切面红棕色及类白色土茯苓药材中总多糖的含量分析

目的建立土茯苓中总多糖的含量测定方法,对32个不同采集地切面红棕色及类白色土茯苓中的总多糖含量进行比较分析。方法采用紫外-可见分光光度法,以葡萄糖为对照品,用苯酚-浓硫酸法显色,于490 nm处测定样品溶液中的吸光度,计算出样品中总多糖的含量。结果通过对土茯苓多糖含量测定多个环节的考察,建立了土茯苓中总多糖的含量测定方法。该方法对多糖的提取率高,得标准曲线:A=9.7853X-0.0473,r=0.9990(n=7),葡萄糖在9.988~119.856μg之间有良好的线性关系。平均加样回收率为102.2%,RSD为2.4%(n=6)。结论其它省区切面类白色土茯苓总多糖的含量明显高于贵州各产地切面红棕色土茯苓的含量,为土茯苓的质量控制提供了一定的依据。     

蒽酮-硫酸法与苯酚-硫酸法测定切面红色与切面白色土茯苓药材中多糖含量的比较

目的比较蒽酮-硫酸法与苯酚-硫酸法测定不同切面颜色(红色、白色)土茯苓药材中多糖的含量差异,建立土茯苓中多糖含量测定方法。方法分别采用蒽酮-硫酸法与苯酚-硫酸法,在紫外可见分光光度计下测定切面红色、白色土茯苓药材中多糖的含量信息,并进行方法学考察,比较两种方法测定结果的差异。结果苯酚硫酸法含量测定结果高于蒽酮硫酸法,其差异有统计学意义,苯酚硫酸法的线性、重现性和稳定性均优于蒽酮硫酸法。结论苯酚硫酸法比蒽酮硫酸法更适合测定土茯苓中多糖的含量。     

土茯苓产地加工与炮制一体化工艺优选

目的为了优化土茯苓产地加工与炮制一体化工艺,减少土茯苓加工炮制中的重复环节,以保证土茯苓饮片的质量。方法以总黄酮、落新妇苷、白藜芦醇、花旗松素含量的综合评分为评价指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面法考察切片厚度、干燥温度和干燥时间对土茯苓有效成分含量的影响,得出最佳加工工艺。结果优化工艺参数为切片厚度2mm、干燥温度60℃、干燥时间8h。结论土茯苓产地加工与炮制一体化工艺合理可行,可作为生产规范进行推广。     

土茯苓黄酮类成分一测多评方法的建立及含量变化规律研究

目的建立土茯苓Smilax glabra中新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的一测多评测定方法(QAMS)并研究不同生长年限土茯苓中各成分含量的动态变化规律。方法采用高效液相色谱法,以土茯苓中的落新妇苷为内参物,计算该成分与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的相对校正因子,用获得的相对校正因子计算各指标成分的含量并与外标法的测定结果进行对比,考察方法的准确性和可行性。采用建立的QAMS法测定不同生长年限土茯苓中各指标成分的含量,研究其动态变化规律。结果共测定不同生长年限样品5批23份,各指标成分一测多评法与外标法计算结果偏差均小于1.0%。各指标成分含量与生长年限具有一定相关性,落新妇苷的含量与生长年限呈负相关,新落新妇苷、新异落新妇苷和异落新妇苷的含量与生长年限呈正相关,两者的变化趋势相反。结论建立的QAMS法准确、可靠,可用于土茯苓中5个成分的定量分析。生长年限对土茯苓中4种落新妇苷类成分含量均具一定影响。     

基于提取温度控制的土茯苓配方颗粒溶化性改善策略研究

目的 通过降低提取温度改善土茯苓Smilacis Glabrae Rhizoma提取物及其配方颗粒的溶化性。方法 分别采用回流提取、煮开后80℃水浴浸提、直接80℃水浴浸提、煮开后70℃水浴浸提、直接70℃水浴浸提5种方法制备土茯苓提取物并对各提取物的溶化性进行分析,同时考察5种提取方法对土茯苓提取物的特征图谱、多糖与淀粉含量、出膏率、落新妇苷含量及转移率的影响。结果 上述5种方法制备的提取物中不溶物含量分别为34.93%、26.67%、24.48%、29.65%、4.03%,与回流提取相比其余4种提取方法均能改善土茯苓提取物的溶化性,其中直接70℃水浴浸提对溶化性改善最明显。不同提取方法制备的土茯苓提取物的特征图谱无明显差异,表明其质量稳定。相比于回流提取,直接70℃水浴浸提的土茯苓提取物的淀粉含量降低了11.74%;落新妇苷含量(38.6 mg/g)及其转移率最高(60.95%)。结论 采用70℃水浴浸提法可显著改善土茯苓配方颗粒的溶化性。     

微波辅助提取土茯苓总黄酮

目的:筛选土茯苓总黄酮提取的优化工艺。方法:应用微波辅助提取技术,通过单因素和正交实验考察提取时间、微波功率、乙醇浓度、固液比和提取温度对土茯苓总黄酮提取率的影响。结果:提取土茯苓总黄酮的优化工艺条件为:提取时间5 min,微波功率600W,乙醇浓度60%,固液比1∶30,提取温度80℃。结论:优化后的工艺稳定,微波辅助提取土茯苓总黄酮提取率高、时间短。按照优化后工艺条件实验,土茯苓总黄酮提取率、总黄酮得率和粗黄酮粉中总黄酮含量分别为93.2%、2.66%和32.6%。     

高效液相色谱法测定都格斯勒5汤散中甘草的含量

都格斯勒5汤散由甘草、黄连、土茯苓、诃子、金连花5味药组成。其中甘草为方中主药，其化学成分主要含甘草酸和甘草苷。笔者曾对甘草采用高效液相色谱法进行含量测定，但其分离效果差，重现性不好，故又改为对甘草酸采用高效液相色谱法进行含量测定，通过多次实验摸索，确定了比较理想的色谱条件，并经过方法学考察实验，表明该方法操作简便，重现性好，专属性强，现报道如下。     

不同采集地土茯苓中(切面红色、白色)总糖及多糖含量分析与体外抗氧化作用

目的:分析测定26个不同采集地土茯苓中(切面红色、白色)总多糖及多糖的含量并探讨其体外抗氧化活性。方法:采用蒽酮-硫酸比色法,比较分析不同产地及不同切面颜色土茯苓中总糖及多糖含量;同时,以抗坏血酸为阳性对照,通过DPPH自由基(1,1-二苯基-2-苦肼基自由基)清除法来评价该药材中总糖与多糖的抗氧化能力。结果:切面红色土茯苓中总糖的质量分数为1.897 3%~11.680 9%,多糖为0.048 0%~1.863 4%;切面白色土茯苓中总糖的质量分数为7.957 5%~81.681 0%,多糖为0.413 2%~7.963 9%,两者含量差异较大;抗氧化结果表明,总糖及多糖均有清除自由基活性,其IC50依次为抗坏血酸(0.033 4 g·L-1)切面红色多糖(0.176 7 g·L-1)切面白色多糖(0.294 9 g·L-1)切面红色总糖(0.354 8 g·L-1)切面白色总糖(0.769 5 g·L-1)。结论:不同切面颜色及不同产地土茯苓药材中总糖及多糖的含量存在显著性差异,其多糖的含量高低与抗氧化作用的强弱不呈正相关。     

土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺优化及其酶动力学研究

目的 优化土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺，并考察其酶动力学。方法 在单因素试验基础上，以乙醇体积分数、提取时间、提取温度为影响因素，黄嘌呤氧化酶活性抑制率为评价指标，响应面法优化提取工艺。分别通过Lineweaver-Burk图、Dixon图确定其抑制类型、抑制动力学常数K_i。结果 最佳条件为乙醇体积分数69%,提取时间89 min,提取温度82℃,黄嘌呤氧化酶活性抑制率为62.25%。抑制类型为竞争性可逆抑制，K_i为1.92 mg/mL。结论 该方法稳定可靠，可用于提取土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。     

赤土茯苓苷对异丙肾上腺素诱发的小鼠缺血心肌的保护作用

赤土茯苓甙为赤土茯苓ＳｍｉｌａｘｇｌａｂｒａＲｏｘｂ．中发现的有效成分。在异丙肾上腺素诱发小鼠急性心肌缺血期，心肌ＳＯＤ，Ｓｅ－ＧＳＨ－Ｐｘ活性均降低，ＭＤＡ含量增加，血清ＣＰＫ浓度升高，心肌超微结构广泛而严重损作画 。     

土茯苓及其制剂中落新妇甙含量测定

采用紫外分光光度法对土茯苓中落新妇甙含量进行测定。实验结果表明,土茯苓中落新妇甙的平均含量为０．０２７５％,而银屑冲剂（含土茯苓）则未测出落新妇。关键词##4土茯苓;;落新妇甙;;紫外分光光度法;;银屑冲剂     

土茯苓降血尿酸乙醇提取物的提取工艺研究

目的:筛选土茯苓降血尿酸乙醇提取物的最佳提取工艺。方法:采用正交试验设计,以土茯苓所含落新妇苷为指标,考察乙醇浓度、提取时间、提取次数和乙醇用量的4种因素对提取结果的影响。落新妇苷和血尿酸含量均采用HPLC法测定。结果:提取次数、提取时间和乙醇浓度对以落新妇苷为指标的提取率都有显著的影响。结论:土茯苓降血尿酸乙醇提取物的最佳工艺是7倍药材量的90%乙醇提取2次,每次2.0h。该提取工艺合理、可行。     

基于指纹图谱和OPLS-DA的越南和国产土茯苓差异性化合物探索

目的:分析越南和国产土茯苓化学成分的差异,对差异性化合物进行辨识,并对样品进行产地鉴别。方法:收集越南土茯苓7份,国产土茯苓28份。建立越南和国产土茯苓化学成分色谱指纹图谱,根据相似度评价结果比较两者的差异程度,采用HPLC-MS对指纹图谱的主要色谱峰进行归属,共鉴定21个峰。采用聚类分析对样品进行产地鉴别;结合正交信号校正偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行差异性化合物的筛选,选取位于S-plot图两端并且VIP1的点作为区分越南与国产土茯苓的差异性化合物。结果:越南和国产土茯苓主要化学成分的含量存在差异性,聚类分析可将35批土茯苓药材分为越南和国产2组,两者的差异性化合物分别为落新妇苷、异落新妇苷、新落新妇苷、黄杞苷,越南土茯苓中差异性化合物的含量显著大于国产土茯苓。结论:采用OPLS-DA分析样品的指纹图谱,既可从整体角度分析越南和国内土茯苓化学成分的异同,又可对两者差异性化合物进行辨识,为越南土茯苓入药的可能性及其质量评价提供实验数据。     

响应面分析法优化酶提取土茯苓多糖工艺

目的优化酶法提取土茯苓多糖的工艺。方法通过单因素试验法和响应面分析法,考察最佳酶的酶解时间、酶解p H、酶用量对提取土茯苓多糖的影响。结果木瓜蛋白酶提取多糖效率最高,其最佳工艺为酶用量0.6%,酶解p H为8,酶解时间150 min,在此条件下得到的实际多糖提取率为26.31%,与预测值25.71%的相对误差为2.33%。说明采用响应面分析法优化木瓜蛋白酶提取土茯苓多糖的方法可靠。结论此设计法用于酶法提取土茯苓多糖可行。     

土茯苓产地加工过程中去皮的合理性分析

目的:探讨土茯苓产地加工过程中去皮的合理性,为该药材的产地加工提供理论依据。方法:将新鲜土茯苓分成去皮组、不去皮组、皮组3组,用阴干,晒干和35,55,80℃烘干5种方法干燥加工,利用UV测定总黄酮含量(以芦丁为对照品),检测波长500 nm;利用HPLC测定落新妇苷、白藜芦醇、花旗松素含量,检测波长分别为291,306,289 nm;利用等离子体质谱仪测定铜、铅、镉、汞、砷5种有害重金属含量,比较各成分含量的差异性。结果:土茯苓皮组中总黄酮、落新妇苷、白藜芦醇、花旗松素均远高于去皮组和不去皮组,且不去皮组中上述成分大多高于去皮组;土茯苓皮组中铜和砷远高于去皮组和不去皮组,土茯苓皮组和不去皮组中铅含量远高于去皮组,三者中各元素含量均低于2015年版《中国药典》限量。结论:土茯苓的有效成分和重金属均富集在表皮部分,建议作药用时,不需要去皮;作食用时,为了避免重金属蓄积,可选择去皮。     

正交设计法优选土茯苓中落新妇苷及总黄酮的提取工艺

目的:研究超声法提取土茯苓中落新妇苷及总黄酮的最佳工艺条件。方法:采用正交试验法研究落新妇苷和总黄酮的提取工艺,其中落新妇苷含量用HPLC法测定,总黄酮含量用紫外分光光度法测定。结果:土茯苓中落新妇苷最佳提取工艺为加入甲醇30mL,超声提取15min,超声3次。总黄酮的最佳提取工艺为料液比1∶50,加入50%乙醇,超声提取60min。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于土茯苓药材中落新妇苷及总黄酮的含量测定及其质量控制。     

HP-20型大孔吸附树脂对土茯苓总黄酮的富集纯化作用

目的考察HP-20型大孔吸附树脂对土茯苓总黄酮的富集纯化作用。方法应用紫外分光光度法和UHPLCLTQ-Orbitrap液质联用技术,从总黄酮含有量和化学成分两个方面,综合考察HP-20型大孔吸附树脂对土茯苓总黄酮的富集纯化作用。结果土茯苓不同组分中总黄酮的含有量存在一定差异,其芦丁当量分别为(422.18±11.59)mg/g(土茯苓粗提组分TFL-Z)、(117.69±9.62)mg/g(水洗脱样品TFL-1)、(1 340.77±66.87)mg/g(30%乙醇洗脱组分TFL-2)、(954.23±71.77)mg/g(60%乙醇洗脱组分TFL-3)、(263.85±9.62)mg/g(90%乙醇洗脱组分TFL-4),TFL-2和TFL-3中的总黄酮含有量明显高于TFL-Z(P0.01),差异具有统计学意义。另外,从TFL-Z的主要信号峰中分析鉴定出落新妇苷、黄杞苷等17个化合物,其主要结构类型为二氢黄酮类。结论 HP-20型大孔吸附树脂能有效地对土茯苓中的总黄酮进行富集纯化。     

一测多评法测定贵州产切面红色土茯苓中3种活性成分的含量

目的:建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷及落新妇苷的一测多评分析方法,并验证该方法的可靠性和准确性。方法:以落新妇苷为内参物,通过方法学考察,建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷对落新妇苷的相对校正因子,根据建立的相对校正因子计算22批药材中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷的含量,并比较外标工作曲线法、外标一点法与一测多评法的结果,验证一测多评法的准确性和科学性。结果:建立的5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷相对于落新妇苷的相对校正因子重复性和耐用性良好;一测多评法计算的22批贵州产切面红色土茯苓药材样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷含量与外标工作曲线法、外标一点法的含量测定结果无明显差异(RSD4.0%);样品含量分析结果表明样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷和落新妇苷的含量差异较大,分别为0.106 3%~2.692%,0.031 29%~0.677 1%,0.581 2%~4.897%。结论:建立的一测多评法准确可靠,可用于贵州产切面红色土茯苓的多成分质量评价。     

微波辅助提取土茯苓多糖

目的筛选土茯苓多糖提取的最优化工艺。方法应用微波辅助提取技术,通过单因素和正交实验,以土茯苓多糖提取率为指标,筛选土茯苓多糖的最佳提取工艺条件。结果土茯苓多糖最佳提取工艺条件为:微波功率800W,固液比(g/ml)1∶30,提取温度100℃,回流浸提两次,10min/次,浓缩液加90%乙醇醇析。结论优化后的工艺稳定,微波辅助提取土茯苓多糖,提取时间短、提取率高,另有较大部分土茯苓总黄酮也同时被浸出。按照优化后工艺条件实验,土茯苓多糖提取率、粗多糖得率以及粗多糖中多糖含量分别为8.33%,3.97%和39.5%。     

Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂纯化土茯苓多糖的工艺研究

目的考察Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂在土茯苓总多糖中的纯化效果。方法采用正交试验设计,以多糖保留率和蛋白清除率为指标,考察天然澄清剂加入量、料液比、纯化时间和温度四个因素的最佳工艺条件。结果Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂纯化土茯苓总多糖的最佳提取工艺为天然澄清剂b组分加入量为2%,a组分为1%,料液比为1∶15,纯化时间120 min,温度为80℃,多糖保留率为94.07%,蛋白清除率为55.59%。结论Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂纯化土茯苓总多糖的工艺简单可靠,合理可行,为土茯苓多糖的纯化和开发利用提供了科学依据。