对异黄酮改构化合物F11雌激素样活性的研究

 目的 探讨异黄酮改构化合物F11对去势大鼠阴道、子宫及乳腺的影响.方法 选用Wistar大鼠,制作去势模型分为生理盐水组、雌二醇组、F11组、假手术组,腹腔给药每日1次,连续给药12周,观察大鼠阴道细胞、子宫湿重/体重比值及乳腺组织形态学变化.结果 F11可促进阴道上皮细胞角化,提高子宫湿重/体重比值,减缓去势大鼠乳腺组织的萎缩.结论 F11有类似雌激素样作用.     

桂皮醛对裸鼠人胃癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响

目的研究桂皮醛对肿瘤细胞的细胞毒作用和对裸鼠人胃癌SGC-7901细胞移植瘤生长及凋亡的影响。方法采用MTT法观察桂皮醛对人癌细胞体外增殖的抑制作用;建立胃癌裸鼠移植瘤模型,以不同浓度桂皮醛ip,与卡铂治疗对比,观察移植瘤的瘤重及瘤重抑制率。应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率。通过透射电镜观察肿瘤组织细胞凋亡情况。结果桂皮醛对体外培养的7种人肿瘤细胞具有直接细胞毒作用,其半数抑制浓度(IC50)的范围为12.3~37.1μg·ml-1;桂皮醛25、50、100mg·kg-1和卡铂5mg·kg-1ip21d均能明显抑制裸鼠移植瘤的生长,抑瘤率分别为15.15%、41.67%、60.61%和65.15%。桂皮醛治疗组裸鼠移植瘤细胞S期比率升高,50、100mg·kg-1剂量组诱导移植瘤细胞凋亡率明显高于对照组。透射电镜发现桂皮醛导致移植瘤大量细胞发生凋亡,可见典型的细胞凋亡形态学变化。结论桂皮醛体内抗肿瘤作用明显,其机制与抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡有关。     

人β干扰素基因的改构及其融合表达和纯化

目的 :通过基因改构来提高人 β干扰素基因原核表达产物的稳定性和比活性。 方法 :用RT_PCR法从人外周血淋巴细胞中获得人 β干扰素基因。定点突变后 ,克隆至表达载体pGEX_2T。IPTG诱导该基因的表达 ,亲和层析和原位裂解法纯化表达产物。结果 :获得大量纯化产物 ,且稳定性和活性获得极大提高。结论 :基因改构可以提高人 β干扰素基因原核表达产物的稳定性和活性     

双向调控Cox-2表达对人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨上调和下调Cox-2基因表达对食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法 构建针对Cox-2基因的siRNA载体及Cox-2基因真核表达载体,通过脂质体转染技术将其转入食管癌EC9706细胞,G418筛选得到稳定转染细胞系。荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测细胞中Cox-2 mRNA和Cox-2蛋白表达水平;裸鼠移植瘤实验检测上调和下调Cox-2表达联合X射线照射对食管癌的生长抑制作用。结果 Cox-2下调组食管癌EC9706细胞内Cox-2基因表达明显降低,Cox-2上调组明显升高。Cox-2下调组裸鼠移植瘤平均体积明显小于对照组(F=34.26,P<0.05);Cox-2上调组的瘤体平均体积大于对照组(F=26.38,P<0.05)。20 Gy γ射线照射后Cox-2下调组瘤体平均体积较照射前明显减小(F=16.35,P<0.05);而上调组裸鼠皮下种植瘤平均体积较照射前无明显变化。结论 下调Cox-2表达能抑制人食管癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体的放射敏感性,上调Cox-2表达则使肿瘤辐射抗拒。     

沙利度胺联合照射对人食管癌裸鼠移植瘤生长和肿瘤血管生成的影响

目的 观察沙利度胺（thalidomide,TLD）联合照射对人食管癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 建立人食管鳞癌裸鼠移植瘤模型,将24只荷瘤裸鼠标号,按随机数字表随机分为健康对照组、TLD组、20 Gy组、20 Gy+TLD组,每组6只。计算肿瘤抑制率,并用免疫组织化学法检测移植瘤瘤组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）、乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）、微血管密度（MVD）的表达水平。结果 20 Gy+TLD组荷瘤鼠瘤体积及瘤重均小于20 Gy组,差异具有统计学意义（t=3.68、4.60,P<0.05）。20 Gy+TLD组的抑瘤率高于其他各实验组,达到60.61%。与20 Gy组相比较,20 Gy+TLD组中裸鼠移植瘤组织中VEGF、HIF-1α蛋白表达均有所降低（t=11.82、6.63,P<0.01）;20 Gy组MVD值高于20 Gy+TLD组（t=5.92,P<0.01）。结论 沙利度胺联合照射对移植瘤的抑瘤作用较单独照射增强,可能是沙利度胺通过调控VEGF的表达,从而影响了食管癌组织的放疗敏感性。     

诺福素对MCF-7人乳腺癌细胞的体内外抗癌药效学研究

目的 研究评价诺福素在体内体外对MCF-7人乳腺癌细胞的生长抑制作用.方法 按照抗癌药物临床前药效学评价原则,体外评价试验用MTT法,体内评价通过观察受试药物对MCF-7裸鼠移植瘤生长的影响,并与阳性药紫杉醇进行比较.结果 两批体外MTT法显示,诺福素抑制MCF-7细胞生长的半效抑制浓度分别为1.7762 nmol/L...     

慢病毒载体介导survivin小分子干扰核糖核酸对裸鼠肺癌移植瘤的影响

目的观察慢病毒载体介导的survivin小分子干扰核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)能否在裸鼠体内抑制肺癌移植瘤的生长。方法裸鼠随机分为3组,分别将A549细胞、无关序列及survivin siRNA慢病毒载体感染A549细胞接种于裸鼠右侧背部近腋窝皮下,观察survivin siRNA对移植瘤生长的影响。采用逆转录酶聚合酶链反应和Western blotting测定移植瘤组织survivin基因及其蛋白表达。结果成功建立人肺癌裸鼠皮下移植瘤模型。survivin siRNA组移植瘤体积及质量明显低于其他2组(P<0.01),抑瘤率为63.6%(基于体积)或58.8%(基于质量),survivin mRNA和蛋白表达分别减少53.7%、57.6%。结论慢病毒载体介导survivin siRNA可明显下调裸鼠体内survivin基因表达,抑制肺癌移植瘤的生长。     

契伦科夫光分子成像技术对胃癌裸鼠移植瘤诊断的可能性探讨

 目的 采用契伦科夫光分子成像(Cerenkov luminescence imaging,CLI)技术对胃癌裸鼠移植瘤进行放射性核素光学分子成像,探索契伦科夫光诊断胃癌的可行性。方法 2只胃癌裸鼠移植瘤模型尾静脉分别注射1.67×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG和3.34×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG,1 h后采集契伦科夫光,选取相同大小的ROI进行信号强度分析。成像结束后解剖出移植瘤组织和肝、肾、心脏、胃肠道、肺脏再次成像。然后进行CLI动态成像:1只胃癌裸鼠移植瘤模型尾静脉注射1.67×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG,分别于注药后40、60、80、100、120、140、160、180 min采集移植瘤部位的光学信号并进行对比。结果 移植瘤部位出现契伦科夫光信号的浓聚,契伦科夫光信号强度与尾静脉注射的¹⁸F-FDG的活度成正比,注射3.34×10⁷ Bq ¹⁸F-FDG和1.67×10⁷Bq ¹⁸F-FDG的胃癌移植瘤小鼠移植瘤部位光子数值分别为8.432×10⁵ p/s和3.172×10⁵ p/s。随时间的延长,移植瘤摄取¹⁸F-FDG的契伦科夫光信号逐渐减弱。结论 CLI可以实现胃癌裸鼠移植瘤的放射性核素光学成像,具有实现光学分子成像诊断胃癌的潜力。     

慢病毒载体介导RNA干扰沉默Livin基因对大肠癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨慢病毒载体介导RNA干扰沉默Livin基因表达,对大肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤生长及放射敏感性的影响。 方法 选取36只BALB/c(nu/nu)裸鼠,按随机区组法分为空白对照组、阴性对照组及实验组,将HT-29细胞接种于裸鼠,建立皮下移植瘤裸鼠模型,观察裸鼠体重及瘤体积的变化。RT-PCR、免疫组织化学分析Livin mRNA及蛋白表达的变化,原位末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡的变化;瘤内注射生理盐水、空载慢病毒和干扰慢病毒,同时均给予10 Gy 6 MV X射线照射,绘制裸鼠体重和移植瘤生长曲线。结果 实验组体积抑瘤率为(50.04±0.07)%,瘤体重量明显减轻(F=4.85,P<0.05), 瘤重抑瘤率为(50.27±0.17)%。实验组Livin mRNA表达水平为(17.75±0.08)%,明显低于空白对照组的(67.60±0.05)%和阴性对照组的(68.54±0.03)% (F=89.97, P<0.01)。实验组Livin蛋白表达水平为(36.00±3.40)%,明显低于空白对照组的(85.00±3.15)%和阴性对照组的(80.33±3.08)%(F=107.32,P<0.01)。实验组凋亡率为(23.67±2.25)%,明显高于空白对照组的(5.00±1.50)%和阴性对照组的(8.33±1.82)%(F=56.94,P<0.01)。与射线联合时,裸鼠移植瘤体积在分组之间总体存在差异(F=10.70,P<0.01),实验组肿瘤体积变化小于阴性对照组和空白对照组(F=7.01~9.32,P<0.01)。结论 慢病毒载体介导RNA干扰沉默Livin基因表达能抑制大肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤的生长,并增加移植瘤对放疗的敏感性。     

对工作场所F类铀化合物空气浓度限值的推导探讨

目的 从辐射和化学危害角度分别推算F类铀化合物导出空气浓度,为工作场所职业危害因素的管理与评价提供参考.方法 用模拟计算的方法,分别推算F类铀化合物达到个人年剂量限值、急慢性机体损害效应阈值时工作场所的空气浓度.结果 正常运行情况下,将工作场所空气中F类铀化合物浓度控制在5 μg/m³以内,可以满足辐射危害和化学危害控制的要求;短时间开放性接触时,控制在1.1 mg/m³是可以接受的.结论 制定F类铀化合物空气浓度限值是可行的.     

人小细胞肺癌原位移植瘤裸鼠模型的构建

目的 探索一种简便易行且成瘤率高的肺癌原位移植瘤模型的构建方法.方法 将人小细胞肺癌NCI-H446细胞悬液经皮穿刺种植到20只实验裸鼠肺内,定期记录实验裸鼠的体重变化及临床症状变化,种植肿瘤细胞后第3周末进行高分辨率CT(HRCT)扫描观察,并对所有实验裸鼠的肺组织进行病理观察.结果 20只实验裸鼠中17只HRCT扫描观察到肺内有小结节影.病理结果显示肺内结节具有人小细胞肺癌特点.本组人小细胞肺癌原位瘤模型成瘤率85%.结论 经皮穿刺肺内种植的方法能够建立人小细胞肺癌裸鼠原位移植瘤模型.     

环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用。方法构建胰腺癌荷瘤裸鼠模型,将成瘤裸鼠随机分为4组,分别给予纯水(对照组)和含有不同浓度(0.05%、0.1%、0.15%)的塞来昔布饮水,观测裸鼠肿瘤生长情况并测量不同时间的体积变化,于治疗28 d后处死裸鼠,测瘤体重量,应用caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,免疫组织化学法检测肿瘤增殖指数(PI)和微血管密度(MVD)。结果治疗组裸鼠肿瘤体积的变化呈浓度依赖性和时效性;治疗28 d后,治疗组瘤重量均明显低于对照组[(0.96±0.09)g、(0.78±0.06)g、(0.64±0.07)g vs(1.16±0.12)g,P<0.01)];治疗组caspase-3相对活性明显高于对照组(0.021±0.002、0.026±0.003、0.031±0.002 vs 0.006±0.001,P<0.01)。0.1%组、0.15%组的PI和MVD均明显低于对照组(P<0.05);0.05%组的PI和MVD虽均低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论COX-2抑制剂塞来昔布可显著抑制荷胰腺癌裸鼠的肿瘤生长,其作用机制可能是通过提高caspase-3活性来诱导细胞凋亡,通过抑制肿瘤细胞的增殖和新生血管的形成来发挥抗肿瘤效应,在临床上具有潜在的应用价值。     

免疫光敏剂抗癌作用的动物实验研究

将血卟啉与抗结肠癌单克隆抗体偶联构成免疫光敏剂,静脉注入荷人结肠癌裸鼠体内,同时以注射单纯血卟啉鼠为对照,经激光照射,初步实验结果显示注射免疫光敏剂鼠不仅肿瘤光敏坏死面积大于注射单纯血卟啉鼠,而且坏死程度亦严重而广泛。表明单克隆抗体在动物体内有可能起到将血卟啉导向肿瘤部位的作用,从而较单独应用血卟啉疗效提高。     

敏感性编码技术MR扩散成像在人结肠癌裸鼠异位移植瘤模型中的探讨

目的:探讨在人结肠癌裸鼠异位移植瘤模型中使用敏感性编码技术磁共振扩散成像的可行性和最佳参数。方法:裸鼠21只,于SW480人结肠癌细胞株皮下种植后7～14d行扩散加权成像(DWI)扫描。13只荷裸鼠使用头部相控阵线圈扫描,作为实验组。成像参数的加速因子(reduction factor)取值为1、2。8只荷裸鼠使用C3表面线圈进行扫描,作为对照组。研究实验组使用敏感性编码后DWI扫描时间、图像信噪比变化及最佳参数。比较实验组使用敏感性编码技术后与对照组DWI图像信噪比的差别。结果:实验组DWI中应用敏感性编码成像缩减因子为2时扫描时间缩短而图像的信噪比没差别(P≥0.05)。b值500s/mm2时荷裸鼠人结肠癌移植瘤具有最高信噪比为105.5±61.6,ADC值为(1.598±0.384)×10-3mm2/s。与对照组相比实验组DWI图像细节显示更清晰,呼吸伪影更少,信噪比更高,时间更短。结论:合理应用敏感性编码技术能缩短扫描时间而图像信噪比没有差别,扩散敏感系数(b值)为500s/mm2是最优b值。使用敏感性编码技术头部相控阵线圈扫描DWI图象质量明显优于C3表面线圈。     

端粒酶核酶时间治疗肝癌裸鼠移植瘤研究

目的 探讨在端粒酶峰值时相与谷值时相施以端粒酶抑制剂治疗肝癌裸鼠移植瘤的疗效差异.方法 24只BALB/C裸鼠进行为期4 wk的LD12: 12节律同步化.移植肝癌细胞(SMMC-7721)于裸鼠以建立肝癌裸鼠移植瘤.在移植后 2 wk,瘤体内注射端粒酶抑制剂hTERT-5'RZ以治疗肝癌裸鼠移植瘤,注射时间点为9 HALO或21 HALO,持续2 wk.结果 21 HALO治疗组的肿瘤抑制率(65%)和端粒酶抑制率(90%)高于9 HALO治疗组的肿瘤抑制率(48%)和端粒酶抑制率(70%),差异具有统计学意义. 结论 在肿瘤DNA合成期注射以端粒酶为作用靶点的核酶能更好地抑制肝癌生长,具有更好的治疗效果.     

血卟啉衍生物对正常小鼠X线全身照射的影响

血卟啉衍生物(HpD)是否有放射增敏作用?正常小鼠用药24时后分别全身照射X线,发现若干实验组小鼠的存活期显著延长,4～48小时内脾.胸腺、淋巴结、睾丸的重量,四种器官以及胃、十二指肠的放射损伤的组织学改变与对照组均无显著差异。表明了HpD有放射保护作用。HpD是否对X线有放射增敏作用的问题仍待研究。     

肝癌裸鼠移植瘤端粒酶活性表达的近日节律

目的：探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的近日节律。方法：在时辰同步化裸鼠中构建肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤，继续在程控光照条件下饲养，于光照后3、9、15、21h取样，用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量，细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果：肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随近日节律变化，且伴随端粒酶活性的同步节律变化，呈近日节律特征。结论：肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰，为制定肿瘤时辰化疗方案提供了有价值的参考。     

顺磁性对比剂Gd-DTPA-DG 的制备及其在肺癌裸鼠模型活体MR实验研究

目的 合成一种顺磁性脱氧葡萄糖类MR对比剂二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖钆盐(Gd-DTPA-DG)并探讨其在荷瘤裸鼠体内肿瘤信号改变的规律.方法 首先合成DTPA-DG ,再与Gd2O3螯合,制得Gd-DTPA-DG.采用荷瘤裸鼠体内实验模型,将裸鼠随机分成实验组与对照组(n=10),前者尾静脉注射Gd-DTPA-DG,后者尾静脉注射含相同Gd3+浓度(0.1 mmol/kg)的Gd-DTPA, 测量SE T1WI平扫及引入对比剂30 s、2 min、5 min、 10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、2 h后瘤体信号强度,并计算对比度噪声比(CNR).将右侧前肢肌肉组织信号变化作为参照物,并进行统计分析.结果 Gd-DTPA-DG比Gd-DTPA在肿瘤组织内表现为更强且更持久的强化.注射对比剂30 s后,实验组裸鼠瘤体信号增加与扫描前差异没有统计意义(P=0.171),在30 min左右差异性最大(P<0.001).对照组5 min时前后差异最大(P<0.001),但2 h时即与注射前没有显著差异性(P=0.057).结论 Gd-DTPA-DG 可在肺癌模型活体内起到肿瘤强化作用,是一种新型顺磁性Gd(III)类糖代谢MR对比剂.     

人胰腺癌裸鼠模型3,0 T MRI早期表现

目的 探讨人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型早期MRI表现. 资料与方法 对照病理组织学结果,分析胰腺癌模型的早期MRI表现. 结果 20只裸鼠有18只接种成功,共发现22个瘤灶,组织学检查符合胰腺低分化腺癌.与邻近肌肉信号相比,肿瘤早期MRI表现为T1WI均匀稍低(50%,11/22)、等(32%,7/22)或稍高信号(18%,4/22),T2WI呈均匀(91%,20/22)或不均匀(9%,2/22)高信号,增强扫描瘤灶呈渐进性强化,延迟期呈等信号. 结论 3.0 T MRI能够检测出直径<5 mm的肿瘤.