龄从１４岁至８９岁；男性患者１６８５例，女性患者 １４８０例。１．２培养基增菌及分离培养基购自北京市东城区卫生防疫站，ＭＨ琼脂购自生物梅里埃公司。新鲜脱纤维羊血和兔血本实验室…     

平板免疫溶血法与ELISA法测定肠毒素的比较

目前，测定产不耐热肠毒素（LT）大肠埃希菌大都采用平析免疫溶血法，我们于1994年7~10月对214例腹泻病人粪便中分离的346株大肠埃菌采用此法，并同时用ELISA法对照测定LT，现总结如下：材料和方法1．LT抗血清购自卫生部生物制品鉴定所，平板免疫溶血法按文献操作。2．ELISA（LT）试剂盒由上海卫生防疫站生产，按说明操作。3．阳性质控菌株LT29，由山东省卫生防疫站菌种室惠赠。大肠O14菌株（阴性对照）购于卫生部生物鉴定所。结果见附表。讨论平板免疫溶血法测定不耐热肠毒素（LT）已在我们实验室应用多年，使腹泻菌阳性检出率有…     

运用PCR检测胃粘膜中幽门螺杆菌

聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction，PCR）技术，具有简便、快速、特异、灵敏度高等优点，应用PCR技术检测幽螺杆菌（HelicobacterPylorlHP）无疑会对慢性胃炎的传染源及传播途径等目前所知甚少的流行病学方面知识有进一步的了解。我们参照来氏等[1]设计的HP的16srRNA基因片段引物，检测慢性胃炎的胃粘膜标本中的HP，现报告如下：1材料与方法1．1试剂①脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）购自上海华美生物工程公司。②FDTaqDNA聚合酶为Promega公司产品。③引物选自HP的16srRNA基因保守区的一j对寡核着酸。引物P；为5’－GCG－…     

抗—HCV抗体检测影响因素浅探

在日常工作中,特别是在对献血员作丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）检测时,经常发现同一人血样初检或复检,有时明时阳的现象;因此,我们从常见的高脂血标本,溶血标本,甲肝抗体（抗-HAV-IgM）阳性标本,乙肝抗体阳性标本（抗-HBS）,部分补体和激素含量高的标本作丙肝抗体检测影响因素的浅探;发现除部份溶血标本和类风湿因子阳性标本等对丙肝抗体有轻度影响外,纤维蛋白也是影响抗-HCV抗体检测的又一重要因素,现将实验结果报告如下。材料与方法1材料1．1试剂国产深圳月亮湾生物工程有限公司提供的抗-HCV抗体检测试剂盒批号：970800…     

新生儿ABO溶血病相关发病因素分析

目的：探讨新生儿ABO溶血病与新生儿血型、性别、出生天数及孕妇血清IgG抗-A（B）抗体效价的关系.方法：时临床送检的66份新生儿溶血标本进行常规血清学分析，对母亲血清中IgG抗-A（B）抗体效价进行测定；应用χ2检验分析发生新生儿溶血与血型、性别、出生天数和孕妇IgG抗-A（B）抗体效价的关系.结果：新生儿溶血病组的孕妇血清IgG抗-A（B）抗体效价高于非新生儿溶血病组，抗体效价高于128的发生新生儿溶血病的几率较大（P＜0.05）；新生儿溶血病的检出与新生儿的出生天数有关，4 d内检出效率最高，与性别和A或B血型无关.结论：孕妇血清中IgG抗-A（B）抗体效价大于128时发生新生儿溶血病的可能性最大，出生后新生儿如果怀疑发生了新生儿溶血病，最好在4 d内进行检测.     

聚天冬酰胺衍生物载体(PHEA-Suc 和Gal-PHEA-Suc)的合成、表征和体外试验

背景：寻找一种新的大分子作为靶向药物载体。 目的：制备一种新型聚天冬酰胺衍生物——琥珀酰化的α，β-聚-（2-羟乙基）-D，L-天冬酰胺（PHEA-Suc）和半乳糖基化的琥珀酰化的α，β-聚-（2-羟乙基）-D，L-天冬酰胺（Gal-PHEA-Suc），对材料进行了表征，体外观察其细胞毒性。 设计、时间及地点：体外观察实验，于2005-06／2007-06在南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室完成。 材料：L-天冬氨酸，无水N，N-二甲基甲酰胺，乳糖酸，异硫氰酸荧光素，二甲亚砜，MTT购自美国Sigma公司；人宫颈癌细胞系HeLa和肝癌细胞系HepG2均购自上海细胞所细胞库；新生牛血清购自杭州四季青生物公司；胰蛋白酶购自美国Hyclone公司；其余试剂均为国产分析纯。 方法：采用红外图谱、核磁共振、元素分析、分子量测定等方法对材料进行了表征，通过四唑盐比色法测定PHEA，SUC和Gal-PHEA-SUC的细胞毒性。 主要观察指标：聚天冬酰胺衍生物载体的结构及细胞毒性。 结果：PHEA-SUC和Gal-PHEA-SUC的结构通过红外光谱和核磁共振分析确认。由元素分析算得PHEA-SUC和Gal-PHEA-SUC的琥珀酰化度为43％（mol／mol），Gal-PHEA-suc的半乳糖基化度为7．6％（mol／mol）。PHEA—SUC和Gal-PHEA—suc的体外细胞毒性分析表明，它们对HeLa和HepG2细胞生长的抑制作用很小，在浓度低于500mg／L时没有抑制作用。 结论：聚天冬酰胺衍生物PHEA-suc、Gal-PHEA-suc细胞毒性低，且具有-suc活性基团和-gal靶向基团，可以作为理想的靶向药物载体。     

聚天冬酰胺衍生物载体（PHEA-Suc和Gal-PHEA-Suc）的合成、表征和体外试验

背景：寻找一种新的大分子作为靶向药物载体。 目的：制备一种新型聚天冬酰胺衍生物——琥珀酰化的α，β-聚-（2-羟乙基）-D，L-天冬酰胺（PHEA-Suc）和半乳糖基化的琥珀酰化的α，β-聚-（2-羟乙基）-D，L-天冬酰胺（Gal-PHEA-Suc），对材料进行了表征，体外观察其细胞毒性。 设计、时间及地点：体外观察实验，于2005-06／2007-06在南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室完成。 材料：L-天冬氨酸，无水N，N-二甲基甲酰胺，乳糖酸，异硫氰酸荧光素，二甲亚砜，MTT购自美国Sigma公司；人宫颈癌细胞系HeLa和肝癌细胞系HepG2均购自上海细胞所细胞库；新生牛血清购自杭州四季青生物公司；胰蛋白酶购自美国Hyclone公司；其余试剂均为国产分析纯。 方法：采用红外图谱、核磁共振、元素分析、分子量测定等方法对材料进行了表征，通过四唑盐比色法测定PHEA，SUC和Gal-PHEA-SUC的细胞毒性。 主要观察指标：聚天冬酰胺衍生物载体的结构及细胞毒性。 结果：PHEA-SUC和Gal-PHEA-SUC的结构通过红外光谱和核磁共振分析确认。由元素分析算得PHEA-SUC和Gal-PHEA-SUC的琥珀酰化度为43％（mol／mol），Gal-PHEA-suc的半乳糖基化度为7．6％（mol／mol）。PHEA—SUC和Gal-PHEA—suc的体外细胞毒性分析表明，它们对HeLa和HepG2细胞生长的抑制作用很小，在浓度低于500mg／L时没有抑制作用。 结论：聚天冬酰胺衍生物PHEA-suc、Gal-PHEA-suc细胞毒性低，且具有-suc活性基团和-gal靶向基团，可以作为理想的靶向药物载体。     

微柱凝胶免疫检测法在新生儿溶血病临床诊断上的应用

目的建立一种新的新生儿溶血病诊断方法——微柱凝胶免疫检测法。方法采用微柱凝胶血型检测实验和抗人球蛋白实验与试管血型检测与试管抗人球蛋白实验同时平行对照检查：①新生儿ABO、Rh系统定型；②新生儿直抗实验；③游离IgG测定；④放散实验。结果两法检测326例疑为新生儿溶血病标本（其中夫妇ABO血型系统不合292例，夫妇ABO系统血型相合34例）。夫妇ABO血型系统不合的阳性率分别为160例（54．8％），80例（27．4％）；夫妇ABO系统血型相合的阳性率分别为23例（67．6％），17例（50％）。结论该法具有操作简单，方便，标本用量少，结果易判定，敏感性高，特异性强，结果可靠，可较长时间保存等优点，与临床诊断符合率达98％，为新生儿溶血病提供实验室可靠诊断依据。     

溶血标本导致HBsAg假阳性结果的探讨

目的：探讨溶血标本对HBsAg结果的影响。方法：将ELISA法检测HBsAg的溶血血清标本，用高铁氰化钾测定血红蛋白含量，用反向间接血凝法（RPHA）复查检测HBsAg的溶血血清标本。结果：溶血标本导致ELISA法检测HBsAg可产生假阳性结果，与溶血程度有关，溶血后细胞内的过氧化物酶释放到血清中是产生ELISA法检测HBsAg产生假阳性结果的直接原因。     

免疫印迹技术在rhIL—4特异性检测中的应用

免疫印迹（Westernblot）是将凝胶电泳的高分辨率与固相免疫检测的强特异性相结合的一种技术。它可以对蛋白质抗原进行定性、半定量分析，也可从混杂蛋白质中检测出特定的抗原，并测定其分子量。目前已成为医学研究和临床分析检测的重要手段。我们应用Westernblot对本实验室制备的rhIL-4产品的特异性进行了检测。1材料与方法1．1材料rhIL-4为本实验室制备的产品：rhIL-4抗血清购于GIBCO／BRL；GelBondPAG膜购自Phar-macia；硝酸纤维素膜购自Amersham，羊抗兔酶标抗体IgG-HRP购于军事医学科学院微生物流行病学研究所I全自动快速…     

微量元素质控血清的制备及临床应用

近年来随着对人体微量元素基础和临床研究的不断深入，微量元素在疾病的预防诊断和治疗等方面的作用[1]越来越受到临床工作者的重视，同时也就对微量元素检测的可靠性提出了更高的要求。为此，我们在原有工作的基础上[2，3]，探讨了应用凉融浓缩技术制备微量元素质控血清的方法及临床应用。现报告如下。1材料与方法1．1材料①正常人血清；收集门诊体检人员中正常（肝功正常、HBsAg阴性、无睹、无溶血）新鲜的血清标本备用。②3％苯甲酸溶液：称取3g朱甲酸（AR级）溶于100ml石英亚沸蒸馏水。③Zn、Cu标准液：贮存标准波lins／ml；应用标准…     

温敏凝胶制备及其在体内的生物相容性评价

学术背景：凝胶材料在体温条件下能以凝胶形式稳定存在，是其作为医学植入物的必备条件，故需要将温敏型凝胶的低临界溶解温度调节到超过人体体温的水平。目的：制备低临界溶解温度超过37℃的温敏凝胶材料聚．（N-异丙基丙稀酰胺/N-羟甲基丙烯酰胺）P（NIPAAm-co-NHMPA），并初步评价其作为医学植入物的安全性。设计：随机、非盲法、分组对照动物实验。单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科。材料：实验于2007-01/10在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室、武汉大学化学系医用高分子材料教育部重点实验室完成。NIPAAm和NHMPA单体购自Aldrich公司、交联剂N，N’-亚甲基双丙烯酰胺（MBAAm）购自Fluka公司、促进剂过硫酸铵（APS）和四甲基乙二胺（TEMED）购自Sigma公司。方法：①温敏凝胶的制备：以APS和TEMED为氧化还原引发体系，MBAAm为交联剂制备P（NIPAAm-co-NHMPA），反应体系中添加一定质量分数的NHMP，溶涨率法测定低临界溶解温度。②安全性评价：进行过敏实验、急性全身毒性实验、遗传毒性实验、植入实验等一系列体内生物相容性动物实验以评估植入物的安全性。主要观察指标：过敏实验记录激发部位红斑水肿；急性全身中毒实验观察记录注射后4，24，48和72h动物的一般状态；遗传毒性实验于注射6h后在显微镜下计数鼠骨髓多染红细胞微核；植入实验将制得的切片进行光镜下观察。结果：①合成的凝胶材料符合预期的温敏特性要求，低临界溶解温度为38℃。②在过敏实验皮内注射浸提液及生理盐水组皮肤无红斑水肿；急性全身毒性实验显示腹腔注射浸提液及生理盐水组无毒性表现；遗传毒性实验中实验组和阴性对照组鼠骨髓多染红细胞的微核出现率无差异；体内植入实验表明材料周围炎性反应轻微而局限。结     

标本溶血对生化检验结果的影响

目的：探讨标本溶血对生化检验结果的影响。方法：用日立7020全自动生化分析仪检测20份正常人血液标本溶血前和溶血后的谷丙转转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰转肽酶（γ－GT），总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、尿素氮（BUN）、肌肝（CRE）、尿酸（UA）、葡萄糖（Glu）、胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、载脂蛋白－A（APo-A）、载脂蛋白－B（APo-B)、高密度胆蛋白（DHL－C）、钙（Ca)、乳酸脱氢酶（LDH）的值，并进行了比较和统计分析。结果：ATL、AST、ALP、γ－GT、TBIL、DBIL、CRE、GLu,Apo-B、LDH的值在溶血前后有非常显著性差别（P＜0．001），APo-A的值在溶血前后有显著性差别（P＜0．05），其中，ALT、AS、TBIL、DBIL、LDH的值溶血后比溶血测得的值高，ALP、γ－GT、CRE、GLu、APo-A,APo-B的值溶血后比溶血前测得的值低，而TP、ALB、BUN、DHL－C、CHO、TG、Ca、UA的值在溶血前后则无显著性差别（P＞0．05）。结论：溶血对较多的生化检验项目有明显的干扰影响，其机制有多种原因，应尽量避免或减少标本的溶血，使检验结果更准确可靠。     

聚合酶链反应在梅毒诊断中的应用

梅毒的各种血清学试验因敏感度和特异性尚不能达到早期和准确的要求，给临床诊断带来一定困难。我们应用PCR技术快速检测梅毒螺旋体，得到满意的结果。材料和方法一、标本来源40例可疑梅毒患者血清和分泌物标本均来自本院皮肤科与妇产科门诊。二、试剂Taq酶、dNTP、购自Promega公司．梅毒螺旋体抗体血凝试验（TPHA）试剂盒由日本富士株式会社生产，快速血浆反应素测定（RPR）试剂由兰州生物制品研究所生产。三、方法1．引物设计根据Burstain等[Clin．Microbi－ol．1991；29（1）62]，选择梅毒螺旋体39kD基底膜蛋白基因序列，扩增片…     

MET—HC822血细胞分析仪试剂的研制与应用

HC822血细胞分析仪具有多参数分析功能。对于中、小医院检验技术及自动化程度的提高非常适宜．我们用美国专家乔治先生来我院校正后的该分析仪为测定仪器。将国内试剂参考配方，适当调整理化指标与进口试剂进行多参数对比，以低廉的成本配制成适用于该机的全套试剂．经过一年的使用，效果满意。1材料和方法1．1材料1．1．1仪器：①HC822血细胞分析仪；②Erma折射仪（辽宁无线电六厂生产）；③电导仪（北京教学仪器厂生产）；④电解质分析仪（合肥恒星公司生产）。1．1．2试剂：进口试剂：稀释液、清洗剂、溶血剂（深圳迈瑞公司提供）。自…     

不要忽视溶血对ALT酶活力测定的影响

以乳酸脱氨酶（LDH）为指示酶，采用酶联一紫外连续监测法测定血清谷丙转氨酶（ALT）的活力时．发现溶血标本对结果有较大的影响．现报道如下：1材料和方法1．1Vitalab21半自动生化分析仪。1．2血清标本选自本院住院病人未溶血血清．1．3Hb液制备采用新鲜双草酸盐抗凝集血，用生理盐水洗涤至上清波无色，倾去上清液，加入等县D·H：0振摇，置一18oC反复冻塔，然后以20000r／min离心15分钟，取上清波用氰化高铁法测定Hb含量，并配三成2．0，4．0，10．0，16．0，34．og／L的溶液．1·4试剂AnT酶试剂由台湾元生生物科技有限公司提供。1…     

骨髓中一类新细胞群--神经组织定向干细胞的确立

背景：骨髓间充质干细胞和造血干细胞具有分化为神经类细胞的潜能己得到共识。另有研究者认为骨髓中除骨髓间充质干细胞和造血干细胞以外，还寄居着CXCR4阳性的组织定向干细胞，包括骨骼肌、心、肝及神经组织定向干细胞。 目的：实验拟进一步证实神经组织定向干细胞寄居于骨髓，并寻求确立神经组织定向干细胞分离、培养的新方法。 设计：开放性实验。 单位：解放军第二军医大学解剖学教研室。 材料：所用成年清洁级SD大鼠由解放军第二军医大学动物中心提供。DMEM/F12,B27，N2均购自Invitrogen公司；bFGF源于CytoLab Ltd;EGF源于Invitrogen公司；Nestin、CXCR4,β-Tublin Ⅲ，神经胶质纤维酸性蛋白等一抗为Santa Cruz公司兔抗鼠多克隆抗体；MAP2ab（Clonell—5B），CNPase（Clone AP20）为NeoMarkers公司小鼠抗大鼠单克隆抗体；荧光（FITC，Cy3）标记试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司；免疫组化试剂盒购自Vector Laboratories公司。NycoPrep^TM分离液（1．077A）购自Axis-Shield公司。 方法：实验于2004-01／2006-12在解放军第二军医大学组织工程研究所完成。取SD大鼠双侧股骨及胫骨，冲洗骨髓腔，经NycoPrep^TM分离液分离单核细胞层，DMEM／F12（1：1）无血清神经干细胞培养液（内含2％B27，1％N2，20μg/L碱性成纤维细胞生长因子，20μg／L表皮生长因子，1×10^5U/L青霉素，100mg／L链霉素），通过先贴壁、后悬浮的方法从骨髓中分离、培养单克隆生长的神经组织定向干细胞。 主要观察指标：通过免疫细胞化学法检测神经组织定向干细胞细胞球CXCR4和nesfin蛋白，以及细胞球自然分化后神经元以及神经胶质细胞的标志蛋白。 结果：①神经组织定向干细胞细胞球表达神经干细胞标志蛋白nesfin和组织定向干细胞标志蛋白CXCR4。②神经组织定向干细胞细胞球在含15％胎牛血清的