FHIT基因与肿瘤的研究进展

1996年Ohta等利用外显子捕捉法在人类染色体3P14．2处确定了1个新的基因。该基因编码的蛋白质与具有组氨酸三联体结构的HIT（histidinetriad）蛋白高度同源，又因为该基因跨越脆性位点，故命名为脆性组氨酸三联体（FHIT）。近年来大量研究表明，FHIT基因在人类许多恶性肿瘤组织以及多种恶性肿瘤细胞系中存在异常。FHIT转录产物异常及FHIT蛋白表达缺失或减少已在多种原发肿瘤及肿瘤细胞株中得到证实，尤其在和环境致癌因素密切相关的肿瘤，如胃癌、肺癌、食管癌、宫颈癌、肝癌等病变早期即可有FHIT基因异常。     

胃癌中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失及其蛋白表达的研究

目的:探讨FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与蛋白表达的关系及其在胃癌发病机制中的作用.方法:应用PCR及免疫组化SP法检测30例胃癌组织、18例正常胃组织中FHIT基因外显子5、8的纯合性缺失和FHIT蛋白的表达.结果:FHIT蛋白阴性表达率及外显子5、8纯合性缺失率在胃癌组织中均高于正常胃组织(P＜0.05).FHIT蛋白表达与胃癌的分化程度有关(P＜0.05):胃癌组织中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与FHIT蛋白阴性表达有显著相关性(r=0.59,P＜0.05).结论:胃癌组织中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失可能是引起FHIT蛋白表达降低并进而导致胃癌发生的重要机制.     

FHIT蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的:脆性组氨酸三联体(FragileHistidineTriad,FHIT)基因是一种侯选的肿瘤抑制基因,它的改变见于多 种类型人类恶性肿瘤。本研究的目的是探讨FHIT蛋白在原发性肝细胞癌中的表达状况及其与临床指标、病理学 特征的关系及意义。方法:应用免疫组化方法检测50例原发性肝细胞癌及癌旁组织中FHIT的表达。结果:FHIT 蛋白主要表达于细胞浆。肝癌组织较癌旁组织中FHIT的表达均明显降低或缺失,异常表达率是60%。其异常表 达与肿瘤直径相关。结论:FHIT蛋白在原发性肝细胞癌异常表达,FHIT基因可能为肝癌的一种抑癌基因。     

乳腺癌组织FHIT基因位点杂合性缺失及其蛋白表达的研究

目的：探讨FHIT基因与乳腺癌发生发展的关系。方法：运用PCR—变性聚丙烯酰胺凝胶电泳—银染法对FHIT基因住点上5个微卫星位点进行LOH的检测。同时采用免疫组织化学方法检测了40例肿瘤组织中Fhit蛋白的表达情况。结果：37．5％的原发性乳腺癌存在LOH，45％的肿瘤样本发生Fhit表达的缺失或明显下降，两者之间无显著性差异(P=0．000)。结论：FHIT基因位点的LOH及Fhit蛋白表达的缺失及下降是乳腺癌早期的和频发的事件，FHIT基因在乳腺癌的发生发展中起重要的作用。     

脆性组氨酸三联体(FHIT)基因外显子5,8纯合性缺失及突变与胃癌的关系

目的:探讨胃癌组织中抑癌基因FHIT外显子5.8纯合性缺失及突变情况。方法:采用外显子特异聚合酶链反应(PCR)及聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)-银染方法对30例胃癌和18例正常组织中FHIT基因外显子5,8的纯合性缺失和点突变显示检测和比较。结果:胃癌组织中FHIT基因外显子5、8总纯合性缺失率为23.3%,正常组织无一例缺失(P=0.011);外显子5、8纯合性缺失率分别为16.67%和13.33%(P>0.05);FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与胃癌的分化程度、病理分期及淋巴结转移无显著性相关(P>0.05)。所有胃癌组织标本均未检测到外显子5,8的点突变。结论:提示FHIT基因外显子5、8纯合性缺失可能在胃癌的发生中起重要作用。而点突变不是FHIT基因失活的主要方式。     

肝癌组织中c-MET基因突变的研究

目的 研究肝癌原癌基因c-MET突变和缺失。方法 采用PCR-SSCP和DNA测序方法，对37例肝癌患者肿瘤组织标本的c-MET基因15-19外显子进行检测，研究c-MET基因的缺失和突变情况。结果 发现5例有c-MET基因外显子15-19存在点突变，突变率为7．4％。结论 c-MET基因的突变与肝癌的发生和发展有一定的联系。     

P16及FHIT基因异常表达在非小细胞肺癌发病机制中的研究

目的探讨P16及FHIT基因异常表达在非小细胞肺癌(NSCLC)的发病机制。方法选取肺癌切除术NSCLC患者65例,收集NSCLC肿瘤组织标本、正常肺组织标本。采用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA,采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染色法检测基因杂合性缺失,采用限制性内切酶法检测DNA甲基化,采用免疫组化法检测蛋白表达。结果NSCLC组织P16及FHIT基因杂合性缺失发生率为58.46%和70.77%,甲基化发生率为49.23%和66.15%,蛋白表达缺失率为67.69%和72.31%;正常肺组织未见P16及FHIT基因杂合性缺失、甲基化、蛋白表达缺失,差异有统计学意义(P0.05)。P16基因杂合性缺失及甲基化与P16蛋白表达缺失具有关联; FHIT基因杂合性缺失及甲基化与FHIT蛋白表达缺失具有关联(P0.05)。临床分期是P16蛋白表达缺失的独立影响因素;性别、吸烟史是FHIT蛋白表达缺失的独立影响因素(P0.05)。结论 P16及FHIT基因异常表达在NSCLC的发生发展中起重要作用,发病机制可能与P16及FHIT基因的杂合性缺失和甲基化导致的P16及FHIT蛋白表达缺失有关。     

肺癌中FHIT基因缺失和p53蛋白表达的研究

目的：探讨肺癌组织中FHIT（fragile histidine triadgene）基因缺失和p53蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法：采用逆转录-巢式聚合酶链反应方法及免疫组织化学ABC法分别检测42例肺癌组织中FHIT基因缺失和p53蛋白表达。结果；肺癌组织中FHIT基因缺失和p53蛋白表达阳性率分别为66．7％（28／42）和76．2％（32／42）．FHIT基因缺失肺癌的p53蛋白阳性率明显高于FHIT基因正常表达的肺癌（P〈0．01）。FHIT基因缺失与肺癌的淋巴结转移有关，p53蛋白表达与临床分期、淋巴结转移密切相关。结论：FHIT基因缺失和p53蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关，二者相互促进．呈明显正相关。     

正常人及肿瘤组织中rb1基因的PCR分析

目的 研究人视网膜母细胞瘤(Rb)及其它肿瘤组织中视网膜母细胞瘤易感基因(rb1)的缺失或突变。方法 应用PER和PER-RFLP法分析人多种正常组织及肿瘤组织中rb1基因的第14～16和第20外显子。结果在9种正常组织中都检测到了正常rb1基因片段，而32例Rb患者第14～16外显子全部缺失，第20外显子缺失率为65％(21／32)。乳腺癌和胃癌组织中第14～16外显子的异常率分别为9、5％和33％。结论 rb1的缺失与Rb的发生直接相关，与其它肿瘤的发生也有一定关系。     

脆性组氨酸三联体基因与白血病

脆性组氨酸三联体（FHIT）基因是1996年Ohta等克隆的抑癌基因,定位于染色体3p14.2,含有脆性部位FRA3B。FHIT mRNA长约1.1Kb,由10个外显子构成,外显子5－9为编码区,编码16.8KD的Fhit蛋白。Fhit蛋白是一种Ap3A水解酶。FHIT基因具有抑癌基因活性,在白血病中有异常表达或表达缺失。